一株适量产乙酸乙酯的酿酒酵母菌株及其构建方法

摘要

本发明公开了一株适量产乙酸乙酯的酒酵母菌种及其构建方法，所述适量产乙酸乙酯的酵母菌株通过在醇乙酰转移酶的编码基因ATF1的ORF前插入梯度截断的PGK1启动子，敲除序列大小分别是100bp、200bp和300bp。启动子靶序列的精确敲除通过融合PCR和酵母整合质粒YIplac211来实现。构建得到ATF1的ORF前插入梯度截断的PGK1启动子的酿酒酵母突变株。在30℃玉米浓醪发酵实验证明在ATF1前分别插入截断的启动子序列，能够实现乙酸乙酯的调节，CLy12a‑P‑100，CLy12a‑P‑200 and CLy12a‑P‑300的乙酸乙酯含量相比于CLy12a‑P减少了28％，30％和42％。本发明构建的酵母菌中基因组上无外源基因残留，因此可以安全的用于生产。