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一种土壤样品中微生物基因组的快速提取方法

摘要

本发明公开一种土壤样品中微生物基因组的快速提取方法,将土壤样品在液氮中研磨粉碎,粉碎后样品中加入基因组提取缓冲液,37℃水浴温育30min,然后加入蛋白酶K溶液和SDS溶液,55℃水浴30min,离心弃沉淀,收集上清液,用苯酚第一次抽提,离心收集上清液,用苯酚、氯仿和异戊醇的混合液第二次抽提,离心收集上清液,向上清液中加入乙醇或异丙醇,将全部液体离心通过DNA回收纯化柱,回收纯化柱再次经高速离心干燥,最后加入DNA洗脱液,经离心得到微生物基因组样品。本发明提取的基因组产量可以达到80ug/g;DNA完整性高,大小在23kb以上,没有RNA或者蛋白质的污染,OD260/OD280接近标准值。

著录项

  • 公开/公告号CN105441423A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2016-03-30

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 安徽远大机械制造有限公司;

    申请/专利号CN201510876679.5

  • 发明设计人 高宇;

    申请日2015-12-03

  • 分类号C12N15/10;

  • 代理机构安徽省蚌埠博源专利商标事务所;

  • 代理人倪波

  • 地址 233000 安徽省蚌埠市高新区嘉和路与黄山大道交叉口

  • 入库时间 2023-12-18 15:12:07

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2018-12-04

    发明专利申请公布后的视为撤回 IPC(主分类):C12N15/10 申请公布日:20160330 申请日:20151203

    发明专利申请公布后的视为撤回

  • 2016-04-27

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/10 申请日:20151203

    实质审查的生效

  • 2016-03-30

    公开

    公开

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