法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2022-11-04
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):C07F 1/10 专利号:ZL2017111993505 申请日:20171126 授权公告日:20191001
专利权的终止
2019-10-01
授权
授权
2018-05-18
实质审查的生效 IPC(主分类):C07F1/10 申请日:20171126
实质审查的生效
2018-04-24
公开
公开
技术领域
本发明涉及医药技术领域,具体涉及一种以三((二苯膦)亚甲基)胺为配体的十五核银簇合物及其合成方法、结构和抗肿瘤应用。
背景技术
恶性肿瘤(通称癌症)是危害人类健康的重大疾病之一。世界上每年新增的癌症患者约为1100万,全球每年因肿瘤死亡的人数约为700多万。恶性肿瘤的防御和治疗已经成为世界医药学界重点关注的焦点。通过放射治疗、化学治疗、手术治疗等都可以不同程度抑制肿瘤的生长。
银作为生物安全性高、稳定性好的金属材料备受广大研究者的关注。在已报道的文献中,人们发现银的纳米材料不仅有显著的抗菌活性,而且还有抗病毒、抗肿瘤等生物活性,它可以通过改变线粒体膜的通透性从而促进细胞凋亡。
随着纳米银生物活性越来越深入的研究,关于纳米银的抗肿瘤活性的研究也越来越热。Foldbjerg R等用人肺癌细胞A549研究了纳米银对肿瘤细胞的增殖抑制作用,结果显示纳米银确实能抑制肿瘤细胞的增殖。但关于其抗肿瘤的作用机制目前还没有明确的定论,它可以通过不同的途径进入细胞内,并产生活性氧簇(ROS),这能使细胞的某些成分受到损坏,比如DNA双链发生破坏并影响核糖体亚基蛋白的表达,从而使细胞凋亡或死亡。关于银及纳米银化合物作用于肿瘤细胞的研究有很多,但由于银化合物的稳定性问题一直困扰其成药的开展应用,本发明开展了一种稳定且目前尚未见报道的以三((二苯膦)亚甲基)胺为配体的十五核银簇合物及其合成方法、结构和应用的相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的十五核银簇合物,即以三((二苯膦)亚甲基)胺为配体的十五核银簇合物以及它的合成方法、结构和抗肿瘤应用。
本发明一种以三((二苯膦)亚甲基)胺为配体的十五核银簇合物的化学式为:[[Ag15(N-triphos)4(Cl4)](NO3)3]>
其为如下式 (I) 所示化合物或其药学上可接受的盐,该簇合物具有六帽体心立方体结构:
上述式 (I) 所示簇合物的合成方法为:取如下结构式 (II) 所示化合物和硝酸银,溶于极性溶剂中,按摩尔比进行配位反应,并用硼氢化钠还原,即得到目标产物;
上述合成方法中涉及的式 (II) 所示化合物作为配体参与反应,其化学名称为三((二苯膦)亚甲基)胺(tris((diphenylphosphino)methyl)amine),简称NP3。
上述合成方法中,所述的极性溶剂为甲醇或乙醇;所述硝酸银和式 (II)所示化合物的摩尔比为6-8:1,优选7:1。
本发明所述的式(I) 所示簇合物的合成方法,具体步骤如下:
1)取60mg(0.35mmol)硝酸银溶解于少量蒸馏水中,待完全溶解后加入2.5-3 mL甲醇或乙醇,待完全溶解后加入30 mg (0.05mmol) NP3置于磁力搅拌器继续搅拌30min,完全反应后加入6mL>
2)反应结束后置于高速离心机10000r/min离心2min,弃其上清反应液,用7mL氯仿、7mL二氯甲烷或1mL无水甲醇加6mL氯仿溶解萃取,于室温下扩散培养晶体,一周左右可得产品。
本发明所述的式 (I) 所示簇合物具体合成时,可直接加入3mL甲醇或乙醇,后加NP3,优选是先用少量蒸馏水溶解硝酸银,再加入配体进行配位。
本发明还包括上述式 (I) 所示化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明还包括上述式 (I) 所示化合物或其药学上可接受的盐为活性成分制备的抗肿瘤药物。
与现有技术相比,本发明提供了一种新的稳定的十五核银簇合物,即以三((二苯膦)亚甲基)胺为配体的十五核银簇合物簇合物,以及它的合成方法和应用。并通过考察其对多种肿瘤细胞株的抑制作用,结果表明以三((二苯膦)亚甲基)胺为配体的Ag15簇合物表现出比其配体更强的抗肿瘤活性,具有较好的潜在药用价值,有望制备成抗肿瘤药物而得到应用。
附图说明
图1为本发明实施例1制得的最终产物的红外图;
图2为本发明实施例1制得的最终产物的紫外光谱图;
图3为本发明实施例1制得的最终产物的电喷雾质谱图;
图4为本发明实施例1制得的最终产物的X射线单晶结构图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明内容作进一步的详述,以更好地理解本发明的内容,但本发明并不限于以下实施例。
实施例1:簇合物[Ag15(N-triphos)4(Cl4)](NO3)3>
1) 取60mg(0.35mmol)硝酸银溶解于0.5mL蒸馏水中,待完全溶解后加入2.5mL甲醇中,待完全溶解后加入30mg(0.05mmol)NP3置于磁力搅拌器继续搅拌30min,完全反应后加入6mL>
2)反应结束后至于高速离心机10000r/min离心2min,弃其上清反应液,用7mL氯仿溶解萃取,乙醚汽相扩散一周后得黑色晶体即为产品。
对所得黑色晶体进行电喷雾质谱和单晶衍射分析。具体电喷雾质谱数据如下:
(1)ESI-MS m/z:1402>15(N-triphos)4(Cl)4]3+>15(N-triphos)4(Cl)4]Cl}2+,如图3。
(2)X射线单晶衍射分析,确定其结构如图4所示,具有六帽体心立方体结构。
参照图1-4,可确定上述黑色晶体产物即为簇合物[Ag15(N-triphos)4(Cl4)](NO3)3。
实施例2:
1)取60mg(0.35mmol)硝酸银溶解于3mL乙醇中,待完全溶解后加入30mg(0.05mmol)NP3置于磁力搅拌器继续搅拌30min,待完全反应后加入6mL (0.53mmol)新配置的硼氢化钠溶液,溶液从无色透明迅速变成黑色,室温下搅拌反应20h;
2)反应结束后至于高速离心机10000r/min离心2min,弃其上清反应液,用1mL无水甲醇和6mL氯仿溶解萃取,乙醚液相扩散五天后得黑色晶体即为产品。对所得黑色晶体进行电喷雾质谱和单晶衍射分析,确定为目标簇合物[Ag15(N-triphos)4(Cl4)](NO3)3。
实施例3:
与实施例2不同的是反应结束后,用旋转蒸发仪旋干溶剂,再加入7mL氯仿溶解萃取,乙醚扩散可得黑色晶体即为产品。
对所得黑色晶体进行电喷雾质谱和单晶衍射分析,确定为目标簇合物[Ag15(N-triphos)4(Cl4)](NO3)3。
为了充分说明本发明所述的以三((二苯基膦基)甲基)胺为配体的Ag15簇合物在制药中的用途,对其进行了抗肿瘤活性实验。
实验例1:以三((二苯基膦基)甲基)胺为配体的Ag15簇合物对多种人类肿瘤株进行体外抑制活性实验
1、细胞株与细胞培养
本实验选用T24(人膀胱癌细胞)、SK-OV-3(人卵巢腺癌细胞株) 、MGC803(人胃癌细胞)在含10 %牛胎血清、1%青链霉素混合液的DMEM培养液内,放入37℃含体积浓度5% CO2孵箱中培养。A549>2孵箱中培养。
2、MTT法测抑制率及IC50
化合物以DMSO助溶为2mM储液,用无血清培养基稀释至终浓度为100μmol/L,50μmol/L,25μmol/L,12.5μmol/L,6.25μmol/L的中间浓度液体,取每个中间浓度20μL,准备加入已有180μL细胞液96孔板。
将各株处于对数生长期的系列肿瘤细胞株以每孔180 μL分别接种于96孔板,边缘孔加200μLPBS(磷酸缓冲盐粉剂配制溶液),细胞浓度约为1×104/孔,,待细胞贴壁培养16小时后,加入20μL中间浓度的化合物液体,终浓度为10μmol/L,5μmol/L,2.5μmol/L,1.25μmol/L,0.625>
培养结束前4小时每孔加入10 µL MTT,继续培养4小时后,倾去培养液,加入DMSO100 µL/孔,平板震荡器振荡7 min,使结晶物充分溶解,空白对照组调零,用酶标仪以570nm/630nm双波长测定去除本底光吸收值后的吸光度(A)值,测得抑制率,10μmol/L浓度抑制率大于50%,且符合光镜下细胞受抑(或受损)的形态变化(如细胞皱缩,破碎,漂浮等)的,则判定为初筛有效,即进入下一步骤求取IC50,结果如以下表1,表2所示:
表1:
表2:
从表中得知Ag15簇合物的抗肿瘤活性更优于配体NP3及顺铂,具有较好的潜在药用价值,可为抗肿瘤新药的研发提供新的来源,可用于抗肿瘤新药的研发。
机译: [] [] [三亚甲基氨基膦酰基氨基酰胺]三[三亚甲基氨基膦酰基苯二酰胺基]磷酸二氢吡啶及其制备方法
机译: 改进的制备丁二烯和氨的辛醇-2,7-二烯基-1-胺,新的三苯基膦单和-二甲氧基糊精中空磺基碱金属碳酸盐的方法以及使用三苯基膦三乙氧基糊精中空磺基,三苯基膦三乙乙基的改进方法糊精中庭磺基和轴。三氟乙酸或磷酸二钠和糊精心房磺基轴作为配体制备钯配合物
机译: 1,2-二(二烷基膦基)-4,5-(甲基二烯基)苯衍生物,制备相同方法的金属络合物具有1,2,2-二(二烷基膦基)-4,5-(甲基二烯基)苯衍生物作为配体,和非对称加氢方法