一种离子液体双水相萃取‑HPLC法检测辣椒中苏丹红的方法

摘要

本发明涉及一种离子液体双水相萃取‑HPLC法检测辣椒中苏丹红的方法，属于食品检测技术领域。本发明提供了一种基于离子液体双水相萃取技术的苏丹红检测方法，本方法能够实现纯化、萃取一步完成，对于辣椒中的苏丹红具有较高的萃取效率以及检测的准确性。

说明书

技术领域

本发明涉及一种离子液体双水相萃取-HPLC法检测辣椒中苏丹红的方法，属于食品检测技术领域。

背景技术

苏丹红是偶氮化合物类合成色素的一种，是一种人工合成的红色染料，常作为一种工业染料，被广泛用于如溶剂、油、蜡、汽油的增色以及鞋、地板等的增光方面。苏丹红I化学分子式为C_l6H₁₂ON₂，苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为苏丹红I的化学衍生物，均有致癌性。

2004年6月，欧盟批准了《有关辣椒及辣椒产品紧急措施的决定》，要求禁止进口掺有苏丹红的辣椒产品。欧洲委员会的检测方法简便、快速，但没有进行样品的净化处理，样品检测时易受杂质的干扰，不利于分析柱的保护，其主要涉及以辣椒为主要成分的产品检测；国标GB/T19681-2005采用了氧化铝柱对样品进行净化，方法灵敏、准确，但操作较复杂、费时、不易掌握。

发明内容

本发明的目的是：提供一种采用离子液体双水相萃取-HPLC检测辣椒中苏丹红的方法，本方法具有提取分离速度快、检测准确率高的优点。

技术方案是：

一种离子液体双水相萃取-HPLC法检测辣椒中苏丹红的方法，包括如下步骤：

第1步，将待检测辣椒与[emim][CF₃SO₃]硫酸铵双水相体系按照重量比1：10～12混合，混合均匀后，升温并保温，然后取上相溶液；

第2步，将上相溶液与流动相按照体积比1：15～30混合，用微孔滤膜过滤之后，进入HPLC仪中进行检测，根据苏丹红的标准曲线计算出待测样品中的苏丹红含量。

所述的第1步中，苏丹红是指苏丹红I。

所述的第1步中，[emim][CF₃SO₃]硫酸铵双水相体系中，[emim][CF₃SO₃]的质量分数为15～18%，硫酸铵的质量分数为20～30%。

所述的第1步中，升温并保温是指升温至40～45℃后，保温30～60min。

所述的第2步中，流动相是甲醇，检测波长是478nm，流动相流速是1.0ml/min，HPLC色谱柱采用的是ZORBAX SB-C18色谱柱，柱温30℃，进样量10 μL。

有益效果

本发明提供了一种基于离子液体双水相萃取技术的苏丹红检测方法，本方法能够实现纯化、萃取一步完成，对于辣椒中的苏丹红具有较高的萃取效率以及检测的准确性。

附图说明

图1是苏丹红标准品的标准曲线。

具体实施方式

实施例1

[emim][CF₃SO₃]硫酸铵双水相体的配制：

按质量百分比计，配制含有[emim][CF₃SO₃]>

标准溶液的配制：

取不含有苏丹红的辣椒与[emim][CF₃SO₃]硫酸铵双水相体系按照重量比1：10混合，混合均匀后，升温至40～45℃后，保温30～60min，然后取上相溶液；将上相溶液与流动相甲醇按照体积比1：20混合，用微孔滤膜过滤之后，再在其中加入苏丹红I标准品，分别配制得到含有0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、25.0>

根据峰面积绘制标准曲线图，如图1所示，线性范围是0.5～25.0 μg/mL，回归方程是：Y=25671X+139.2，R²=0.9993。

加样回收率的考察

将辣椒在含有0.5wt%苏丹红的水溶液中浸泡，水温30℃，浸泡时间1h，取出后自然阴干，作为待测样品。

待测样品与[emim][CF₃SO₃]硫酸铵双水相体系按照重量比1：10混合，混合均匀后，升温至40～45℃后，保温30～60min，然后取上相溶液；将上相溶液与流动相甲醇按照体积比1：20混合，用微孔滤膜过滤之后，再在其中加入苏丹红I标准品，分别按照1.0、5.0、10.0μg/mL的加入量加入标准品，作为加样溶液；依照同法进行HPLC检测。

上述步骤重复6次，计算不同条件下的加样回收率。结果如表1所示：

表1 加样回收率 %

1.0 μg/mL5.0 μg/mL10.0 μg/mL第1次102.3103.299.1第2次99.7102.6103.2第3次101.7101.3101.2第4次100.899.3103.7第5次104.299.098.9第6次102.699.799.3RSD1.52%1.52%2.13%

从上表中可以看出，本方法对含有苏丹红的辣椒具有较好的检测效果，方法重复性好、回收率准确。

对照例

分别采用[Bupy][BF₄]、[emim]Cl、[emim]NO₂、[emim][TFSI]作为离子液体依照上述同法进行检测。在不同的加样条件下，得到的检测回收率范围如表2所示：

表2 加样检测回收率 %

1.0 μg/mL5.0 μg/mL10.0 μg/mL[Bupy][BF₄]54.345.348.5[emim]Cl34.339.735.3[emim]NO₂25.628.332.1[emim][TFSI]48.334.351.3

可以看出，本发明采用的[emim][CF₃SO₃]离子液体在应用于双水相萃取-HPLC法检测辣椒中苏丹红样品的检测时，检测准确率优于其它的离子液体。