一步法检测HER2/neu基因表达量的试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一步法检测HER2/neu基因表达量的试剂盒及其检测方法，首先针对HER2/neu基因设计合成用于检测其表达量的上下游引物、HER2/neu cDNA特异性探针，为了有效降低因不同个体差异带来的偏差，引入了ACTB和GAPDH作为内参基因。内参基因与目的基因均会产生阈循环值(即Ct值)，通过计算内参基因与目的基因的Ct值的差值即ΔCt值，可实现对乳腺癌组织标本中的HER2基因扩增水平进行检测。本发明中所选用的内参基因在组织中的表达比较稳定，因此ΔCt值的大小表示乳腺癌组织标本中HER2基因的扩增程度。检测过程由市售的荧光定量PCR仪自动完成，操作简单，耗时少，且最大限度地减少了污染的发生，检测结果可用于由HER2基因扩增导致的乳腺癌的辅助诊断、药物治疗及预后等多个领域研究。