一种能同时表达CD19 CAR和敲低T细胞表面PD-1表达的质粒结构及其构建方法

摘要

本发明涉及一种能同时表达CD19CAR和敲低T细胞表面PD‑1表达的质粒结构，包括依次串联的H1启动子、由H1启动子启动的抗PD‑1shRNA序列、EF1α启动子以及由EF1α启动子启动的三代CD19CAR序列；所述三代CD19CAR序列由CD19单链可变区、人CD8α铰链区、人CD28跨膜区和胞内区、人41BB胞内区、以及人CD3ζ胞内区串联构成。本发明所提供的质粒结构，将其用慢病毒转导进T细胞，比采用CRISPR/Cas9敲除PD‑1在生产CART细胞的工艺上简化了很大一步；并且这些CART细胞在体外受到抗原刺激后表现出了杀肿瘤细胞毒性的增强，细胞持久性的修复以及细胞因子分泌能力的上升。