一种基于CRISPR‑Cas9系统的酿酒酵母基因组编辑载体及其应用

摘要

本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9系统的酿酒酵母基因组编辑载体及其应用，所述的酿酒酵母基因组编辑载体通过将Cas9蛋白表达框和sgRNA scaffold表达框整合在载体中，获得载体‑Cas9‑sgRNA scaffold，然后将以ADE1为靶位点设计合成的多条sgRNA片段中的任意一条整合到所述的载体‑Cas9‑sgRNA scaffold中得到所述的酿酒酵母基因组编辑载体。本发明采用单质粒并单拷贝的载体系统，采用一个质粒同时表达Cas9蛋白和sgRNA scaffold，使得靶基因编辑系统只需一步构件和转化，操作简便。