一种构建植物中pre‑miRNA5’RACE‑seq文库的方法

摘要

本发明提供了一种构建植物中pre‑miRNA 5’RACE‑seq文库的方法，利用该方法可以明确的看到植物中pre‑miRNA 5’末端碱基的变化情况。本发明通过RNA的提取，加接头，反转录，成环及PCR等方法，成功解决了在5’端难以加接头的技术难题，在植物中创立了用于高通量测序的pre‑miRNA 5’RACE‑seq文库构建新方法。本发明利用SDS‑PAGE分离RNA技术、3’‑RACE接头技术和单链DNA环化等技术。本方法首先在pre‑miRNA建库过程中引入成环技术，解决了接头的添加问题，并能构建出高质量的pre‑miRNA 5’RACE‑seq文库。