一种核桃青皮提取物及其在烟草蚜虫病害中的应用方法

摘要

本发明提供一种核桃青皮提取物及其在烟草蚜虫病害中的应用方法，核桃外层青皮干燥粉碎后、经石油醚和乙酸乙酯提取，得到核桃青皮提取物，将核桃青皮提取物溶解稀释后即可用于防治烟草蚜虫病害。本发明提供的核桃青皮提取物提取方法简单、易于操作，将核桃青皮变废为宝，提高了其利用率。而且，本发明的核桃青皮提取物对烟蚜的杀虫率高、防治效果好，同时药效持续时间长。

说明书

技术领域

本发明属于植物提取物领域，具体涉及一种核桃青皮提取物及其在烟草蚜虫病害中的应用方法。

背景技术

核桃青皮，又名青龙衣，为胡桃科植物胡桃楸(Juglans>M.)和胡桃(Juglans> L.)的未成熟果实的绿色外果皮，主产于东北、山东、河北等地，自古以来一直作为民间常用中药材，辛、苦、涩、平，有清热解毒、祛风疗癣、止痛止痢等广泛的药用价值。研究表明，青龙衣有效成分对于人类的健康保护以及抗微生物活性方面有着重要的作用。核桃青皮为核桃外部一层厚厚的绿色果皮，核桃果实采摘后脱掉的青皮堆放在田间地头或倾倒在河里，不仅会造成资源的浪费，还会给生态环境带来严重的污染。如果对核桃青皮中的有效物质加以提取、分离、综合利用，既可以保护环境，还可以增加果农收入，岂不是一举两得。

烟蚜在全国各产烟区发生非常普遍且日益严重，每年6～7月在烟草上为害最盛，7月下旬以后从烟田产生有翅蚜转移为害蔬菜，至10月下旬进入越冬。烟蚜严重影响我国各产烟区的烟叶产量和质量。

农药在病虫害综合防治中起着重要作用，但随着化学农药的普遍使用，3R（Resistance，Resurgence，Residue）现象，即抗性、再增猖獗和残留现象也日趋严重，具有严重的副作用。从植物体中寻找高效、低毒、低残留、且与环境相容性好的新的天然活性物质，应用于农药在病虫害防治中具有重要意义。而关于核桃青皮提取物在防治烟草蚜虫病的应用，并未出现相关报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种核桃青皮提取物，以及该核桃青皮提取物在烟草蚜虫病害中的应用方法。

本发明通过以下技术方案实现的。

一种核桃青皮提取物，是通过以下步骤制备的：

（1）取核桃外层青皮，通风晾干，切忌颜色变黑，然后在75-90℃下烘干，冷却后粉碎，过60~100目筛，得到核桃青皮粉，常温下储藏备用；

（2）称取一定量的核桃青皮粉于容器内，按体积比1:2加入石油醚，在45℃下回流提取2h，进行脱脂，冷却至室温后过滤，回收滤液中的石油醚，滤渣备用；

（3）取步骤（2）中滤渣，然后按照体积比1：5-10加入乙酸乙酯溶液，在70-80℃回流提取5h，过滤，滤液和滤渣备用；

（4）取步骤（3）中核桃青皮滤渣按体积比1：3-6的比例加入乙酸乙酯，提取，在70-80℃回流提取2h，过滤，重复此操作3-5次；

（5）将上述步骤（3）和（4）中的滤液合并，浓缩，除去溶剂，即得核桃青皮提取物。

优选地，上述核桃青皮提取物的制备步骤（2）所述石油醚的沸点范围为：30-60℃。

优选地，上述核桃青皮提取物的制备步骤（3）加入的乙酸乙酯浓度为50%-70%。

优选地，上述核桃青皮提取物的制备步骤（4）加入的乙酸乙酯浓度为80%-90%。

一种上述的核桃青皮提取物在烟草蚜虫病害中的应用方法如下：

（1）将核桃青皮提取物溶解，得到核桃青皮溶液，浓度为10-30mg/mL；

（2）将核桃青皮溶液稀释250-300倍，在第一代1日龄幼虫始盛期，选择晴朗天气喷洒于烟叶表面和背面。

优选地，上述核桃青皮提取物在烟草蚜虫病害中的应用方法中步骤（1）采用5%的二甲基亚砜（DMSO）将核桃青皮提取物溶解。

本发明具有以下优点：

本发明提供的核桃青皮提取物对防治烟草蚜虫病害具有明显的效果，与传统的吡虫啉相比，本发明的核桃青皮提取物对烟蚜的防治率达到99%以上，而且药效持续时间长，25天时仍具有良好的效果。本发明回收废弃的核桃青皮为原料，提取方法操作简单，将核桃青皮变废为宝，提高了其利用率，保护了生态环境。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明加以详细说明。

实施例1

（1）取核桃外层青皮，通风晾干，切忌颜色变黑，然后在75℃下烘干，冷却后粉碎，过60目筛，得到核桃青皮粉，常温下储藏备用；

（2）称取一定量的核桃青皮粉于容器内，按体积比1：2加入石油醚，石油醚的沸点范围为：30-60℃，在45℃下回流提取2h，进行脱脂，冷却至室温后过滤，回收滤液中的石油醚，滤渣备用；

（3）取步骤（2）中滤渣，按照体积比1：5加入50%的乙酸乙酯溶液，在70℃回流提取5h，过滤，滤液和滤渣备用；

（4）取步骤（3）中核桃青皮滤渣按体积比1：3的比例加入80%的乙酸乙酯，提取，在70℃回流提取2h，过滤，重复此操作3次；

（5）将上述步骤（3）和（4）中的滤液合并，浓缩，除去溶剂，即得核桃青皮提取物。

实施例2

（1）取核桃外层青皮，通风晾干，切忌颜色变黑，然后在90℃下烘干，冷却后粉碎，过100目筛，得到核桃青皮粉，常温下储藏备用；

（2）称取一定量的核桃青皮粉于容器内，按体积比1：2加入石油醚，石油醚的沸点范围为：30-60℃，在45℃下回流提取2h，进行脱脂，冷却至室温后过滤，回收滤液中的石油醚，滤渣备用；

（3）取步骤（2）中滤渣，按照体积比1：10加入70%的乙酸乙酯溶液，在80℃回流提取5h，过滤，滤液和滤渣备用；

（4）取步骤（3）中核桃青皮滤渣按体积比1：6的比例加入90%的乙酸乙酯，提取，在80℃回流提取2h，过滤，重复此操作3次；

（5）将上述步骤（3）和（4）中的滤液合并，浓缩，除去溶剂，即得核桃青皮提取物。

实施例3

（1）取核桃外层青皮，通风晾干，切忌颜色变黑，然后在85℃下烘干，冷却后粉碎，过80目筛，得到核桃青皮粉，常温下储藏备用；

（2）称取一定量的核桃青皮粉于容器内，按体积比1:2加入石油醚，石油醚的沸点范围为：30-60℃，在45℃下回流提取2h，进行脱脂，冷却至室温后过滤，回收滤液中的石油醚，滤渣备用；

（3）取步骤（2）中滤渣，按照体积比1：5加入60%的乙酸乙酯溶液，在75℃回流提取5h，过滤，滤液和滤渣备用；

（4）取步骤（3）中核桃青皮滤渣按体积比1：4的比例加入85%的乙酸乙酯，提取，在75℃回流提取2h，过滤，重复此操作3次；

（5）将上述步骤（3）和（4）中的滤液合并，浓缩，除去溶剂，即得核桃青皮提取物。

将上述核桃青皮提取物用5%DMSO溶液配制成20mg/mL的溶液，充分溶解，各自稀释250倍。

实施例4

本发明核桃青皮提取物在烟草蚜虫病害中的应用方法及防治效果

1.试验材料

（1）供试烟株：60 d烟苗

（2）防治对象：烟草蚜虫第一代幼虫

（3）供试药剂：吡虫啉，实施例1、2、3制得的核桃青皮提取物。

2.试验设计

本试验共设4种、2类药剂处理：浓度都为20mg/mL，一类是市售传统农药吡虫啉作为对照组，另一类是实施例1、2、3制得的3种核桃青皮提取物用5%的DMSO溶解制得的核桃青皮提取液。另设5%的DMSO作为空白组，每种处理重复5次，每个重复为1个组，每组为20株烟妙，各药剂和空白组的稀释倍数相同，都稀释250倍。

3.施药方法

在第一代1日龄幼虫始盛期，选择晴朗天气将稀释过的各组药剂喷洒于有蚜虫的烟叶正反两面。

4.药效检查

选择每组蚜虫较多的叶面作为固定样本，用标签标记，标明编号、药品名称。施药前调查叶面上的蚜虫数量。从喷药后的1d、2d、4d、8d、16d、25d、32d分别检查每组固定样本上幼虫活虫数目。

5.结果

表1 不同药剂对烟蚜的防治效果

从表1中可以看出，两类药剂对烟草蚜虫都有较明显的防治效果，与传统农药相比，本发明制备的核桃青皮提取物对烟草蚜虫的防治效果更好，不仅杀虫率高、对烟蚜的防止效果好、见效快，而且药效持续时间长，在喷药25d时，防治效果仍能达到99%左右，当喷药32d后防治效果有所下降，是药效发挥殆尽的缘故，这说明有必要进行二次喷药以加强防治效果。而吡虫啉在喷药16d后就有药效下降的表现。

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