识别简并序列或四碱基序列的限制性内切酶在接头介导的PCR方法中的应用

摘要

本发明公开了识别简并序列或四碱基序列的限制性内切酶在接头介导的PCR方法中的应用，利用识别简并序列的限制性内切酶或识别四个碱基序列的限制性内切酶可将基因组切割成更多短片段，增加了克隆目的片段的几率。影响接头介导的PCR扩增效率的一个重要因素是所扩增片段的长度。片段越短，扩增越容易。在大多数情况下，长片段不能被Taq DNA聚合酶及其改进的衍生物有效扩增。另一方面，在克隆T‑DNA侧翼序列时，几十个核苷酸信息就能确定插入位点。因此，识别简并序列的酶或识别四个碱基序列的酶将会是更好的选择。