一种载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一种载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂及其制备方法，属于新药技术领域，分为两个部分制成：一、载罗红霉素纳米结构脂质载体：由以下材料重量组分组成：罗红霉素1-7mg、固态脂质材料45-75mg、液态脂质材料30-60mg、乳化剂45-300mg、水5-25mL；二、载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂：载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉4-7g、凝胶基质0.01-0.01g、保湿剂1.0-3.0g、防腐剂0.001-0.003g、pH调节剂0.004-0.02g、水5-15g；将罗红霉素、固态脂质材料、液态脂质材料乙醇，乳化剂45-300mg，水10-20mL，加热至50-80℃，制成载罗红霉素含量纳米结构脂质载体冻干粉加入凝胶基质中，充分搅拌，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂。

说明书

技术领域

本发明涉及一种载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂及其制备方法，属于新药技术领域。

背景技术

罗红霉素(ROXYTHROMYCIN，简称ROX)，又名罗希红霉素，是新一代大环内酯类抗生素，其抗菌作用机制为抑制细菌蛋白质合成，是呼吸道感染、咽炎、喉炎、皮肤软组织感染的首选药物，外用可用于治疗脓疱疮等化脓性皮肤病及小面积烧伤、溃疡面的感染，寻常性痤疮，毛囊炎等。

研究发现，罗红霉素属于时间依赖性抗生素，抗菌效能与药物和细菌接触的时间成正比，由于罗红霉素具有合适的油水分配系数，皮肤渗透性良好，易于进入血液循环，引起恶心、呕吐、腹泻等胃肠道不良反应。由于药物易透过皮肤，进入血液循环，在局部的停留时间短，对于具有时间依赖性的罗红霉素，又不利于药效的发挥。

发明内容

为了克服上述不足，本发明的目的是提供一种载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂及其制备方法，该一种载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂及其制备方法可以缓慢持续释药，增加其在皮肤内的滞留量，延长药物作用时间，提高生物利用度，为时间依赖性药物提高皮肤治疗效果，提供新的剂型选择。

本发明的技术方案是：一种载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂及其制备方法，分为两个部分制成：

一、载罗红霉素纳米结构脂质载体：

由以下材料重量组分组成：

罗红霉素1-7mg、固态脂质材料45-75mg、液态脂质材料30-60mg、

乳化剂45-300mg、水5-25mL；

所述的固态脂质材料为单硬脂酸甘油脂、双硬脂酸甘油酯、卵磷脂、硬脂酸的一种或组合；

所述的液态脂质材料为MIGLYOL、肉豆蔻酸异丙酯、大豆油、蓖麻油、中链甘油三酸酯、辛/癸酸聚乙二醇甘油酯一种或组合；

所述的乳化剂为月桂酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯蓖麻油、蓖麻油聚烃氧酯、吐温80、F68（Poloxamer188）、HS15（聚乙二醇十二羟基硬脂酸锂）、聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油、吐温80的一种或组合；

二、载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂：

由以下材料重量组分组成：

载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉4-7g、凝胶基质0.01-0.01g、保湿剂1.0-3.0g、防腐剂0.001-0.003g、pH调节剂0.004-0.02g、水5-15g；

所述的凝胶基质为卡波姆980或940。

保湿剂为丙二醇。

促渗剂为氮酮。

防腐剂为山梨酸。

首先，将罗红霉素制成载罗红霉素纳米结构脂质载体其步骤如下：

第一步：将罗红霉素1-7mg，固态脂质材料45-75mg，液态脂质材料30-60mg，溶于1-5mL乙醇，加热至50-80℃，作为油相，备用；

第二步：将乳化剂45-300mg，水10-20mL，加热至50-80℃，作为水相，备用；

第三步：在10-800r/min恒温磁力搅拌下，将油相缓慢加入到水相中，滴加完成后，继续搅拌10-40min，得混悬液；将混悬液趁热转移，并探头超声1-30min，超声功率为20-400w；

第四步：将混悬液趁热转移，并探头超声1-30min，超声功率为20-400w；

第五步：将混悬液在冰水浴中固化5-60min，即得载罗红霉素含量纳米结构脂质载体。

其次，再制作载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂其步骤如下：

第一步：载罗红霉素纳米结构脂质载体溶液，在-80℃以下冷冻至少12h，迅速转移至冷冻干燥机下冻干24h，即制得载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉；

第二步：称取载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉4-7g，溶于4-7g水，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体混悬液，备用；

第三步：称取卡波姆粉末0.01-0.01g，加1-11g水过夜膨胀，滴加pH调节剂0.004-0.02g，调节pH值为6-8，即得浓度为0.1%-1%的空白卡波姆基质；

第四步：向空白卡波姆基质，加入0.001-0.003g山梨酸和1.0-3.0g保湿剂混合物，促渗剂0-1g，充分搅拌；将溶解完全的纳米粒混悬液加入到上述凝胶基质中，充分搅拌，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂。

本发明的有益效果是：纳米结构脂质载体（NANOSTRUCTRUEDlipidCARRIES,NLC）采用生物相容性好、毒性低的类脂材料为载体，加入了化学差异很大的液态油，使纳米粒以结晶缺陷型或无定型结构存在，避免或减小SLN放置过程中药物外排的现象，提高药物的包封率及稳定性。NLC作为皮肤给药的载体，具有下列特点：①缓控释作用可使药物长时间维持在有效浓度；②皮肤靶向性，可促进活动成分透过角质层进入表皮并滞留于表皮深层细胞而发挥功效；③生理相容性，制备的NLC与皮肤的具有良好的亲和性，可促进活性成分在皮肤中渗透，有效作用于皮肤的深层细胞，并且脂质可被生物降解，安全无毒；④闭合效应，可以在皮肤表面形成一层闭合膜，延缓皮肤水分的蒸发，可促进活性成分的吸收；⑤存储稳定性好，不易发生药物泄漏；⑥适宜工业化大批量生产。凝胶剂(gel)是指药物与适宜的辅料制成的均一、混悬或乳剂型的透明或半透明的半固体或稠厚液体制剂，其中应用的最为广泛的是水凝胶。生理条件下不溶于水，具有良好的生理相容性。水凝胶为立体网络结构，可以储存药物，增加粘附性，提高药物局部浓度，由于水凝胶的骨架中保留了一部分水分，所以凝胶质地细腻，涂于皮肤后无油腻感及刺激性，适合皮肤局部外用，得到广泛应用。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明进一步说明。

图1载罗红霉素纳米结构脂质载体粒径分布图。

图2载罗红霉素纳米结构脂质载体电镜图。

图3载罗红霉素纳米结构脂质载体DTA图。

图4载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂的皮肤滞留量对比图。

具体实施方式

一种载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂及其制备方法，分为两个部分制成：

一、载罗红霉素纳米结构脂质载体：

由以下材料重量组分组成：

罗红霉素1-7mg、固态脂质材料45-75mg、液态脂质材料30-60mg、

乳化剂45-300mg、水5-25mL；

所述的固态脂质材料为单硬脂酸甘油脂、双硬脂酸甘油酯、卵磷脂、硬脂酸的一种或组合；

所述的液态脂质材料为Miglyol、肉豆蔻酸异丙酯、大豆油、蓖麻油、中链甘油三酸酯、辛/癸酸聚乙二醇甘油酯一种或组合；

所述的乳化剂为月桂酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯蓖麻油、蓖麻油聚烃氧酯、吐温80、F68（Poloxamer188）、HS15（聚乙二醇十二羟基硬脂酸锂）、聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油、吐温80的一种或组合；

二、载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂：

由以下材料重量组分组成：

载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉4-7g、凝胶基质0.01-0.01g、保湿剂1.0-3.0g、防腐剂0.001-0.003g、pH调节剂0.004-0.02g、水5-15g；

所述的凝胶基质为卡波姆980或940。

保湿剂为丙二醇。

促渗剂为氮酮。

防腐剂为山梨酸。

首先，将罗红霉素制成载罗红霉素纳米结构脂质载体其步骤如下：

第一步：将罗红霉素1-7mg，固态脂质材料45-75mg，液态脂质材料30-60mg，溶于1-5mL乙醇，加热至50-80℃，作为油相，备用；

第二步：将乳化剂45-300mg，水10-20mL，加热至50-80℃，作为水相，备用；

第三步：在10-800r/min恒温磁力搅拌下，将油相缓慢加入到水相中，滴加完成后，继续搅拌10-40min，得混悬液；将混悬液趁热转移，并探头超声1-30min，超声功率为20-400w；

第四步：将混悬液趁热转移，并探头超声1-30min，超声功率为20-400w；

第五步：将混悬液在冰水浴中固化5-60min，即得载罗红霉素含量纳米结构脂质载体。

其次，再制作载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂其步骤如下：

第一步：载罗红霉素纳米结构脂质载体溶液，在-80℃以下冷冻至少12h，迅速转移至冷冻干燥机下冻干24h，即制得载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉；

第二步：称取载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉4-7g，溶于4-7g水，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体混悬液，备用；

第三步：称取卡波姆粉末0.01-0.01g，加1-11g水过夜膨胀，滴加pH调节剂0.004-0.02g，调节pH值为6-8，即得浓度为0.1%-1%的空白卡波姆基质；

第四步：向空白卡波姆基质，加入0.001-0.003g山梨酸和1.0-3.0g保湿剂混合物，促渗剂0-1g，充分搅拌；将溶解完全的纳米粒混悬液加入到上述凝胶基质中，充分搅拌，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂。

实施例1：

①载罗红霉素纳米结构脂质载体

精密称取罗红霉素1mg、双硬脂酸甘油酯75mg、辛/癸酸甘油酯45mg、大豆卵磷脂67mg，溶解于1mL乙醇中，于75℃下水浴熔融，作为油相；精密称取吐温80、F18各80mg，溶解于20mL水中，作为水相。在恒温水浴磁力搅拌下，将油相缓慢加入到水相中，滴加速度0.2mL/min，全部滴加完成后，继续搅拌30min，趁热转移，在20%超声功率下探头超声90s，迅速转移至冰水浴下固化20min，经0.22μm微孔滤膜过滤，即制得罗红霉素纳米结构脂质载体。

②载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂

制备称取载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉4g，用4mL水溶解，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体混悬液，备用；称取卡波姆粉末0.002g，加1mL水过夜膨胀，滴加三乙胺4滴，调节pH值为6-8，即得空白基质；向空白卡波姆基质，加入0.001g山梨酸、1g丙二醇、0.5g氮酮，充分搅拌；将上述溶解好的载罗红霉素纳米结构脂质载体混悬液加入到上述凝胶基质中，充分搅拌，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂。

实施例2：

①载罗红霉素纳米结构脂质载体

精密称取罗红霉素4mg、双硬脂酸甘油酯45mg、辛/癸酸聚乙二醇甘油酯30mg、大豆卵磷脂67mg，溶解于3mL乙醇中，于75℃下水浴熔融，形成油相；精密称取吐温80、F68各38mg，溶解于10mL水中，形成水相。在恒温水浴磁力搅拌下，将油相缓慢加入到水相中，滴加速度0.2mL/min，全部滴加完成后，继续搅拌30min，迅速转移至冰水浴下固化30min，经0.22μm微孔滤膜过滤，即制得罗红霉素纳米结构脂质载体。

②载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂

制备称取载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉5.5g，用7mL水溶解后，备用；称取卡波姆粉末0.01g，加3mL水过夜膨胀，滴加三乙胺4滴，调节pH值为6-8，即得空白基质；向空白卡波姆基质，加入0.003g山梨酸、0.5g丙二醇、2g氮酮，充分搅拌；将上述溶解好的载罗红霉素纳米结构脂质载体混悬液加入到上述凝胶基质中，充分搅拌，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂。

实施例3：

①载罗红霉素纳米结构脂质载体

精密称取罗红霉素7mg、单硬脂酸甘油酯60mg、中链甘油三酸酯60mg、大豆卵磷脂67mg，溶解于5mL乙醇中，于75℃下水浴熔融，形成油相；精密称取吐温80、HS15各150mg，溶解于处方量水中，形成水相。在恒温水浴磁力搅拌下，将油相缓慢加入到水相中，滴加速度0.2mL/min，全部滴加完成后，继续搅拌30min，迅速转移至冰水浴下固化10min，经0.22μm微孔滤膜过滤，即制得罗红霉素纳米结构脂质载体。

②载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂

制备称取载罗红霉素纳米结构脂质载体冻干粉7g，用7mL水溶解，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体混悬液，备用；称取卡波姆粉末0.3g，加3mL水过夜膨胀，滴加三乙胺3滴，调节pH值为6-8，即得空白基质；向空白卡波姆基质，加入0.001g山梨酸、3g丙二醇，充分搅拌；将上述溶解好的载罗红霉素纳米结构脂质载体混悬液加入到上述凝胶基质中，充分搅拌，即得载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂。

上述制备好的罗红霉素纳米结构脂质载体用水稀释后，在MalvernZETASIZERNano-ZS90下测定纳米粒粒径，大约120nm左右。如图1所示，在HitachiS-576下观察纳米粒形态分布，纳米粒城椭圆形，且形态分布均匀；如图2所示，在MalvernZETASIZERNano-ZS90下测定纳米粒粒径，大约45nm左右；如图3所示，使用恒久差热仪测定纳米粒物理存在状态，罗红霉素的熔点发生改变，以无定型形式存在。

在体外透皮实验中，将离体的小鼠腹部皮肤固定于Franz扩散池上，角质层面向供给池，释放介质为17mL20%乙醇-吐温80的PBS溶液，32℃恒温水浴，600rpm磁力搅拌，分别取1g小粒径-载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂（本专利）、罗红霉素普通凝胶（对照）和大粒径-载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂（对照）均匀涂布在皮肤角质层上。24h后将皮肤取下，洗净，用手术剪剪碎研磨，用乙醇提取滞留在皮肤层内的罗红霉素。同时将小粒径-载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂（本专利）、罗红霉素普通凝胶（对照）和大粒径-载罗红霉素纳米结构脂质载体凝胶剂（对照）用乙醇破乳溶解，即样品中总药量。将所取样品进行处理，进HPLC测定药物含量。

结论：如图4所示。对比三种制剂的透皮释放差别，纳米粒凝胶剂的皮内滞留量明显高于普通制剂，小粒径-纳米结构脂质载体载体凝胶皮内滞留量明显高于大粒径-纳米结构脂质载体载体凝胶。