丹参酮IIA纳米结构脂质载体凝胶剂的制备及其抗银屑病药效的初步研究

摘要

植物丹参（ Salvia miltiorrhiza Bunge）的主要有效成分是丹参酮 IIA（Tanshinone IIA, Tan IIA），它属于菲醌类化合物。近年来，Tan IIA在临床上已被广泛地应用于银屑病、特应性皮炎及其他炎症相关疾病的治疗和预防[1]。由于Tan IIA属于强脂溶性成分，难溶于水，遇光、热时易分解，透皮吸收差，极大的限制了其药效的发挥[2-3]。纳米结构脂质载体（ Nanostructure lipid carrier, NLC）是一种新型脂质纳米给药系统[4]，能够显著提高药物的溶解度和稳定性，增加药物对皮肤的生物利用度。本文制备了丹参酮IIA纳米结构脂质载体（Tan IIA-NLC）及其凝胶剂，并对Tan IIA-NLC及其凝胶剂进行了初步评价。主要结果如下：
　　本文采用高压乳匀法制备了Tan IIA-NLC，通过Box-Behnken设计-效应面法优化处方，最终确定工艺条件为：避光条件下，5.86%GMS和2.94%Miglyol?812水浴加热成熔融状态，再向其中加入0.10%Tan IIA原料药，混匀后作为油相。将1.00%的F68溶于蒸馏水中，加热至相同温度，作为水相。在70℃的条件下，将同温度的油相滴入水相中，滴加完毕后持续搅拌20 min，转速为2000 r·min-1，将得到的初乳以13300 r·min-1的转速高速剪切5次，每次1 min，再在12000 psi条件下均质循环6次，室温下用流动水冷却固化，0.45μm微孔滤膜过滤。所得纳米粒粒径为（182±14）nm，多分散指数(PDI)为（0.1906±0.0245），Zeta电位为（-27.8±5.4）mV,包封率(EE)为86.44±9.26%，载药量(DL)为0.98±0.18%， DSC及XRD的表征结果均表明Tan IIA以无定形状态存在于NLC中。
　　本文对Tan IIA-NLC的光稳定性及体外评价进行了研究。结果显示，NLC能显著降低光对Tan IIA的降解，光照24 h后仅下降7.04%；体外释放试验显示， Tan IIA-NLC具有先突释后缓释的释放行为，72 h累积释放量为52.28%；体外透皮试验结果显示，在24 h时，Tan IIA-NLC的药物累积透过量低于Tan IIA溶液，但其在表皮的药物滞留量是Tan IIA溶液的3.06倍；Tan IIA在一定范围内以剂量依赖性的方式抑制HaCaT细胞增殖，与同质量浓度的Tan IIA溶液相比， Tan IIA-NLC对HaCaT细胞增殖的抑制作用更强。
　　本文采用直接溶胀法制备丹参酮 IIA纳米结构脂质载体凝胶剂（ Tan IIA-NLC-gel），在单因素考察的基础上，应用星点设计-效应面法优化处方，最终确定工艺条件为：称取0.68 g卡波姆940置适量蒸馏水中溶胀24 h，再依次加入Tan IIA-NLC50 mL、氮酮1.17 g、丙二醇8.95 g，混合均匀，边搅拌边加入20%三乙醇胺，直至pH值为5.5～6.5，最后加适量蒸馏水至100 g，即得皮肤滞留量为（17.12±2.38）μg·cm-2的Tan IIA-NLC-gel。凝胶复溶后的粒径、PDI、Zeta电位分别为（198±15）nm，0.218±0.022，（-43.5±4.6）mV；凝胶的pH值为6.07±0.11，粘度系数为（45.2±3.8）Pa.s，符合外用制剂的标准；稳定性试验结果表明Tan IIA-NLC-gel的稳定性较好（室温放置90天）；药效试验结果显示Tan IIA-NLC-gel在抗银屑病方面具有良好的疗效，且对完整皮肤无刺激性。

目录

引言

1.1 丹参酮IIA概述

1.2 纳米结构脂质载体的研究概况

1.3 皮肤用凝胶剂的研究概况

1.4 疾病研究现状

1.5 本课题研究目的和意义

第一章 丹参酮IIA纳米结构脂质载体检测方法的确定及处方前研究

1.1 前言

1.2 实验材料

1.3 实验仪器

1.4 Tan IIA-NLC含量测定方法的建立

1.5 Tan IIA的在不同脂质中的溶解度

1.6 Tan IIA油水分配系数

1.7 包封率与载药量的测定

1.8 讨论与小结

第二章 丹参酮IIA纳米结构脂质载体的制备

2.1 仪器和材料

2.2 实验方法

2.3 讨论与小结

第三章 Tan IIA-NLC的光稳定性及体外初步评价

3.1 仪器与材料

3.2 Tan IIA-NLC的光稳定性研究

3.3 Tan IIA-NLC体外释药的测定

3.4 Tan IIA-NLC的体外透皮吸收研究

3.5 Tan IIA-NLC对HaCaT细胞细胞增殖的影响

3.6讨论与小结

第四章 丹参酮IIA纳米结构脂质载体凝胶剂（Tan IIA-NLC-gel）的制备和表征

4.1材料与仪器

4.2 Tan IIA-NLC的制备

4.3 Tan IIA-NLC-gel的制备

4.4 凝胶基质的选择

4.5 保湿剂丙二醇用量的选择

4.6 Tan IIA-NLC-gel体外皮肤滞留量的测定

4.7 皮肤中药物滞留量试验

4.8 星点设计-效应面法优化Tan IIA-NLC-gel的处方

4.9 Tan IIA-NLC-gel理化性质的考察

4.10 讨论与小结

第五章 Tan IIA-NLC-gel对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型的治疗作用

5.1 实验材料与仪器

5.2 实验方法

5.3 Tan IIA-NLC凝胶对银屑病动物模型的影响

5.4 实验结果

5.6 皮肤刺激性试验

5.7 讨论与小结

第六章 全文总结

6.1 研究总结

6.2 创新点

6.3 问题与展望

参考文献

致谢

在校校期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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