ABO正反和RhD抗原血型鉴定组合器及鉴定方法

摘要

本发明涉及医疗中的血液检测技术检测设备，具体是ABO正反和RhD抗原血型鉴定组合器，该鉴定组合器包括有四个ABO试管和一个RhD抗原试管，其特征是：四个ABO试管连成一排构成一体结构，每个ABO试管由上、下两段构成，上段为直管，下段为锥形管；所述RhD抗原试管是与最外侧的一个ABO试管采用活结构连接，RhD抗原试管具有直筒管体，在管体下部叉接有一抽液管，在RhD抗原试管的底部配有一个取样观察器，鉴定血型的方法是应用上述鉴定组合器采用经典的常量法同时进行ABO血型和RhD血型鉴定；本发明解决了现有ABO及RhD检测分开进行，操作不方便、容易出差错、不方便存档等问题，主要应用于医疗保健行业。

说明书

技术领域

本发明涉及医疗卫生中的检测技术，具体是ABO正反和RhD抗原血型鉴定组合器及鉴定方法。

背景技术

到目前为止各级医院输血科做血型鉴定，如ABO血型系统均是以标准的抗A、抗B血清试剂及A抗原和B抗原的血球四种血型标准试剂分别加上病人的血清和血球在试管（或玻片纸板或凝胶液管）内进行反应，然后根据以上四种反应结果可得出ABO系统的血型结果。

随着时代的发展到目前如果需要输血治疗，配血除了ABO系统必作出血型定型外，更重要的是要必作RhD抗原的血型鉴定，因为其造成此血型不合的不良反应更是严重或危险。因此临床上非常严格要求作RhD抗原的血型同时采用输血治疗和其他妊娠或其他免疫病的治疗和阻断（如RhD阴性孕妇怀孕有RhD阳性胎儿此时母或子必然招致重大的危险），即RhD抗原的检测以列入临床预防和治疗的非常重要血型系统且已纳入与ABO血型同等重要的必检血型系统。

目前ABO血型鉴定和RhD抗原鉴定是两个各自完全独立的一套检测程序，操作繁琐复杂，容易出差错（通常有多人同时进行鉴定，确定对应关系时容易造成差错），另一方面传统的ABO血型鉴定是以常量法为主，通过人工观察结果进行确定，确定完成后将试管丢掉，不能形成固定状态，不能扫描拍照存档，给以后的复诊查档带来困难。

近几年有医院开始采用微量快速ABO血型鉴定方法，用量为常量法的1/5，反应时间仅用几秒（而常量法为15分钟左右），反应温度在20-25℃，这些血型鉴定因素的改变都不利于不完全抗体的检出，也会造成某些ABO亚型血型可以难以鉴别或漏检的弊病。微量快速血型鉴定方法同样存在不方便扫描拍照存档的问题。

发明内容

本发明的目的就是要解决传统常量法ABO血型鉴定与RhD抗原鉴定分开独立进行，操作复杂，容易出错，不方便扫描拍照存档，而微量快速血型鉴定方法有误检、漏检、不精准、同样不方便存档等问题，提供一种ABO正反和RhD抗原血型鉴定组合器及鉴定方法。

本发明的具体方案是：ABO正反和RhD抗原血型鉴定组合器，包括有四个ABO试管和一个RhD抗原试管，其特征是：四个ABO试管连成一排构成一体结构，每个ABO试管由上、下两段构成，上段为直管，下段为锥形管；所述RhD抗原试管是与最外侧的一个ABO试管采用活结构连接，RhD抗原试管具有直筒管体，在管体下部叉接有一抽液管，在RhD抗原试管的底部配有一个取样观察器，该取样观察器具有一个透明塑料囊，透明塑料囊的顶部设有插管，该插管是在RhD抗原试管完成混合液剂后插入RhD抗原试管的底部使透明塑料囊与RhD抗原试管连通，在透明塑料囊上配置有一个手动气囊。

本发明中所述四个ABO试管是直接成型固定连成一体或采用连接件连接成一体。

本发明中所述RhD抗原试管是采用卡或扣结构与最外侧的ABO试管连接成一排。

本发明中所述ABO试管的上段容积为ABO测试的常量容积(符合标准操作规程容量)。

本发明中所述ABO试管的上段高度为40±10mm，内口径为7-9mm；下段高度为10±5mm，上口内径为5±2mm。

本发明中所述RhD抗原试管中，抽液管的叉接处离管体底面4-10mm，抽液管折弯向上垂直布置，其上端面高度>4/5管体高度。

本发明中应用权上述任意一种血型鉴定组合器进行ABO正反和RhD抗原血型的鉴定方法，包括以下具体步骤：

、准备一组ABO正反和RhD抗原血型鉴定组合器，并将鉴定组合器中的五个试管从RhD抗原试管一侧开始依次编号为1号试管、2号试管、3号试管、4号试管、5号试管；操作前与1号试管配置的取样观察器是独立放置的；

、在2-5号试管中加入中性凝胶并灌满试管的下段锥形管部份；

、在1号试管中加入适量的RhD抗体（即抗D抗体），在2号试管中加入适量抗A（即标准抗A血清），在3号试管中加入适量抗B（即标准抗B血清），在4号试管中加入适量A抗原（即A型标准血球），在5号试管中加入适量B抗原（即B型标准血球）；

、在1-3号试管中分别加入被检者的5％血球悬液0.1ml，在4、5号试管中分别加入被检者的血清0.25 ml；

、将1号试管从组合器中分开，将2-5号试管摇动混匀后放入温箱保持恒温37℃反应10-18分钟；

、从温箱中取出2-5号试管放入离心机以3400转/分速度离心3分钟，取出观察结果按如下方法确定被检者的ABO血型：观察试管的下段，有无血球渗入底部，设定有渗入则试管上段中的混合液不凝集表示为“-”,无渗入则试管上段中的混合液凝集表示为“+”；则如果2号、5号试管为“+”，3号、4号试管为“-”时，被检者血型可以确定为A型血；如果2号、5号试管为“-”，3号、4号试管为“+”时，被检者血型可以确定为B型血；如果2号、3号试管为“-”，4号、5号试管为“+”时，被检者血型可以确定为O型血；如果2号、3号试管为“+”，4号、5号试管为“-”时，被检者血型可以确定为AB型血；

、在1号试管中加入凝聚胺2滴和低离子缓冲剂0.65 ml，再将1号试管放入离心机以3400转/分速度离心2分钟后取出，采用抽吸装置从1号试管的抽液管中抽出上部的废液，保留底部的血块混渣，目测此血块混渣是否有凝集，如无凝集此试验必须重做；观察有凝集后，再向血块混渣中加入解凝剂2滴，并轻轻摇动试管观察混合血凝块是否散开，观察试管内的混合物，如果凝集散开则表示RhD抗体为阴性，如果凝集不散开则表示被检者血球中有RhD抗原，即为RhD阳性血型；

、将取样观察器的插管插入1号试管底部连通，操作取样观察器上的手动气囊，使1号试管中的混合液进入取样观察器中的透明塑料囊，与2号、3号、4号、5号试管并同送扫描仪扫描拍照存档。

本发明方案还可以将中性凝胶预先灌装在每个ABO试管中的下段（灌满下段），形成加装有中性凝胶的血型鉴定组合器。应用这种血型鉴定组合器进行血型鉴定方法基本同上述方法步骤，只是免去上述步骤即可。

本发明通过设计一套特别的血型鉴定组合器，使ABO血型鉴定和RhD抗原鉴定同时进行操作，简单方便，不易出错。特别是在ABO血型鉴定中，通过采用中性凝胶分层，使血液凝聚或不凝聚状态在试管锥形段中得以相对固定，而在RhD抗原试管中增加了取样观察器，从而方便观察、扫描拍照存档。并且本发明是从方法上严格地遵守了血型交叉反应的溯源性的操作规程和经典的常规试验的标准试剂用量和典范的试管法（37℃反应温度和反应时间、条件）来进行鉴定的，因此其结果是索源和真实、科学、可靠地。同时本发明也克服了漏检的弊病。

附图说明

图1是本发明鉴定组合器的结构示意图；

图2是取样观察器的放大视图。

图中：1-ABO试管，2-中性凝胶，3-RhD抗原试管，4-抽液管，5-取样观察器，6-透明塑料囊，7-手动气囊，8-插管。

具体实施方式

例 1：首先按照图1、2制作一组ABO正反和RhD抗原血型鉴定组合器。该鉴定组合器体包括有四个ABO试管1和一个RhD抗原试管3，其特征是：四个ABO试管1连成一排构成一体结构，每个ABO试管1由上、下两段构成，上段为直管，下段为锥形管；所述RhD抗原试管3是与最外侧的一个ABO试管1采用活结构连接，RhD抗原试管3具有直筒管体，在管体下部叉接有一抽液管4，在RhD抗原试管3的底部配有一个取样观察器5，该取样观察器5具有一个透明塑料囊6，透明塑料囊6的顶部设有插管8，该插管8是在RhD抗原试管3完成混合液剂后插入RhD抗原试管3的底部使透明塑料囊6与RhD抗原试管3连通，在透明塑料囊6上配置有一个手动气囊7。

本实施例中所述四个ABO试管1是直接成型固定连成一体或采用连接件连接成一体。

本实施例中所述RhD抗原试管3是采用卡或扣结构与最外侧的ABO试管1连接成一排。

本实施例中所述ABO试管1的上段容积为ABO测试的常量容积。

本实施例中所述ABO试管1的上段高度为40±10mm，具体为40mm，内口径为7-9mm，具体为8mm；下段高度为10±5mm，具体为10mm，上口内径为5±2mm，具体为5mm。

本实施例中所述RhD抗原试管3中，抽液管4的叉接处离管体底面4-10mm，具体为8mm，抽液管4折弯向上垂直布置，其上端面高度与管体高度平齐（一般>4/5试管高度即可）。

应用上述制作的血型鉴定组合器进行血型鉴定的方法包括以下步骤：

、准备一组上述ABO正反和RhD抗原血型鉴定组合器，并将鉴定组合器中的五个试管从RhD抗原试管3一侧开始依次编号为1号试管、2号试管、3号试管、4号试管、5号试管；操作前与1号试管配置的取样观察器5是独立放置的；

、在2-5号试管中加入中性凝胶2并灌满试管的下段锥形管部份；、在1号试管中加入适量的RhD抗体，在2号试管中加入适量抗A，在3号试管中加入适量抗B，在4号试管中加入适量A抗原，在5号试管中加入适量B抗原；

、在1-3号试管中分别加入被检者的5％血球悬液0.1ml，在4、5号试管中分别加入被检者的血清0.25 ml；

、将1号试管从组合器中分开，将2-5号试管摇动混匀后放入温箱保持恒温37℃反应10-18分钟；

、从温箱中取出2-5号试管放入离心机以3400转/分速度离心3分钟，取出观察结果按如下方法确定被检者的ABO血型：观察试管的下段，有无血球渗入底部，设定有渗入则试管上段中的混合液不凝集表示为“-”,无渗入则试管上段中的混合液凝集表示为“+”；则如果2号、5号试管为“+”，3号、4号试管为“-”时，被检者血型可以确定为A型血；如果2号、5号试管为“-”，3号、4号试管为“+”时，被检者血型可以确定为B型血；如果2号、3号试管为“-”，4号、5号试管为“+”时，被检者血型可以确定为O型血；如果2号、3号试管为“+”，4号、5号试管为“-”时，被检者血型可以确定为AB型血；

、在1号试管中加入凝聚胺2滴和低离子缓冲剂0.65 ml，再将1号试管放入离心机以3400转/分速度离心2分钟后取出，采用抽吸装置从1号试管的抽液管中抽出上部的废液，保留底部的血块混渣，目测此血块混渣是否有凝集，如无凝集此试验必须重做；观察有凝集后，再向血块混渣中加入解凝剂2滴，并轻轻摇动试管观察混合血凝块是否散开，观察试管内的混合物，如果凝集散开则表示RhD抗体为阴性，如果凝集不散开则表示被检者血球中有RhD抗原，即为RhD阳性血型；

、将取样观察器5的插管8插入1号试管底部连通，操作取样观察器5上的手动气囊7，使1号试管中的混合液进入取样观察器5中的透明塑料囊6，与2号、3号、4号、5号试管并同送扫描仪扫描拍照存档。

应用本发明方法还可以同时对多人被检对象进行测检，即根据被检对象的人数准备相应组（一一对应）的血型鉴定组合器，然后每一组均重复按上述步骤进行鉴定即可。

例2：首先按例1同样结构制作一组血型鉴定组合器，然后在每一个ABO试管1中的下段灌满有中性凝胶2，且在ABO试管1的顶部加封有密封膜或密封盖，构成一组加装有中性凝胶2的血型鉴定组合器。

应用上述加装有中性凝胶2的血型鉴定组合器进行血型鉴定的方法包括以下步骤：

、准备一组上述加装有中性凝胶2的血型鉴定组合器，并将鉴定组合器中的五个试管从RhD抗原试管3一侧开始依次编号为1号试管、2号试管、3号试管、4号试管、5号试管；操作前与1号试管配置的取样观察器5是独立放置的；

、打开2-5号试管上的密封膜或盖，在1号试管中加入适量的RhD抗体，在2号试管中加入适量抗A，在3号试管中加入适量抗B，在4号试管中加入适量A抗原，在5号试管中加入适量B抗原；

、在1-3号试管中分别加入被检者的5％血球悬液0.1ml，在4、5号试管中分别加入被检者的血清0.25 ml；

、将1号试管从组合器中分开，将2-5号试管摇动混匀后放入温箱保持恒温37℃反应10-18分钟；

、从温箱中取出2-5号试管放入离心机以3400转/分速度离心3分钟，取出观察结果按如下方法确定被检者的ABO血型：观察试管的下段，有无血球渗入底部，设定有渗入则试管上段中的混合液不凝集表示为“-”,无渗入则试管上段中的混合液凝集表示为“+”；则如果2号、5号试管为“+”，3号、4号试管为“-”时，被检者血型可以确定为A型血；如果2号、5号试管为“-”，3号、4号试管为“+”时，被检者血型可以确定为B型血；如果2号、3号试管为“-”，4号、5号试管为“+”时，被检者血型可以确定为O型血；如果2号、3号试管为“+”，4号、5号试管为“-”时，被检者血型可以确定为AB型血；

、在1号试管中加入凝聚胺2滴和低离子缓冲剂0.65 ml，再将1号试管放入离心机以3400转/分速度离心2分钟后取出，采用抽吸装置从1号试管的抽液管中抽出上部的废液，保留底部的血块混渣，目测此血块混渣是否有凝集，如无凝集此试验必须重做；观察有凝集后，再向血块混渣中加入解凝剂2滴，并轻轻摇动试管观察混合血凝块是否散开，观察试管内的混合物，如果凝集散开则表示RhD抗体为阴性，如果凝集不散开则表示被检者血球中有RhD抗原，即为RhD阳性血型；

、将取样观察器5的插管8插入1号试管底部连通，操作取样观察器5上的手动气囊7，使1号试管中的混合液进入取样观察器5中的透明塑料囊6，与2号、3号、4号、5号试管并同送扫描仪扫描拍照存档。