一种三棱提取物的提取方法及含有该三棱提取物的香烟和精华霜

摘要

本发明涉及植物提取工艺及植物提取物应用技术领域，具体涉及一种三棱提取物的提取方法及含有该三棱提取物的香烟和精华霜，一种三棱提取物的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：将三棱提取物粉碎，加入到乙醇水溶液进行提取，合并滤液，减压浓缩得到三棱提取液；将所述三棱提取液离心，离心液依次进行两次酶解处理，酶解结束后升温，得到三棱酶解液，将所述三棱酶解液进行两次柱层析吸附，收集水洗脱液，目标洗脱液进行减压浓缩、冷冻干燥后得到所述三棱提取物，将其加入卷烟中，可具有改善烟气状态、丰富烟香、除杂降刺等作用。经体外测试后，发现三棱提取物具有良好的清除自由基及保湿功效，也可应用于保湿抗衰老化妆品中。

说明书

技术领域

本发明涉及植物提取工艺及植物提取物应用技术领域，具体涉及一种三棱提取物的提取方法及含有该三棱提取物的香烟和精华霜。

背景技术

我国地大物博，植物种类繁多，所含有效成分的组成也各有特点，为功效性植物添加剂的开发提供了丰富的资源。可通过不同方式方法对植物有效成分进行提取分离，探索植物有效成分在不同领域的应用，以便提升其经济价值。

三棱为黑三棱科植物黑三棱Sparganium stoloniferum Buch. -Ham. 削去外皮的干燥块茎。冬季至次年春季采挖，洗净，削去外皮，晒干。始载于唐代《本草拾遗》，自宋代开始作做正品药用，并一直被《中国药典》收载。三棱性平、味苦，入肝、脾经，具有破血行气、消积止痛等功能。现代药理研究表明，三棱具有抗肿瘤、抗氧化、镇痛、抗炎、抗凝血、抗血小板聚集、抗血栓、抗肺纤维化等作用，是常用的活血化瘀类中药。研究表明，与药理活性相关的成分主要是酚类、黄酮类、皂苷类与多糖类。

三棱的应用非常广泛，目前关于三棱的报道和研究很多，但大部分都是跟其他的药材混合使用，并且目前对于三棱的提取方法仅限于浸提或有机物提纯，时间长，提取效率低，该总方法主要是针对三棱中的黄酮进行提取，对于三棱的其他成分及应用研究甚少。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种三棱提取物的提取方法，直接从三棱中得到有效活性物质，步骤工艺简单易操作，得到的提取物有效成分高，纯度好，可应用范围广。

本发明的另一目的在于提供一种三棱提取物，其有效成分含量高，应用效果好。

本发明的另一目的在于提供一种三棱提取物的应用，其能应用在卷烟加料领域，有助于提高卷烟吸食品质，还能应用到化妆品的保湿和抗衰老领域。

8、一种含有三棱提取物的精华霜

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种三棱提取物的提取方法，包括以下步骤：

步骤一：将a重量份的三棱提取物粉碎，加入到乙醇水溶液进行提取1-3次，每次加入乙醇水溶液8a-10a重量份，合并滤液，减压浓缩得到a重量份三棱提取液；

步骤二：将a重量份所述三棱提取液离心，离心液依次进行两次酶解处理，酶解温度为37℃，时间为30-60min，酶解结束后升温至80-90℃保持15-30min，得到三棱酶解液；酶解有助于分解影响活性效果的淀粉、蛋白质、果胶等成分。

步骤三：将所述三棱酶解液进行第一次柱层析，收集水洗脱液并进行二次柱层析吸附，收集水洗脱液，目标洗脱液进行减压浓缩、冷冻干燥后得到所述三棱提取物。柱层析的目的是脱色、提纯，提高三棱提取物中的活性成分含量。

其中，所述所述步骤一种的乙醇水溶液中乙醇质量分数为5-40%。

其中，步骤二中第一次酶解用的是0.01a-0.03a重量份的复合酶，所述复合酶由淀粉酶、纤维素酶、果胶酶按照质量比为：3-5：1-2：1-2混合而成；第二次酶解用的是0.005a-0.01a重量份的蛋白酶。所用生物酶可为固体或液体状。

其中，步骤三中第一次柱层析填料由硅藻石和活性炭颗粒按照质量比为1-2：3-5混合而成；第二次柱层析填料为非极性大孔树脂。型号为但不限于BS-65，X-5，HPD-100，HP20，D101等。硅藻土结合活性炭颗粒，可高效去除三棱提取物中的色素，比单独用其中的一种效果好。非极性大孔树脂将进一步除去三棱提取物中的微量脂溶性杂质，起到除杂提纯作用。

一种三棱提取物，上述方法提取得到。

一种含有三棱提取物的香烟，有本发明制得的三棱提取物的添加量为烟丝重量的0.05-0.5%。

一种三棱提取物在化妆品中的应用，妆品包括基质和所述三棱提取物，所述三棱提取物占所述化妆品总重量的0.01-10%。

所述化妆品的剂型为溶液、乳液或霜。

1、一种含有三棱提取物的精华霜，包括以下质量百分比组分：

A相：鲸蜡硬脂醇 1-2%

辛酸/癸酸甘油三酯4-5%

角鲨烷 1-3%

聚二甲基硅氧烷 2%

环五聚二甲基硅氧烷 2-5%

B相：甘油 3-5%

1,3-丁二醇 1-3%

尿囊素 0.2%

汉生胶 0.1-0.3%

水 余量

C相：聚丙烯酰胺 0-0.2%

C13-14异链烷烃 0-0.4%

桂醇醚-7 0.2%

D相：三棱提取物 0.1-3%

E相：苯氧乙醇 0.1-0.2%

乙基己基甘油 0.1-0.2%，

所述精华霜的制备方法为：将A相加入油相锅中，加热到80℃；将B相加入乳化锅中，加热到80℃；把A相加入B相均质2-3分钟；加入C相均质2-3分钟；搅拌冷却至30-40℃加入D相、E相，制得含有三棱提取物的精华霜。

所述精华霜具有保湿和清除自由基的功能，在抗衰老领域效果显著。

本发明的有益效果在于：本发明的三棱提取物的制备方法安全可靠、简单高效，首先通过提取、浓缩、酶解等步骤制备得到粗提取液，进一步通过硅藻土及活性炭颗粒脱色处理，再进行二次大孔树脂吸附纯化，经浓缩，冷冻干燥后得到三棱提取物。将其加入卷烟中，可具有改善烟气状态、丰富烟香、除杂降刺等作用。经体外测试后，发现三棱提取物具有良好的清除自由基及保湿功效，也可应用于保湿抗衰老化妆品中。

本发明方法操作简单、原料易得，具有良好的工业化生产实际意义。

具体实施方式

为了便于本领域技术人员的理解，下面结合实施例对本发明作进一步的说明，实施方式提及的内容并非对本发明的限定。

实施例1

称取100g三棱提取物粉碎，加入800-1000g乙醇水溶液（乙醇质量分数35%）进行提取2次，合并滤液，减压浓缩得到100g三棱提取液；三棱提取液离心，离心液加入1.5g的复合酶进行酶解，复合酶为淀粉酶、纤维素酶、果胶酶按照质量比为3：1：1的混合物，酶解温度为37℃，时间为40min。第一次酶解结束后升温至85℃保持20min，随后降温至37℃，再加入0.8g的蛋白酶酶解30min，第二次酶解结束后升温至90℃保持15min，随后冷却至常温，得到三棱酶解液；将三棱酶解液通过装载有硅藻石和活性炭颗粒混合物的玻璃层析柱，混合比例为2：4，收集去离子水洗脱液并进行第二次X-5大孔树脂吸附，收集去离子水洗脱液，目标洗脱液进行减压浓缩、冷冻干燥后得到11g三棱提取物。

实施例2

称取100g三棱提取物粉碎，加入1000g乙醇水溶液（乙醇质量分数20%）进行提取1次，合并滤液，减压浓缩得到100g三棱提取液；三棱提取液离心，离心液加入2g的复合酶进行酶解，复合酶为淀粉酶、纤维素酶、果胶酶按照质量比为5： 2：1的混合物，酶解温度为37℃，时间为50min。第一次酶解结束后升温至80℃保持30min，随后降温至37℃，再加入1g的蛋白酶酶解40min，第二次酶解结束后升温90℃保持30min，随后冷却至常温，得到三棱酶解液；将三棱酶解液通过装载有硅藻石和活性炭颗粒混合物的玻璃层析柱，混合比例为2：5，收集去离子水洗脱液并进行第二次D101大孔树脂吸附，收集去离子水洗脱液，目标洗脱液进行减压浓缩、冷冻干燥后得到8.9g三棱提取物。

实施例3

称取100g三棱提取物粉碎，加入900g乙醇水溶液（乙醇质量分数5%）进行提取3次，合并滤液，减压浓缩得到100g三棱提取液；三棱提取液离心，离心液加入3g的复合酶进行酶解，复合酶为淀粉酶、纤维素酶、果胶酶按照质量比为 5：2：1的混合物，酶解温度为37℃，时间为60min。第一次酶解结束后升温至90℃保持20min，随后降温至37℃，再加入0.5g的蛋白酶酶解50min，第二次酶解结束后升温至85℃保持15min，随后冷却至常温，得到三棱酶解液；将三棱酶解液通过装载有硅藻石和活性炭颗粒混合物的玻璃层析柱，混合比例为1：5，收集去离子水洗脱液并进行第二次HP20大孔树脂吸附，收集去离子水洗脱液，目标洗脱液进行减压浓缩、冷冻干燥后得到9.7g三棱提取物。

下述对上述三个实施例的制备方法制备得到的三棱提取物的保湿活性及消除自由基活性的效果进行测试。

测试1：皮肤保湿功效的检测

选取10名健康的受试者，平均年龄31岁。采用德国CK公司的皮肤水分测试仪Corneometer825对涂抹不同浓度的三棱提取物的受试者进行角质层含水量测定。

环境条件：测试期间环境的温度和湿度恒定，温度为（25±2）℃，相对湿度为40%～60%。

涂抹部位：距手臂胳膊肘关节4、8cm处，受测面积（3×3CM2）；时长60min。读数用任意单位(Arbitrary Unit, A. U.)来表示。

样品用去离子水稀释成不同浓度，去离子水溶液做空白对照。结果如下表1。

表1 保湿能力测试结果

从表2中可以看出，三棱提取物均能实现对较为优越的皮肤保湿能力，其中用量达到1%以上时，保湿能力显著提升。表明三棱提取物可以应用于保湿化妆品中，并且效果显著。

测试2：清除自由基活性的检测

分别将实施例1、2、3制备得到的三棱提取物溶于去离子水，配制成质量百分比为0.5%的溶液，用DPPH 去除自由基法测定其清除自由基活性，以VC（维生素C）为对照样品。

测定步骤为：准确移取提取液2mL于10mL具塞试管中，加人2mLDPPH乙醇溶液（2×10^-4mol/L），充分混匀，室温静置，30min后用分光光度计测定517nm波长的吸光度A₅₁₇（以乙醇为参比）；同时测定2mL>C，以及2mL>0。平行测定三次，取平均值，根据以下公式计算自由基清除率：

自由基清除率=（1-（A₅₁₇-A₀）/A_C）×100%。

最终测得三个实施例得到的三棱提取物及VC的自由基清除率如表2所示。

表2三棱提取物及VC的自由基清除率

从表2中可以看出，本发明的三棱提取物均能实现自由基清除作用，而且优于目前同等浓度的VC。说明可将本发明的三棱提取物用于抗衰老的化妆品中。

下述结合具体实施例对本发明优选实施例中的三棱提取物在化妆品中的应用作进一步说明。

实施例4：一种含三棱提取物的精华霜

取三棱提取物，用于制备具有保湿及抗衰老功效的护肤精华霜。具体原料及含量如表3所示。

表3精华霜的原料及含量

该精华霜可由以下工艺制备：将A相加入油相锅中，加热到80℃；将B相加入乳化锅中，加热到80℃；把A相加入B相均质2-3分钟；加入C相均质2-3分钟；搅拌冷却至30-40℃加入D相、E相；制得精华霜，将该精华霜再次进行皮肤保湿功效和清除自由基活性的检测结果显示，该精华霜具有优越的保湿性能及抗衰老功效。

下述结合具体实施例对本发明优选实施例中的三棱提取物在卷烟中的应用作进一步说明。

实施例5：卷烟加香加料测试

一种本发明的三棱提取物的新用途，将所述三棱提取物喷施于烤烟的烟叶表面，所述三棱提取物的喷施量占其所喷施的烤烟烟丝重量的0.05～0.5%。

具体的试验测试：将实施例1中的三棱提取物用去离子水稀释后作为添加剂喷洒在同一种中档空白（未加香加料）烤烟烟丝表面，添加量分别为烟丝重量的0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、0.8%。后续处理按常规的卷烟工艺进行，即在喷施烟用香料后，将烤烟烟丝贮存4小时，再经过切丝、烘丝、加香、贮丝、卷接和包装工序制成卷烟成品。由8人组成的评吸小组分别对上述样品进行评吸对比，得到的总体感官试验结果如下表4所示。其中，将空白样品的内在品质均设定为0，相对于空白样品内在品质有所改进（如烟气状态流畅，掩盖杂气，增加香气量，降低刺激），则相应得正分，分值越高，改进越好；相对于空白样品内在品质有所降低（如烟气状态下沉，杂气增加，香气量减低，余味不舒适），则相应得负分，负分越低，改进越差。

表4总体感官试验结果

经过卷烟加料评吸实验表明，制备的三棱提取物具有良好的加香效果，与烟香协调，能够改善烟气状态，增加香气量，掩盖杂气及降低刺激的作用。整体能够提升烤烟卷烟的吸食品质，具有应用价值。

上述实施例为本发明较佳的实现方案，除此之外，本发明还可以其它方式实现，在不脱离本发明构思的前提下任何显而易见的替换均在本发明的保护范围之内。