一种用于病毒包装的293T细胞株的构建方法

摘要

本发明公开了一种用于病毒包装的293T细胞株的构建方法，包括如下步骤：步骤一：合成靶向EIF2AK2基因的sgRNA克隆质粒；步骤二：EIF2AK2‑sgRNA‑CAS9质粒转染293T细胞；步骤三：通过嘌呤霉素筛选获得EIF2AK2基因敲除的单克隆细胞株；步骤四：病毒包装。本发明通过该方法获得的293T细胞(EIF2AK2‑KO)，在转染相同量的病毒包装质粒时，生产的病毒量要高于未做处理的293T细胞(EIF2AK2‑CON)。即，在293T细胞中通过去除EIF2AK2基因的表达，能够提高病毒的生产量，降低病毒的生产成本。