按大小分级来选择性分开和分离核酸混合物的方法

摘要

本发明涉及按大小分级来分离核酸的方法，其特征是有以下步骤：在不存在脂肪族醇的情况下，向一定量的核酸混合物中添加第一结合缓冲剂，所述第一结合缓冲剂包含至少一种离液盐和至少一种提高该结合缓冲剂的pH值的物质；结合至固相，并使通过步骤a)所结合的核酸分开；将来自步骤a)的滤液与pH值小于步骤a)中的结合缓冲剂的第二结合缓冲剂混合，或者与非离子表面活性剂混合，或者与醇混合，或者与非离子表面活性剂和醇的混合物混合；结合至固相并使通过步骤c)所结合的核酸分开；按照已知方法洗涤和洗脱在步骤a)和步骤c)之后所分离的核酸，结果，不仅在步骤a)后所分离的核酸具有比在步骤c)中分离的核酸更多数量的碱基对，而且在步骤a)后和在步骤c)后都分离出具有特定数量的碱基对的、在各其它步骤中未被分离出的独特的特定核酸级分。核酸级分的大小关系可以通过改变pH值来控制。