作为WNT途径的调节剂的顺丁烯二酰亚胺衍生物

摘要

本发明涉及式(I)的化合物，

说明书

技术领域

本发明涉及WNT途径调节剂、用于制备它们的方法以及使用它们的方法。

优先权

本申请要求2013年12月17日提交的英国申请GB 1322334.2的优先权，该英国申请的全部内容以交叉引用的方式并入本文。

背景技术

Wnt蛋白是充当生长因子的分泌糖蛋白，所述生长因子通过激活多个细胞内信号转导级联来调节各种细胞功能，包括增殖、分化、死亡、迁移、以及极性，所述级联包括β-连环蛋白依赖性途径和非β-连环蛋白依赖性途径。已经在人类和小鼠中发现19个Wnt成员，并且它们在发育期间表现出独特的表达谱和不同的功能。在人类和小鼠中，卷曲受体(Frizzled，Fz)家族的10个成员包含一系列七遍跨膜受体，这些受体已经被鉴定为Wnt受体。除了Fz蛋白之外，单遍跨膜蛋白，如低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)、LRP6、受体酪氨酸激酶(RTK)样孤儿受体1(Ror1)、Ror2、以及受体样酪氨酸激酶(Ryk)也已经被证实充当Wnt信号转导的辅助受体。因此，在传统上已经假定，不同的Wnt与它们的特异性受体的结合经由不同的细胞内途径选择性地触发了不同的结果。

不同的Wnt、Wnt受体、以及下游途径都促成了Wnt的作用。这些途径在发育、干细胞维持、癌症以及转移中均起作用。

在不存在Wnt信号转导的情况下，β-连环蛋白被“破坏复合体”结合并磷酸化，所述破坏复合体含有腺瘤性结肠息肉病(APC)和轴素(Axin)蛋白以及糖原合酶激酶3(GSK3)和酪蛋白激酶I(CKI)。磷酸化的β-连环蛋白被F-框蛋白Slimb/β-TrCP结合并且被多泛素化，从而引起蛋白酶体降解。此外，所述复合体起作用以防止β-连环蛋白的核定位。在Wnt与卷曲受体(Fz)和低密度脂蛋白相关蛋白5和6(LRP5/6)结合之后，GSK3、轴素、以及其它破坏复合体组分被募集到受体复合体。所述破坏复合体的功能被抑制，并且未磷酸化的β-连环蛋白在细胞质中积聚并且最终易位到核中。在那里，它与TCF蛋白缔合，从而使TCF从Wnt响应性基因转录的阻遏因子转化成激活因子。

癌症和干细胞中的Wnt：

Wnt/β-连环蛋白信号转导的组分的失调牵涉到广泛的疾病，包括变性疾病、代谢疾病、以及许多癌症，如宫颈癌、结肠癌、乳腺癌、膀胱癌、头颈部癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、甲状腺癌、非小细胞肺癌以及慢性淋巴细胞性白血病、间皮瘤、黑色素瘤、胰腺腺癌、基底细胞癌、骨肉瘤、肝细胞癌、肾母细胞瘤(Wilm's tumor)以及成神经管细胞瘤。

Wnt信号转导在发育期间以及在成人的干细胞小生境内均发挥作用。这在皮肤、造血干细胞、乳腺中以及在肠内增殖中是公认的。举例来说，DKK1(Wnt信号转导的抑制剂)的高水平表达会阻断小鼠肠中正常的干细胞增殖，这表明Wnt信号转导在维持消化道中的干细胞方面起必要的作用。对于胚胎干细胞和神经干细胞，Wnt在干细胞的自我更新和扩增中的作用也已经被证实，这表明Wnt信号转导可能是干细胞维持的一般要求。抑制Wnt信号转导，例如通过使轴素或细胞外Wnt结合蛋白sFRP过表达来抑制Wnt信号转导会减少造血干细胞(HSC)在体外的生长以及在体内重建HSC的能力。值得注意的是，虽然激活的β-连环蛋白的过表达可以将培养中的HSC群体扩增较长时期，但是两个研究小组已经报道β-连环蛋白并不是HSC存活和连续移植所必需的，这支持了以下提议，即在干细胞存活方面，Wnt信号转导不仅仅是β-连环蛋白的稳定化。不同的Wnt可以调节干细胞增殖：Wnt 1、Wnt 5a、以及Wnt 10b能够刺激HSC群体扩增并且Wnt5a与干细胞因子(SCF)起协同作用以扩增HSC并且促进HSC的自我更新。对Wnt5a在HSC自我更新中的作用以及它与干细胞因子协同作用的能力的论证是特别有意义的，这是因为Wnt5a往往以非β-连环蛋白依赖性方式起作用。虽然Wnt信号转导对于干细胞维持来说是关键的，但是它因此可能是经由与β-连环蛋白途径不同或并行的信号转导途径。

纤维化：

Wnt/β-连环蛋白信号转导途径一般来说对胚胎发育是必要的并且对器官形态发生是必要的，因此并不令人惊讶的是，成人的这一途径的失调已经与成纤维细胞生物学和纤维化相关联。已经证实，Wnt/β-连环蛋白信号转导在严重的纤维化疾病中起作用，所述疾病诸如肺纤维化、肝纤维化、皮肤纤维化以及肾纤维化。

其它：

Wnt/β-连环蛋白信号转导的失调通过诱导视网膜炎症、血管渗漏、以及新血管生成而导致糖尿病性视网膜病变的产生。

Wnt蛋白与间充质细胞上的质膜受体结合诱导这些细胞分化为成骨细胞谱系，从而支持骨形成。Wnt还是关节重塑过程中关键的信号转导蛋白。活性Wnt信号转导促使骨赘形成并且可能在强直性脊柱炎和骨关节炎中所观测到的合成代谢性关节重塑模式中具有必要的作用。相比之下，阻断Wnt信号转导促进骨侵蚀并且引起分解代谢性关节重塑，即在类风湿性关节炎中所观测到的过程。

因此需要调节和/或抑制WNT途径以治疗与WNT活性相关的疾病的化合物。

定义

抑制剂与酶结合以及随后从酶释放的量度是“IC₅₀”值，该值反映了在给定的底物浓度下产生50％酶活性的抑制剂浓度。

如本文所用的术语“受试者”指的是已经作为治疗对象、观测对象或实验对象的动物，优选地是哺乳动物，最优选地是人类。在一个实施方案中，所述受试者不是人类。所述受试者可以是例如非人类哺乳动物。

如本文所用的术语“治疗有效量”意指活性化合物或药剂在组织系统、动物或人类中诱发由研究人员、兽医、医生或其它临床医师所寻求的生物响应或医学响应的量，所述响应包括所治疗的疾病或病症的症状缓和。

如本文所用的术语“药学上可接受的”涵盖了人类使用和兽医使用这两方面。举例来说，术语“药学上可接受的”涵盖了兽医学上可接受的化合物或人类医学和卫生保健中可接受的化合物。在一个实施方案中，排除人类医学和卫生保健。

在整个说明和权利要求书中，除非明确限制，否则措辞“烷基”表示C_1-12烷基，适当地表示C_1-6烷基，例如C_1-4烷基。烷基可以是直链的或支链的。合适的烷基包括例如甲基、乙基、丙基(例如正丙基和异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、仲丁基以及叔丁基)、戊基(例如正戊基)、己基(例如正己基)、庚基(例如正庚基)以及辛基(例如正辛基)。例如在措辞“烷氧基”、“卤代烷基”以及“硫代烷基”中的措辞“烷”应当根据“烷基”的定义来解释。示例性烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如正丙氧基)、丁氧基(例如正丁氧基)、戊氧基(例如正戊氧基)、己氧基(例如正己氧基)、庚氧基(例如正庚氧基)以及辛氧基(例如正辛氧基)。示例性硫代烷基包括甲硫基-。示例性卤代烷基包括氟代烷基，例如CF₃。

除非明确限制，否则措辞“烯基”表示C_2-12烯基，适当地表示C_2-6烯基，例如C_2-4烯基，所述基团在任何所期望的位置处含有至少一个双键并且不含任何三键。烯基可以是直链的或支链的。包含一个双键的示例性烯基包括丙烯基和丁烯基。包含两个双键的示例性烯基包括戊二烯基，例如(1E,3E)-戊二烯基。

除非明确限制，否则措辞“炔基”表示C_2-12炔基，适当地表示C_2-6炔基，例如C_2-4炔基，所述基团在任何所期望的位置处含有至少一个三键并且还可能含有或可能不含一个或多个双键。炔基可以是直链的或支链的。示例性炔基包括丙炔基和丁炔基。

除非明确限制，否则措辞“亚烷基”表示式-(CH₂)_n-的链，其中n是整数，例如1-12、1-6、2-6或2-5(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12)。

除非明确限制，否则措辞“环烷基”表示C_3-10环烷基(即3个至10个环碳原子)，更适当地表示C_3-8环烷基，例如C_3-6环烷基。示例性环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基以及环辛基。环碳原子的最合适的数目是3个至6个或4个至8个或5个至7个，但可以是3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个。

除非明确限制，否则措辞“环烯基”表示C_3-10环烯基(即3个至10个环碳原子)，适当地表示C_5-10环烯基(即5个至10个环碳原子)，更适当地表示C_5-8环烯基，例如C_5-6环烯基。示例性环烯基包括环丙烯基、环己烯基、环庚烯基以及环辛烯基。环碳原子的最合适的数目是5个至6个。

除非明确限制，否则措辞“碳环基”表示任何环系，其中所有环原子均为碳并且它含有3个至12个环碳原子，适当地3个至10个碳原子并且更适当地3个至8个碳原子。碳环基可以是饱和的或部分不饱和的，但是不包括芳环。碳环基的示例包括单环系、双环系、以及三环系，特别是单环系和双环系。其它碳环基包括桥环系(例如双环[2.2.1]庚烯基)。碳环基的具体示例是环烷基。碳环基的另一个示例是环烯基。

除非明确限制，否则措辞“杂环基”指的是其中一个或多个(例如1个、2个或3个)环原子被置换为杂原子的碳环基。所述一个或多个杂原子通常选自N、S以及O。杂环基的具体示例是环烷基(例如环戊基或更特别是环己基)，其中一个或多个(例如1个、2个或3个，特别是1个或2个，尤其是1个)环原子被置换为选自N、S或O的杂原子。含有一个杂原子的示例性杂环基包括吡咯烷、四氢呋喃以及哌啶，并且含有两个杂原子的示例性杂环基包括吗啉和哌嗪。杂环基的另一个具体示例是环烯基(例如环己烯基)，其中一个或多个(例如1个、2个或3个，特别是1个或2个，尤其是1个)环原子被置换为选自N、S以及O的杂原子。这样的基团的示例是二氢吡喃基(例如3,4-二氢-2H-吡喃-2-基-)。杂环基可以通过碳环原子或氮环原子与分子的其它一个部分或多个部分连接。

除非明确限制，否则措辞“芳基”表示C_6-12芳基，适当地表示C_6-10芳基，更适当地表示C_6-8芳基。芳基将含有至少一个芳环(例如一个、两个或三个环)。具有多个芳环的芳基包括稠合芳环和通过一个单键彼此连接的芳环。具有一个芳环的典型的芳基的示例是苯基。具有两个稠合芳环的典型的芳基的示例是萘基。具有两个直接连接的芳环的芳族基团的示例是联苯基。

除非明确限制，否则措辞“杂芳基”表示芳基残基，其中一个或多个(例如1个、2个、3个、或4个，适当地1个、2个或3个)环原子被置换为杂原子，所述杂原子通常选自N、S以及O；或者含有一个或多个(例如1个、2个、3个或4个，适当地1个、2个或3个)环原子的5元芳环，所述杂原子通常选自N、S以及O。在一些实施方案中，杂芳基将没有除氮以外的环杂原子。具有一个杂原子的示例性单环杂芳基包括：五元环(例如吡咯、呋喃、噻吩)；以及六元环(例如吡啶，如吡啶-2-基、吡啶-3-基以及吡啶-4-基)。具有两个杂原子的示例性单环杂芳基包括：五元环(例如吡唑、唑、异唑、噻唑、异噻唑、咪唑，如咪唑-1-基、咪唑-2-基、咪唑-4-基)；以及六元环(例如哒嗪、嘧啶、吡嗪)。具有三个杂原子的示例性单环杂芳基包括：1,2,3-三唑、1,2,4-三唑、1,2,3-二唑以及1,2,4-二唑。具有四个杂原子的示例性单环杂芳基包括四唑。示例性双环杂芳基包括：吲哚(例如吲哚-6-基)、苯并呋喃、苯并噻吩、喹啉、异喹啉、吲唑、苯并咪唑、苯并噻唑、喹唑啉以及嘌呤。杂芳基可以通过碳环原子或氮环原子与分子的其它一个部分或多个部分连接。

上述芳基和杂芳基在适当的情况下可以任选地被一个或多个(例如1个、2个或3个，适当地1个或2个)独立地选自单价或多价(即具有大于1的化合价)官能团的基团取代。合适的取代基包括烷基、烯基、炔基、卤代烷基、-烷氧基(例如OMe)、环烷基、烯氧基-、炔氧基-、烷氧基烷基-、硝基、卤素(例如氟、氯以及溴)、氰基、羟基、氧代、-C(O)-烷基(例如COMe)、C(O)OH、-C(O)O烷基(例如-C(O)OMe)、-OC(O)烷基(例如-OC(O)Me)、-NH₂、-NH烷基(例如-NHMe)、-N(烷基)₂(例如二甲氨基-)、-C(O)NH₂、-C(O)NH(烷基)(例如-C(O)NHMe)、-NHC(O)烷基(例如-NHC(O)Me)、-C(NH)NH₂、硫代烷基(例如-硫代甲基)、-SO₂烷基(例如SO₂Me)、-SO烷基(例如-SOMe)、-SO₂环烷基以及-SO环烷基。更通常，取代基将选自烷基(例如Me)、氟代烷基(例如CF₃和CHF₂)、烷氧基(例如OMe)、卤素以及羟基。

除非明确限制，否则措辞“-烷基芳基”表示经由亚烷基部分，例如C_1-4亚烷基部分连接的芳基残基。这样的基团的示例是苯甲基：PhCH₂-。

术语“卤素”或“卤代”包括氟(F)、氯(Cl)以及溴(Br)。

术语“氨基”指的是基团-NH₂。

术语“氧代”指的是连同它所取代的碳原子一起形成羰基C＝O的氧原子。

立体异构体：

要求保护的化合物的所有可能的立体异构体均被包括在本发明中。

在根据本发明的化合物具有至少一个手性中心的情况下，它们可以相应地以对映体的形式存在。在所述化合物具有两个或更多个手性中心的情况下，它们可以另外以非对映体的形式存在。应当了解的是，所有这样的异构体和其混合物均被涵盖在本发明的范围内。

立体异构体的制备和分离：

在用于制备根据本发明的化合物的方法产生立体异构体的混合物的情况下，可以通过常规技术，如制备色谱来分离这些异构体。所述化合物可以被制备成外消旋形式，或单个对映体可以通过对映体特异性合成或通过拆分来制备。所述化合物可以例如通过标准技术被拆分成它们的组分对映体，所述标准技术诸如通过与光学活性酸，如(-)-二对甲苯甲酰基-d-酒石酸和/或(+)-二对甲苯甲酰基-l-酒石酸形成盐来形成非对映体对，继而分步结晶以及使游离碱再生。所述化合物还可以通过形成非对映的酯或酰胺，继而进行色谱分离并且去除手性辅剂而被拆分。或者，所述化合物可以使用手性HPLC柱来拆分。

药学上可接受的盐：

鉴于游离化合物与呈它们的盐或溶剂化物形式的化合物之间密切的关系，每当在此上下文中提到化合物时，还意图是相应的盐、溶剂化物或多晶型物，前提条件是这样在所述情况下是可能的或适当的。

适用于医学中的式(I)的化合物和其生理功能衍生物的盐和溶剂化物是其中抗衡离子或缔合的溶剂是药学上可接受的那些。然而，具有非药学上可接受的抗衡离子或缔合的溶剂的盐和溶剂化物落入本发明的范围内，例如以用作制备其它化合物和它们的药学上可接受的盐和溶剂化物的中间体。

根据本发明的合适的盐包括与有机和无机的酸或碱形成的那些。药学上可接受的酸加成盐包括由以下各项形成的那些：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、三氟乙酸、三苯基乙酸、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、丁二酸、草酸、反丁烯二酸、顺丁烯二酸、苹果酸、扁桃酸、谷氨酸、天冬氨酸、草酰乙酸、甲磺酸、乙磺酸、芳基磺酸(例如对甲苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸或萘二磺酸)、水杨酸、戊二酸、葡糖酸、丙三羧酸、肉桂酸、取代的肉桂酸(例如苯基、甲基、甲氧基或卤代取代的肉桂酸，包括4-甲基肉桂酸和4-甲氧基肉桂酸)、抗坏血酸、油酸、萘甲酸、羟基萘甲酸(例如1-羟基-2-萘甲酸或3-羟基-2-萘甲酸)、萘丙烯酸(例如萘-2-丙烯酸)、苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、2-羟基苯甲酸或4-羟基苯甲酸、4-氯苯甲酸、4-苯基苯甲酸、苯丙烯酸(例如1,4-苯二丙烯酸)、羟基乙磺酸、高氯酸、丙酸、乙醇酸、羟基乙磺酸、双羟萘酸、环己烷氨基磺酸、水杨酸、糖精酸以及三氟乙酸。药学上可接受的碱盐包括铵盐；碱金属盐，如钠盐和钾盐；碱土金属盐，如钙盐和镁盐；以及与有机碱，如二环己胺和N-甲基-D-葡糖胺形成的盐。

本发明的化合物的所有药学上可接受的酸加成盐形式均意图由本发明的范围所涵盖。

多晶型物晶形：

此外，所述化合物的晶形中的一些可以多晶型物的形式存在并且因而意图被包括在本发明中。此外，所述化合物中的一些可以与水(即水合物)或常见的有机溶剂形成溶剂化物，并且这样的溶剂化物也意图被涵盖在本发明的范围内。所述化合物，包括它们的盐还可以它们的水合物的形式获得，或包括用于它们的结晶的其它溶剂。

前药：

本发明进一步在它的范围内包括本发明的化合物的前药。一般来说，这样的前药将是所述化合物的功能衍生物，所述功能衍生物在体内可容易转化成所期望的治疗活性化合物。因此，在这些情况下，本发明的治疗方法、术语“施用”应当涵盖用要求保护的化合物中的一种或多种的前药型式治疗所述的各种病症，但是所述前药型式在向受试者施用后在体内转化成上述指定的化合物。用于选择和制备合适的前药衍生物的常规程序描述于例如“Design of Prodrugs(《前药设计》)”,H.Bundgaard编著,Elsevier,1985中。

保护基：

在用于制备本发明的化合物的方法中的任一种期间，可能需要和/或期望保护所关注的分子中的任一种上的敏感性基团或反应性基团。这可以借助于常规的保护基来实现，所述保护基诸如Protective Groups in Organic Chemistry(《有机化学中的保护基》),J.F.W.McOmie编著,Plenum Press,1973；以及T.W.Greene和P.G.M.Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis(《有机合成中的保护基》),John Wiley&Sons,1991中所述的那些，这些文献以引用的方式整体并入本文。所述保护基可以在适当的后续阶段时，使用本领域已知的方法来去除。

如本文所用的术语“组合物”意图涵盖包含治疗有效量的要求保护的化合物的产品、以及直接或间接由要求保护的化合物的组合产生的任何产品。

用于盖伦制剂的载体和添加剂：

可以被添加到混合物中的载体包括必要的和惰性的药物赋形剂，包括但不限于合适的粘合剂、助悬剂、润滑剂、调味剂、甜味剂、防腐剂、包衣、崩解剂、染料以及着色剂。

因此，对于液体口服制剂，如例如混悬液、酏剂以及溶液，合适的载体和添加剂可以有利地包括水、二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等；对于固体口服制剂，如例如粉剂、胶囊、胶丸(gelcap)以及片剂，合适的载体和添加剂包括淀粉、糖、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。

作为可靶向的药物载体的可溶性聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟乙基天冬酰胺-苯酚、或被棕榈酰基残基取代的聚氧化乙烯聚赖氨酸。此外，本发明的化合物可以与可用于实现药物的受控释放的一类可生物降解的聚合物偶联，所述聚合物例如聚乳酸、聚ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯以及水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。

合适的粘合剂包括但不限于淀粉、明胶、天然糖(如葡萄糖或β乳糖)、玉米甜味剂、天然树胶和合成树胶(如阿拉伯树胶、黄蓍胶)或油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。

崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。

发明内容

根据本发明，提供了一种式(I)的化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，包括其所有互变异构体和立体异构体，其中：

R₁表示任选地被各自独立地选自C_1-6烷氧基的一个或多个取代基取代的烷基；任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的碳环基：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷基、C_1-6卤代烷氧基以及卤素；或-烷基芳基；

R₂表示H；或烷基；

R₃表示H；或烷基；

U、V以及W各自表示-(CH₂)-；或U和V连在一起表示-CH＝CH-并且W表示C＝O；

Y表示芳基；杂芳基；任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的碳环基：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷基、C_1-6卤代烷氧基以及卤素；或任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的杂环基：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-C(O)OC_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基以及-C(O)NHC_1-6烷基；并且

Z表示芳基；杂芳基；任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的碳环基：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷基、C_1-6卤代烷氧基以及卤素；或任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的杂环基：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-C(O)OC_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基以及-C(O)NHC_1-6烷基。

附图说明

图1：图示了两种化合物，即化合物13和化合物43对哺乳动物豪猪的活性的抑制的条形图。

图2：图示了化合物43对MMTV-Wnt1小鼠模型的功效的图表。

图3：图示了化合物52对MMTV-Wnt1小鼠模型的功效的图表。

图4：图示了化合物43对Wnt3a的棕榈酰化的抑制的图像。

图5至7：示出了软琼脂测定的结果的图像和图表。图5示出了用化合物43处理的细胞系AsPC-1的结果。图6示出了用化合物43处理的细胞系HPAF-II的结果。图7示出了用化合物43处理的细胞系CFPAC-1的结果。

具体实施方式

根据本发明，提供了一种式(I)的化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，包括其所有互变异构体和立体异构体，其中：

R₁表示任选取代的烷基(其中任选的取代基包括各自独立地选自C_1-6烷氧基的一个或多个取代基)；任选取代的碳环基(其中任选的取代基包括各自独立地选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷基、C_1-6卤代烷氧基以及卤素的一个或多个取代基)；或-烷基芳基；

R₂表示H；或烷基；

R₃表示H；或烷基；

U、V以及W表示-(CH₂)-；或U和V连在一起表示-CH＝CH-并且W表示C＝O；

Y表示芳基；杂芳基；任选取代的碳环基(其中任选的取代基包括各自独立地选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷基、C_1-6卤代烷氧基以及卤素的一个或多个取代基)；或任选取代的杂环基(其中任选的取代基包括各自独立地选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-C(O)OC_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基以及-C(O)NHC_1-6烷基的一个或多个取代基)；并且

Z表示芳基；杂芳基；任选取代的碳环基(其中任选的取代基包括各自独立地选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷基、C_1-6卤代烷氧基以及卤素的一个或多个取代基)；或任选取代的杂环基(其中任选的取代基包括各自独立地选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-C(O)OC_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基以及-C(O)NHC_1-6烷基的一个或多个取代基)。

此外，根据本发明，提供了一种式(I)的化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，包括其所有互变异构体和立体异构体，其中：

R₁表示烷基，任选地被各自独立地选自C_1-6烷氧基的一个或多个取代基取代；碳环基，其任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷基、C_1-6卤代烷氧基以及卤素；或-烷基芳基；

R₂表示H；或烷基；

R₃表示H；或烷基；

U、V以及W表示-(CH₂)-；或U和V连在一起表示-CH＝CH-并且W表示C＝O；

Y表示芳基；杂芳基；碳环基，任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷基、C_1-6卤代烷氧基以及卤素；或杂环基，任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-C(O)OC_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基以及-C(O)NHC_1-6烷基；并且

Z表示芳基；杂芳基；碳环基，任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6卤代烷基、C_1-6卤代烷氧基以及卤素；或杂环基，任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-C(O)OC_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基以及-C(O)NHC_1-6烷基。

在变量Y的背景下，术语“芳基”被理解为意指“亚芳基”(例如“苯基”被理解为意指“亚苯基”(即C₆H₄))，这是因为Y是连接基团(因为它使酰胺氮原子与基团Z连接)，而不是端基。所述术语对于其它Y环(例如杂芳基)来说将作同样的解释。当Y被称为未被取代时，这被理解为意指没有除Z和NR₃以外的其它取代基。当Y被称为被单取代时，这被理解为意指存在除Z和NR₃以外的一个取代基。

当R₁表示任选地被各自独立地选自C_1-6烷氧基(例如甲氧基)的一个或多个取代基取代的烷基时，示例包括C_1-6烷基(例如未取代的C_1-6烷基)，如甲基、乙基、丙基(例如正丙基、异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基)、戊基(例如正戊基)以及己基(例如正己基)。示例性C_1-6烷基是甲基、乙基以及异丙基，特别是甲基和异丙基，更特别是甲基。

当R₁表示任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的碳环基时：C_1-6烷基(例如甲基)、C_1-6烷氧基(例如甲氧基)、C_1-6卤代烷基(例如氟代甲基)、C_1-6卤代烷氧基(例如氟代甲氧基)以及卤代(例如氟，例如氯)，示例包括环烷基，如C_3-10环烷基(例如C_3-6环烷基，如C_3-4环烷基)。示例包括环丙基、环丁基、环戊基以及环己基。示例性C_3-4环烷基是环丙基和环丁基，特别是环丙基。

当R₁表示-烷基芳基时，示例包括苯甲基。

当R₂表示烷基时，示例包括C_1-6烷基，如甲基、乙基、丙基(例如正丙基、异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基)、戊基(例如正戊基)以及己基(例如正己基)。示例性C_1-6烷基是甲基和乙基，特别是甲基。当R₂表示烷基(例如甲基)时，与R₂相邻的立构中心可以具有“S型”或“R型”立体化学。

当R₃表示烷基时，示例包括C_1-6烷基，如甲基、乙基、丙基(例如正丙基、异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基)、戊基(例如正戊基)以及己基(例如正己基)。示例性C_1-6烷基是甲基和乙基，特别是甲基。

在一个实施方案中，U、V以及W各自表示-(CH₂)-。在另一个实施方案中，U和V连在一起表示-C＝C-并且W表示C＝O。

当Y表示芳基时，示例包括任选取代的苯基。示例性取代基包括各自独立地选自以下各项的一个或多个(例如一个或两个，特别是一个)取代基：C_1-6烷基(例如甲基)、C_1-6烷氧基(例如甲氧基)、卤代(例如氟，例如氯)、-C_1-6卤代烷基(例如氟代甲基，如三氟甲基)以及-C_1-6卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)。具体示例包括苯基、2-甲基苯基、3-甲基苯基、2-氟代苯基、3-氟代苯基、2-甲氧基苯基以及3-甲氧基苯基。Z和NR₃可以相对于彼此定位在苯环上的1位和4位处(即Z和NR₃具有对位关系)。

当Y表示杂芳基时，示例包括单环(例如5元和6元)和双环(例如9元和10元)杂芳环系，特别是单环环系。上述杂芳基可以未被取代或可以被一个或多个(例如一个或两个，特别是一个)取代基取代。示例性取代基独立地选自C_1-6烷基(例如甲基)、C_1-6烷氧基(例如甲氧基)、卤代(例如氟，例如氯)、-C_1-6卤代烷基(例如氟代甲基，如三氟甲基)以及-C_1-6卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)，特别是甲基和氟。当Y是5元单环杂芳基时，Z和NR₃可以定位在环上不相邻的环原子处。当Y是6元单环杂芳基时，Z和NR₃可以相对于彼此定位在环上的1位和4位处(即Z和NR₃具有对位关系)。未取代的6元单环杂芳基的示例包括吡啶基、哒嗪基、吡嗪基以及嘧啶基。未取代的5元单环杂芳基的示例包括咪唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、异唑基以及异噻唑基。未取代的单环杂芳基的具体示例包括吡啶基、哒嗪基、吡嗪基以及异唑基，特别是吡啶基、哒嗪基以及吡嗪基。取代的单环杂芳基的示例包括甲基吡啶基、甲基哒嗪基、甲基吡嗪基、甲基嘧啶基、氟代吡啶基、氟代哒嗪基、氟代吡嗪基以及氟代嘧啶基。取代的单环杂芳基的具体示例包括甲基哒嗪基、甲基吡啶基以及氟代吡啶基。

当Y表示任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的碳环基时：C_1-6烷基(例如甲基)、C_1-6烷氧基(例如甲氧基)、C_1-6卤代烷基(例如氟代甲基)、C_1-6卤代烷氧基(例如氟代甲氧基)以及卤代(例如氟，例如氯)，Y可以表示任选地被C_1-6烷基取代的碳环基。示例包括任选地被C_1-6烷基(如甲基)取代的单环碳环基。碳环基的示例包括C_3-8环烷基(例如环己基)和C_5-8环烯基(例如环己烯基)。碳环基环任选地被一个、两个或三个取代基(例如一个或两个，特别是一个，例如一个甲基)取代。当Y表示碳环基时，Y可以表示C_3-8环烷基，例如C_5-6环烷基。具体示例是环己基。当Y是环己基时，Z和-NR₃可以相对于彼此定位在环Y上的1位和4位处。

当Y表示任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的杂环基时：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-C(O)OC_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基以及-C(O)NHC_1-6烷基，Y可以表示任选地被C_1-6烷基(如甲基)取代的杂环基。示例包括单环杂环基。杂环基可以未被取代或可以具有例如一个或两个(例如一个)取代基(例如一个甲基)。示例包括吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、4,5-二氢吡唑基、4,5-二氢异唑基以及4,5-二氢异噻唑基。

当Z表示芳基时，示例性取代基包括C_1-6烷基(例如甲基)、C_1-6烷氧基(例如甲氧基)、卤代(例如氟，例如氯)、-C_1-6卤代烷基(例如氟代甲基，如二氟甲基或三氟甲基)以及-C_1-6卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)。示例包括单环芳基，如取代或未取代的苯基，例如苯基、氯代苯基(例如2-氯代苯基、3-氯代苯基、4-氯代苯基)、氟代苯基(例如2-氟代苯基、3-氟代苯基、4-氟代苯基)、甲基苯基(2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基)、甲氧基苯基(例如2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基)、卤代烷基苯基(例如2-三氟甲氧基苯基、3-三氟甲基苯基、4-三氟甲基苯基、2-二氟甲氧基苯基、3-二氟甲基苯基以及4-二氟甲基苯基)、卤代烷氧基苯基(例如3-三氟甲氧基苯基、4-三氟甲氧基苯基)。

当Z表示杂芳基时，示例包括单环(例如5元和6元)和双环(例如9元和10元)杂芳环系，特别是单环环系。上述杂芳基可以未被取代或可以被一个或多个(例如一个或两个，特别是一个)取代基取代。示例性取代基独立地选自C_1-6烷基(例如甲基)、C_1-6烷氧基(例如甲氧基)、卤代(例如氟，例如氯)、-C_1-6卤代烷基(例如氟代甲基，如三氟甲基)以及-C_1-6卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)。未取代的示例包括吡啶基(例如2-吡啶基、3-吡啶基以及4-吡啶基)、嘧啶基(例如2-嘧啶基、4-嘧啶基以及5-嘧啶基)、哒嗪基(例如3-哒嗪基)以及噻唑基(例如2-噻唑基)。其中杂芳基包含一个环杂原子的取代的示例包括甲基吡啶基(例如2-甲基-5-吡啶基、2-甲基-6-吡啶基、3-甲基-5-吡啶基)、氟代甲基吡啶基(例如三氟甲基吡啶基，如2-三氟甲基-5-吡啶基和3-三氟甲基-5-吡啶基；以及二氟甲基吡啶基，如3-二氟甲基-5-吡啶基)、氟代吡啶基(例如2-氟-5-吡啶基、3-氟-5-吡啶基以及2-氟-3-吡啶基)以及氯代吡啶基(例如3-氯-5-吡啶基)。其中杂芳基包含两个环杂原子的取代的示例包括甲基噻唑基(例如2-甲基-4-噻唑基)。

当Z表示任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的碳环基时：C_1-6烷基(例如甲基)、C_1-6烷氧基(例如甲氧基)、C_1-6卤代烷基(例如氟代甲基)、C_1-6卤代烷氧基(例如氟代甲氧基)以及卤代(例如氟，例如氯)，Z可以表示任选地被C_1-6烷基取代的碳环基。示例包括任选地被C_1-6烷基(如甲基)取代的单环碳环基。碳环基的示例包括C_3-8环烷基(例如环己基)和C_5-8环烯基(例如环己烯基)。碳环基环任选地被一个、两个或三个取代基(例如一个或两个，特别是一个，例如一个甲基)取代。当Z表示碳环基时，Z可以表示C_3-8环烷基，如C_5-6环烷基。具体示例是环己基。

当Z表示任选地被各自独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的杂环基时：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-C(O)OC_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基以及-C(O)NHC_1-6烷基，Z可以表示任选地被C_1-6烷基(如甲基)取代的杂环基。示例包括单环杂环基。杂环基可以未被取代或可以具有例如一个或两个(例如一个)取代基(例如一个甲基)。示例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基、4,5-二氢吡唑基以及4,5-二氢异唑基。

适当地，R₁表示任选地被C_1-4烷基(例如甲基)取代的烷基或环烷基。更适当地，R₁表示C_1-3烷基或C_3-4环烷基。最适当地，R₁表示甲基、环丙基、环丁基或异丙基，特别是甲基或环丙基，最特别是环丙基。

适当地，R₂表示H或C_1-3烷基。更适当地，R₂表示H或甲基，特别是H。

适当地，R₃表示H或C_1-3烷基。更适当地，R₃表示H或甲基，特别是H。

适当地，U、V以及W各自表示-(CH₂)-。

适当地，Y表示芳基(特别是苯基)或杂芳基(特别是单环杂芳基)。更适当地，Y表示任选地被选自以下各项的一个或多个基团(特别是一个基团)取代的苯基：C_1-6烷基(特别是甲基)、C_1-6烷氧基(特别是甲氧基)或氟；或任选地被C_1-6烷基(特别是甲基)或卤代(特别是氟)取代的单环杂芳基(特别是包含一个或两个氮环原子的单环杂芳基，如吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基或异唑基，例如吡啶基、哒嗪基或吡嗪基)。适当地，Y是苯基或6元杂芳基。在一个实施方案中，Y是苯基。在一个实施方案中，Y是包含一个或两个氮环原子的6元杂芳基。在一个实施方案中，Y未被取代。在一个实施方案中，Y是未取代的苯基。在一个实施方案中，Y是未取代的杂芳基。在一个实施方案中，Y被单取代，例如被甲基或氟单取代。在一个实施方案中，Y是单取代的苯基。在一个实施方案中，Y是单取代的杂芳基。当Y是6元芳基或6元杂芳基时，Z和-NR₃相对于彼此适当地定位在环Y上的1位和4位处(即Y和-NR₃具有对位关系)。

适当地，Z表示芳基(特别是苯基)或杂芳基(特别是单环杂芳基)。更适当地，Z表示任选地被氟、氯、甲基、甲氧基、氟代甲基(例如二氟甲基或三氟甲基)或卤代烷氧基(例如-OCF₃)取代的苯基；或任选地被甲基、氟代甲基(例如二氟甲基或三氟甲基)、氟或氯取代的单环杂芳基(特别是包含一个或两个氮环原子的单环杂芳基，如吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基、唑基或噻唑基)。在一个实施方案中，Z未被取代。在一个实施方案中，Z是未取代的苯基。在一个实施方案中，Z是未取代的单环杂芳基。在一个实施方案中，Z被单取代，例如被甲基、氟代甲基、氟或氯单取代。

在一个实施方案中，R₁表示甲基或环丙基；R₂表示H；R₃表示H；U、V以及W各自表示-CH₂-；Y表示苯基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基或嘧啶基，其中Y任选地被选自甲基和氟的一个基团取代；并且Z表示苯基、噻唑基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基或嘧啶基，其中Z任选地被选自甲基、氟、氯、甲氧基以及氟代甲基的一个基团取代。

在一个实施方案中，提供了式(I)的化合物，所述化合物是式(IA)的化合物，

或其药学上可接受的盐、溶剂化物或多晶型物，包括其所有互变异构体和立体异构体，其中：

R₁表示烷基或环烷基；

R₂表示H或烷基；

R₃表示H或烷基；

Y表示芳基或杂芳基；并且

Z表示芳基或杂芳基。

在一个实施方案中，式(I)的化合物具有低于约10微摩尔的针对HEK293-STF3A细胞的IC₅₀。

在一些实施方案中，R₁是甲基并且R₂和R₃两者均为H。在其它实施方案中，R₁是环丙基并且R₂和R₃两者均为H。在另外的实施方案中，R₁和R₂两者均为甲基并且R₃是H。

方法

本发明进一步提供了一种用于制备式(I)的化合物或其受保护的衍生物的方法，所述方法包括使式(II)的化合物

或其受保护的衍生物，其中R₁、R₂、U、V以及W如上文所定义；与式(III)的化合物

或其受保护的衍生物反应，其中R₃、Y以及Z如上文所定义。

式(II)的化合物可以通过使式(IV)的化合物进行酯水解来制备

其中R₁、R₂、U、V以及W如上文所定义并且其中R₄是C_1-6烷基。

当U、V以及W各自表示-(CH₂)-时，式(IV)的化合物可以通过使式(V)的化合物

其中R₁如上文所定义；与式(VI)的化合物反应来制备，

其中R₂和R₄如上文所定义并且其中LG₁是离去基，如Br。

式(V)的化合物可以由式(VI)的化合物来制备

其中R₁如上文所定义，例如通过催化氢化来制备。

式(VI)的化合物可以由式(VII)的化合物

和相应的胺R₁-NH₂来制备。化合物(VII)可商购。

其中U和V连在一起表示-CH＝CH-并且W表示C＝O的式(IV)的化合物可以通过使式(VIII)的化合物

其中R₁如上文所定义；与式(VI)的化合物反应来制备

其中R₂、R₄以及LG₁如上文所定义。

式(VIII)的化合物可以使用羟基化剂，如CsOAc，由式(IX)的化合物来制备

其中R₁如上文所定义。

式(IX)的化合物可以由式(X)的化合物来制备

其中R₁如上文所定义，例如通过使用氯化剂，如POCl₃来制备。

式(X)的化合物可以通过使用氧化剂，如间氯过苯甲酸(mCPBA)，由式(XI)的化合物来制备

其中R₁如上文所定义。

式(III)的化合物可以通过偶联反应，如铃木偶联(Suzuki coupling)来制备。举例来说，式(III)的化合物可以通过使式(XII)的化合物

其中Y和R₃如上文所定义并且LG₂是离去基，如硼酸基或硼酸酯基或Br或Cl；与式(XIII)的化合物进行偶联反应来制备

其中Z如上文所定义并且LG₃是离去基，如硼酸基或硼酸酯基或Br或Cl。

治疗用途

本发明提供了一种式(I)的化合物，所述化合物用作药物。

本发明的化合物可以具有低于20微摩尔，例如低于10微摩尔的针对STF3A的IC50。所述IC50可以低于5微摩尔、2微摩尔、1微摩尔、0.5微摩尔、0.2微摩尔或0.1微摩尔。它可以是约0.01微摩尔至约10微摩尔，或约0.01微摩尔至5微摩尔、0.01微摩尔至1微摩尔、0.01微摩尔至0.5微摩尔、0.01微摩尔至0.1微摩尔、0.01微摩尔至0.05微摩尔、0.1微摩尔至5微摩尔、0.1微摩尔至1微摩尔、0.1微摩尔至0.5微摩尔、0.1微摩尔至10微摩尔、0.5微摩尔至10微摩尔、1微摩尔至10微摩尔、5微摩尔至10微摩尔、1微摩尔至5微摩尔或0.1微摩尔至0.5微摩尔，例如约0.01微摩尔、0.02微摩尔、0.03微摩尔、0.04微摩尔、0.05微摩尔、0.1微摩尔、0.2微摩尔、0.3微摩尔、0.4微摩尔、0.5微摩尔、0.6微摩尔、0.7微摩尔、0.8微摩尔、0.9微摩尔、1微摩尔、2微摩尔、3微摩尔、4微摩尔、5微摩尔、6微摩尔、7微摩尔、8微摩尔、9微摩尔或10微摩尔。

本发明提供了用于调节WNT途径的式(I)的化合物。

本发明还提供了一种调节WNT活性的方法，所述方法包括使WNT蛋白质或WNT受体暴露于式(I)的化合物。

此外，本发明提供了式(I)的化合物用于调节WNT活性的用途。

本发明此外提供了用于治疗与WNT途径活性相关的疾病或病况的式(I)的化合物。

本发明还提供了一种治疗与WNT途径活性相关的疾病或病况的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物。

本发明进一步提供了式(I)的化合物用于治疗与WNT途径活性相关的疾病或病况的用途。

本发明还提供了式(I)的化合物用于制造用于治疗与WNT途径活性相关的疾病或病况的药物的用途。

上述疾病或病况适当地选自由癌症、纤维化、干细胞和糖尿病性视网膜病变、类风湿性关节炎、银屑病以及心肌梗塞组成的组。

所述癌症可以是特征在于高WNT活性的癌症。

所述疾病或病况可以是癌症，如宫颈癌、结肠癌、乳腺癌、膀胱癌、头颈部癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、甲状腺癌、非小细胞肺癌以及慢性淋巴细胞性白血病、间皮瘤、黑色素瘤、胰腺腺癌、基底细胞癌、骨肉瘤、肝细胞癌、肾母细胞瘤或成神经管细胞瘤；或纤维化疾病，如肺纤维化、肝纤维化、皮肤纤维化或肾纤维化；或变性疾病；或代谢疾病，如糖尿病性视网膜病变。

本发明还提供了式(I)的化合物用于诊断的用途。

药物组合物

为了制备本发明的药物组合物，至少一种式(I)的化合物，任选地与其它上述药剂中的至少一种组合可以用作活性成分。根据常规的药物配混技术将所述活性成分与药物载体紧密混合，所述载体可以采用多种多样的形式，这取决于施用(例如口服或肠胃外如肌内施用)所期望的制剂的形式。在制备呈口服剂型的组合物时，可以使用常见药物介质中的任一种。因此，对于液体口服制剂，如例如混悬液、酏剂以及溶液，合适的载体和添加剂包括水、二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等；对于固体口服制剂，如例如粉剂、胶囊、胶丸以及片剂，合适的载体和添加剂包括淀粉、糖、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。由于片剂和胶囊易于施用，因此它们代表了最有利的口服剂量单位形式，在这种情况下，显然使用固体药物载体。如果需要的话，可以通过标准技术将片剂包被糖衣或包被肠溶衣。对于肠胃外制剂，载体将通常包含无菌水，尽管可以包括其它成分，例如以用于实现诸如辅助溶解或防腐的目的。

还可以制备注射混悬液，在这种情况下，可以使用适当的液体载体、助悬剂等。本文中的药物组合物每剂量单位，例如片剂、胶囊、粉剂、注射剂、一茶匙等将含有一定量的如上文所述的为递送有效剂量所必需的活性成分。本文中的药物组合物每剂量单位，例如片剂、胶囊、粉剂、注射剂、栓剂、一茶匙等将含有约0.03mg/kg至100mg/kg(优选0.1mg/kg-30mg/kg)，并且可以每天约0.1mg/kg-300mg/kg(优选每天1mg/kg-50mg/kg)的剂量的每一种活性成分或其组合给予。然而，所述剂量可以根据患者的需求、所治疗的病况的严重程度以及所使用的化合物而变化。可以采用每日施用或周期后给药(post-periodic dosing)。

优选地，这些组合物呈单位剂型，所述单位剂型来自如片剂、丸剂、胶囊、粉剂、颗粒剂、无菌肠胃外溶液或混悬液、计量气溶胶或液体喷雾剂、滴剂、安瓿、自动注射装置或栓剂；以用于口服、肠胃外、鼻内、舌下或经直肠施用、或用于通过吸入或吹入来施用。或者，所述组合物可以适用于每周一次或每月一次施用的形式呈现；例如，活性化合物的不溶性盐，如癸酸盐可能适于提供用于肌内注射的贮库制剂(depot preparation)。为了制备固体组合物，如片剂，将主要活性成分与药物载体混合，以形成含有本发明的化合物或其药学上可接受的盐的均相混合物的固体预制剂组合物，所述药物载体例如常规的制片成分，如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨糖醇、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、磷酸二钙或树胶，以及其它药物稀释剂，例如水。当将这些预制剂组合物称为均相时，意指活性成分均匀地分散在整个组合物中，使得可以容易地将组合物细分成同样有效的剂型，如片剂、丸剂以及胶囊。然后将这一固体预制剂组合物细分成含有0.1mg至约500mg本发明的每一种活性成分或其组合的上文所述类型的单位剂型。

本发明的组合物的片剂或丸剂可以被包被或以其它方式配混以提供给予延长作用的优势的剂型。举例来说，片剂或丸剂可以包含内部剂量组分和外部剂量组分，后者呈处于前者上的包层形式。这两种组分可以由肠溶层隔开，所述肠溶层用来抵御在胃中的崩解并且容许内部组分完整地进入十二指肠中或在释放上被延迟。多种材料可以用于这样的肠溶层或包衣，这样的材料包括多种聚合酸连同诸如虫胶、乙酰基醇和乙酸纤维素的材料。

其中本发明的组合物可以被并入以用于口服或通过注射施用的这一液体形式包括水溶液、适当调味的糖浆剂、水性混悬液或油混悬液、以及含有食用油如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油的调味乳液、以及酏剂和相似的药物媒介物。用于水性混悬液的合适的分散剂或助悬剂包括合成树胶和天然树胶(如黄蓍胶、阿拉伯树胶)、藻酸盐、葡聚糖、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或明胶。

药物组合物可以含有约0.01mg至100mg，优选地约5mg至50mg的每一种化合物，并且可以被构造成适用于所选施用方式的任何形式。载体包括必要的和惰性的药物赋形剂，包括但不限于粘合剂、助悬剂、润滑剂、调味剂、甜味剂、防腐剂、染料以及包衣。适用于口服施用的组合物包括固体形式，如丸剂、片剂、囊片、胶囊(每一种均包括立即释放、定时释放以及持续释放制剂)、颗粒剂、粉剂；以及液体形式，如溶液、糖浆剂、酏剂、乳液、以及混悬液。可用于肠胃外施用的形式包括无菌溶液、乳液以及混悬液。

有利地，本发明的化合物可以按单次日剂量施用，或总日剂量可以按每天两次、三次或四次的分次剂量施用。此外，本发明的化合物可以鼻内形式，经由局部使用合适的鼻内媒介物、或经由本领域普通技术人员所公知的透皮皮肤贴剂来施用。为了以透皮递送系统的形式施用，剂量施用在整个给药方案中当然将是连续的，而不是间歇性的。

举例来说，对于以片剂或胶囊的形式口服施用，可以将活性药物组分与口服的无毒的药学上可接受的惰性载体组合，所述载体诸如乙醇、甘油、水等。此外，在期望或需要时，还可以将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂以及着色剂并入到混合物中。合适的粘合剂包括但不限于淀粉、明胶、天然糖(如葡萄糖或β乳糖)、玉米甜味剂、天然树胶和合成树胶(如阿拉伯树胶、黄蓍胶)或油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。

液体形式包括合适的调味的助悬剂或分散剂，如合成树胶和天然树胶，例如黄蓍胶、阿拉伯树胶、甲基纤维素等。对于肠胃外施用，无菌的混悬液和溶液是所期望的。在期望静脉内施用时，使用一般含有合适的防腐剂的等渗制剂。

本发明的化合物或组合还可以脂质体递送系统的形式被施用，如小单层囊泡、大单层囊泡、以及多层囊泡。脂质体可以由多种磷脂形成，所述磷脂诸如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱。

本发明的化合物或组合还可以通过使用单克隆抗体作为与所述化合物分子偶联的单个载体来递送。本发明的化合物还可以与作为可靶向的药物载体的可溶性聚合物偶联。这样的聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟乙基天冬酰胺-苯酚、或被棕榈酰基残基取代的聚氧化乙烯聚赖氨酸。此外，本发明的化合物可以与可用于实现药物的受控释放的一类可生物降解的聚合物偶联，所述聚合物例如聚乳酸、聚ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯以及水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。

每当需要治疗所应对的病症时，可以在前述组合物中的任一种中并且根据本领域确定的给药方案施用本发明的化合物或组合。

所述产品的日剂量可以在每天每只哺乳动物0.01mg至1.000mg的宽范围内变化。对于口服施用，组合物优选地以片剂的形式提供，所述片剂含有0.01毫克、0.05毫克、0.1毫克、0.5毫克、1.0毫克、2.5毫克、5.0毫克、10.0毫克、15.0毫克、25.0毫克、50.0毫克、100毫克、150毫克、200毫克、250毫克以及500毫克的每一种活性成分或其组合以根据症状对所治疗的患者的剂量进行调整。药物的有效量通常是以每天每公斤体重约0.1mg至每天每公斤体重约300mg的剂量水平提供的。优选地，所述范围是每天每公斤体重约1mg至每天每公斤体重约50mg。所述化合物或组合可以按照每天1次至4次的方案来施用。

待施用的最佳剂量可以容易地由本领域技术人员确定，并且将随所用的具体化合物、施用方式、制剂的强度、施用方式、以及疾病病况的进展而变化。此外，与所治疗的具体患者相关的因素，包括患者的年龄、体重、饮食以及施用时间，将使得需要对剂量加以调整。

在另一个方面，本发明还提供了一种用于制备药物组合物的方法，所述药物组合物包含至少一种式(I)的化合物，所述化合物任选地与其它上述药剂中的至少一种组合；以及药学上可接受的载体。

所述组合物优选地呈适于相关日剂量的量的单位剂型。

本发明的化合物的合适的剂量(特别是包括单位剂量)包括已知的剂量，包括如诸如以下参考教科书中所述或所提到的这些化合物的单位剂量：《英国药典》和《美国药典》、Remington's Pharmaceutical Sciences(《雷明顿药物科学》)(麦克出版公司(Mack Publishing Co.))、Martindale The Extra Pharmacopoeia(《马丁代尔大药典》)(伦敦药学出版社(London,The Pharmaceutical Press))(例如参见第31版的第341页和其中所引用的页)或上述出版物。

实施例

在一个实施方案中，排除选自实施例1至实施例158的具有10微摩尔或更大的针对STF3A细胞的IC₅₀的化合物。

实施例的合成：

式(I)的化合物是根据一般合成方案1来合成的：

当U、V以及W各自是-CH₂-时，式(II)的化合物可以根据合成方案2来合成：

当U和V连在一起表示-CH＝CH-并且W表示C＝O时，式(II)的化合物可以根据合成方案3来合成：

式(III)的化合物可以根据合成方案4来合成：

酸的合成

酸中间体2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸的合成

步骤1：6-甲基-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(6H)-二酮的制备

向呋喃并[3,4-b]吡啶-5,7-二酮(5g，33.55mmol)在甲苯(100mL)中的溶液中添加甲胺(33.5mL，67.11，2M THF溶液)并且配备迪安斯塔克装置(dean stark setup)并且在130℃加热16小时。在完成后，将反应混合物冷却到室温并且将甲苯滗析并且将固体用甲苯洗涤，将合并的甲苯层浓缩，通过柱色谱纯化，得到2.5g(46％)呈白色固体状的所期望的化合物。

¹H>

LC-MS:m/z 163[M+H⁺]，纯度：99.35％。

步骤2：6-甲基-3,4-二氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(2H,6H)-二酮的制备

向化合物6-甲基-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(6H)-二酮(3g，18.51mmol)在THF(60mL)中的溶液中添加300mg 10％Pd/C并且将反应物在室温在氢气球下搅拌16小时。在完成后，将反应混合物经由硅藻土床过滤并且将滤液在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到900mg(29％)呈黄色固体状的所期望的化合物。

¹H>6)δ(ppm):7.69(brs,1H),3.22(t,J＝6Hz,2H),2.77(s,3H),2.17(t,J＝6.4Hz,2H),1.73-1.67(m,2H)。

LC-MS:m/z 167[M+H⁺]，纯度：86.4％。

步骤3：2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸乙酯的制备

向化合物6-甲基-3,4-二氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(2H,6H)-二酮(500mg，3.012mmol)在乙腈(25mL)中的溶液中添加K₂CO₃(623mg，4.518mmol)和溴乙酸甲酯(817mg，4.89mmol)并且将所得的反应混合物在70℃加热16小时。在完成后，将反应混合物浓缩，添加水(30mL)并且用EtOAc(2×30mL)萃取。将合并的EtOAc层用盐水溶液(30mL)洗涤并且经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到280mg(35％)呈黄色固体状的所期望的化合物。

¹H>3)δ(ppm):5.83(q,J＝7.6Hz,1H),4.18(t,J＝7.6Hz,2H),3.25-3.24(m,2H),2.92(s,3H),2.35-2.29(m,2H),1.90-1.85(m,2H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 267.10[M+H⁺]，纯度：93.53％。

步骤4：2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸的制备

将2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸乙酯在2∶1的THF和水中的溶液(0.1M)用LiOH·H₂O和3-5滴甲醇处理。将反应物在室温在环境气氛下搅拌16小时。在起始物质耗完后，将反应混合物用1N>

¹H>6)δ(ppm):4.38(s,2H),3.39(t,J＝6.0Hz,2H),2.77(s,3H),2.18(t,J＝6.0Hz,2H),1.80(q,J＝6.0Hz,2H)。

酸中间体2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酸的合成

步骤1：2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酸乙酯的制备

向化合物6-甲基-3,4-二氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(2H,6H)-二酮(500mg，3.012mmol)在乙腈(25mL)中的溶液中添加K₂CO₃(623mg，4.518mmol)和溴乙酸乙酯(817mg，4.518mmol)并且将所得的反应混合物在70℃加热16小时。在完成后，将反应混合物浓缩，添加水(30mL)并且用EtOAc(2×30mL)萃取。将合并的EtOAc层用盐水溶液(30mL)洗涤并且经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到280mg(35％)呈黄色固体状的所期望的化合物。

¹H>3)δ(ppm):5.83(q,J＝7.6Hz,1H),4.18(t,J＝7.6Hz,2H),3.25-3.24(m,2H),2.92(s,3H),2.35-2.29(m,2H),1.90-1.85(m,2H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 267.10[M+H⁺]，纯度：93.53％。

步骤2：2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酸的制备

向2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酸乙酯(280mg，1.052mmol)在THF(20mL)、MeOH(10mL)以及水(5mL)中的经过搅拌的溶液中添加LiOH·H₂O(66mg，1.578mmol)并且在室温搅拌2小时。在起始物质耗完后，将反应混合物浓缩，将残余物溶解在水(30mL)中，用EtOAc(30ml)洗涤，用KHSO₄水溶液酸化，并且将水层在真空下浓缩并且通过用THF洗涤残余物来回收产物。将THF浓缩并且得到150mg呈黄色固体状的所期望的化合物(60％)。

¹H>6):δ5.57(q,J＝7.2Hz,1H),3.32-3.26(m,1H),3.25-3.16(m.1H),2.81(s,3H),2.23-2.12(m,2H),1.80-1.74(m,2H),1.38(d,J＝7.6Hz,3H)。

LC-MS:m/z 239.0[M+H⁺]，纯度：92.34％。

酸中间体2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸的合成

步骤1：6-环丙基-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(6H)-二酮的制备

向于甲苯(100mL)中的化合物呋喃并[3,4-b]吡啶-5,7-二酮(5g，33.55mmol)中添加环丙胺(3.82g，67.11)并且配备迪安斯塔克装置并且在130℃加热16小时。在完成后，将反应混合物冷却到室温并且将甲苯滗析并且将固体用甲苯洗涤，将合并的甲苯层浓缩，通过柱色谱纯化，得到1.7g(27％)呈白色固体状的所期望的化合物。

¹H>1＝1.2Hz,J₂＝3.6Hz,1H),8.15(dd,J₁＝1.2Hz,J₂＝6.4Hz,1H),7.63-7.60(m,1H),2.80-2.75(m,1H),1.12-1.01(m,4H)。

LC-MS:m/z 189.10[M+H⁺]，纯度：97.22％。

步骤2：6-环丙基-3,4-二氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(2H,6H)-二酮的制备

向化合物6-环丙基-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(6H)-二酮(1.6g，8.510mmol)在THF(40mL)中的溶液中添加200mg的10％Pd/C并且将反应物在室温在氢气球下搅拌16小时。在完成后，将反应混合物经由硅藻土床过滤并且将滤液在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到400mg(24.5％)呈黄色固体状的所期望的化合物。

¹H>

LC-MS:m/z 193.3[M+H⁺]，纯度：98.14％。

步骤3：2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸乙酯的制备

向化合物6-环丙基-3,4-二氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(2H,6H)-二酮(400mg，2.083mmol)在乙腈(40mL)中的溶液中添加K₂CO₃(431mg，3.124mmol)和溴乙酸乙酯(522mg，3.124mmol)并且将所得的反应混合物在70℃加热16小时。在完成后，将反应混合物浓缩，添加水(30mL)并且用EtOAc(2×30mL)萃取。将合并的EtOAc层用盐水溶液(30mL)洗涤并且经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到400mg(69％)呈黄色固体状的所期望的化合物。

¹H>

LC-MS:m/z 279.1[M+H⁺]，纯度：95.44％。

步骤4：2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸的制备

向2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸酯(400mg，1.438mmol)在THF(20mL)、MeOH(20mL)以及水(10mL)中的经过搅拌的溶液中添加LiOH·H₂O(91mg，2.158mmol)并且在室温搅拌2小时。在起始物质耗完后，将反应混合物浓缩，将残余物溶解在水(30mL)中，用EtOAc(30ml)洗涤，用KHSO₄水溶液酸化，并且将产物用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的有机层干燥(Na₂SO₄)，浓缩，得到210mg呈黄色固体状的所期望的化合物(58％)。

¹H>6)δ(ppm):12.60(brs,1H),4.36(s,2H),3.26(t,J＝5.2Hz,2H),2.39-2.35(m,1H),2.15(t,J＝6Hz,2H),1.82-1.76(m,2H),0.78-0.73(m,2H),0.68-0.64(m,2H)。

LC-MS:m/z 251.00[M+H⁺]，纯度：99.14％。

酸中间体2-(6-环丁基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸的合成

¹H>6)δ4.31-4.40(m,3H),3.16(s,2H),2.56-2.66(m,2H),2.14-2.18(m,2H),2.02-2.09(m,2H),1.76-1.82(m,2H),1.60-1.71(m,2H)。

LC-MS:m/z 265(M+H)。

酸中间体2-(6-甲基-4,5,7-三氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸的合成

步骤1：6-甲基-5,7-二氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶1-氧化物

在0℃向化合物6-甲基-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(6H)-二酮(300mg，1.85mmol)在DCM(30mL)中的溶液中添加MCPBA(638mg，3.70mmol)并且将反应物在室温搅拌16小时。在完成后，将反应混合物在真空下浓缩。将残余物通过柱色谱纯化，得到200mg(61％)呈淡棕色固体状的所期望的化合物。

¹H>6):8.47-8.45(t,J＝3.6Hz,1H),7.71-7.70(d,J＝3.2Hz,2H),3.00(s,3H)。

LC-MS:m/z 178.97(M+H⁺)，纯度：99.64％。

步骤2：4-氯-6-甲基-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(6H)-二酮

将化合物6-甲基-5,7-二氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶1-氧化物(100mg，0.56mmol)在POCl₃(1mL)中在100℃加热3小时。在起始物质耗完后，将反应混合物浓缩；将残余物用NaHCO₃水溶液淬灭并且用EtOAc(2×20mL)萃取。将合并的EtOAc层用盐水溶液(20mL)洗涤并且经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到40mg(36％)呈浅粉红色固体状的所期望的化合物。

¹H>

LC-MS:m/z 197.05(M+H⁺),199.06(M+3H)，纯度：95.21％。

步骤3：4-羟基-6-甲基-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(6H)-二酮

向4-氯-6-甲基-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(6H)-二酮(50mg，0.253mmol)在DMF(2mL)中的经过搅拌的溶液中添加CsOAc(122mg，0.634mmol)，在80℃加热6小时。在起始物质耗完后，向反应混合物中添加NH₄Cl水溶液，将化合物用EtOAc(2×20mL)萃取。将合并的EtOAc层用盐水溶液(10mL)洗涤并且经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到25mg(55％)呈灰白色固体状的所期望的化合物。

¹H>

LC-MS:m/z 179.09(M+H⁺)，纯度：98.45％。

步骤4：2-(6-甲基-4,5,7-三氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸乙酯

将4-羟基-6-甲基-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5,7(6H)-二酮(150mg，0.842mmol)在DMF(3mL)中的经过搅拌的溶液用K₂CO₃(140mg，1.011mmol)处理，继而在室温用溴乙酸乙酯(163mg，1.011mmol)处理，并且将所得的反应混合物在60℃加热2小时。在起始物质耗完后，将水(20mL)添加到反应混合物中并且用EtOAc(2×20mL)萃取。将合并的EtOAc层用盐水溶液(10mL)洗涤，经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到60mg(27％)呈白色固体状的所期望的化合物。

¹H>

LC-MS:m/z 265.14(M+H⁺)，纯度：94.10％。

步骤5：2-(6-甲基-4,5,7-三氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸

将化合物2-(6-甲基-4,5,7-三氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸乙酯在4N HCl水溶液中在50℃加热6小时。在起始物质耗完后，将反应混合物浓缩并且在真空下干燥，得到40mg呈灰白色固体状的所期望的化合物。

¹H>6):13.0(brs,1H),8.20-8.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.25-7.23(d,J＝7.2Hz,1H),5.00(s,2H),2.02(s,3H)。

LC-MS:m/z 237.13(M+H⁺)，纯度：93.29％。

胺的合成

用于铃木反应的一般程序：

方法A：

将芳基卤化物(1当量)、硼酸(1.5当量)以及2M碳酸钾(2.5当量)在4:1的1,4-二烷和水中的经过搅拌的溶液用氩气脱气15分钟。将四(三苯基膦)钯(0)(0.05当量)添加到反应混合物中并且将反应混合物加热到回流，持续3-18小时。在起始物质耗尽之后，将反应混合物浓缩并且将水添加到反应混合物中并且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到纯化产物。

[2,3'-联吡啶]-6'-胺的制备

¹H>4)δ(ppm):8.55-8.56(m,1H),8.50-8.51(m,1H),8.14-8.16(m,1H),7.83-7.87(m,1H),7.75-7.77(m,1H),7.28-7.32(m,1H),6.75-6.77(m,1H)。

LC-MS:m/z 172.0[M+H⁺]。

6-(对甲苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>

6-(4-氟苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H-NMR(400MHz；DMSO-d₆)δ(ppm):8.02-7.98(m,2H),7.82(d,J＝9.2Hz,1H),7.29(t,J＝9.2Hz,2H),6.84(d,J＝9.6Hz,1H),6.5(s,2H)。

LC-MS:m/z 190[M+H⁺]。

5-苯基吡啶-2-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.23(s,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.55(d,J＝8.0Hz,2H),7.39(t,J＝8.0Hz,2H),7.26(t,J＝8.0Hz,1H),6.52(d,J＝8.0Hz,2H),6.0(brs,2H)。

LC-MS:m/z 171.12[M+H⁺]。

5-(噻唑-2-基)吡啶-2-胺的制备

¹H>4)δ(ppm):8.48(s,1H),7.95-7.98(m,1H),7.77(d,J＝3.6Hz,1H),7.48(d,J＝3.6Hz,1H),6.64-6.66(m,1H)。

LC-MS:m/z 178[M+H⁺]。

5-(4-氟苯基)吡啶-2-胺的制备

¹H>4)δ(ppm):8.20(s,1H),8.09-8.10(m,1H),7.87-7.90(m,1H),7.54-7.57(m,2H),7.14-7.18(m,2H),6.80-6.82(m,1H)。

6-(邻甲苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>4)δ(ppm):8.19(s,1H),7.53(d,J＝9.2Hz,1H),7.27-7.36(m,4H),7.13(d,J＝9.2Hz,1H),2.31(s,3H)。

6-(2-甲氧基苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.14(s,1H),7.62-7.58(m,2H),7.40-7.35(m,1H),7.11(d,J＝8.0Hz,1H),7.04(t,J＝7.6Hz,1H),6.77(d,J＝9.2Hz,1H)6.35(s,2H),3,79(s,3H)。

6-(4-甲氧基苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>3)δ(ppm):8.17(s,1H),7.87(d,J＝8.0Hz,2H),7.67(d,J＝9.6Hz,1H),6.99(d,J＝8.8Hz,2H),6.90(d,J＝9.2Hz,1H),5.85(br>

LC-MS:m/z 202[M+H⁺]。

6-(3-甲氧基苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.14(s,1H),7.80(d,J＝9.2Hz,1H),7.52-7.50(m,2H),7.37(t,J＝8.0Hz,1H),6.97-6.94(m,1H),6.84(d,J＝9.6Hz,1H),6.46(s,2H)3,79(s,3H)。

LC-MS:m/z 202[M+H⁺]。

5-(6-甲基吡啶-3-基)吡嗪-2-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.96(d,J＝2.0Hz,1H),8.52(d,J＝1.6Hz,1H),7.96(d,J＝1.6Hz,1H),7.28(d,J＝8.0Hz,1H),6.61(s,2H),2.48(s,3H)。

LC-MS:m/z 187[M+H⁺]。

6-(5-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.93(d,J＝2.0Hz,1H),8.42(d,J＝1.6Hz,1H),8.15-8.13(m,1H),7.86(d,J＝9.2Hz,1H),6.86(d,J＝9.2Hz,1H),6.56(s,2H),2.37(s,3H)。

6-(3-氟苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):7.86-7.76(m,3H),7.53-7.47(m,1H),7.23-7.18(m,1H),6.85(d,J＝9.6Hz,1H),6.55(s,2H)。

LC-MS:m/z 190[M+H⁺]。

3,5'-二甲基-[2,3'-联吡啶]-5-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.45(d,J＝2.0Hz,1H),8.33(d,J＝1.2Hz,1H),7.87(d,J＝2.8Hz,1H),7.67(d,J＝0.4Hz,1H),6.83(d,J＝2.0Hz,1H),6.38(s,2H),2.33(s,3H),2.22(s,3H)。

LC-MS:m/z 200[M+H⁺]。

5-(嘧啶-5-基)吡啶-2-胺的制备

¹H>3)δ(ppm):9.16(s,1H),8.88(s,2H),8.32(d,J＝2.0Hz,1H),7.67-7.64(m,1H),6.63(d,J＝8.4Hz,1H),4.65(s,2H)。

6-(嘧啶-5-基)吡啶-3-胺的制备

¹H>3)δ(ppm):9.26(s,2H),9.19(s,1H),8.24(d,J＝2.8Hz,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),7.12-7.09(m,1H),3.92(s,2H)。

6-(间甲苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>4)δ(ppm):8.20(s,1H),7.89-7.91(m,1H),7.72(s,1H),7.66-7.68(m,1H),7.35-7.38(m,1H),7.26-7.28(m,1H),7.14-7.16(m,1H),2.42(s,3H)。

LC-MS:m/z 186[M+H⁺]。

6'-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.64(s,1H),8.24(s,1H),7.83-7.85(m,1H),7.70-7.72(m,1H),7.25-7.27(m,1H),6.52-6.54(m,1H),6.09(bs,2H),2.33(s,3H)。

LC-MS:m/z 186[M+H⁺]。

6-(6-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.99-9.00(m,1H),8.19-8.21(m,1H),7.83-7.85(m,1H),7.32-7.34(m,1H),6.84-6.87(m,1H),6.52(brs,2H),2.32(s,3H)。

LC-MS:m/z 187[M+H⁺]。

4-(哒嗪-3-基)苯胺的制备

¹H>3)δ9.00(d,J＝4.4Hz,1H),8.00(d,J＝8.8Hz,1H),7.87(d,J＝7.9Hz,2H),7.62-7.60(m,1H),6.67(d,J＝8.0Hz,2H),5.61(s,2H)。

方法B：

将芳基卤化物(1当量)、硼酸(1.11当量)以及碳酸钠(3.33当量，预先溶解在2mL水中)在3mL的1,4-二烷和水中的经过搅拌的溶液用氮气脱气15分钟。将双(三苯基膦)二氯化钯(II)(Pd(dppf)Cl₂·DCM)(0.06当量)添加到反应混合物中并且将反应混合物在100℃加热到回流，持续3-18小时。在起始物质耗尽之后，将反应混合物浓缩并且将水添加到反应混合物中并且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过反相色谱纯化，得到纯化的胺。

6-苯基哒嗪-3-胺(3，化合物3、9、13、33、38、94以及95胺)的制备

¹H>6)δ(ppm):7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.80(d,J＝10Hz,1H),7.47(m,2H),7.40-7.36(m,1H),6.85(d,J＝9.2Hz,1H),6.46(br>

LC-MS:m/z 172.08[M+H⁺]。

2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):9.11(s,1H),8.47(d,J＝4.8Hz,1H),8.24(d,J＝8Hz,1H),8.07(s,1H),7.71(d,J＝8.8Hz,1H),7.41-7.38(m,1H),7.04-7.01(m,1H),5.57(brs,2H)。

LC-MS:m/z 172.15[M+H⁺]。

6'-甲基-[2,3'-联吡啶]-5-胺的制备

步骤1：6'-甲基-5-硝基-2,3'-联吡啶的制备

¹H>4)δ(ppm):9.46-9.47(m,1H),9.19-9.20(m,1H),8.65-8.68(m,1H),8.47-8.50(m,1H),8.18-8.21(m,1H),7.47-7.49(m,1H),2.62(s,3H)。

LC-MS:m/z 216[M+H⁺]。

步骤2：6'-甲基-[2,3'-联吡啶]-5-胺的制备

向6'-甲基-5-硝基-2,3'-联吡啶在2:1的乙醇和水中的溶液(0.1M)中添加铁粉(5当量)和乙酸(5当量)。将反应物在室温在环境气氛下剧烈搅拌1小时。在起始物质耗完后，将反应混合物用1N NaOH(pH 8-10)碱化并且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过反相色谱纯化，得到纯化的胺。

¹H>4)δ(ppm):8.84(s,1H),8.11-8.14(m,1H),8.06-8.07(m,1H),7.57-7.59(m,1H),7.33-7.35(m,1H),7.14-7.16(m,1H),2.55(s,3H)。

乙基5-(2-甲基噻唑-4-基)吡啶-2-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.49(d,J＝1.6Hz,1H),7.86(dd,J₁＝2Hz,J₂＝8.4Hz,1H),7.60(s,1H),6.48(d,J＝8.4Hz,1H),6.08(brs,2H),2.68(s,3H)。

LC-MS:m/z 192.13[M+H⁺]。

6-(吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):9.13(d,J＝1.6Hz,1H),8.58(dd,J＝4.8Hz,1.6Hz,1H),8.33-8.30(m,1H),7.88(d,J＝9.2Hz,1H),7.47(dd,J＝8.4Hz,8.0Hz>

LC-MS:m/z 173[M+H⁺]。

6-(6-氟吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.78(s,1H),8.55-8.50(m,1H),7.88(d,J＝9.2Hz,1H),7.29-7.26(m,1H),6.87(d,J＝9.2Hz,1H),6.58(brs,2H)。

LC-MS:m/z 191.13[M+H⁺]。

6-(5-氟吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6):9.04(s,1H),8.59-8.58(d,J＝2.8Hz,1H),8.24-8.21(m,1H),7.95-7.93(d,J＝9.6Hz,1H),6.89-6.86(d,J＝9.2Hz,1H),6.68(brs,2H)。

LC-MS:m/z 191.04(M+H⁺)，纯度：88.20％。

6-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):9.45(s,1H),8.98(s,1H),8.67(s,1H),8.04(d,J＝9.2Hz,1H),6.90(d,J＝9.2Hz,1H),6.73(br>

LC-MS:m/z 241.15[M+H⁺]。

3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.80(d,J＝2Hz,1H),8.47-8.45(m,1H),8.30(d,J＝2.4Hz,1H),7.96(t,J＝8Hz,1H),7.77-7.74(m,1H),7.41(t,J＝7.6Hz,1H),6.55(d,J＝8.4Hz,1H),6.14(brs,2H)。

LC-MS:m/z 172.0[M+H⁺]，纯度：99.63％。

6-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6):9.33(s,1H),8.61.-8.59(d,J＝7.9Hz,1H),8.00-7.97(dd,J＝3.5Hz,J＝2.6Hz,2H),6.91-6.89(d,J＝9.2Hz,1H),6.75(brs,2H)。

LC-MS:m/z 241.13(M+H⁺)，纯度：99.50％。

6-(4-(三氟甲基)苯基)哒嗪-3-胺(3，化合物49胺)的制备

¹H>6)δ(ppm):δ8.19(d,J＝8.4Hz,2H),7.90(d,J＝9.2Hz,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,2H),6.88(d,J＝10Hz,1H),6.63(brs,2H)。

LC-MS:m/z 240.15[M+H⁺]，纯度：99.94％。

6-(3-(三氟甲基)苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):δ8.30(s,1H),8.25(d,J＝7.2Hz,1H),7.94(d,J＝9.2Hz,1H),7.75-7.68(m,2H),6.87(d,J＝9.2Hz,1H),6.60(brs,2H)。

LC-MS:m/z 240.15[M+H⁺]，纯度：99.68％。

6-(3-(三氟甲氧基)苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):7.99-7.95(m,2H),7.88(d,J＝9.2Hz,1H),7.6(t,J＝7.6Hz,1H),7.37(d,J＝8.3Hz,1H),7.86(d,J＝9.6Hz,1H),6.59(s,2H)。

LC-MS:m/z 254.05[M+H⁺]，纯度：95.07％。

6-(4-(三氟甲氧基)苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.08(dd,J₁＝2Hz,J₂＝4.8Hz,2H),7.83(d,J＝9.6Hz,1H),7.44(d,J＝8.4Hz,2H),6.86(d,J＝9.2Hz,1H),6.53(brs,2H)。

LC-MS:m/z 256.21[M+H⁺]，纯度：95.19％。

6-(5-氯吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):9.11(s,1H),8.63(d,J＝2Hz,1H),8.42(s,1H),7.94(d,J＝9.2Hz,1H),6.89-6.86(dd,J₁＝9.2Hz,J₂＝0.8Hz,1H),6.66(brs,2H)。

LC-MS:m/z 207.11[M+2H⁺]，纯度：98.58％。

6-(5-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):9.29(s,1H),8.80(d,J＝1.2Hz,1H),8.54(s,1H),7.98(d,J＝9.2Hz,1H),7.37-7.09(m,1H),6.89(d,J＝9.2Hz,1H),6.67(brs,2H)。

5-甲基-6-(吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.71(s,1H),8.60(d,J＝4.8Hz,1H),7.93(d,J＝7.6Hz,1H),7.49-7.46(m,1H),6.68(s,1H),6.36(brs,2H),2.18(s,3H)。

LC-MS:m/z 187.0[M+H⁺]，纯度：96.33％。

4-(吡啶-2-基)苯胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.51(d,J＝4.4Hz,1H),7.79(d,J＝8Hz,2H),7.73(d,J＝3.2Hz,2H),7.15-7.12(m,1H),6.63(d,J＝8.4Hz,2H),5.38(brs,2H)。

LC-MS:m/z 171.0[M+H⁺]，纯度：97.74％。

4-(吡啶-3-基)苯胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.77(d,J＝1.6Hz,1H),8.40(dd,J＝1.6Hz,J＝4.4Hz,1H),7.92-7.89(m,1H),7.42-7.35(m,3H),6.68-6.65(m,2H),5.31(brs,2H)。

LC-MS:m/z 171.0[M+H⁺]，纯度：99.37％。

4-(吡啶-3-基)苯胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.47(dd,J＝1.6Hz,J＝4.8Hz,2H),7.55-7.51(m,4H),6.66(d,J＝8.8Hz,2H),5.48(brs,2H)。

LC-MS:m/z 171.0[M+H⁺]，纯度：99.79％。

5'-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-胺的制备

¹H>6)δppm:8.58(s,1H),8.30-8.29(m,1H),8.27-8.26(m,1H),7.78(br>

LC-MS:m/z 186[M+H⁺]。

6-(5-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δppm:8.93(s,1H),8.42(s,1H),8.15(s,1H),7.87-7.85(d,J＝9.2Hz,1H),6.88-6.86(d,J＝9.2Hz,1H),6.56(brs,2H),2.37(s,3H)。

LC-MS:m/z 240.15[M+H⁺]，纯度：98.49％。

6-(吡啶-4-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):7.96-7.94(d,J＝8Hz,2H),7.82-7.80(d,J＝9.2Hz,1H),7.48-7.35(m,3H),6.86-6.84(m,1H),6.64(br>

LC-MS:m/z 172.0[M+H⁺]。

3-氟联苯-4-胺的制备

¹H>6):7.57-7.55(d,J＝7.6Hz,2H),7.39-7.31(m,3H),7.26-7.22(m,2H),6.86-6.82(t,J＝8.8Hz,1H),5.25(brs,2H)。

LC-MS:m/z 187.94(M+H)，纯度：99.96％。

6-(2-氟苯基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6):7.87-7.83(m,1H),7.61-7.58(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝9.2Hz,1H),7.48-7.42(m,1H),7.33-7.28(m,2H),6.86-6.84(d,J＝9.2Hz,1H),6.54(brs,2H)。

LC-MS:m/z 190.22(M+H)，纯度：99.74％。

5'-氟-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):9.0(s,1H),8.45-8.44(d,J＝2.8Hz,1H),8.12-8.10(m,1H),8.06-8.05(d,J＝2.8,1H),7.79-7.77(d,J＝8.8Hz,1H),7.03-7.0(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝6.4Hz,1H),5.68(brs,2H)。

LC-MS:m/z 189.98(M+H⁺)，纯度：99.73％。

5'-甲基-3,3'-联吡啶-6-胺(化合物91胺)的制备

¹H>6):8.59(s,1H),8.30-8.28(d,J＝9.6Hz,2H),7.78-7.72(m,2H),6.55.6.52(d,J＝8.8Hz,1H),6.13(brs,2H),2.33(s,3H)。

LC-MS:m/z 185.9(M+H)，纯度：93.09％。

6'-氟-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.436-8.432(d,J＝1.6Hz,1H),8.28-8.27(d,J＝2Hz,1H),8.19-8.14(m,1H),7.75-7.72(dd,J₁＝2.8Hz,,J₂＝8.4Hz,1H),7.21-7.18(dd,J₁＝2.8Hz,J₂＝8.4Hz,1H),6.55-6.52(d,J＝8.8Hz,1H),6.15(brs,2H)。

LC-MS:m/z 190.0(M+H)，纯度：99.71％。

2'-氟-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.17(s,1H),8.14-8.13(m,1H),8.07-8.02(m,1H),7.65-7.62(m,1H),7.42-7.38(m,1H),6.55-6.53(d,J＝8.8Hz,1H),6.23(brs,2H)。

LC-MS:m/z 190.0(M+H)，纯度：98.07％。

5'-氟-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.71(s,1H),8.50-8.44(d,J＝2.8Hz,1H),8.376-8.37(d,J＝2.4Hz,1H),7.97-7.93(m,1H),7.83-7.80(m,1H),6.55-6.53(d,J＝8.4Hz,1H),6.25(brs,2H)。

LC-MS:m/z 189.97(M+H)，纯度：99.66％。

4-(吡嗪-2-基)苯胺的制备

¹H>6):9.401-9.037(d,J＝1.6Hz,1H),8.53-8.52(m,1H),8.376-8.37(d,J＝2.4Hz,1H),7.85-7.83(m,2H),6.67-6.65(dd,J₁＝2Hz,J₂＝6.8Hz,2H),5.57(brs,2H)。

LC-MS:m/z 171.94(M+H)，纯度：96.58％。

4-氟-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.67(s,1H),8.52-8.51(m,1H),8.13-8.10(d,J＝12Hz,1H),7.89-7.86(m,1H),7.46-7.43(m,1H),6.46(brs,2H),6.33-6.30(d,J＝12.8Hz,1H)。

HPLC：在254nm，纯度：99.59％。

2'-甲基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

步骤1：2'-甲基-5-硝基-2,3'-联吡啶的制备

HPLC：在254nm，纯度：83.07％。

步骤2：2'-甲基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

我们已经进一步进行而没有分析数据。

2,4'-联吡啶-5-胺的制备

步骤1：5-硝基-2,4'-联吡啶的制备

¹H>6):9.50-9.50(d,J＝2.4Hz,1H),8.80-8.78(m,2H),8.76-8.73(m,1H),8.43-8.41(d,J＝8.8Hz,1H),8.15-8.13(dd,J₁＝2Hz,J₂＝4.8Hz,2H)。

LC-MS:m/z 202.03[M+H⁺]，纯度：98.80％。

步骤2：2,4'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):8.54-8.53(d,J＝6Hz,2H),8.07-8.06(d,J＝3.2Hz,1H),7.88-7.86(m,2H),7.80-7.88(d,J＝8.4Hz,1H),7.02-6.99(dd,J₁＝2.8Hz,J₂＝8.4Hz,1H),5.76(brs,2H)。

LC-MS:m/z 172.03[M+H⁺]，纯度：98.34％。

4'-甲基-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.37-8.35(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(s,1H),7.92-7.91(d,J＝2Hz,1H),7.46-7.43(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.4Hz,1H),7.29-7.27(d,J＝4.8Hz,1H),6.54-6.52(d,J＝8.4Hz,1H),6.07(brs,2H),2.27(s,3H)。

HPLC：在254nm，纯度：96.49％。

5-甲基-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.80(s,1H),8.46-8.45(d,J＝4.8Hz,1H),8.18-8.175(d,J＝2Hz,1H),7.97-7.95(d,J＝8Hz,1H),7.63(s,1H),7.41-7.38(m,1H),5.93(brs,2H),2.11(s,3H)。

LC-MS:m/z 186.0(M+H⁺)，纯度：98.13％。

4-甲基-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.52(s,2H),7.76-7.73(m,2H),7.43-7.40(m,1H),6.38(s,1H),5.38(brs,2H),2.12(s,3H)。

LC-MS:m/z 186.0(M+H⁺)，纯度：98.01％。

2-甲基-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.51.8.48(m,2H),7.73-7.71(d,J＝8Hz,1H),7.43-7.39(m,1H),7.29-7.26(d,J＝8.4Hz,1H),6.39-6.37(d,J＝8.4Hz,1H),5.99(brs,2H),2.23(s,3H)。

LC-MS:m/z 186.0(M+H⁺)，纯度：99.44％。

6-甲基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):9.11(s,1H),8.458-8.45(d,J＝3.2Hz,1H),8.25-8.23(d,J＝8Hz,1H),7.60-7.58(d,J＝8Hz,1H),7.40-7.37(m,1H),7.01-6.99(d,J＝8.4Hz,1H),5.29(brs,2H),2.35(s,3H)。

LC-MS:m/z 186.2[M+H⁺]，纯度：74.47％。

3-甲基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>

LC-MS:m/z 186.0[M+H⁺]，纯度：93.98％。

5'-甲基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

步骤2：5'-甲基-5-硝基-2,3'-联吡啶的制备

¹H>6):9.47-9.46(d,J＝2Hz,1H),9.17(s,1H),8.71-8.68(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.8Hz,1H),8.58(s,1H),8.39-8.34(m,2H),2.42(s,3H)。

LC-MS:m/z 216.03(M+H⁺)，纯度：90.92％。

步骤2：5'-甲基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):8.896-8.891(d,J＝1.6Hz,1H),8.307-8.303(d,J＝1.6Hz,1H),8.07(s,1H),8.046-8.040(d,J＝2.4Hz,1H),7.69-7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.01-6.99(dd,J₁＝2.8Hz,J₂＝8.4Hz,1H),5.54(brs,2H),2.34(s,3H)。

LC-MS:m/z 186.0(M+H⁺)，纯度：99.78％。

4-甲基-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

LC-MS:m/z 186.0[M+H⁺]。

5-(6-甲基吡嗪-2-基)吡啶-2-胺的制备

¹H>1＝2Hz,J₂＝8Hz,1H),6.62-6.60(d,J＝8.4Hz,1H),4.67(s,2H),2.59(s,3H)。

LC-MS:m/z 187.0(M+H⁺)，纯度：99.39％。

6-(2-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>1＝1.6Hz,J₂＝4.8Hz,1H),7.76-7.73(dd,J₁＝2Hz,J₂＝8Hz,1H),7.36-7.34(d,J＝8.8Hz,1H),7.24-7.22(m,1H),6.85-6.82(d,J＝8.8Hz,1H),4.80(brs,2H),2.60(s,3H)。

LC-MS:m/z 187.0(M+H⁺)，纯度：73.36％。

2'-氟-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

步骤1：2'-氟-5-硝基-2,3'-联吡啶的制备

¹H>6):9.51-9.50(d,J＝2.4Hz,1H),8.76-8.73(dd,J₁＝2Hz,J₂＝8Hz>1＝1.6Hz,J₂＝8.8Hz>

LC-MS:m/z 219.92(M+H⁺)，纯度：97.88％。

步骤2：2'-氟-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):8.43-8.38(m,1H),8.14-8.08(m,2H),7.58-7.55(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.8Hz,1H),7.43-7.39(m,1H),7.02-6.99(dd,J₁＝2.8Hz,J₂＝7.6Hz,1H),5.66(brs,2H)。

LC-MS:m/z 189.97(M+H⁺)，纯度：92.44％。

3-氟-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):8.96(s,1H),8.51(d,J＝4.8Hz,1H),8.14(d,J＝3.6Hz,1H),7.95(t,J＝2.0Hz,1H),7.46-7.43(m,1H),6.85(dd,J＝2.4Hz,14.4Hz,1H)5.95(bs,2H)。

LC-MS:m/z 190.0(M+H⁺)。

6'-氟-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

步骤1：6'-氟-5-硝基-2,3'-联吡啶的制备

¹H>6):9.47-9.46(d,J＝2.4Hz,1H),9.068-9.062(d,J＝2.4Hz,1H),8.78-8.70(m,2H),8.38-8.35(d,J＝8.8Hz,1H),7.41-7.38(dd,J₁＝2.8Hz,J₂＝8.4Hz,1H)。

LC-MS:m/z 219.94(M+H⁺)，纯度：97.14％。

步骤2：6'-氟-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):8.72(s,1H),8.46-8.41(m,1H),8.04-8.03(d,J＝2.8Hz,1H),7.70-7.68(d,J＝8.8Hz,1H),7.20-7.17(dd,J₁＝2.8Hz,J₂＝8.4Hz,1H),7.02-7.00(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.4Hz,1H),5.56(brs,2H)。

LC-MS:m/z 190.0(M+H)，纯度：98.88％。

6-(4-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6):8.50(s,1H),8.45-8.43(d,J＝5.6Hz,1H),7.50-7.48(d,J＝8.8Hz,1H),7.33-7.32(d,J＝4.8Hz,1H),6.87-6.85(d,J＝9.2Hz,1H),6.49(brs,2H),3.29(s,3H)。

LC-MS:m/z 187.0[M+H⁺]，纯度：99.69％。

6-氟-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):9.098-9.090(d,J＝2Hz,1H),8.56-8.55(d,J＝4Hz,1H),8.22-8.19(m,1H),7.49-7.47(d,J＝8Hz,1H),7.35-7.32(m,1H),7.20-7.15(m,1H),3.90(brs,2H)。

6'-甲基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

步骤1：6'-甲基-5-硝基-2,3'-联吡啶的制备

¹H>

LC-MS:m/z 216.03(M+H⁺)，纯度：91.08％。

步骤2：6'-甲基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>

LC-MS:m/z 186.0(M+H⁺)，纯度：90.22％。

2'-氟-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.17(s,1H),8.14-8.13(m,1H),8.07-8.02(m,1H),7.65-7.62(m,1H),7.42-7.38(m,1H),6.55-6.53(d,J＝8.8Hz,1H),6.23(brs,2H)。

LC-MS:m/z 190.0(M+H⁺)，纯度：98.07％。

5'-氟-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.71(s,1H),8.50-8.44(d,J＝2.8Hz,1H),8.376-8.37(d,J＝2.4Hz,1H),7.97-7.93(m,1H),7.83-7.80(m,1H),6.55-6.53(d,J＝8.4Hz,1H),6.25(brs,2H)。

LC-MS:m/z 189.97(M+H⁺)，纯度：99.66％。

4-甲基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):9.11-9.10(d,J＝2Hz,1H),8.46-8.44(dd,J₁＝1.6Hz,J₂＝4.8Hz,1H),8.26-8.23(m,1H),8.01(s,1H),7.63(s,1H),7.40-7.37(m,1H),5.33(brs,2H),2.14(s,3H)。

LC-MS:m/z 186.0[M+H⁺]，纯度：78.41％。

5-(5-氟吡啶-3-基)吡嗪-2-胺的制备

¹H>6):9.01(s,1H),8.65(s,1H),8.50-8.49(d,J＝2.4Hz,1H),8.15-8.12(m,1H),7.99(s,1H),6.79(brs,2H)。

LC-MS:m/z 191.0(M+H⁺)，纯度：95.15％。

5'-甲氧基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

步骤1：5'-甲氧基-5-硝基-2,3'-联吡啶的制备

¹H>6):9.52-9.51(d,J＝2.8Hz,1H),8.855-8.551(d,J＝1.6Hz,1H),8.59-8.56(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.8Hz,1H),8.457-8.45(d,J＝2.8Hz,1H),7.99-7.96(m,2H),3.97(s,3H)。

LC-MS:m/z 231.88(M+H⁺)，纯度：96.05％。

步骤2：5'-甲氧基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):8.705-8.701(d,J＝1.6Hz,1H),8.18-8.17(d,J＝3.2Hz,1H),8.05-8.04(d,J＝2.4Hz,1H),7.81-7.80(t,J＝2Hz,1H),7.74-7.72(d,J＝8.8Hz,1H),7.02-6.99(dd,J₁＝2.8Hz,J₂＝8.4Hz,1H),5.57(brs,2H),3.88(s,3H)。

LC-MS:m/z 201.90(M+H⁺)，纯度：97.13％。

6'-甲氧基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

步骤1：6'-甲氧基-5-硝基-2,3'-联吡啶的制备

¹H>6):9.47-9.47(d,J＝2.4Hz,1H),8.889-8.883(d,J＝2.4Hz,1H),8.53-8.50(dd,J₁＝2.8Hz,J＝8.8Hz,1H),8.35-8.32(dd,J₁＝2.4Hz,J＝8.4Hz,1H),7.85-7.83(d,J＝8.8Hz,1H),6.90-6.87(d,J＝8.8Hz,1H),4.02(s,3H)。

LC-MS:m/z 231.91(M+H⁺)，纯度：97.91％。

步骤2：6'-甲氧基-2,3'-联吡啶-5-胺的制备

¹H>6):8.67-8.66(d,J＝2.4Hz,1H),8.20-8.18(d,J₁＝2.4Hz,,J₂＝8.8Hz,1H),8.01-8.00(d,J＝2.4Hz,1H),7.60-7.58(d,J＝5.2Hz,1H),7.00-6.97(dd,J₁＝2.8Hz,J₂＝8.4Hz,1H),6.84-6.82(d,J＝8.4Hz,1H),5.41(brs,2H),3.87(s,3H)。

LC-MS:m/z 201.9(M+H⁺)，纯度：98.28％。

5-甲基-2,3'-联吡啶-6'-胺的制备

¹H>6):8.65(s,1H),8.46(s,1H),8.12-8.09(dd,J₁＝3.2Hz,J₂＝8.4Hz,1H),7.52-7.51(d,J＝1.6Hz,2H),6.61-6.59(d,J＝8Hz>

LC-MS:m/z 186.08(M+H)，纯度：83.26％。

5-氟-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.857-8.85(d,J＝2.4Hz,1H),8.49-8.48(m,1H),8.19(m,1H),8.04-8.01(m,1H),7.83-7.79(dd,J₁＝1.6Hz,J₂＝10.8Hz,1H),7.43-7.40(m,1H),6.43(brs,2H)。

HPLC：在254nm，纯度：99.66％。

4-氟-3,3'-联吡啶-6-胺的制备

¹H>6):8.67(s,1H),8.55-8.51(dd,J₁＝1.6Hz,J₂＝4.4Hz,1H),8.14-8.11(d,J＝11.6Hz,1H),7.89-7.86(dd,J₁＝1.6Hz,J₂＝8Hz,1H),7.46-7.43(m,1H),6.47(brs,2H).6.34-6.31(d,J＝13.6Hz,1H)。

LC-MS:m/z 189.93(M+H⁺)，纯度：92.32％。

6-(4-氟苯基)吡啶-3-胺的制备

步骤1：2-(4-氟苯基)-5-硝基吡啶的制备

¹H>1＝6.4Hz,J₂＝8.8Hz,1H),8.12-8.09(m,2H),7.87-7.85(d,J＝8.8Hz,1H),7.25-7.19(m,2H)。

LC-MS:m/z 218.88(M+H⁺)，纯度：99.55％。

步骤2：6-(4-氟苯基)吡啶-3-胺的制备

¹H>6):8.008-8.001(d,J＝2.8Hz,1H),7.95-7.91(m,2H),7.61-7.59(d,J＝8.4Hz,1H),7.21-7.17(m,2H),7.08-6.98(m,1H),5.43(brs,2H)。

LC-MS:m/z 188.92(M+H⁺)，纯度：96.28％。

6-(5-甲氧基吡啶-3-基)哒嗪-3-胺的制备

¹H>6):8.74-8.73(d,J＝2Hz,1H),8.31-8.30(d,J＝2.8Hz,1H),7.92-7.85(m,2H),6.88-6.86(d,J＝9.2Hz>

LC-MS:m/z 202.96(M+H⁺)，纯度：83.80％。

6-(3-氟苯基)吡啶-3-胺的制备

步骤1：2-(3-氟苯基)-5-硝基吡啶的制备

¹H>6):9.50-9.49(d,J＝2.4Hz,1H),8.56-8.53(dd,J₁＝2.4Hz,J₁＝8.8Hz,1H),7.91-7.82(m,3H),7.53-7.47(m,1H),7.25-7.19(m,1H)。

LC-MS:m/z 218.88(M+H⁺)，纯度：99.25％。

步骤2：6-(3-氟苯基)吡啶-3-胺的制备

¹H>6):8.03-8.023(d,J＝2.8Hz,1H),7.76-7.66(m,3H),7.44-7.38(m,1H),7.09-7.05(m,1H),7.01-6.98(m,1H),5.55(brs,2H)。

LC-MS:m/z 189.22(M+H⁺)，纯度：95.86％。

方法C：

将芳基卤化物(1当量)、硼酸(1.11当量)以及碳酸钠(3.33当量，预先溶解在2mL水中)在3mL的1,4-二烷和水中的经过搅拌的溶液用氮气脱气15分钟。将双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.06当量)添加到反应混合物中并且将反应混合物加热到回流，持续3-18小时。在起始物质耗尽之后，将反应混合物浓缩并且将水添加到反应混合物中并且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过反相色谱纯化，得到纯化的胺。

5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-胺的制备

¹H>6)δ(ppm):9.10(s,1H),8.57(s,1H),8.49-8.51(m,1H),8.23-8.26(m,1H),7.98(s,1H),7.41-7.44(m,1H),6.67(brs,2H)。

6-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-胺的制备

¹H>4)δ(ppm):8.47(s,1H),8.22(brs,1H),8.15-8.18(m,1H),7.72-7.76(m,1H),7.52-7.54(m,1H),7.18-7.20(m,1H),6.78-6.81(m,1H),2.56(s,3H)。

方法D：

向硼酸(1当量)在二烷(0.02M)和水(0.05M)中的经过搅拌的溶液中添加芳基卤化物(1.1当量)、PCy₃(102mg，0.36mmol)以及K₃PO₄(9当量)并且用氮气脱气15分钟。将Pd₂(dba)₃(167mg，0.18mmol)添加到反应混合物中并且再脱气15分钟。将反应混合物在100℃加热到回流，持续10小时。在完成之后，将反应混合物冷却到室温，添加水(10mL)，用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的乙酸乙酯层用盐水溶液(1×10mL)洗涤，经过无水Na₂SO₄干燥，过滤，旋转蒸发并且在真空下干燥，得到粗产物。将粗产物通过硅胶柱色谱(100-200筛目)纯化。

4-(噻唑-2-基)苯胺的制备

H-NMR(400MHz；CDCl₃)δ(ppm):7.77(d,J＝6.0Hz,1H),7.19(d,J＝3.6Hz,1H),6.71(d,J＝4.8Hz,2H),3.8(brs,2H)。

LC-MS:m/z 175[M-H^-]，纯度：61.9％。

最终靶标的合成

用于酰胺偶联反应的一般程序

酰胺偶联方法A：

将2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸1(1.3当量)和无水TEA(2.0当量)在无水DCM(0.05M)中的溶液在氮气气氛下冷却到0℃并且用氯甲酸异丁酯(1.5当量)处理。将反应混合物搅拌1小时，用联芳胺2(1.0当量)处理并且平缓地升到室温，持续2小时。在起始物质耗尽后，将它在DCM与饱和NaHCO₃之间分配。将有机相分离，用盐水洗涤，经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。使用反相色谱将残余物纯化，得到所期望的产物。

N-([2,3'-联吡啶]-6'-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物1)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.87(s,1H),9.03-9.04(m,1H),8.66-8.67(m,1H),8.44-8.46(m,1H),8.11-8.13(m,1H),8.00-8.02(m,1H),7.87-7.91(m,1H),7.35-7.38(m,1H),4.60(s,2H),3.42(t,J＝6.0Hz,2H),2.76(s,3H),2.21(t,J＝6.0Hz,2H),1.84(q,J＝6.0Hz,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：95.85％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(6-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物40)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.45(s,1H),9.13-9.14(m,1H),8.33-8.37(m,2H),8.27-8.29(m,1H),7.41-7.43(m,1H),4.67(s,2H),3.35(t,J＝6.0Hz,2H),2.77(s,3H),2.55(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.85(q,J＝6.0Hz,2H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：98.68％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(5-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物41)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.47(s,1H),9.07(d,J＝2.0Hz,1H),8.53(d,J＝1.2Hz,1H),8.37-8.29(m,3H),4.67(s,2H),3.33-3-31(brs,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.88-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：98.35％。

N-(6-(3-氟苯基)哒嗪-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物42)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.46(s,1H),8.36-8.28(m,2H),7.98-7.92(m,2H),7.62-7.56(m,1H),7.36-7.32(m,1H),4.67(s,2H),3.33-3-31(brs,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.88-1.82(m,2H)。

LC-MS:m/z 396[M+H⁺]，纯度：98.66％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物43)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.45(s,1H),9.27(s,1H),8.68-8.70(m,1H),8.46-8.49(m,1H),8.31-8.38(m,2H),7.55-7.58(m,1H),4.65(s,2H),3.33(t,J＝5.2Hz,2H),2.35-2.40(m,1H),2.19(t,J＝5.2Hz,2H),1.83(q,J＝5.2Hz,2H),0.66-0.77(m,4H)。

LC-MS:m/z 405[M+H⁺]，纯度：97.33％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物45)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.56(br>

LC-MS:m/z 447[M+H⁺]，纯度：97.81％。

N-(6-(6-氟吡啶-3-基)哒嗪-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物46)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.47(s,1H),8.94(d,J＝2.4Hz,1H),8.71-8.66(m,1H),8.38-8.31(m,2H),7.38-7.36(m,1H),4.67(s,2H),3.33-3-31(brs,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.88-1.82(m,2H)。

LC-MS:m/z 397[M+H⁺]，纯度：98.57％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物48)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.52(br>

LC-MS:m/z 447[M+H⁺]，纯度：98.04％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(4-(三氟甲基)苯基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物49)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.51(br>

LC-MS:m/z 446[M+H⁺]，纯度：98.25％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(3-(三氟甲基)苯基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物50)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.50(br>

LC-MS:m/z 446[M+H⁺]，纯度：97.15％。

N-(3,3'-联吡啶-6-基)-2-(6-甲基-4,5,7-三氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物63)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.96(s,1H),8.965-8.96(d,J＝2Hz,1H),8.76-8.75(d,J＝2Hz,1H),8.60-8.59(d,J＝3.6Hz,1H),8.21-8.09(m,4H),7.54-7.51(m,1H),7.30-7.28(d,J＝8.4Hz,1H),5.23(s,2H),3.0(s,3H)。

LC-MS:m/z 390.0[M+H⁺]，纯度：94.26％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(6-氟吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物69)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.46(s,1H),8.94(s,1H),8.66-8.71(m,1H),8.32-8.38(m,2H),7.36-7.39(m,1H),4.65(s,2H),3.33(t,J＝5.2Hz,2H),2.35-2.39(m,1H),2.19(t,J＝5.2Hz,2H),1.83(q,J＝5.2Hz,2H),0.72-0.77(m,2H),0.65-0.68(m,2H)。

LC-MS:m/z 423[M+H⁺]，纯度：98.25％。

(S)-N-([2,3'-联吡啶]-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物116)的合成

通过手性纯化分离两种异构体，得到峰1(化合物116)和峰2(化合物117)。

¹H>6):10.27(s,1H),9.22-9.21(d,J＝1.6Hz,1H),8.88-8.87(d,J＝2.4Hz,1H),8.59-8.58(d,J＝3.2Hz,1H),8.39-8.37(d,J＝8.4Hz,1H),8.18-8.15(d,J₁＝2Hz,J₂＝8.8Hz,1H),8.04-8.02(d,J＝8Hz,1H),7.50-7.47(m,1H),5.72-5.70(q,J＝7.2Hz,1H),3.33-3.29(m,2H),2.81(s,3H),2.23-2.18(m.2H),1.83-1.79(m,2H),1.47-1.45(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z391.95(M+H)，纯度：99.60％。对映体过量：在254nm，98.9％。

(R)-N-([2,3'-联吡啶]-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物117)的合成

¹H>6):10.27(s,1H),9.22-9.21(d,J＝1.6Hz,1H),8.88-8.87(d,J＝2.4Hz,1H),8.59-8.58(d,J＝3.2Hz,1H),8.39-8.37(d,J＝8.4Hz,1H),8.18-8.15(d,J₁＝2Hz,J₂＝8.8Hz,1H),8.04-8.02(d,J＝8Hz,1H),7.50-7.47(m,1H),5.72-5.70(q,J＝7.2Hz,1H),3.33-3.29(m,2H),2.81(s,3H),2.23-2.18(m.2H),1.83-1.79(m,2H),1.47-1.45(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z392.09(M+H)，纯度：99.38％。对映体过量：在254nm，94.50％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-甲基-2,3'-联吡啶-5-基)乙酰胺(化合物123)的合成

¹H>6):9.69(s,1H),9.22(s,1H),8.60-8.59(d,J＝4Hz,1H),8.40-7.38(d,J＝7.6Hz,1H),7.96-7.94(d,J＝8.4Hz,1H),7.89-7.87(d,J＝8Hz,1H),7.51-7.48(m,1H),4.58(s,2H),3.36-3.29(m,2H),2.52(s,3H),2.49-2.39(m,1H),2.19-2.16(t,J＝6.4Hz,2H),1.85-1.82(m,2H),0.79-0.66(m,4H)。

LC-MS:m/z418.14(M+H)，纯度：99.62％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(3-甲基-2,3'-联吡啶-5-基)乙酰胺(化合物133)的合成

¹H>6):10.37(s,1H),8.73(s,1H),8.65-8.645(d,J＝2Hz,1H),8.60-8.58(m,1H),8.03(s,1H),7.96-7.94(m,1H),7.49-7.46(m.1H),4.55(s,2H),3.34-3.31(t,J＝4.8Hz,2H),2.39-2.36(m,1H),2.34(s,3H),1.85-1.82(t,J＝5.6Hz,2H),1.85-1.82(m,2H),0.76-0.73(m,2H),0.69-0.66(m,2H)。

LC-MS:m/z418.14(M+H)，纯度：99.08％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(2'-氟-2,3'-联吡啶-5-基)乙酰胺(化合物135)的合成

¹H>6):8.758-8.752(d,J＝2.4Hz,1H),8.54-8.49(m,1H),8.26-8.18(m,3H),7.90-7.88(d,J＝7.6Hz,1H),7.34-7.26(m,1H),4.41(s,2H),3.48-3.45(t,J＝5.6Hz,2H),2.49-2.44(m,1H),2.36-2.33(t,J＝6Hz,2H),1.98-1.92(m,2H),0.93-0.84(m,4H)。

LC-MS:m/z 421.90(M+H)，纯度：97.36％。

N-(6-氟-2,3'-联吡啶-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物137)的合成

¹H>3OD):9.16(s,1H),8.67-8.63(m,1H),8.56-8.55(d,J＝4.4Hz,1H),8.44-8.42(d,J＝8Hz,1H),7.88-7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.55-7.52(m,1H),4.79(s,2H),3.34-3.33(t,J＝5.6Hz,2H),2.41-2.36(m,1H),2.30-2.27(t,J＝6.4Hz,2H),1.98-1.92(m,2H),0.91-0.74(m,4H)。

LC-MS:m/z422.18(M+H)，纯度：95.03％。

N-(5'-氟-3,3'-联吡啶-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物139)的合成

¹H>6):10.80(s,1H),8.85(s,1H),8.79-8.78(d,J＝2.4Hz,1H),8.59-8.58(d,J＝2.8Hz,1H),8.25-8.22(dd,J₁＝2Hz,J₂＝8.4Hz,1H),8.16-8.13(m,2H),5.73-5.68(q,J＝6.8Hz,1H),3.32-3.31(m,2H),2.76(s,3H),2.22-2.14(m,2H),1.81-1.80(m,2H),1.47-1.45(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z410.12(M+H)，纯度：99.41％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-甲基-2,3'-联吡啶-5-基)乙酰胺(化合物140)的合成

¹H>6):9.75(s,1H),9.23(s,1H),8.63(s,1H),8.61-8.60(m,1H),8.41-8.39(d,J＝8Hz,1H),7.97(s,1H),7.51-7.48(m,1H),4.58(s,2H),3.34-3.32(m,2H),2.41-2.37(m,1H),2.31(s,3H),2.19-2.16(t,J＝6Hz,2H),1.84(m,2H),0.80-0.75(m,2H),0.70-0.68(m,2H)。

LC-MS:m/z418.14(M+H)，纯度：96.62％。

N-(5'-氟-3,3'-联吡啶-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物143)的合成

¹H>6):10.87(s,1H),8.86(s,1H),8.80-8.79(d,J＝2Hz,1H),8.59-8.58(d,J＝2.8Hz,1H),8.25-8.22(m,1H),8.17-8.11(m,2H),4.61(s,2H),3.36-3.32(m,2H),2.77(s,3H),2.23-2.20(t,J＝5.6Hz,2H),1.86-1.83(m,2H)。

LC-MS:m/z396.11(M+H)，纯度：98.40％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5'-甲氧基-2,3'-联吡啶-5-基)乙酰胺(化合物144)的合成

¹H>6):11.46(s,1H),8.83-8.82(d,J＝2Hz,2H),8.31-8.30(d,J＝2.8Hz,1H),8.18-8.15(m,1H),8.07-8.05(d,J＝8.8Hz,1H),7.94-7.93(m,1H),4.56(s,2H),3.91(s,3H),3.35-3.32(t,J＝5.2Hz,2H),2.39-2.36(m,1H),2.20-2.18(t,J＝6Hz,2H),1.85-1.83(m,2H),0.78-0.73(m,2H),0.69-0.66(m,2H)。

LC-MS:m/z 434.17(M+H)，纯度：97.21％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6'-甲氧基-2,3'-联吡啶-5-基)乙酰胺(化合物145)的合成

¹H>6):10.39(s,1H),8.82-8.81(d,J＝2Hz,1H),8.786-8.780(d,J＝2.4Hz,1H),8.34-8.31(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.4Hz,1H),8.11-8.09(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.4Hz,1H),7.93-7.91(d,J＝8.8Hz,1H),6.92-6.89(d,J＝8.4Hz,1H),4.55(s,2H),3.90(s,3H),3.34-3.31(m,2H),2.40-2.35(m,1H),2.20-2.17(t,J＝6Hz,2H),1.85-1.82(m,2H),0.76-0.71(m,2H),0.69-0.65(m,2H)。

LC-MS:m/z434.13(M+H)，纯度：98.82％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5'-甲氧基-3,3'-联吡啶-6-基)乙酰胺(化合物147)的合成

¹H>6):10.82(s,1H),8.76-8.75(d,J＝2Hz,1H),8.538-8.534(d,J＝1.6Hz,1H),8.30-8.29(d,J＝3.6Hz>

LC-MS:m/z 434.13(M+H⁺)，纯度：96.03％。

酰胺偶联方法B：

将2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸1(1.0当量)和无水N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)(1.5当量)在无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)(0.1M)中的溶液用N-(3-二甲基氨丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)(1.5当量)、1-羟基苯并三唑水合物(HOBt)(1.5当量)以及联芳胺2(1.1当量)处理。将混合物在室温在氮气气氛下搅拌18小时并且在DCM与水之间分配。将有机相分离，用盐水洗涤，经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。使用反相色谱将残余物纯化，得到所期望的产物。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(噻唑-2-基)苯基)乙酰胺(化合物2)的合成

¹H>4)δ(ppm):7.90(d,J＝8.4Hz,2H),7.83(d,J＝3.6Hz,2H),7.69(d,J＝8.4Hz,2H),7.55(d,J＝3.6Hz,2H),4.60(s,2H),4.55(bs,2H),3.39(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.97(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 383[M+H⁺]，纯度：95.50％。

酰胺偶联方法C：

将联芳胺2(1当量)和2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酸1(1.1当量)在吡啶(0.1M)中的溶液在氮气气氛下冷却到0℃并且用POCl₃(3当量)处理。将反应混合物搅拌45分钟。在起始物质耗尽后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠淬灭并且用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过反相色谱纯化，得到所期望的产物。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物3)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.47-8.49(m,1H),8.10-8.13(m,1H),8.00-8.02(m,2H),7.49-7.55(m,3H),4.70(s,2H),4.55(s,1H),3.42(t,J＝5.6Hz,2H),2.86(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：96.77％。

N-(6-(4-氟苯基)哒嗪-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物4)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.46-8.48(m,1H),8.09-8.11(m,1H),8.05-8.08(m,2H),7.24-7.29(m,2H),4.70(s,2H),4.55(s,1H),3.41(t,J＝5.6Hz,2H),2.86(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 396[M+H⁺]，纯度：98.38％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-苯基吡啶-2-基)乙酰胺(化合物5)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.77(s,1H),8.65(s,1H),8.09(bs,2H),7.69-7.71(m,2H),7.46-7.49(m,2H),7.36-7.40(m,1H),4.60(s,2H),3.42(t,J＝6.0Hz,2H),2.76(s,3H),2.21(t,J＝6.0Hz,2H),1.84(q,J＝6.0Hz,2H)。

LC-MS:m/z 377[M+H⁺]，纯度：98.85％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(噻唑-2-基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物6)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.88-8.89(m,1H),8.27-8.29(m,1H),8.18-8.20(m,1H),7.89(d,J＝3.2Hz,1H),7.63(d,J＝3.2Hz,1H),4.64(s,2H),3.40(t,J＝5.6Hz,2H),2.86(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.97(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 384[M+H⁺]，纯度：98.65％。

N-(5-(4-氟苯基)吡啶-2-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物7)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.53-8.54(m,1H),8.11-8.14(m,1H),7.98-8.01(m,1H),7.63-7.66(m,2H),7.18-7.22(m,2H),4.64(s,2H),3.40(t,J＝5.6Hz,2H),2.86(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.97(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 395[M+H⁺]，纯度：98.05％。

N-([3,3'-联吡啶]-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物8)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.83-8.84(m,1H),8.62-8.63(m,1H),8.55-8.56(m,1H),8.19-8.21(m,1H),8.08-8.14(m,2H),7.53-7.56(m,1H),4.65(s,2H),3.40(t,J＝5.6Hz,2H),2.86(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：98.39％。

N-([2,3'-联吡啶]-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物10)的合成

¹H>4)δ(ppm):9.14(s,1H),8.84(s,1H),8.55-8.57(m,1H),8.39-8.42(m,1H),8.21-8.24(m,1H),7.92-7.94(m,1H),7.52-7.56(m,1H),4.63(s,2H),3.41(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：97.32％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-苯基吡嗪-2-基)乙酰胺(化合物12)的合成

¹H>4)δ(ppm):9.37(s,1H),8.83(s,1H),8.00-8.02(m,2H),7.42-7.52(m,3H),4.67(s,2H),3.41(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.33(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：99.58％。

N-([3,3'-联吡啶]-6-基)-2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物14)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.83(s,1H),8.62(s,1H),8.54-8.56(m,1H),8.19-8.21(m,1H),8.08-8.14(m,2H),7.53-7.56(m,1H),4.63(s,2H),3.39(t,J＝5.6Hz,2H),2.36-2.42(m,1H),2.29(t,J＝5.6Hz,2H),1.96(q,J＝5.6Hz,2H),0.76-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 404[M+H⁺]，纯度：98.50％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(2-甲基噻唑-4-基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物15)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.83(s,1H),8.21-8.24(m,1H),8.10-8.12(m,1H),7.70(s,1H),4.62(s,2H),3.38(t,J＝5.6Hz,2H),2.76(s,3H),2.36-2.42(m,1H),2.29(t,J＝5.6Hz,2H),1.96(q,J＝5.6Hz,2H),0.77-0.81(m,4H)。

LC-MS:m/z 424[M+H⁺]，纯度：98.63％。

N-([2,3'-联吡啶]-6'-基)-2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物16)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.89-8.90(m,1H),8.62-8.64(m,1H),8.33-8.36(m,1H),8.17-8.19(m,1H),7.87-7.93(m,2H),7.36-7.39(m,1H),4.63(s,2H),3.39(t,J＝5.6Hz,2H),2.36-2.42(m,1H),2.30(t,J＝5.6Hz,2H),1.96(q,J＝5.6Hz,2H),0.76-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 404[M+H⁺]，纯度：98.81％。

N-(3-(3-氯苯基)异唑-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物18)的合成

¹H>4)δ(ppm):7.83(brs,1H),7.72-7.75(m,1H),7.47-7.48(m,2H),6.74(s,1H),5.83(q,J＝7.2Hz,1H),2.88(s,3H),2.27-2.32(m,2H),1.90-1.93(m,2H),1.52(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 415[M+H⁺]，纯度：98.63％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-苯基吡嗪-2-基)丙酰胺(化合物19)的合成

¹H>4)δ(ppm):9.38(s,1H),8.83(s,1H),8.00-8.02(m,2H),7.44-7.52(m,3H),5.83(q,J＝7.2Hz,1H),3.43-3.48(m,2H),2.89(s,3H),2.23-2.38(m,2H),1.89-1.97(m,2H),1.55(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 392[M+H⁺]，纯度：98.60％。

N-([2,3'-联吡啶]-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物20)的合成

¹H>4)δ(ppm):9.13-9.14(m,1H),8.86-8.87(m,1H),8.55-8.57(m,1H),8.39-8.42(m,1H),8.22-8.25(m,1H),7.91-7.94(m,1H),7.52-7.56(m,1H),5.82(q,J＝7.2Hz,1H),3.41-3.44(m,2H),2.89(s,3H),2.25-2.37(m,2H),1.89-1.94(m,2H),1.53(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 392[M+H⁺]，纯度：98.21％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-基)乙酰胺(化合物21)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.15(brs,1H),9.35(s,1H),9.26-9.27(m,1H),9.09-9.10(m,1H),8.64-8.65(m,1H),8.42-8.45(m,1H),7.52-7.55(m,1H),4.65(s,2H),3.31(t,J＝5.6Hz,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 379[M+H⁺]，纯度：98.20％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(吡啶-4-基)吡嗪-2-基)乙酰胺(化合物22)的合成

¹H>6)δ(ppm):9.38(s,1H),9.16(s,1H),8.70(d,J＝6.4Hz,2H),8.70(d,J＝6.4Hz,2H),8.06(d,J＝6.4Hz,2H),4.65(s,2H),3.31(t,J＝5.6Hz,2H),2.76(s,3H),2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 379[M+H⁺]，纯度：97.74％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-基)丙酰胺(化合物23)的合成

¹H>4)δ(ppm):9.45(s,1H),9.20(s,1H),8.92(s,1H),8.59-8.61(m,1H),8.47-8.50(m,1H),7.55-7.59(m,1H),5.83(q,J＝7.2Hz,1H),3.44-3.48(m,2H),2.89(s,3H),2.23-2.36(m,2H),1.90-1.97(m,2H),1.56(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：98.93％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6'-甲基-[2,3'-联吡啶]-5-基)乙酰胺(化合物24)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.46(s,1H),9.08(s,1H),8.80(s,1H),8.25-8.28(m,1H),8.12-8.15(m,1H),7.96-7.99(m,1H),7.33-7.35(m,1H),4.58(s,2H),3.31(t,J＝5.6Hz,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：96.99％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物25)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.47(brs,1H),9.27(s,1H),8.68-8.70(m,1H),8.46-8.49(m,1H),8.31-8.38(m,2H),7.55-7.59(m,1H),4.67(s,2H),3.31(t,J＝5.6Hz,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 379[M+H⁺]，纯度：96.37％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-基)乙酰胺(化合物26)的合成

¹H>4)δ(ppm):9.43(s,1H),9.19-9.20(m,1H),8.92(s,1H),8.59-8.61(m,1H),8.46-8.49(m,1H),7.56-7.59(m,1H),4.66(s,2H),3.40(t,J＝5.6Hz,2H),2.36-2.41(m,1H),2.30(t,J＝5.6Hz,2H),1.97(q,J＝5.6Hz,2H),0.79-0.82(m,2H),0.73-0.77(m,2H)。

LC-MS:m/z 405[M+H⁺]，纯度：96.05％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(邻甲苯基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物27)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.48(d,J＝9.2Hz,1H),7.78(d,J＝9.2Hz,1H),7.30-7.40(m,4H),4.70(s,2H),3.42(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.32(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：96.06％。

N-(6-(2-甲氧基苯基)哒嗪-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物28)的合成

¹H>3)δ(ppm):10.06(s,1H),8.48(d,J＝9.2Hz,1H),8.06(d,J＝9.2Hz,1H),7.89-7.87(m,1H),7.46-7.42(m,1H),7.10(t,J＝7.6Hz,1H),7.03(d,J＝8.4Hz,1H)4.78(s,2H),3.87(s,3H),3.39(t,J＝5.6Hz,2H),2.93(s,3H),2.38(t,J＝6.0Hz,2H),1.97(t,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 408[M+H⁺]，纯度：95.60％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(间甲苯基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物29)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.45-8.47(m,1H),8.09-8.11(m,1H),7.83(bs,1H),7.77-7.79(m,1H),7.39-7.43(m,1H),7.32-7.33(m,1H),4.70(s,2H),3.42(t,J＝5.6Hz,2H),2.86(s,3H),2.44(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：96.42％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(对甲苯基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物30)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.44(d,J＝9.2Hz,1H),8.09(d,J＝9.2Hz,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,2H),4.69(s,2H),3.41(t,J＝5.6Hz,2H),2.86(s,3H),2.41(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：96.81％。

N-(6-(4-甲氧基苯基)哒嗪-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物31)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.34(s,1H),8.29-8.27(m,1H),8.18-8.15(m,1H),8.06(d,J＝8.8Hz,2H),7.09(d,J＝8.8Hz,2H),4.65(s,2H),3.83(s,3H),3.36-3.33(m,2H),2.77(s,3H),2.21(t,J＝6.4Hz,2H),1.87-1.83(m,2H)。

LC-MS:m/z 408[M+H⁺]，纯度：97.22％。

N-(6-(3-甲氧基苯基)哒嗪-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物32)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.40(s,1H),8.33-8.31(m,1H),8.25-8.23(m,1H),7.68-7.66(m,2H),7.45(t,J＝8.0Hz,1H),7.08-7.05(m,1H),4.67(s,2H),3.85(s,3H),3.36-3.34(m,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.88-1.82(m,2H)。

LC-MS:m/z 408[M+H⁺]，纯度：97.23％。

2-(6-异丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物33)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.49(d,J＝9.2Hz,1H),8.12(d,J＝9.2Hz,1H),8.00-8.02(m,2H),7.49-7.55(m,3H),4.69(s,2H),4.21(q,J＝6.8Hz,1H),3.40(t,J＝6.0Hz,2H),2.30(t,J＝6.0Hz,2H),1.97(q,J＝6.0Hz,2H),1.32(d,J＝6.8Hz,6H)。

LC-MS:m/z 407[M+H⁺]，纯度：98.67％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-基)乙酰胺(化合物34)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.86-8.87(m,1H),8,30-8.33(m,1H),8.14-8.16(m,1H),7.76-7.80(m,1H),7.63-7.65(m,1H),7.24-7.26(m,1H),4.65(s,2H),3.41(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.59(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 392[M+H⁺]，纯度：96.66％。

N-(6-(3-甲氧基苯基)哒嗪-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物35)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.12(s,1H),9.33(s,1H),9.13(d,J＝2.4Hz,1H),9.05(d,J＝1.6Hz,1H),8.34-8.31(m,1H),7.39(d,J＝8.0Hz,1H),4.64(s,2H),3.37-3.34(m,2H),2.77(s,3H),2.53(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.86-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：95.59％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-苯基嘧啶-2-基)乙酰胺(化合物36)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.91(s,1H),8.99(s,2H),7.78-7.76(m,2H),7.53-7.50(m,2H),7.45-7.42(m,1H),4.79(s,2H),2.76(s,3H),2.21(t,J＝5.6Hz,2H),1.84(t,J＝5.2Hz,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：97.25％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-苯基吡啶-3-基)乙酰胺(化合物37)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.43(s,1H),8.79(d,J＝2.4Hz,1H),8.13-8.10(m,1H),8.04-8.02(m,2H),7.94-7.92(m,1H),7.48-7.45(m,2H),7.41-7.37(m,1H),4.58(s,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.4Hz,2H),1.88-1.82(m,2H)。

LC-MS:m/z 377[M+H⁺]，纯度：97.41％。

2-(6-环丁基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物38)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.49(d,J＝9.6Hz,1H),8.12(d,J＝9.6Hz,1H),8.00-8.03(m,2H),7.49-7.55(m,3H),4.69(s,2H),4.41-4.50(m,1H),3.40(t,J＝6.0Hz,2H),2.70-2.81(m,2H),2.30(t,J＝6.0Hz,2H),2.09-2.15(m,2H),1.97(q,J＝6.0Hz,2H),1.65-1.79(m,2H)。

LC-MS:m/z 418[M+H⁺]，纯度：97.40％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6'-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物39)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.80(s,1H),8.79(s,1H),8.69(s,1H),8.08-8.15(m,2H),8.00-8.03(m,1H),7.34-7.36(m,1H),4,60(s,2H),3.31(t,J＝5.6Hz,2H),2.76(s,3H),2.33(s,3H),2.21(t,J＝5.6Hz,2H),1.84(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 392[M+H⁺]，纯度：95.03％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6'-甲基-[2,3'-联吡啶]-5-基)乙酰胺(化合物44)的合成

¹H>4)δ(ppm):8.99(bs,1H),8.81-8.82(m,1H),8.27-8.29(m,1H),8.18-8.21(m,1H),7.87-7.89(m,1H),7.39-7.41(m,1H),4.60(s,2H),3.39(t,J＝5.6Hz,2H),2.58(s,3H),2.36-2.42(m,1H),2.29(t,J＝5.6Hz,2H),1.96(q,J＝5.6Hz,2H),0.76-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 418[M+H⁺]，纯度：97.43％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(哒嗪-3-基)苯基)乙酰胺(化合物47)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.34(s,1H),9.17-9.15(m,1H),8.19-8.12(m,3H),7.77-7.72(m,3H),4.57(s,2H),3.36-3.33(m,2H),2.78(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.88-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：97.86％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(5-氟吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物52)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.50(br>

LC-MS:m/z 423[M+H⁺]，纯度：95.22％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(4-(三氟甲氧基)苯基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物57)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.43(s,1H),8.34-8.36(m,1H),8.23-8.29(m,3H),7.52-7.54(m,2H),4.65(s,2H),3.33(t,J＝5.2Hz,2H),2.34-2.40(m,1H),2.19(t,J＝5.2Hz,2H),1.83(q,J＝5.2Hz,2H),0.72-0.77(m,2H),0.66-0.68(m,2H)。

LC-MS:m/z 488[M+H⁺]，纯度：96.93％。

N-(6-(5-氯吡啶-3-基)哒嗪-3-基)-2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物58)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.51(br>

LC-MS:m/z 439[M+H⁺]，纯度：97.76％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(吡啶-3-基)哒嗪-3-基)丙酰胺(化合物60)的合成

¹H>4)δ(ppm):9.21-9.22(m,1H),8.65-8.67(m,1H),8.53-8.55(m,1H),8.47-8.50(m,1H),8.20-8.23(m,1H),7.59-7.62(m,1H),5.85(q,J＝7.2Hz,1H),3.45-3.47(m,2H),2.89(s,3H),2.23-2.38(m,2H),1.88-2.00(m,2H),1.57(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：92.47％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-甲基-6-(吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物62)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.36(br>+]，纯度：96.01％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(吡嗪-2-基)吡啶-3-基)乙酰胺(化合物65)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.93(br>

LC-MS:m/z 405[M+H⁺]，纯度：96.75％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(吡嗪-2-基)吡啶-3-基)乙酰胺(化合物66)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.95(br>

LC-MS:m/z 379[M+H⁺]，纯度：95.59％。

N-([1,1'-联苯]-4-基)-2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物67)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.18(s,1H),7.67-7.61(m,6H),7.44(t,J＝7.2Hz,2H),7.32(t,J＝7.2Hz,2H),4.52(s,2H),3.31-3.30(m,2H),2.40-2.35(m,1H),2.18(t,J＝6.0Hz,2H),1.85-1.82(m,2H),0.78-0.71(m,2H),0.69-0.65(m,2H)。

LC-MS:m/z 402[M+H⁺]，纯度：98.05％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(3,5'-二甲基-[2,3'-联吡啶]-5-基)乙酰胺(化合物68)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.39(s,1H),8.63(d,J＝2.4Hz,1H),8.52(d,J＝2.0Hz,1H),8.43(d,J＝1.6Hz,1H),8.02(d,J＝2.0Hz,1H),7.576(s,1H),4.55(s,2H),3.31-3.30(m,2H),2.40-2.33(m,7H),2.19(t,J＝6.0Hz,2H),1.85-1.82(m,2H),0.78-0.73(m,2H),0.69-0.67(m,2H)。

LC-MS:m/z 432[M+H⁺]，纯度：97.05％。

N-([1,1'-联苯]-4-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物70)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.19(s,1H),7.61-7.67(m,6H),7.42-7.45(m,2H),7.30-7.34(m,1H),4,54(s,2H),3.31(t,J＝5.6Hz,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 376[M+H⁺]，纯度：96.59％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(吡啶-4-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物71)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.55(s,1H),8.74-8.75(m,2H),8.36-8.41(m,2H),8.08-8.10(m,2H),4,68(s,2H),3.35(t,J＝5.6Hz,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 379[M+H⁺]，纯度：95.91％。

N-(6-(5-氟吡啶-3-基)哒嗪-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物72)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.52(s,1H),9.18-9.19(m,1H),8.71-8.72(m,1H),8.39-8.42(m,3H),4,68(s,2H),3.35(t,J＝5.6Hz,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:397m/z[M+H⁺]，纯度：96.15％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(嘧啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物73)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.39(s,1H),9.18(d,J＝1.2Hz,1H),8.80(d,J＝5.6Hz,1H),8.20(d,J＝8.8Hz,2H),8.04-8.02(m,1H),7.75(d,J＝8.8Hz,2H),4.56(s,2H),3.31-3.30(m,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.86-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：98.60％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(嘧啶-2-基)苯基)乙酰胺(化合物74)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.35(s,1H),8.85(d,J＝5.2Hz,2H),8.34(d,J＝8.8Hz,2H),7.72(d,J＝8.8Hz,2H),7.38(d,J＝4.8Hz,1H),4.56(s,2H),3.31-3.30(m,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.87-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：95.40％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(嘧啶-5-基)苯基)乙酰胺(化合物75)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.30(s,1H),9.14-9.12(m,3H),7.80-7.72(m,4H),4.56(s,2H),3.31-3.30(m,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.88-1.82(m,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：96.33％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(吡啶-2-基)苯基)乙酰胺(化合物76)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.26(s,1H),8.62(d,J＝4.4Hz,1H),8.05(d,J＝8.8Hz,2H),7.92-7.90(m,1H),7.86-7.82(m,1H),7.69(d,J＝8.8Hz,2H),7.31-7.28(m,4H),4.55(s,2H),3.31-3.30(m,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.86-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z 377[M+H⁺]，纯度：97.71％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(吡啶-3-基)苯基)乙酰胺(化合物77)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.25(s,1H),8.87(d,J＝1.6Hz,1H),8.53-8.52(m,1H),8.06-8.03(m,1H),7.70(s,4H),7.47-7.44(m,1H),4.55(s,2H),3.35-3.31(m,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.88-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z 377[M+H⁺]，纯度：97.57％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(3-甲基-[1,1'-联苯]-4-基)乙酰胺(化合物78)的合成

¹H>6)δ(ppm):9.48(brs,1H),7.63-7.65(m,2H),7.42-7.52(m,5H),7.32-7.35(m,1H),4,57(s,2H),3.35(t,J＝5.6Hz,2H),2.78(s,3H),2.28(s,3H),2.19(t,J＝5.6Hz,2H),1.85(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 390[M+H⁺]，纯度：99.13％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(吡啶-4-基)苯基)乙酰胺(化合物79)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.30(s,1H),8.59(d,J＝6.0Hz,1H),7.81-7.78(m,2H),7.73-7.67(m,4H),4.55(s,2H),3.35-3.31(m,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.86-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z 377[M+H⁺]，纯度：98.06％。

N-(2-氟-[1,1'-联苯]-4-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物80)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.41(s,1H),7.67-7.64(m,1H),7.53-7.44(m,5H),7.39-7.35(m,2H),4.55(s,2H),3.35-3.31(m,2H),2.77(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.86-1.82(m,2H)。

LC-MS:m/z 394[M+H⁺]，纯度：96.95％。

N-(3-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物81)的合成

¹H>6)δ(ppm):9.38(s,1H),8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.69-7.67(m,2H),7.44(t,J＝7.6Hz,2H),7.36-7.30(m,2H),7.22-7.19(m,1H),4.59(s,2H),3.95(s,3H),3.29-3.27(s,2H),2.77(s,3H),2.21(t,J＝6.4Hz,2H),1.86-1.83(m,2H)。

LC-MS:m/z 406[M+H⁺]，纯度：96.93％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(2-甲基-[1,1'-联苯]-4-基)乙酰胺(化合物82)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.11(s,1H),7.54(s,1H),7.40-7.44(m,3H),7.29-7.35(m,3H),7.12-7.14(m,1H),4,53(s,2H),3.35(t,J＝5.6Hz,2H),2.77(s,3H),2.21(t,J＝5.6Hz,2H),2.20(s,3H),1.85(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 390[M+H⁺]，纯度：97.53％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6'-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物85)的合成

¹H>3)δ(ppm):8.71(d,J＝2.0Hz,1H),8.49(d,J＝2.0Hz,1H),8.41(s,1H),8.28(d,J＝8.8Hz,1H),7.91-7.88(m,1H),7.81(d,J＝6.4Hz,1H),7.30(d,J＝8.0Hz,1H),4.52(s,2H),3.40(t,J＝5.2Hz,2H),2.65(s,3H),2.47-2.41(m,1H),2.37(t,J＝6.0Hz,2H),2.00-1.95(m,2H),0.91-0.80(m,4H)。

LC-MS:m/z 418[M+H⁺]，纯度：98.02％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(6-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物86)的合成

¹H>3)δ(ppm):9.68(s,1H),9.11(d,J＝2.0Hz,1H),8.58(d,J＝9.6Hz,1H),8.33(d,J＝8.4Hz,1H),7.91(d,J＝9.2Hz,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),4.69(s,2H),3.40(t,J＝5.2Hz,2H),2.68(s,3H),2.46-2.41(m,1H),2.37(t,J＝6.0Hz,2H),2.02-1.96(m,2H),0.88-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 419[M+H⁺]，纯度：96.91％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5'-氟-[2,3'-联吡啶]-5-基)乙酰胺(化合物87)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.54(s,1H),9.13(s,1H),8.84-8.85(m,1H),8.60(s,1H),8.27-8.30(m,1H),8.17-8.20(m,1H),8.10-8.12(m,1H),4.57(s,2H),3.33(t,J＝5.2Hz,2H),2.34-2.40(m,1H),2.19(t,J＝5.2Hz,2H),1.84(q,J＝5.2Hz,2H),0.73-0.78(m,2H),0.64-0.69(m,2H)。

LC-MS:m/z 422[M+H⁺]，纯度：98.01％。

N-([3,4'-联吡啶]-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物88)的合成

¹H>3)δ(ppm):8.69(d,J＝6.0Hz,2H),8.58-8.57(m,1H),8.41(s,1H),8.30(d,J＝8.4Hz,1H),7.98-7.95(m,1H),7.48-7.47(m,2H),4.53(s,2H),3.42(t,J＝5.6Hz,2H),2.94(s,3H),2.38(t,J＝6.0Hz,2H),2.02-1.96(m,2H)。

LC-MS:m/z 378[M+H⁺]，纯度：97.34％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(嘧啶-5-基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物89)的合成

¹H>3)δ(ppm):9.24(s,1H),8.94(s,2H),8.52(d,J＝2.0Hz,1H),8.40-8.33(m,2H),7.94-7.91(m,1H),4.52(s,2H),3.40(t,J＝5.6Hz,2H),2.47-2.42(m,1H),2.36(t,J＝6.0Hz,2H),2.01-1.95(m,2H),0.91-0.81(m,4H)。

LC-MS:m/z 405[M+H⁺]，纯度：97.02％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(嘧啶-5-基)苯基)乙酰胺(化合物90)的合成

¹H>3)δ(ppm):9.19(s,1H),8.93(s,2H),8.12(s,1H),7.71-7.68(m,2H),7.57-7.55(m,2H),4.40(s,2H),3.46(t,J＝5.2Hz,2H),2.49-2.43(m,1H),2.34(t,J＝6.0Hz,2H),1.98-1.92(m,2H),0.94-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 404[M+H⁺]，纯度：97.97％。

N-(2-甲氧基-[1,1'-联苯]-4-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物99)的合成

¹H>4)δ7.44-7.48(m,3H),7.32-7.36(m,2H),7.21-7.27(m,2H),7.09-7.12(m,1H),4.60(s,2H),4.56(bs,1H),3.78(s,3H),3.40(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.97(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 406(M+H⁺)，纯度：97.22％。

N-(5'-氟-[2,3'-联吡啶]-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物100)的合成

¹H>4)δ9.03(s,1H),8.85(s,1H),8.48-8.49(m,1H),8.21-8.25(m,2H),7.96-7.98(m,1H),4.63(s,2H),3.41(t,J＝5.6Hz,2H),3.34(s,3H),2.86(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 396(M+H⁺)，纯度：96.89％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(嘧啶-5-基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物101)的合成

¹H>3)δ9.24(s,1H),8.94(s,2H),8.52(d,J＝2.0Hz,1H),8.44(s,1H),8.34(d,J＝8.8Hz,1H),7.94-7.91(m,1H),4.53(s,2H),3.42(t,J＝5.2Hz,2H),2.95(s,3H),2.39(t,J＝6.0Hz,2H),2.02-1.96(m,2H)。

LC-MS:m/z 379[M+H⁺]，纯度：96.17％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(嘧啶-5-基)吡啶-3-基)乙酰胺(化合物102)的合成

¹H>3)δ9.30(s,2H),9.23(s,1H),8.70(d,J＝2.4Hz,1H),8.34-8.31(m,2H),7.75(d,J＝8.8Hz,1H),4.41(s,2H),3.47(t,J＝5.6Hz,2H),2.49-2.44(m,1H),2.35(t,J＝6.4Hz,2H),1.99-1.93(m,2H),0.94-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 405[M+H⁺]，纯度：95.90％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(嘧啶-5-基)吡啶-3-基)乙酰胺(化合物103)的合成

¹H>3)δ9.30(s,2H),9.23(s,1H),8.70(d,J＝2.4Hz,1H),8.33-8.31(m,2H),7.75(d,J＝8.8Hz,1H),4.43(s,2H),3.48(t,J＝5.2Hz,2H),2.97(s,3H),2.37(t,J＝6.0Hz,2H),2.00-1.94(m,2H)。

LC-MS:m/z 379[M+H⁺]，纯度：97.77％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(2'-氟-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物104)的合成

¹H>3)δ8.50(s,1H),8.35-8.23(m,3H),7.94-7.84(m,2H),7.33-7.29(m,1H),4.51(s,2H),3.40(t,J＝5.2Hz,2H),2.47-2.42(m,1H),2.36(t,J＝6.0Hz,2H),2.00-1.95(m,2H),0.91-0.81(m,4H)。

LC-MS:m/z 422[M+H⁺]，纯度：96.21％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6'-氟-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物105)的合成

¹H>3)δ8.47-8.28(m,4H),7.97-7.92(m,1H),7.88-7.86(m,1H),7.06-7.03(m,1H),4.51(s,2H),3.40(t,J＝5.2Hz,2H),2.47-2.42(m,1H),2.36(t,J＝6.4Hz,2H),2.00-1.95(m,2H),0.91-0.80(m,4H)。

LC-MS:m/z 422[M+H⁺]，纯度：96.14％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5'-氟-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物106)的合成

¹H>3)δ8.65-8.64(m,1H),8.52-8.49(m,2H),8.39(s,1H),8.31(d,J＝8.4Hz,1H),7.93-7.90(m,1H),7.59-7.55(m,1H),4.51(s,2H),3.40(t,J＝5.2Hz,2H),2.47-2.42(m,1H),2.36(t,J＝6.4Hz,2H),2.01-1.95(m,2H),0.91-0.81(m,4H)。

LC-MS:m/z 422[M+H⁺]，纯度：96.31％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-氟-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物107)的合成

¹H>3)δ8.82-8.81(m,1H),8.68-8.66(m,1H),8.41(d,J＝2.0Hz,1H),8.06(s,1H),7.85-7.82(m,1H),7.67-7.64(m,1H),7.44-7.40(m,1H),4.85(s,2H),3.42(t,J＝5.6Hz,2H),2.45-2.40(m,1H),2.35(t,J＝6.0Hz,2H),1.99-1.93(m,2H),0.87-0.81(m,4H)。

LC-MS:m/z 422[M+H⁺]，纯度：96.57％。

N-(6'-氟-[2,3'-联吡啶]-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物108)的合成

¹H>4)δ8.78-8.82(m,2H),8.49-8.54(m,1H),8.19-8.22(m,1H),7.88-7.90(m,1H),7.16-7.18(m,1H),4.62(s,2H),3.41(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.97(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 396(M+H⁺)，纯度：97.21％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-氟-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物109)的合成

¹H>3)δ9.19(s,1H),8.65-8.63(m,1H),8.50(s,1H),8.44-8.43(m,1H),8.27-8.24(m,1H),7.41-7.38(m,1H),4.40(s,2H),3.46(t,J＝5.2Hz,2H),2.49-2.44(m,1H),2.35(t,J＝6.0Hz,2H),1.99-1.93(m,2H),0.94-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 422[M+H⁺]，纯度：98.16％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(2'-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物110)的合成

¹H>3)δ8.55-8.53(m,1H),8.36(s,1H),8.27-8.26(m,2H),7.71-7.68(m,1H),7.51-7.49(m,1H),7.23-7.20(m,1H),4.52(s,2H),3.40(t,J＝5.2Hz,2H),2.51(s,3H),2.47-2.42(m,1H),2.36(t,J＝6.0Hz,2H),2.01-1.95(m,2H),0.91-0.81(m,4H)。

LC-MS:m/z 418[M+H⁺]，纯度：96.76％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4'-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物111)的合成

¹H>3)δ8.49-8.48(m,1H),8.42(s,1H),8.36(s,1H),8.28-8.26(m,2H),7.71-7.68(m,1H),7.22-7.21(m,1H),7.23-7.20(m,1H),4.52(s,2H),3.40(t,J＝5.2Hz,2H),2.47-2.42(m,1H),2.36(t,J＝6.0Hz,2H),2.01-1.95(m,2H),1.56(s,3H),0.91-0.81(m,4H)。

LC-MS:m/z 418[M+H⁺]，纯度：99.28％。

N-(6'-氟-[2,3'-联吡啶]-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物112)的合成

¹H>4)δ8.55(bs,2H),7.99-8.01(m,1H),7.86-7.89(m,1H),7.63-7.65(m,1H),7.52-7.55(m,1H),4.63(s,2H),3.40(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.42(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 392(M+H⁺)，纯度：98.62％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物113)的合成

¹H>4)δ8.86(bs,1H),8.55-8.58(m,2H),8.14-8.17(m,1H),8.04-8.05(m,1H),7.54-7.57(m,1H),4.69(s,2H),3.43(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.36(s,3H),2.31(t,J＝5.6Hz,2H),1.97(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 392(M+H⁺)，纯度：96.35％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物114)的合成

¹H>4)δ8.57-8.59(m,1H),8.55(s,1H),8.14(s,1H),8.07(bs,1H),7.87-7.90(m,1H),7.53-7.56(m,1H),4.64(s,2H),3.40(t,J＝5.6Hz,2H),2.87(s,3H),2.32(t,J＝5.6Hz,2H),2.31(s,3H),1.98(q,J＝5.6Hz,2H)。

LC-MS:m/z 392(M+H⁺)，纯度：96.96％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5'-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物115)的合成

¹H>3)δ8.97(s,1H),8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.49(s,1H),8.29-8.26(m,2H),8.13(s,1H),7.76(d,J＝8.8Hz,1H),4.44(s,2H),3.49(t,J＝5.6Hz,2H),2.51-2.46(m,1H),2.44(s,3H),2.37(t,J＝6.4Hz,2H),2.01-1.95(m,2H),1.56(s,3H),0.96-0.84(m,4H)。

LC-MS:m/z 418[M+H⁺]，纯度：98.20％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物120)的合成

¹H>3)δ8.65-8.63(m,1H),8.58(d,J＝1.6Hz,1H),8.28(s,1H),8.15(s,1H),8.11(s,1H),7.65-7.62(m,1H),7.40-7.37(m,1H),4.51(s,2H),3.39(t,J＝5.2Hz,2H),2.47-2.41(m,1H),2.35(t,J＝6.0Hz,2H),2.31(s,3H),2.00-1.95(m,2H),0.90-0.80(m,4H)。

LC-MS:m/z 418[M+H⁺]，纯度：98.51％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6'-氟-[2,3'-联吡啶]-5-基)乙酰胺(化合物124)的合成

¹H>4)δ8.78-8.82(m,2H),8.49-8.54(m,1H),8.19-8.22(m,1H),7.88-7.90(m,1H),7.16-7.18(m,1H),4.61(s,2H),3.39(t,J＝5.6Hz,2H),2.36-2.42(m,1H),2.29(t,J＝5.6Hz,2H),1.96(q,J＝5.6Hz,2H),0.76-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 422(M+H⁺)，纯度：97.91％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(2-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物125)的合成

¹H>4)δ8.55-8.56(m,2H),7.99-8.01(bs,1H),7.86-7.89(m,1H),7.64-7.66(m,1H),7.52-7.55(m,1H),4.61(s,2H),3.38(t,J＝5.6Hz,2H),2.42(s,3H),2.36-2.41(m,1H),2.29(t,J＝5.6Hz,2H),1.96(q,J＝5.6Hz,2H),0.76-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 418(M+H⁺)，纯度：96.20％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(2-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物126)的合成

¹H>4)δ8.85-8.86(m,1H),8.57-8.58(m,1H),8.55-8.56(m,1H),8.14-8.17(m,1H),8.05(bs,1H),7.54-7.57(m,1H),4.67(s,2H),3.41(t,J＝5.6Hz,2H),2.38-2.42(m,1H),2.36(s,3H),2.28(t,J＝5.6Hz,2H),1.96(q,J＝5.6Hz,2H),0.74-0.83(m,4H)。

LC-MS:m/z 418(M+H⁺)，纯度：96.26％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(6-甲基吡嗪-2-基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物128)的合成

¹H>3)δ8.93(d,J＝1.6Hz,1H),8.80(s,1H),8.42(s,1H),8.37-8.34(m,2H),8.31-8.29(m,1H),4.52(s,2H),3.40(t,J＝5.2Hz,2H),2.63(s,3H),2.47-2.42(m,1H),2.36(t,J＝6.4Hz,2H),2.01-1.95(m,2H),0.91-0.82(m,4H)。

LC-MS:m/z 419[M+H⁺]，纯度：96.37％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(6-甲基吡嗪-2-基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物129)的合成

¹H>3)δ8.93(s,1H),8.80(s,1H),8.42-8.29(m,4H),4.54(s,2H),3.41(t,J＝6.0Hz,2H),2.94(s,3H),2.63(s,3H),2.39(t,J＝5.6Hz,2H),2.00-1.98(m,2H)。

LC-MS:m/z 393[M+H⁺]，纯度：99.05％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-甲基-2,3'-联吡啶-6'-基)乙酰胺(化合物146)的合成

¹H>6):10.82(s,1H),9.015-9.01(d,J＝2Hz,1H),8.50(s,1H),8.43-8.40(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.8Hz,1H),8.11-8.09(d,J＝9.2Hz,1H),7.92-7.90(d,J＝8.4Hz,1H),7.72-7.70(m,1H),4.58(s,2H),3.34-3.29(m,2H),2.44-2.38(m,1H),2.33(s,3H),2.20-2.17(t,J＝6Hz,2H),1.84-1.81(m,2H),0.77-0.74(m,2H),0.69-0.64(m,2H)。

LC-MS:m/z418.14(M+H⁺)，纯度：99.06％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-氟-3,3'-联吡啶-6-基)乙酰胺(化合物151)的合成

¹H>6):11.11(s,1H),8.80(s,1H),8.63-8.58(m,2H),8.04-7.95(m,2H),7.55-7.51(m,1H),4.60(s,2H),3.33-3.29(m,2H),2.40-2.34(m,1H),2.20-2.14(m,2H),1.86-1.82(m,2H),0.75-0.71(m,2H),0.69-0.64(m,2H)。

LC-MS:m/z422.07(M+H⁺)，纯度：99.06％。

N-(6-(4-氟苯基)吡啶-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物152)的合成

¹H>6):10.40(s,1H),8.788-8.782(d,J＝2.4Hz,1H),8.12-8.06(m,3H),7.93-7.91(J＝8.8Hz,1H),7.30-7.26(m,2H),4.57(s,2H),3.34-3.33(t,J＝4.8Hz,2H),2.77(s,3H),2.23-2.20(t,J＝6Hz,2H),1.87-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z395.07(M+H⁺)，纯度：98.98％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(5-甲氧基吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物153)的合成

¹H>6):11.44(s,1H),8.879-8.875(d,J＝1.6Hz,1H),8.417-8.410(d,J＝2Hz,1H),8.36(s,2H),8.03-8.02(m,1H),4.66(s,2H),3.94(s,3H),3.35-3.33(m,2H),2.40-2.34(m,1H),2.20-2.17(t,J＝6Hz,2H),1.85-1.82(m,2H),0.77-0.71(m,2H),0.69-0.65(m,2H)。

LC-MS:m/z435.10(M+H⁺)，纯度：98.35％。

N-(6-(3-氟苯基)吡啶-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物154)的合成

¹H>6):10.43(s,1H),8.81-8.80(d,J＝2.4Hz,1H),8.15-8.12(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.8Hz>

LC-MS:m/z395.10(M+H⁺)，纯度：97.37％。

N-(4-氟-3,3'-联吡啶-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物155)的合成

¹H>6):11.12(s,1H),8.79(s,1H),8.63-8.58(m,2H),8.03-7.95(m,2H),7.55-7.51(m,1H),4.62(s,2H),3.35-3.32(m,2H),2.77(s,3H),2.23-2.20(t,J＝6.4Hz,2H),1.86-1.83(m,2H)。

LC-MS:m/z396.08(M+H⁺)，纯度：98.79％。

方法D：

将2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酸1(1.0当量)在DCM(0.05M)中的经过搅拌的溶液用HATU(1.2当量)、TEA(2.0当量)以及联芳胺2(1.0当量)处理并且在室温搅拌16小时。在完成之后，将水添加到反应混合物中并且用DCM萃取。将合并的DCM层经过Na₂SO₄干燥并且在真空下浓缩。将粗制化合物通过柱色谱纯化，得到所期望的产物。

N-(2,3'-联吡啶-6'-基)-2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物9)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.84(s,1H),9.05(d,J＝1.6Hz,1H),8.67(d,J＝4.4Hz,1H),8.45(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝6.4Hz,1H),8.12(d,J＝8.8Hz,1H),8.01(d,J＝8Hz,1H),7.89(t,J＝6.4Hz,1H),7.38-7.35(m,1H),4.95(s,2H),3.29(m,2H),2.50-2.35(m,1H),2.20-2.17(m,2H),1.84-1.82(m,2H),0.77-0.70(m,2H),0.69-0.67(m,2H)。

LC-MS:404.07[M+H⁺]，纯度：97.02％。

N-([3,3'-联吡啶]-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物11)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.82(s,1H),8.95(d,J＝2Hz,1H),8.74(d,J＝2Hz,1H),8.60-8.58(m,1H),8.20-8.13(m,3H),7.52-7.49(m,1H),5.72(q,J＝6.8Hz,1H),3.35-3.30(m,2H),2.79(s,3H),2.22-2.17(m.2H),2.07(m,2H),1.46(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 392.20[M+H⁺]，纯度：96.00％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)丙酰胺(化合物13)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.41(s,1H),8.35(d,J＝9.6Hz,1H),8.24(d,J＝9.6Hz,1H),8.10(d,J＝7.2Hz,2H),7.56-7.49(m,3H),5.77(q,J＝7.2Hz,1H),3.39-3.34(m,2H),2.80(s,3H),2.33-2.15(m.2H),1.81-1.80(m,2H),1.49(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 391.54[M+H⁺]，纯度：95.88％。

N-([2,3'-联吡啶]-6'-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物17)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.78(s,1H),9.04(s,1H),8.67(d,J＝4.4Hz,1H),8.46(d,J＝8.4Hz,1H),8.15(d,J＝8.4Hz,1H),8.01(d,J＝7.6Hz,1H),7.89(t,J＝6.8Hz,1H),7.37(t,J＝4.8Hz,1H),5.72(q,J＝7.2Hz,1H),3.37(m,2H),2.79(s,3H),2.25-214(m,2H),1.82-1.80(m,2H),1.46(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z 392.20[M+H⁺]，纯度：99.81％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(4-(三氟甲基)苯基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物51)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.46(s,1H),8.39-8.32(m,3H),7.90(d,J＝7.6Hz,2H),4.66(s,2H),3.37-3.35(m,2H),2.39-2.37(m,1H),2.18(t,J＝5.6Hz,2H),1.84(m,2H),0.75-0.73(m,2H),0.69-0.67(m,2H)。

LC-MS:m/z 472.0[M+H⁺]，纯度：89.12％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(5-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物53)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.47(s,1H),9.08(d,J＝1.7Hz,1H),8.53(s,1H),8.37-8.29(m,3H),4.65(s,2H),3.34-3.33(m,2H),2.39-2.35(m,4H),2.18(t,J＝6.1Hz,2H),1.83(t,J＝5.2Hz,2H),0.77-0.71(m,2H),0.69-0.65(m,2H)。

LC-MS:m/z 472.31[M+H⁺]，纯度：98.02％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(5-(三氟甲基)吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物54)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.53(s,1H),9.58(s,1H),9.10(s,1H),8.83(s,1H),8.51-8.39(m,2H),4.66(s,2H),3.34-3.24(m,2H),2.37-2.32(m,1H),2.19(t,J＝6.1Hz,2H),1.83(t,J＝5.3Hz,2H),0.75-0.67(m,4H)。

LC-MS:m/z 473.39[M+H⁺]，纯度：96.44％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(3-(三氟甲基)苯基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物55)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.47(s,1H),8.45-8.36(m,4H),7.87(d,J＝8Hz,1H),7.79(t,J＝7.2Hz,1H),4.66(s,2H),3.35-3.32(m,2H),2.39-2.35(m,1H),2.18(t,J＝6Hz,2H),1.86-1.82(m,2H),0.77-0.71(m,2H),0.69-0.65(m,2H)。

LC-MS:m/z 472.31[M+H⁺]，纯度：99.75％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(3-(三氟甲氧基)苯基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物56)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.42(s,1H),8.34(d,J＝9.2Hz,1H),8.25(d,J＝9.2Hz,1H),8.11(d,J＝6.8Hz,2H),7.56-7.48(m,3H),4.69(s,2H),3.39-3.25(m,2H),2.36-2.35(m,1H),2.19(t,J＝5.6Hz,2H),1.83(m.2H),0.77-0.74(m,2H),0.68-0.66(m,2H)。

LC-MS:m/z 39.20[M+H⁺]，纯度：96.00％。

N-(2,3'-联吡啶-5-基)-2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物59)的合成

¹H>6)δ(ppm):10.45(s,1H),9.22(s,1H),8.84(d,J＝2Hz,1H),8.59(d,J＝3.6Hz,1H),8.39-8.37(m,1H),8.17-8.14(m,1H),8.03(d,J＝8.8Hz,1H),7.51-7.47(m,1H),4.57(s,2H),3.33-3.29(m,2H),2.38(t,J＝5.2Hz,1H),2.19(t,J＝6.4Hz,2H),1.857-1.83(m,2H),0.76-0.69(m,2H),0.68-0.65(m,2H)。

LC-MS:m/z 404.1[M+H⁺]，纯度：99.52％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(5-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物61)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.51(s,1H),9.44(s,1H),8.91(s,1H),8.70(s,1H),8.45-8.38(m,1H),7.41-7.13(m,1H),4.66(s,2H),3.35-3.29(m,2H),2.40-2.32(m,1H),2.20-2.17(m,2H),1.853-1.827(m,2H),0.77-0.69(m,2H),0.68-0.65(m,2H)。

LC-MS:m/z 455.32[M+H⁺]，纯度：98.68％。

2-(6-甲基-4,5,7-三氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物64)的合成

¹H>6)δ(ppm):11.61(s,1H),9.27(s,1H),8.69(s,1H),8.46-8.43(m,1H),8.34-8.33(m,2H),8.21(d,J＝8.4Hz,1H),7.58(m,1H),7.30(d,J＝8.4Hz,1H),5.29(s,2H),3.0(s,3H)。

LC-MS:m/z 391.0[M+H⁺]，纯度：95.80％。

N-(3-氟联苯-4-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物83)的合成

¹H>6):10.0(s,1H),8.02-7.98(t,J＝8.4Hz,1H),7.69-7.68(d,J＝7.6Hz,2H),7.62-7.58(dd,J₁＝2Hz,J₂＝10.4Hz,1H),7.50-7.45(m,3H),7.38-7.34(t,J＝7.2Hz,1H),4.60(s,2H),3.34-3.29(m,2H),2.78(s,3H),2.22-2.19(t,J＝5.6Hz,2H),1.86-1.83(m,2H)。

LC-MS:m/z394.12(M+H⁺)，纯度：99.93％。

N-(6-(2-氟苯基)哒嗪-3-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物84)的合成

¹H>6):11.45(s,1H),8.37-8.34(d,J＝9.6Hz,1H),8.04-8.02(m,1H),7.97-7.94(m,1H),7.57-7.55(m,1H),7.41-7.37(m,2H),4.67(s,2H),3.36-3.34(t,J＝4.8Hz,2H),2.77(s,3H),2.23-2.20(t,J＝6Hz,2H),1.86-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z396.10(M+H⁺)，纯度：96.25％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5'-甲基-2,3'-联吡啶-5-基)乙酰胺(化合物91)的合成

¹H>6):10.81(s,1H),8.74-8.72(d,J＝8.4Hz,2H),8.42(s,1H),8.17-8.12(m,2H),7.97(s,1H),4.59(s,2H),3.29-3.27(m,2H),2.37(s,3H),2.33-2.32(m,1H),2.21-2.18(t,J＝5.2Hz,2H),1.84-1.82(m,2H),0.76-0.74(m,2H),0.69-0.67(m,2H)。

LC-MS:m/z418.41(M+H⁺)，纯度：97.41％。

(S)-N-([3,3'-联吡啶]-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物92)的合成

通过手性纯化分离两种异构体，得到峰1(化合物92)和峰2(化合物93)。

¹H>6):10.82(s,1H),8.95-8.94(d,J＝2Hz,1H),8.74-8.73(d,J＝2Hz,1H),8.60-＝8.58(m,1H),8.20-8.13(m,3H),7.52-7.49(m,1H),5.74-5.70(q,J＝6.8Hz,1H),3.35-3.30(m,2H),2.79(s,3H),2.22-2.17(m.2H),2.07(m,2H),1.47-1.45(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z391.9(M+H⁺)，纯度：99.05％。对映体过量：在254nm，100％。

(R)-N-([3,3'-联吡啶]-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物93)的合成

¹H>6):10.82(s,1H),8.95-8.94(d,J＝2Hz,1H),8.74-8.73(d,J＝2Hz,1H),8.60-＝8.58(m,1H),8.20-8.13(m,3H),7.52-7.49(m,1H),5.74-5.70(q,J＝6.8Hz,1H),3.35-3.30(m,2H),2.79(s,3H),2.22-2.17(m.2H),2.07(m,2H),1.47-1.45(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z391.9(M+H⁺)，纯度：99.45％。对映体过量：在254nm，98.27％。

(S)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)丙酰胺(化合物94)的合成

通过手性纯化分离两种异构体，得到峰1(化合物94)和峰2(化合物95)。

¹H>6):11.41(s,1H),8.36-8.33(d,J＝9.6Hz,1H),8.26-8.23(d,J＝9.6Hz,1H),8.11-8.09(d,J＝7.2Hz,2H),7.56-7.49(m,3H),5.79-5.74(q,J＝7.2Hz,1H),3.39-3.34(m,2H),2.80(s,3H),2.33-2.15(m.2H),1.81-1.80(m,2H),1.50-1.48(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z391.9(M+H⁺)，纯度：99.12％。对映体过量：在254nm，99.94％。

(R)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)丙酰胺(化合物95)的合成

¹H>6):11.41(s,1H),8.36-8.33(d,J＝9.6Hz,1H),8.26-8.23(d,J＝9.6Hz,1H),8.11-8.09(d,J＝7.2Hz,2H),7.56-7.49(m,3H),5.79-5.74(q,J＝7.2Hz,1H),3.39-3.34(m,2H),2.80(s,3H),2.33-2.15(m.2H),1.81-1.80(m,2H),1.50-1.48(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z391.9(M+H⁺)，纯度：99.70％。对映体过量：在254nm，99.90％。

N-(6'-氟-3,3'-联吡啶-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物96)的合成

¹H>1＝2.4Hz,J₂＝8.8Hz,1H),7.05-7.02(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.4Hz,1H),5.79-5.75(m,1H),3.38-3.33(m,2H),2.98(s,3H),2.38-2.31(m,2H),1.93-1.89(m,2H),1.53-1.51(d,J＝9.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z410.15(M+H⁺)，纯度：95.99％。

N-(2'-氟-3,3'-联吡啶-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物97)的合成

¹H>

LC-MS:m/z410.22(M+H⁺)，纯度：97.89％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-(吡嗪-2-基)苯基)乙酰胺(化合物118)的合成

¹H>6):10.31(s,1H),9.21(s,1H),8.67(s,1H),8.56-8.55(d,J＝2.8Hz,1H),8.12-8.10(d,J＝8.4Hz,2H),7.75-7.73(d,J＝8.8Hz,2H),4.56(s,2H),3.35-3.33(t,J＝5.6Hz,2H),2.77(s,3H),2.23-2.20(t,J＝6Hz,2H),1.87-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z377.97(M+H⁺)，纯度：96.14％。

N-(4-氟-3,3'-联吡啶-6-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)丙酰胺(化合物119)的合成

¹H>6):11.09(s,1H),8.79(s,1H),8.63-8.57(m,2H),8.03-7.98(m,2H),7.55-7.52(m,1H),5.71-5.68(q,J＝7.2Hz,1H),3.32-3.29(m,2H),2.79(s,3H),2.22-2.17(m,2H),1.80-1.79(m,2H),1.47-1.45(d,J＝7.2Hz,3H)。

LC-MS:m/z410.12(M+H⁺)，纯度：99.36％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(2'-甲基-2,3'-联吡啶-5-基)乙酰胺(化合物121)的合成

¹H>

LC-MS:m/z418.11(M+H⁺)，纯度：99.07％。

N-(2,4'-联吡啶-5-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物122)的合成

¹H>6):10.54(s,1H),8.86-8.86(d,J＝2Hz,1H),8.67-8.65(d,J＝5.6Hz,2H),8.20-8.18(m,1H),8.11-8.09(d,J＝8.8Hz,1H),8.01-7.99(d,J＝6Hz,2H),4.59(s,2H),3.36-3.34(t,J＝4.8Hz,2H),2.77(s,3H),2.24-2.21(t,J＝6Hz,2H),1.87-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z378.11(M+H⁺)，纯度：99.81％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-氟-[2,3'-联吡啶]-6'-基)乙酰胺(化合物127)的合成

¹H>6)δ10.87(s,1H),9.01(d,J＝1.6Hz,1H),8.66(d,J＝3.2Hz,1H),8.44-8.41(dd,J₁＝2Hz,J₂＝8.8Hz,1H),8.12-8.09(m,2H),7.87-7.82(m,1H),4.59(s,2H),3.41-3.26(m,2H),2.38-2.35(m,1H),2.20-2.17(t,J＝5.6Hz,2H),1.90-1.83(m,2H),0.77-0.66(m,4H)。

LC-MS:m/z 422.11[M+H⁺]，纯度：98.69％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-甲氧基-[2,3'-联吡啶]-6'-基)乙酰胺(化合物130)的合成

¹H>6)δ10.80(s,1H),8.97(d,J＝2.0Hz,1H),8.39-8.36(m,2H),8.10-8.08(d,J＝8.0Hz,1H),7.98-7.96(d,J＝8.8Hz,1H),7,51-7.48(dd,J₁＝3.2Hz,J₂＝8.8Hz,1H),4.58(s,2H),3.88(s,3H),3.42-3.26(m,2H),2.38-2.32(m,1H),2.20-2.17(t,J＝6.4Hz,2H),1.84-1.81(m,2H),0.77-0.64(m,4H)。

LC-MS:m/z 432.1[M+H⁺]，纯度：97.84％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(间甲苯基)吡啶-3-基)乙酰胺(化合物131)的合成

¹H>6)δ10.42(s,1H),8.78-8.77(d,J＝2.8Hz,1H),8.12-8.10(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝8.8Hz,1H),7.92-7.90(d,J＝8.8Hz,1H),7.87(s,1H),7.82-7.80(d,J＝7.6Hz,1H),7.36-7.32(t,J＝7.2Hz,1H),7.21-7.20(d,J＝7.2Hz,1H),4.58(s,2H),3.36-3.26(m,2H),H),2.77(s,3H),2.38(s,3H),2.23-2.20(t,J＝5.6Hz,2H),1.87-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z 391.34[M+H⁺]，纯度：96.85％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(5-甲基吡嗪-2-基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物132)的合成

¹H>6):10.90(s,1H),9.15(d,J＝1.6Hz,1H),9.06(d,J＝2.0Hz,1H),8.60(s,1H),8.48-8.46(dd,J＝2.4,J＝8.8Hz,1H),7.15-7.13(d,J＝8.8Hz,2H),4.61(s,2H),3.34-3.33(m,2H),2.70(s,3H),2.54(s,3H),2.23-2.20(t,J＝6.0Hz,2H),1.87-1.82(m,2H)。

LC-MS:m/z 393.16(M+H⁺)，纯度：99.40％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(2-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物134)的合成

¹H>6):11.44(s,1H),8.57-8.56(dd,J₁＝2Hz,J₂＝4.8Hz,1H),8.36-8.34(d,J＝9.2Hz,2H),7.88-7.86(m,1H),7.41-7.37(m,1H),4.67(s,2H),3.37-3.35(m,2H),2.77(s,3H),2.79(s,3H),2.23-2.20(t,J＝6Hz,2H),1.87-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z392.90(M+H⁺)，纯度：97.70％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(4-甲基吡啶-3-基)哒嗪-3-基)乙酰胺(化合物136)的合成

¹H>6):10.09(s,1H),8.59(s,1H),8.53-8.52(d,J＝5.2Hz,1H),8.37-8.34(d,J＝9.2Hz>

LC-MS:m/z393.16(M+H⁺)，纯度：99.35％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4'-甲基-2,3'-联吡啶-5-基)乙酰胺(化合物138)的合成

¹H>6):10.43(s,1H),8.85-8.84(d,J＝2.4Hz,1H),8.53(s,1H),8.44-8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.14-8.11(dd,J₁＝2Hz,J₂＝8.4Hz,1H),7.60-7.58(d,J＝8.8Hz,1H),7.33-7.31(d,J＝4.8Hz,1H),4.56(s,2H),3.35-3.28(m,2H),2.39-2.38(m,1H),2.36(s,3H),2.20-2.17(t,J＝6.4Hz,2H),1.85-1.83(m,2H),0.76-0.73(m,2H),0.69-0.67(m,2H)。

LC-MS:m/z418.14(M+H⁺)，纯度：99.47％。

N-(5-(5-氟吡啶-3-基)吡嗪-2-基)-2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)乙酰胺(化合物141)的合成

¹H>6):11.20(s,1H),9.36(s,1H),9.17-9.15(m,2H),8.66-8.65(d,J＝2.4Hz,1H),8.37-8.34(m,1H),4.66(s,2H),3.37-3.34(t,J＝5.2Hz,2H),2.77(s,3H),2.24-2.21(t,J＝6Hz,2H),1.87-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z397.08(M+H⁺)，纯度：99.05％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(5-氟吡啶-3-基)吡嗪-2-基)乙酰胺(化合物142)的合成

¹H>6):11.19(s,1H),9.37(s,1H),9.17-9.16(d,J＝7.2Hz,2H),8.66-8.66(d,J＝2.4Hz,1H),8.37-8.34(d,J＝10.4Hz,1H),4.64(s,2H),3.34-3.33(m,2H),2.39-2.36(m,1H),2.21-2.18(t,J＝5.6Hz,2H),1.85-1.82(m,2H),0.77-0.71(m,2H),0.69-0.67(m,2H)。

LC-MS:m/z423.11(M+H⁺)，纯度：96.44％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5'-甲基-[3,3'-联吡啶]-6-基)乙酰胺(化合物148)的合成

¹H>6):10.82(s,1H),8.74-8.71(dd,J＝1.6Hz,J＝9.2Hz,2H),8.42(s,1H),8.17-8.10(m,2H),7.98(s,1H),4.61(s,2H),3.34-3.32(m,2H),2.77(s,3H),2.37(s,3H),2.23-2.20(t,J＝5.6Hz,2H),1.86-1.83(m,2H)。

LC-MS:m/z392.15(M+H⁺)，纯度：95.68％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5'-甲基-[2,3'-联吡啶]-5-基)乙酰胺(化合物149)的合成

¹H>6):10.46(s,1H),9.01(d,J＝2Hz,1H),8.82(d,J＝2.4Hz,1H),8.43(s,1H),8.21(s,1H),8.16-8.13(dd,J＝2.4Hz,J＝8.8Hz,1H),8.02-8.00(d,J＝8.4Hz,1H),4.58(s,2H),3.36-3.35(m,2H),2.77(s,3H),2.37(s,3H),2.24-2.21(t,J＝6.0Hz,2H),1.87-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z392.08(M+H⁺)，纯度：98.72％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-甲基-[2,3'-联吡啶]-6'-基)乙酰胺(化合物150)的合成

¹H>6):10.86(s,1H),9.03(d,J＝2Hz,1H),8.51(d,J＝5.2Hz,1H),8.45-8.42(dd,J＝2.4Hz,J＝8.8Hz,1H),8.12(d,J＝9.2Hz,1H),7.86(s,1H),7.20(d,J＝4.8Hz,1H),4.58(s,2H),3.32-3.28(m,2H),2.39-2.35(m,5H),2.20-2.17(t,J＝6.4Hz,2H),1.84-1.81(m,2H),0.77-0.65(m,4H)。

LC-MS:m/z 418.11(M+H⁺)，纯度：97.21％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(4-氟-[2,3'-联吡啶]-6'-基)乙酰胺(化合物156)的合成

¹H>6):10.94(s,1H),9.09(d,J＝2Hz,1H),8.71-8.69(dd,J＝5.6Hz,J＝9.2Hz,1H),8.52-8.49(dd,J＝2.0Hz,J＝8.4Hz,1H),8.23-8.20(m,1H),8.03(d,J＝10.8Hz,1H),7.31(s,1H),4.59(s,2H),3.33-3.30(m,2H),2.19-2.17(t,J＝6.0Hz,2H),1.83-1.82(m,2H),0.75-0.66(m,4H)。

LC-MS:m/z421.80(M+H⁺)，纯度：95.01％。

2-(6-环丙基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(5-(5-甲基吡嗪-2-基)吡啶-2-基)乙酰胺(化合物157)的合成

¹H>6):10.89(s,1H),9.15(d,J＝1.6Hz,1H),9.06-9.05(d,J＝2.0Hz,1H),8.60(s,1H),8.49-8.46(dd,J＝2.4Hz,J＝8.4Hz,1H),8.15-8.13(d,J＝8.8Hz,1H),7.31(s,1H),4.59(s,2H),3.39-3.34(m,2H),2.54(s,3H),2.20-2.17(t,J＝6.0Hz,2H),1.84-1.81(m,2H),0.77-0.64(m,4H)。

LC-MS:m/z419.15(M+H⁺)，纯度：95.49％。

2-(6-甲基-5,7-二氧代-2,3,4,5,6,7-六氢-1H-吡咯并[3,4-b]吡啶-1-基)-N-(6-(对甲苯基)吡啶-3-基)乙酰胺(化合物158)的合成

¹H>6):10.38(s,1H),8.76(d,J＝2.8Hz,1H),8.10-8.07(dd,J＝2.8,J＝8.8Hz,1H),7.94-7.87(m,3H),7.28-7.26(d,J＝8.0Hz,2H),4.57(s,2H),3.36-3.34(m,2H),2.77(s,3H),2.34(s,3H),2.32-2.20(t,J＝6.4Hz,2H),1.86-1.84(m,2H)。

LC-MS:m/z391.14(M+H⁺)，纯度：96.48％。

材料与方法

细胞系和培养条件：

HEK293-STF细胞系从被STF报告基因转染的人胚肾细胞系HEK293改良得到。HEK293-STF3A细胞系从HEK293-STF细胞系被进一步改良以表达Wnt3A。使用这一细胞系来鉴定调节Wnt途径的早期信号转导组分或晚期信号转导组分的化合物。这两种细胞系是从杜克-新加坡国立大学医学研究院(Duke-NUS)的David Virshup实验室获得的。使用L-Wnt3A(ATCC，编号CRL-2647)细胞系提供Wnt3A条件培养基。将这三种细胞系培养在含有10％FBS的DMEM中，在37℃、5％CO₂下孵育。

细胞活力测定：

将于75μl培养基中的5000个细胞接种到黑色96孔板(Greiner公司，编号：655090)的每个孔中并且在37℃孵育过夜。将25μl连续稀释的化合物添加到细胞中，得到50μM至1.5nM的最终浓度。在处理1天之后，将100μl CellTiter-Glo发光细胞活力测定试剂(编号：G7571，普洛麦格公司(Promega))添加到每个孔中并且在室温孵育10分钟。使用Tecan Safire2微孔板读数器测量发光。

STF3A测定：

将于75μl的培养基中的2×10⁴个HEK293-STF3A细胞接种到白色96孔板(Greiner公司，编号：655098)的每个孔中并且在37℃孵育过夜。将25μl连续稀释的化合物添加到细胞中，得到50μM至1.5nM的最终浓度。在处理1天之后，将100μl的Steady-Glo荧光素酶测定试剂(编号：E2520，普洛麦格公司)添加到每个孔中并且在室温孵育10分钟。使用Tecan>

STF/WNT3A条件培养基(STF/WNT3A CM)测定：

将L-Wnt3A细胞以3×10⁴个细胞/毫升培养在三个T-175烧瓶中，每个烧瓶有30ml培养基。在孵育4天之后，收获Wnt3A条件培养基，然后以2000rpm离心10分钟以去除碎片。如果不立即使用的话，那么将Wnt3A条件培养基储存在-20℃。

将于25μl培养基中的2×10⁴个HEK293-STF细胞添加到白色96孔板(Greiner公司，编号：655098)的每个孔中。将25μl连续稀释的化合物添加到细胞中。在孵育4小时之后，将100μl>

蛋白质印迹：

将2.5ml培养基中的8.0×10⁵个细胞接种到T-25烧瓶中。将化合物在1ml培养基中稀释到600nM并且将0.5ml添加到T-25烧瓶中，得到100nM的最终浓度。在37℃孵育两天后，收集培养基并且将其以2000rpm离心10分钟。收集上清液并且将来自每个样品的32μl用于SDS>TM>TM>

MMTV-Wnt1小鼠模型：

将8-10周大的雌性BALBc小鼠用150mg/kg氯胺酮+75mg/kg甲苯噻嗪麻醉。在无菌条件下，将第四乳腺脂肪垫附近的皮肤切开。将乳腺脂肪垫用钳子捏起并且植入约2mm³的肿瘤片段。将切口使用组织粘合剂封闭。将动物随机分成八组，并且每天用测试化合物处理，持续14天。使用卡尺在两个维度上测量肿瘤，并且使用下式计算体积：肿瘤体积(mm³)＝w²×l/2。最大肿瘤体积极限是2000mm³。

Wnt3A棕榈酰化测定：

用于确定化合物对Wnt的棕榈酰化的抑制的测定是由Yap等(Yap MC,Kostiuk MA,Martin DD,Perinpanayagam MA,Hak PG,Siddam A,Majjigapu JR,Rajaiah G,Keller BO,Prescher JA,Wu P,Bertozzi CR,Falck JR,Berthiaume LG.2010.Rapid and selective detection of fatty acylated proteins using omega-alkynyl-fatty acids and click chemistry(使用ω-炔基-脂肪酸和点击化学对脂肪酰化蛋白进行快速和选择性检测),J Lipid Res.51(6):1566-1580)描述的，其中有一定的改动。将3×10⁶个HeLa细胞接种到10cm培养皿中并且在37℃孵育过夜。将细胞用5μg>

软琼脂测定：

将AsPC-1细胞维持在补充有10％FBS、2mM L-谷氨酰胺以及P/S(100单位/毫升青霉素和100μg/ml链霉素)的RPMI164中。将HPAF-II细胞维持在补充有10％FBS、2mM L-谷氨酰胺以及P/S(100单位/毫升青霉素和100μg/ml链霉素)的MEM(伊格氏培养基(Eagles'))中。将CFPAC-1细胞维持在补充有10％FBS、2mM L-谷氨酰胺以及P/S(100单位/毫升青霉素和100μg/ml链霉素)的Iscove MEM中。

将600μl的0.6％琼脂添加到24孔板中以形成基层。然后，将0.36％琼脂的中层(含有5000个细胞和连续稀释的化合物)添加到基层上。最终，将500μl新鲜生长培养基添加到中层的顶部。将板在加湿的孵育箱中在37℃、5％二氧化碳下孵育2周。使用光学显微镜观测集落的形成。当集落尺寸大于500μm时，将70μl MTT(5mg/ml)添加到每个孔中并且将板在37℃孵育至少2小时。用仪器对集落进行计数。使用GraphPad Prism软件绘制集落计数与化合物浓度的关系图。还使用该软件来进行非线性曲线拟合以及抑制50％集落形成的化合物浓度的计算。

结果：

顺丁烯二酰亚胺化合物特异性抑制哺乳动物PORCN。

将无PORCN的HT1080细胞用哺乳动物或爪蟾(Xenopus)PORCN表达质粒以及WNT3A、STF报告基因和mCherry转染作为转染对照。在转染后6小时，将细胞用如所示的化合物或DMSO处理，并且在第二天，测定荧光素酶。爪蟾PORCN对化合物的抑制作用具有抗性。两种化合物，即化合物14和化合物43抑制哺乳动物豪猪的活性(图1)。

用化合物43和化合物52进行的处理减少了所有接受处理的小鼠的肿瘤生长(图2和图3)。

图5：Wnt3a的棕榈酰化被化合物43抑制。A.使用抗V5抗体，继而使用抗小鼠Dylight 680使Wnt3a-V5显现。B.用链霉亲和素-Dylight800检测V5-Wnt3a中生物素-叠氮化物点击的棕榈酸酯。在Wnt3a-V5蛋白质上方观测到非特异性条带。用链霉亲和素-Dylight 800检测到生物素-叠氮化物点击的棕榈酸酯(下条带)。DMSO用作阴性对照。泳道1：无炔烃棕榈酸酯；泳道2：未处理对照，DMSO+炔烃棕榈酸酯；泳道3：100nM化合物43+炔烃棕榈酸酯。

软琼脂测定的结果示于图5至图7和表1中：化合物43对胰腺细胞系AsPC-1和HPAF-II的50％集落生长抑制浓度(IC₅₀，μM)。下文所示的结果是来自两次独立实验的平均值±标准偏差(SD)。

MMTV-Wnt1小鼠模型的结果示于图2和表2中。

表2

在整个本说明书和所附权利要求书中，除非上下文另外要求，否则词语‘包含(comprise)’以及诸如‘包含(comprises)’和‘包含(comprising)’之类的变化形式将被理解为表示包括所述整数、步骤、整数的组或步骤的组，但并不排除任何其它整数、步骤、整数的组或步骤的组。

在整个本发明的说明书中所提到的所有专利和专利申请均以引用的方式整体并入本文。

本发明涵盖上文所述的优选的和更优选的组以及组的实施方案的所有组合。