薏米壳和薏米种皮提取物在抑制全齿复活线虫中的应用及其组合物和制备方法

摘要

本发明公开了薏米壳和薏米种皮提取物在抑制全齿复活线虫中的应用，并同时公开了一种抑制全齿复活线虫的组合物及其制备方法，所述组合物中包括以下重量份的原料：薏米壳15～20份和薏米种皮10～15份。本发明的薏米壳和薏米种皮提取物对全齿复活线虫具有较高的杀伤作用，24小时线虫死亡率达100％；能破坏全齿复活线虫卵卵壳，对虫卵的正常孵化有较强的抑制作用；能够抑制土壤中的全齿复活线虫的活性，明显减少土壤中的全齿复活线虫数量，改善土壤质量，较大提高植物的产量。

说明书

技术领域

本发明涉及农业害虫防治领域，尤其涉及薏米壳和薏米种皮提取物在抑制全齿复活线虫中应用及其组合物和制备方法。

背景技术

近年来，由于连作大棚蔬菜面积的不断扩大，以及用药不科学，致使全齿复活线虫发展蔓延速度较快，抗性增强。作物死苗率不断增加，从而造成作物严重减产，品质降低，已经严重影响了农作物生产。以黄瓜为例，根结全齿复活线虫病发生棚室死苗率一般在20～50％，最严重的毁棚绝收。根结全齿复活线虫发生的原因全齿复活线虫大量发生原因：大量使用剧毒农药灌根，不但破坏了作物根系，而且还破坏了土壤中根系有益微生物的生存环境，打破土壤平衡，造成恶性循环，致使全齿复活线虫越来越严重。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了薏米壳和薏米种皮提取物的在抑制全齿复活线虫中的应用，同时提出了一种抑制全齿复活线虫的组合物及其制备方法。

本发明采用的技术手段如下：薏米壳和薏米种皮提取物在抑制全齿复活线虫中的应用。

进一步的，应用于一种抑制全齿复活线虫的组合物。

一种抑制全齿复活线虫的组合物，包括以下重量份的原料：薏米壳15～20份和薏米种皮10～15份。

进一步的，所述抑制全齿复活线虫的组合物，包括以下重量份的原料：薏米壳18份和薏米种皮13份。

所述的抑制全齿复活线虫的组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1、粉碎：将薏米壳、薏米种皮粉碎，粉末过20～100目筛；

S2、浸泡：将薏米壳、薏米种皮放入3～8倍重量的有机酸溶液中浸泡，浸泡温度为30～40度，浸泡20～24小时；

S3、回流提取：薏米种皮用丙酮回流提取2～4次，每次提取3～4小时，过滤，合并薏米种皮滤液；

S4、萃取：薏米壳用三氯甲烷萃取2～3次，萃取温度为40～50℃，每次提取2～3小时，过滤，合并薏米壳滤液；

S5、调配：将薏米种皮滤液和薏米壳滤液放入搅拌锅内，搅拌速度为80～100r/min，搅拌30～40分钟，得薏米壳及薏米种皮的混合液；

S6、浓缩：将薏米壳及薏米种皮的混合液经旋转蒸发器浓缩并收集浓缩液；

S7、二次提取：将浓缩液溶解于盐酸溶液中，用石油醚萃取2～4次，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即得薏米壳及薏米种皮提取物。

进一步的，所述步骤S2中，所述有机酸溶液为8～10g/L醋酸溶液。

进一步的，所述步骤S2中，浸泡温度为35度，浸泡20小时。

进一步的，所述步骤S3中，薏米种皮用丙酮回流提取3次，丙酮的每次加入量为10倍量，每次提取3小时，过滤，合并薏米种皮滤液。

进一步的，所述步骤S4中，薏米壳用三氯甲烷萃取3次，萃取温度为45℃，三氯甲烷的每次加入量为8倍量，每次提取2小时，过滤，合并薏米壳滤液。

进一步的，所述步骤S7中，所述盐酸溶液浓度为1～2mol/L。

有益效果：本发明的薏米壳和薏米种皮提取物对全齿复活线虫具有较高的杀伤作用，24小时线虫死亡率达100％；薏米壳和薏米种皮提取物能破坏全齿复活线虫卵卵壳，对虫卵的正常孵化有较强的抑制作用。本发明提供的薏米壳和薏米种皮提取物，能够抑制土壤中的全齿复活线虫的活性，明显减少土壤中的全齿复活线虫数量，改善土壤质量，较大提高植物的产量。本发明的薏米壳和薏米种皮提取物能够长期放置后，且保留强的杀虫效果。且经试验可知，本发明提供的薏米壳和薏米种皮提取物可在抑制全齿复活线虫中的应用，可应用于一种抑制全齿复活线虫活性的组合物。

具体实施方式

以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。

实施例1

一种抑制全齿复活线虫的组合物，包括以下重量份的原料：薏米壳15份和薏米种皮10份。

实施例2

一种抑制全齿复活线虫的组合物，包括以下重量份的原料：薏米壳20份和薏米种皮15份。

实施例3

一种抑制全齿复活线虫的组合物，包括以下重量份的原料：薏米壳18份和薏米种皮13份。

上述实施例1～3所述的抑制全齿复活线虫的组合物的制备方法，包括以下步骤：

所述的抑制全齿复活线虫的组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1、粉碎：将薏米壳、薏米种皮粉碎，粉末过50目筛；

S2、浸泡：将薏米壳、薏米种皮粉末放入5倍重量的10g/L醋酸溶液中浸泡，浸泡温度为35度，浸泡20小时。

S3、回流提取：将步骤S2薏米种皮浸泡液用丙酮回流提取3次，每次提取3小时，过滤，合并薏米种皮滤液；

S4、萃取：将步骤S2薏米壳浸泡液用三氯甲烷萃取3次，萃取温度为45℃，每次萃取2小时，过滤，合并薏米壳滤液；

S5、调配：将薏米种皮滤液和薏米壳滤液放入搅拌锅内，搅拌速度为90r/min，搅拌35分钟，得薏米壳及薏米种皮的混合液；

S6、浓缩：将薏米壳及薏米种皮的混合液经旋转蒸发器浓缩并收集浓缩液；

S7、二次提取：将浓缩液溶解于1mol/L盐酸溶液中，用石油醚萃取3次，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即得薏米壳及薏米种皮提取物。

实施例4

一种抑制全齿复活线虫的组合物，包括以下重量份的原料：薏米壳18份和薏米种皮13份。

S1、粉碎：将薏米壳、薏米种皮粉碎，粉末过20目筛；

S2、浸泡：将薏米壳、薏米种皮粉末放入8倍重量的8g/L醋酸溶液中浸泡，浸泡温度为30度，浸泡24小时。

S3、回流提取：将步骤S2薏米种皮浸泡液用丙酮回流提取2次，每次提取4小时，过滤，合并薏米种皮滤液；

S4、萃取：将步骤S2薏米壳浸泡液用三氯甲烷萃取3次，萃取温度为40℃，每次萃取3小时，过滤，合并薏米壳滤液；

S5、调配：将薏米种皮滤液和薏米壳滤液放入搅拌锅内，搅拌速度为80r/min，搅拌30分钟，得薏米壳及薏米种皮的混合液；

S6、浓缩：将薏米壳及薏米种皮的混合液经旋转蒸发器浓缩并收集浓缩液；

S7、二次提取：将浓缩液溶解于1mol/L盐酸溶液中，用石油醚萃取2次，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即得薏米壳及薏米种皮提取物。

实施例5

一种抑制全齿复活线虫的组合物，包括以下重量份的原料：薏米壳18份和薏米种皮13份。

所述的抑制全齿复活线虫的组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1、粉碎：将薏米壳、薏米种皮粉碎，粉末过100目筛；

S2、浸泡：将薏米壳、薏米种皮粉末放入3倍重量的10g/L醋酸溶液中浸泡，浸泡温度为40度，浸泡22小时。

S3、回流提取：将步骤S2薏米种皮浸泡液用丙酮回流提取4次，每次提取3小时，过滤，合并薏米种皮滤液；

S4、萃取：将步骤S2薏米壳浸泡液用三氯甲烷萃取2次，萃取温度为50℃，每次萃取2小时，过滤，合并薏米壳滤液；

S5、调配：将薏米种皮滤液和薏米壳滤液放入搅拌锅内，搅拌速度为100r/min，搅拌40分钟，得薏米壳及薏米种皮的混合液；

S6、浓缩：将薏米壳及薏米种皮的混合液经旋转蒸发器浓缩并收集浓缩液；

S7、二次提取：将浓缩液溶解于2mol/L盐酸溶液中，用石油醚萃取4次，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即得薏米壳及薏米种皮提取物。

对比例1

对比例1与实施例3的区别在于，所述步骤S1粉碎后未经浸泡，直接回流提取或者萃取。

对比例2

对比例1与实施例3的区别在于，所述步骤S5调配后未经浓缩，直接进行二次提取。

一、薏米壳和薏米种皮提取物抑制全齿复活线虫活性试验

1、制备全齿复活线虫：将全齿复活线虫接种于固体培养基上，经活化处理后保存于4℃冰箱备用；将所需线虫用贝曼漏斗法洗出，置于5ml离心管内，加5ml无菌水洗涤，瞬时离心，弃上清，重复5次得到洁净供试线虫，用无菌水将线虫稀释为含量为15条/μl的线虫悬浮液；

2、制备薏米壳和薏米种皮提取物的水溶液：将实施例1～6与对比例1～2的薏米壳和薏米种皮提取物按10g/L溶解于水；

3、杀全齿复活线虫试验：选择无污染线虫的土壤，分为7份土壤，每份土壤1m³，接入全齿复活线虫约500条，分别取实施例1～5和对比例1～2相应1L薏米壳和薏米种皮提取物的水溶液均匀洒入各份1m³土壤中；12h观察一次，连续观察24h，每次随机选取100条线虫计算死亡率。

4、薏米壳和薏米种皮提取物对全齿复活线虫的杀伤效果见表1：

上述试验表明，24小时实施例1～5的死亡率都达100％，表明本发明的薏米壳和薏米种皮提取物对全齿复活线虫具有较强的抑制作用，杀伤效果佳，薏米壳和薏米种皮提取物能破坏全齿复活线虫卵卵壳，对虫卵的正常孵化有较强的抑制作用，其中，实施例3制得薏米壳和薏米种皮提取物对全齿复活线虫的抑制效果最佳。当杀虫时间相同，实施例3的死亡率大大高于对比例1～2，说明实施例3的抑制效果明显优于对比例1～2，表明浸泡和浓缩这两个步骤对薏米壳和薏米种皮提取物的抑制效果有明显的提升，浸泡使得薏米壳和薏米种皮提取物的抑制线虫的活性成分更好溶出，浓缩使得薏米壳和薏米种皮提取物中的的抑制线虫的活性成分更好融合而起到更佳的抑制全齿复活线虫的作用。

二、薏米壳和薏米种皮提取物在田间试验

选取9块同样面积大小、土壤等生长环境相同、生长状况相同的花生种植地作为实验田，每块为1亩，第1～5块农田分别使用本发明实施例1～5所得的薏米壳和薏米种皮提取物，第6～7块农田使用对比例1～2所得的薏米壳和薏米种皮提取物，第8块农田使用传统杀虫剂，第9块农田不使用任何杀虫剂，其他管理均一致，一年后观察花生的实验。结果见下表2：

项目产量(Kg/亩)花生根际每100g干土全齿复活线虫数量(条)实施例132813实施例233115实施例333410实施例431814实施例532113对比例123225对比例222620传统杀虫剂18632空白试验15453

从表中结果表明，不使用任何杀虫剂，全齿复活线虫数量多、产量低；使用传统杀虫剂，全齿复活线虫数量也较多、产量也较低；相对于对比例1～2，实施例1～5杀虫后，花生的产量有较高的提升，花生根际每100g干土全齿复活线虫数量有明显减少，其中，实施例3的线虫数量最少、产量最高，说明实施例3制得薏米壳和薏米种皮提取物对土壤中全齿复活线虫的抑制效果最佳。表明本发明提供的薏米壳和薏米种皮提取物，对土壤中的全齿复活线虫有明显的抑制作用，显著改善土壤的质量。

将实施例1～3的薏米壳和薏米种皮提取物放置于仓库中，室温20～28℃、70％RH湿度条件下存放12个月，取出后，重复上述的试验，结果如下表3：

项目产量(Kg/亩)花生根际每100g干土全齿复活线虫数量(条)实施例128813实施例228116实施例328411空白试验15656

从表中可以看出，实施例1和2中的薏米壳和薏米种皮提取物在长期放置后，花生产量稍有下降，但杀虫效果还是依旧。

上述试验表明，薏米壳和薏米种皮提取物可在抑制全齿复活线虫中的应用，亦可应用于一种抑制全齿复活线虫活性的组合物。

上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明保护的范围之内。