将干细胞分化为肝细胞谱系的方法

摘要

本公开提供了用于将干细胞分化为相关肝细胞谱系的方法和试剂盒，以及在筛选细胞反应、筛选表型和病况的治疗中使用所述相关肝细胞谱系的方法。在一个实施方案中，首先将干细胞分化为定形内胚层谱系细胞，通过一种或多种视黄酸活化剂和/或一种或多种转化生长因子‑β(TGFβ)抑制剂将所述定形内胚层谱系细胞分化为后前肠(PFG)谱系细胞。另一实施方案提供了用于通过一种或多种TGFβ信号传导活化剂、和/或一种或多种Wnt信号传导调节剂、和/或一种或多种环AMP/PKA信号传导活化剂将后前肠谱系细胞分化为肝芽祖细胞(LB)的方法；并且又一实施方案提供了用于通过一种或多种TGFβ信号传导抑制剂和/或成纤维细胞生长因子(FGF)抑制剂和/或一种或多种Notch抑制剂将肝芽祖细胞分化为肝祖细胞的方法。另一实施方案公开了通过一种或多种Notch抑制剂和/或糖皮质激素信号传导活化剂和/或一种或多种胰岛素信号传导活化剂和/或一种或多种抗坏血酸信号传导活化剂和/或另外的因子将肝祖细胞分化为肝细胞样细胞或静脉周肝细胞样细胞。还公开了用于维持LB处于自我更新状态、维持肝细胞样细胞处于静脉周或门静脉周状态的方法和试剂盒，以及用于LB和中肠/后肠(MHG)细胞的表面标志物。