一种植物中高效筛选CRISPR/CAS9基因编辑系统候选sgRNA系统及应用

摘要

本发明公开了一种CRISPR/CAS9系统候选sgRNA靶位点高通量筛选系统及其应用，所述测试系统包括：(1)用于同时表达多个候选sgRNA的质粒；(2)用于表达CAS9的质粒；(3)利用拟南芥及水稻原生质体瞬时表达系统快速高通量鉴定候选sgRNA靶位点切割效率。CRISPR/CAS9系统在敲除或编辑基因之前，选择可以高效切割的靶序列至关重要，短时间内验证多个候选sgRNA靶位点的切割效率，从而选择最佳的sgRNA提高敲除的成功效率，不仅可以降低工作成本，还可以提高工作效率。