一种尖吻蝮蛇凝血酶重组蛋白的表达方法

摘要

本发明涉及一种尖吻蝮蛇凝血酶重组蛋白的表达方法。该方法包括如下步骤：(1)优化尖吻蝮蛇凝血酶基因(2)PCR扩增优化后的尖吻蝮蛇凝血酶基因；(3)构建Agkis‑pMCX表达载体，将质粒转化大肠杆菌感受态细胞中扩增，经Amp抗性筛选出阳性克隆，进行测序，提取测序正确的重组质粒；(4)将重组质粒转染至CHO细胞；(5)重组蛋白表达鉴定。本发明是首次利用无血清悬浮式培养的CHO细胞表达一种重组尖吻蝮蛇凝血酶，运用生物工程手段，较成功地解决了蛇毒产品原料来源不足、质量不稳定的实际生产问题。