一种稳定的灯盏花素注射液制备工艺

摘要

本发明公开了一种稳定的灯盏花素注射液制备工艺，包括如下步骤：将乙二胺四醋酸二钠加入到小部分配制量的注射用水中，加入灯盏花素，再加入适量碳酸氢钠溶液使原料溶解完全至澄清，使用盐酸溶液或磷酸缓冲盐溶液初次将药液pH调节至6.0‑7.2，低温冷藏，冷藏后的药液经筒式过滤器过滤，再经过超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量；二次使用盐酸溶液或磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至6.0‑7.0，用过滤器精滤，灌封，灭菌；本发明在不额外添加标准处方(标准号为WS3‑B‑3822‑98)灯盏花素、乙二胺四醋酸二钠以外的辅料的前提下，制得的灯盏花素注射液经6月加速稳定性考察和36月长期稳定性考察，结果都符合标准要求。

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别是涉及一种稳定的灯盏花素注射液制备工艺。

背景技术

灯盏花素注射液收载于卫生部颁药品标准，标准号为WS3-B-3822-98，其制法是将0.26g乙二胺四醋酸二钠溶于280ml的注射用水中，加入灯盏花素1g，搅棒使混悬，加入适量的碳酸氢钠，边加边搅拌至pH7-7.5时为止，充分搅拌使灯盏花素基本溶解，加注射用水至400ml，加入溶液体积0.1％的经活化的活性炭，搅棒吸附20分钟，除炭，精滤，经半成品检验合格后灌封，经100℃15分钟流通蒸汽灭菌，灯检，包装；或将1g乙二胺四醋酸二钠溶于700ml的注射用水中，加入灯盏花素4g，同法制成1000ml注射液，即得。本品含灯盏花素以灯盏乙素(C₂₁H₁₈O₁₂)计，应为标识量的95.0-105.0％。

目前市面上的灯盏花素注射液普遍存在质量不稳定，效期内含量持续下降，颜色变深，出现析出、白点、白块等可见异物不合格情况。

现有技术中，中国专利CN 106214629A公开使用苹果酸、苹果酸钠作为pH调节剂，将pH调节为4-6，经实验灯盏花素在6以下pH条件会出现析出，无法保证生产的正常进行。中国专利CN 102198092A在处方中使用了无水亚硫酸钠，在生产过程中，灯盏花素溶解后加注射用水至1000ml，pH值用盐酸调在6-7，配制液经1000-10000分子量超滤器超滤，滤液再用0.22um滤器过滤，充氮气灌封，经121℃15分钟进行灭菌。该专利内容首先使用了标准以外的无水亚硫酸钠，其次药液在配制至终点1000ml后使用1000-10000分子量超滤器超滤过滤，由于超滤器除了会截留大分子物质比如蛋白质、氨基酸、树脂，热源等物质时，对灯盏花素也会有很大的吸附，因此不适合在此处使用超滤器来进行过滤。中国专利CN 1476840A公开使用稀醋酸、盐酸、枸橼酸、硼酸等调节pH为4.5-6.5，经实验灯盏花素在6以下pH条件会出现析出，无法保证生产的正常进行，同时其也使用了标准以外的物质L-精氨酸，甘油，乙醇等溶剂。中国专利CN 1861087A公开在整个加工过程采用了全过程充氮保护，在全过程充氮保护下，将灯盏乙素加入到部分配制剂量(如50％)的注射用水中，加碳酸氢盐溶液使完全溶解为止，加入适宜量的稳定剂或其组合(包括EDTA-2Na，碳酸盐或碳酸氢盐，维生素C，聚山梨酯80，以上稳定剂可单独使用，也可适宜配合)，搅棒使溶解，加水至全量，用碳酸氢钠溶液调节pH6.5-7.5，精滤、灌封、灭菌，即得。以上专利中，有的存在技术实施环节上的不可实现性，有的添加了标准以外的其他辅料，产品质量无法保证，药品安全性未知。

因此，如何创设一种无需添加标准以外的其它辅料、产品质量和药品安全性有保证的稳定的灯盏花素注射液制备工艺，成为当前业界极需改进的目标。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种无需添加标准以外的其它辅料、产品质量和药品安全性有保证的稳定的灯盏花素注射液制备工艺。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种稳定的灯盏花素注射液制备工艺，包括如下步骤：

将乙二胺四醋酸二钠加入到小部分配制量的注射用水中，加入灯盏花素，再加入适量碳酸氢钠溶液使原料溶解完全至澄清，使用盐酸溶液或磷酸缓冲盐溶液初次将药液pH调节至6.0-7.2，低温冷藏，冷藏后的药液经筒式过滤器过滤，再经过超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量；二次使用盐酸溶液或磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至6.0-7.0，用过滤器精滤，灌封，灭菌；其中，注射液采用标准处方用量(标准号为WS3-B-3822-98)：每1000ml注射液中，包括乙二胺四醋酸二钠1g、灯盏花素4g；或每400ml注射液中，包括乙二胺四醋酸二钠0.26g、灯盏花素1g。

进一步优选地，将乙二胺四醋酸二钠加入到15-30％配制量的注射用水中。

进一步优选地，药液在0-10℃低温条件下冷藏20-30小时。

进一步优选地，冷藏后的药液经0.3-0.5um筒式过滤器过滤，再用8000-10000分子量的超滤器进行超滤。

进一步优选地，二次调节pH后用0.22um过滤器精滤。

进一步优选地，所述过滤器精滤后采用充氮气灌封。

进一步地优选地，灌封采用聚丙烯塑料安瓿、聚乙烯塑料安瓿、低硼硅玻璃安瓿或中硼硅玻璃安瓿。

进一步优选地，在105-115℃条件下灭菌10-20分钟。

通过采用上述技术方案，本发明至少具有以下优点：

1、本发明在物料的使用上，不额外添加标准处方(标准号为WS3-B-3822-98)灯盏花素、乙二胺四醋酸二钠以外的辅料，因为对于注射剂产品，为确保其安全性，在产品稳定的前提下，辅料使用越少越安全；在制备工艺上，本发明明确了溶解后的药液要经过冷藏处理以起到分离杂质的目的，筒式过滤去除大的杂质，超滤器过滤起到截留大分子物质、热源等作用。该制备工艺无需使用具有吸附杂质作用的活性炭，仅使用超滤器超滤，就可以很好的控制住产品热源和内毒素，避免了活性炭由于其粉尘大，生产过程控制不好容易造成污染的缺陷，而通过将药液冷藏，在低温条件下，利用溶液中灯盏花素与其他杂质成分的溶解性能不一样，可以起到去除杂质的作用，该工艺对产品的稳定性起到非常重要的作用。

2、本发明先将乙二胺四醋酸二钠加入到小部分配制量注射用水中，优选15-30％，先配成浓配药液，采用对浓配液超滤，主要是基于超滤器的材料有吸附性，药液使用不同分子量的超滤器超滤后含量会不同程度下降，这样一来，对浓配液超滤相比对最终的药液超滤会更加安全和可控，保证工艺可重现。工艺上可以根据超滤后的药液含量及预计达到的成品药液含量来计算稀释用水量，从而更好地控制成品的含量在标准范围内。

3、本发明在超滤后灌封前，对药液进行二次调pH，申请人根据长期的生产试验发现，药液在超滤过程pH会上升0.2-0.5个pH不等，分析原因可能为处方中含有碳酸氢钠，碳酸氢钠溶液在振荡情况下pH会上升有关，如此一来，其最终产品的pH就会达到7.5及以上，会影响产品的稳定性。因此，本发明的工艺将调节pH值放在超滤结束后，灌封前，确保药液的最高pH在7左右，提高了产品的稳定性。

4、本发明明确了药液灌封材料，灌封效果好。

5、本发明的产品经6个月的加速稳定性试验和36个月的产期稳定性试验考察，关键的指标性状、pH、含量、有关物质、不溶性微粒和可见异物均符合标准要求。

具体实施方式

本发明在不额外添加标准处方灯盏花素、乙二胺四醋酸二钠以外的辅料前提下，通过使用盐酸或磷酸缓冲盐调节溶液调节pH值，浓配药液经过冷藏，超滤，再次调节pH值，精滤，灌封，灭菌。

本发明注射液的制备过程为：将乙二胺四醋酸二钠加入到小部分配制量的注射用水中，加入灯盏花素，再加入适量碳酸氢钠溶液使原料溶解完全至澄清，使用盐酸溶液或磷酸缓冲盐溶液初次将药液pH调节至6.0-7.2，低温冷藏，冷藏后的药液经筒式过滤器过滤，再经过超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量；二次使用盐酸溶液或磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至6.0-7.0，用过滤器精滤，灌封，灭菌；其中，注射液采用标准处方用量：每1000ml注射液中，包括乙二胺四醋酸二钠1g、灯盏花素4g；或每400ml注射液中，包括乙二胺四醋酸二钠0.26g、灯盏花素1g。

优选地，本发明注射液的制备过程为：将乙二胺四醋酸二钠加入到15-30％配制量的注射用水中，加入灯盏花素，再加入碳酸氢钠溶液使原料溶解完全至澄清，使用盐酸或磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至6.0-7.2，药液在0-10℃条件冷藏20-30小时，冷藏后的药液经0.3-0.5um筒式过滤器过滤，再用8000-10000分子量的超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量，使用盐酸或磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至6.0-7.0，用0.22um过滤器精滤，充氮气灌封，灌封可以使用聚丙烯塑料安瓿、聚乙烯塑料安瓿、低硼硅玻璃安瓿或中硼硅玻璃安瓿，在105-115℃条件下灭菌10-20分钟，检漏，灯检，即得。

下面通过具体实施例进行详细说明。

处方一：100L注射液

灯盏花素400g

乙二胺四醋酸二钠100g

实施例1：

将乙二胺四醋酸二钠溶于15L的注射用水中，加入灯盏花素，搅棒使混悬，加入适量的碳酸氢钠溶液使灯盏花素溶解完全，使用一定浓度的盐酸溶液将药液pH调节至6，药液0℃条件下冷藏20小时，冷藏后的药液经0.3um筒式过滤器过滤，再用8000分子量的超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量，使用一定浓度的盐酸溶液将药液pH调节至6，用0.22um过滤器精滤，充氮气灌封，灌封使用聚乙烯塑料安瓿，经105℃20分钟进行灭菌，检漏，灯检，即得。

实施例2：

将乙二胺四醋酸二钠溶于30L的注射用水中，加入灯盏花素，搅棒使混悬，加入适量的碳酸氢钠溶液使灯盏花素溶解完全，使用一定浓度的磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至6.5，药液6℃条件下冷藏25小时，冷藏后的药液经0.3um筒式过滤器过滤，再用8000分子量的超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量，使用一定浓度的磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至6.5，用0.22um过滤器精滤，充氮气灌封，灌封使用低硼硅玻璃安瓿，经110℃15分钟进行灭菌，检漏，灯检，即得。

实施例3：

将乙二胺四醋酸二钠溶于20L的注射用水中，加入灯盏花素，搅棒使混悬，加入适量的碳酸氢钠溶液使灯盏花素溶解完全，使用一定浓度的磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至7.2，药液10℃条件下冷藏25小时，冷藏后的药液经0.5um筒式过滤器过滤，再用10000分子量的超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量，使用一定浓度的磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至7，用0.22um过滤器精滤，充氮气灌封，灌封使用中硼硅玻璃安瓿，经115℃10分钟进行灭菌，检漏，灯检，即得。

实施例4：

将乙二胺四醋酸二钠溶于25L的注射用水中，加入灯盏花素，搅棒使混悬，加入适量的碳酸氢钠溶液使灯盏花素溶解完全，使用一定浓度的盐酸溶液将药液pH调节至6.2，药液8℃条件下冷藏30小时，冷藏后的药液经0.5um筒式过滤器过滤，再用10000分子量的超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量，使用一定浓度的盐酸溶液将药液pH调节至7，用0.22um过滤器精滤，充氮气灌封，灌封使用聚丙烯塑料安瓿，经105℃20分钟进行灭菌，检漏，灯检，即得。

处方二：80L注射液

灯盏花素200g

乙二胺四醋酸二钠52g

实施例1：

将乙二胺四醋酸二钠溶于12L的注射用水中，加入灯盏花素，搅棒使混悬，加入适量的碳酸氢钠溶液使灯盏花素溶解完全，使用一定浓度的磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至6，药液0℃条件下冷藏20小时，冷藏后的药液经0.3um筒式过滤器过滤，再用8000分子量的超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量，使用一定浓度的盐酸溶液将药液pH调节至6，用0.22um过滤器精滤，充氮气灌封，灌封使用聚乙烯塑料安瓿，经105℃20分钟进行灭菌，检漏，灯检，即得。

实施例2：

将乙二胺四醋酸二钠溶于18L的注射用水中，加入灯盏花素，搅棒使混悬，加入适量的碳酸氢钠溶液使灯盏花素溶解完全，使用一定浓度的盐酸溶液将药液pH调节至6.5，药液6℃条件下冷藏25小时，冷藏后的药液经0.3um筒式过滤器过滤，再用8000分子量的超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量，使用一定浓度的盐酸溶液将药液pH调节至7，用0.22um过滤器精滤，充氮气灌封，灌封使用中硼硅玻璃安瓿，经110℃15分钟进行灭菌，检漏，灯检，即得。

实施例3：

将乙二胺四醋酸二钠溶于24L的注射用水中，加入灯盏花素，搅棒使混悬，加入适量的碳酸氢钠溶液使灯盏花素溶解完全，使用一定浓度的盐酸溶液将药液pH调节至7，药液10℃条件下冷藏25小时，冷藏后的药液经0.5um筒式过滤器过滤，再用10000分子量的超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量，使用一定浓度的磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至6.5，用0.22um过滤器精滤，充氮气灌封，灌封使用低硼硅玻璃安瓿，经115℃10分钟进行灭菌，检漏，灯检，即得。

实施例4：

将乙二胺四醋酸二钠溶于18L的注射用水中，加入灯盏花素，搅棒使混悬，加入适量的碳酸氢钠溶液使灯盏花素溶解完全，使用一定浓度的磷酸缓冲盐溶液将药液pH调节至7.2，药液4℃条件下冷藏30小时，冷藏后的药液经0.5um筒式过滤器过滤，再用10000分子量的超滤器进行超滤，根据超滤后药液的含量补加注射用水至全量，使用一定浓度的盐酸溶液将药液pH调节至6，用0.22um过滤器精滤，充氮气灌封，灌封使用聚丙烯塑料安瓿，经115℃10分钟进行灭菌，检漏，灯检，即得。

上述样品分别放在温度40℃±2℃相对湿度75±5％的条件下6个月、温度25℃±2℃相对湿度60±10％的条件下36个月，进行稳定考察，按标准方法检测，稳定性关键数据如下：

表1处方一实施例1稳定性考察结果

表2处方一实施例2稳定性考察结果

表3处方一实施例3稳定性考察结果

表4处方一实施例4稳定性考察结果

表5处方二实施例1稳定性考察结果

表6处方二实施例2稳定性考察结果

表7处方二实施例3稳定性考察结果

表8处方二实施例4稳定性考察结果

经6个月的加速稳定性试验和36个月的产期稳定性试验考察，本发明的灯盏花素注射液，性状均为黄色澄明液体，有效物质含量均可达到100％以上，且含量降解速度较慢，最多仅降低了0.16个百分点(6个月)和0.17个百分点(36个月)，pH值、可见异物、不溶性微粒和有关物质(主要是在生产过程中带入的起始原料、中间体、聚合体、副反应产物，以及贮藏过程中的降解产物等)等这些对稳定性影响非常关键的质量指标也符合标准规定，产品质量稳定。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，本领域技术人员利用上述揭示的技术内容做出些许简单修改、等同变化或修饰，均落在本发明的保护范围内。