冬油菜叶片质外体抗冻蛋白标样制备方法及蛋白裂解液

摘要

一种冬油菜叶片质外体抗冻蛋白标样制备方法及蛋白裂解液，将冬油菜叶片质外体抗冻蛋白干粉溶于含尿素的蛋白裂解液中保存，即得冬油菜叶片质外体抗冻蛋白标样；该冬油菜叶片质外体抗冻蛋白干粉是用质外体抗冻蛋白提取法从强冬性白菜型冬油菜油菜陇油7号和强冬性甘蓝型冬油菜Vision中提取；该含尿素的蛋白裂解液中尿素的摩尔体积浓度为6～10mol/L。用该蛋白裂解液裂解冬油菜叶片质外体抗冻蛋白，得到的蛋白含量高了9~13倍，进行SDS-PAGE凝胶电泳检测到的蛋白条带数多而清晰，毒性更小。本发明蛋白裂解液中不含有毒试剂β-巯基乙醇，可以减少对人体的危害。