一种提高EGF91在重组毕赤酵母中表达效率的方法

摘要

本发明提供了一种提高EGF91在重组毕赤酵母中表达效率的方法，其包括如下步骤：(1)扩增EGF91基因、酶切；(2)将酶切产物分离后回收、连接反应；(3)连接反应后转化至E.coli DH5α感受态细胞，提取阳性转化子质粒，获得重组表达载体；(4)转化毕赤酵母，得到重组菌株；(5)酶切、扩增pfu‑sHSP基因，用Nhel和Spel进行双酶切；(6)分离、回收酶切产物，进行连接反应；(7)转化至E.coli DH5α感受态细胞，提取阳性转化子质粒，获得重组表达载体；(8)将表达载体导入菌株中，获得重组酵母；(9)接种、培养重组酵母。本发明的方法能够提高EGF的表达量。