用于预防早产的含有延长、不变和持续释放的孕酮的环扎子宫托

摘要

含有均匀分布在子宫托体中的孕酮的环扎子宫托提供了延长、保持不变和持续的释放，持续至少6个月的时间段，其中子宫托由具有RTV(室温硬化)机理的二甲基硅氧烷弹性体组成，孕酮含量为20％至30％w/w，相对于子宫托重量，并且形成基质的聚合物的比例为6:1至14:1。环扎子宫托用于预防早产。由于本文中所用的形成聚合物基质的弹性体不是生物可降解的，孕酮通过聚合物持续扩散，没有改变子宫托的形状和完整性。这确保了子宫托的形式保持完整，直至治疗结束。

说明书

本发明由含有持续不变释放的孕酮的子宫颈子宫托组成，所述子 宫颈子宫托以每天20至30mg的含量持续和稳定地释放激素长达至少 6个月的时间段，用于预防早产。

现有技术

早产，在怀孕37周前，具有约10％的发生率，是全世界最重要 的围产期发病率和死亡率的诱因(Iam等，2008；Goldenberg等，2008； Draper等，1999)。早产占全世界约28％的新生儿死亡(Menon，2008)， 在32至36周之间最关键；在这时间段中，1％活着出生的儿童没有在 生命的头一年存活下来(Martin等，2003)。死亡率和发病率与胎龄 成负相关，并且尽管新生儿护理的发展已经有相当大的提高，但在非 常早产的存活婴儿中仍然存在相当大的无能风险(Marlow等，2005； Saigal等，2008)。

从可获得的信息看，已知早产不是由于单一状况引起的，因此不 存在用于预测的简单测试，更不用说能够预防早产的简单干预 (Romero，2011)。单胎或双胞胎怀孕中的自然性早产风险的最重要 诱因之一是缩短的子宫颈长度。在怀孕20-24周之间通过经阴道超声 波的测量，已经成为鉴别可能具有自然性早产的女性中考虑的重要前 例(IamsJD等，1996；CelikE.等，2008；OwenJ等，2001)。已 经观察到子宫颈长度越短，发生早产的风险越高(VCHeath等，1998； SoukaAP等，1999)。预测早产时，还必须考虑自然性早产和后期流 产的病史(GoldenbergRL等，1996；ToMS等，2006)。

早产的预防

早产预防中使用的策略之一是在怀孕中间将孕酮预防性地给药于 有早产病史的妇女以及子宫颈短和单胎怀孕的那些。孕酮用于防止早 产的作用机理一方面似乎与停止或减缓子宫颈成熟中涉及的生化事件 的级联的局部抗炎作用有关，并且其次，通过子宫收缩时的轻微抑制 作用，以这种方式，保持子宫休息(Jayasooriya等2009；Grazzini 等，1998；Astle等，2003)。

在公开的临床研究中(DaFonsecaEB等，2007；DeFrancoEA 等，2007；HassanSS等，2011.)，描述了使用不同剂量和给药途径 的孕酮，用于预防早产：250mg的孕酮，IM每周，从22周开始；从 24至34周，200mg每日的阴道孕酮栓剂；从20至36周，90mg的孕 酮阴道凝胶。以上所有的显示出大约40％的功效(33或34周后，自 然早产的比例)。

源自随机临床试验和综合分析的证据揭示了阴道给药的孕酮在预 防具有短子宫颈的病人的早产中是有效的(Campbell等，2011； Romero等，2011)。然而，即使已经显示出在33-34周前显著降低了 自然早产的比例(约低于40-45％)，但仍然有55-60％具有缩短子宫 颈的病人，尽管给予了孕酮，还是在34周前生产了(Dodd等，2005； Berghella，2009；Hassan等，2011)，这与这种状况的多因素性质相 一致(Romero等，2011)。

阴道宫颈环扎或Shirodkar或MacDonald环扎，对应于围绕子宫 颈进行的外科手术，已经被提议为具有单胎怀孕和短子宫颈的病人的 可替换预防方式，但在之前没有子宫颈功能不全病史的病人中的结果 仍然是有争议的，并且哪些病人可以真正地得益于这种治疗仍然在讨 论中(Romero等，2006)。Simcox等(2009)的出版物显示了显示 短颈的环扎预防早产的结果与基于之前的产科病史表示环扎的组相 似，因此等待子宫颈缩短，以进行该手术未证明是适当的。此外，临 床研究的综合分析的结果推断对于降低具有早产病史和<25mm短子 宫颈的单胎怀孕妇女的早产率，阴道孕酮与宫颈环扎一样有效 (Conde-Agudelo等，2013)。

环扎的可替换方式是使用未加药的子宫颈子宫托，从1959年开始 用于预防早产。在理论上，其作用是基于机械能力，其必须将子宫颈 移动至后部区域，略微增加颈长并且改变子宫颈角度，这巩固了子宫 颈管并且还降低了膜与阴道环境接触的机会，因此有助于保持其完整 性(Caritis等，2012；Arabin等，2013)。Cannie等(2013)的研 究提供了在具有短子宫颈的单胎怀孕中，子宫颈子宫托通过对子宫颈 角度的机械作用延迟了生产的证据；放置子宫托后立即测量的角度明 显比放置前更尖锐，并且保持未改变直至取出。这将避免在内口和子 宫颈自身水平的对膜的直接压力。结果，子宫重量将逐渐增加地朝向 前面较低的子宫部分转移。此外，子宫托可以防止内口打开，这常常 与羊膜和绒膜的分离相关，主要在垂直的母体位置(Arabin等，2006)。 通常，怀孕女性中不成熟的子宫颈在后部位置，朝向骶骨，这使得在 子宫部位上而不是在子宫颈内口上施加子宫内压力和胎先露 (Berghella等，2003)，防止其早期扩张。子宫颈子宫托的另一个益 处是它们有助于维持胚胎外绒羊膜空间和阴道微生物菌丛之间的免疫 屏障，与假定的外科环扎机理相似。子宫颈子宫托相对是非入侵性的； 不依赖于操作者干预并且可以容易地安置或取出，不需要外部医疗中 心的麻醉。

硅酮Arabin子宫托是最常见的并且可以找到不同直径和高度的 尺寸(Dr.Arabin的子宫托-http://www.dr-arabin.de/e/intro.html)。 安置后，简短地观察病人，以确保没有不适、阴道出血或子宫活动。

在通过常规超声波的双胎妊娠且子宫颈长度低10个百分点的妇 女的配对分析的追溯研究中，23个病例用子宫托治疗，23个通过怀孕 管理。32周前的自然生产比例在子宫托组中为0％，在对照组中为30％ (p<0.001)。在相同的研究中，12名单胎妊娠的妇女用子宫托治疗， 12名通过怀孕管理。36周前的自然早产比例在子宫托组中为0％，在 对照组中为50％(p<0.001)(ArabinB.等2003)。此外，在西班牙 380名妇女中进行的多中心研究中，将具有早产病史和子宫颈≤25mm 的一些，随机分配至使用子宫颈托或怀孕管理。在使用子宫托的组中， 观察到，与对照组相比，34周妊娠的出生率(6.3％vs26.8％)和新 生儿发病率(4.2％vs22.1％)分别都有显著下降(GoyaM等，2012)。 对使用子宫托预防早产存在许多其他观察性或病例-对照研究。这些从 1959年开始的研究已经给出了有前景的结果，不存在严重的不利作用 (Cross，1959)。

Alfirevic等(2013)进行了上述三种干预的间接比较：1)给药阴 道孕酮；2)环扎，和；3)使用子宫颈子宫托，用于预防具有至少一 次在34周早产的病史并且子宫颈长度短于25mm的无症状单胎妊娠 怀孕妇女的早产。结果表明三种策略具有相似的有效性，观察到三个 处理组中37周前的早产数量没有显著差异。然而，主要结果是使用子 宫颈子宫托具有较低的34周妊娠前的早产比例，这在统计学上是显著 的。通常，34周时的早产比例在用孕酮或环扎治疗的组中接近30％， 与使用子宫颈子宫托的组的12％相比(Alfirevic等，2013)。

此外，使用孕酮作为预防具有证明的自然早产病史妇女早产的预 防手段，很快被接受，尽管需要鉴定使用孕酮的配方、剂量和理想的 给药途径。

目前用于预防早产的三种主要临床策略：孕酮、子宫颈环扎和插 入环扎子宫托，不足以降低整体的早产比例，其在这些年中仍然保持 不变。对于可以给予这种主要的公众健康问题解决方法的新治疗方法 存在迫切需求。

发明内容

本发明的发明人令人惊讶地研发了一种新的技术，其将孕酮和环 扎子宫托的有益作用结合在一起，以在单个装置中传递激素的药物作 用和子宫托的机械作用，用于从安置子宫托那刻开始的整个妊娠阶段， 在子宫颈中只有安置装置的干预。

这种新的装置是由含有孕酮的二甲基硅氧烷弹性体制成的环扎子 宫托，将其插入具有早产风险的病人的子宫颈中并且保持安置状态， 没有进一步干预，除了在取出时。子宫托在安置的整个时间中持续和 保持不变地释放孕酮，其可以从妊娠16周直至366/7周或直至生产时。 子宫托不需要取出来装满孕酮以维持整个时间过程中由子宫托传递的 孕酮水平，因为孕酮含量及其释放模式足以在整个治疗期间提供激素。

在现有技术中，不存在如本文中所述的由含有孕酮的二甲基硅氧 烷弹性体制成的具有延长、保持不变和持续释放激素的子宫颈子宫托。 本发明的子宫托设计确保在整个治疗期间维持孕酮的局部释放，没有 干预子宫托来再装填或补充活性成分。

在现有技术中，存在各种局部传送活性成分的阴道装置，如阴道 环。作为参考，专利文献US5869081、US415991、US20080248017公 开了含有激素的环，所述激素如孕酮。尽管它们是延长释放的环，但 只释放激素持续14-36天的时间段。

US20090264395公开了一种方法，其涉及使用含有孕酮的阴道内 环或现有技术的其他装置，并且表明可以每周或每日给药，以防止早 产。

US20040089308描述了一种含有孕酮的子宫颈环，其与子宫颈形 成吸力啮合，使其停留在子宫颈上。没有提及释放孕酮有多久。

如WO2012170578和WO2006010097中，还描述了含有用于释放 活性成分的层的环。WO2011011099描述了包含至少三层硅酮弹性体 的环。

此外，在WO2009099586中，公开了整体式的阴道内环，其包含 均匀分散在聚硅氧烷弹性体中的孕酮和药物学上可接受的烃或脂肪酸 甘油酯；及其制造方法和用于治疗病人黄体期缺乏的用途。孕酮的浓 度为环的15-30％重量，并且以大约15至25mg/天的速率释放1至14 天。在给药7天后，更换环。

WO199922680公开了一种包括表面储器的子宫托；以及可以插入 储器中的可插入药筒。该装置可以容易地加载至使用的子宫托中，并 且在一段时间后，一旦药物已经从筒中传送出来，可以将该装置取出。 该装置在30-90天的时间段中持续释放。

存在几种方式来通过阴道传送活性成分。其中包括阴道环，将其 用作在局部部位释放活性剂的介质或载体。这些分配器的目的仅仅是 局部释放，而装置自身没有另外的作用，持续有限的时间段。

此外，已经提出了使用含有孕酮的子宫托用于预防早产(Romero 等，2013)，甚至DE2012009057描述了在大约1-5个月期间具有延 长孕酮释放的旋转子宫托。这种子宫托在生物可降解层中含有活性成 分，其应用于子宫内装置表面上的活动子区中，因此孕酮由一个或多 个层携带，这取决于应用子宫托时的妊娠阶段。根据层的数量，使得 活性化合物的使用适于活性成分需要的时间，并且例如，短的施用时 间将需要一层，诸如此类。聚合物用作施用层的载体，大部分不溶于 水。还使用了支持材料与其结合的溶剂或选定溶剂的混合物，例如， 根据聚合物溶剂的性质或与水和油相的可混性。在溶剂选择中，还应 当考虑液体载体与体液的可混性、外相和可以影响载体相的固化。载 体相的粘度还可能受到通过支持物的溶剂的特征的影响，例如，分子 量和浓度的影响。

DE20121009057中所述的子宫托中所含的活性物质，包含在至少 一层生物可降解层中，分布在支持子宫托的表面的至少一部分中，具 有0.01至2mm的厚度，优选0.1-1mm。还注意到位于支持子宫托内 部的室，在活性物质排出后，可以再充填，或再加载，优选通过支持 子宫托表面中的开口，其中所用的活性物质的含量为10-100mg，优选 30-50mg。

在本发明中，描述了与DE20121009057中所述的子宫托非常不同 的子宫托。最实质性的差异在于：1)DE20121009057的子宫托由含 有孕酮的生物可降解层形成；相反，本发明的加药子宫托不具有层， 而是激素均匀地分布在整个子宫托体中。2)DE20121009057子宫托 中的孕酮加载物被排空，因此子宫托必须再充填活性成分；相反，本 发明的子宫托中的孕酮含量没有被排空，因此从制造时所含的装载物， 对于整个治疗阶段是足够的并且是非常充裕的，其可以长达5或6个 月。3)子宫托的配制也是非常不同；DE20121009057子宫托需要添 加溶剂；然而，在本申请中，溶剂是形成环部分的相同结构聚合物， 并且提供了激素延长释放所需的基质。4)DE20121009057子宫托的 设计是复杂的，因为其具有其中加载活性成分的室和再填充所述室的 表面开口；相反，本发明的设计简单，因为其是不需要再填充的连续 体，并且令人惊讶地适用于长时间的激素释放。

对于所有现有技术，没有预言由具有室温硬化(RTV)机理的二 甲基硅氧烷弹性体制得的子宫颈子宫托的设计，如本发明的加药子宫 托可以确保延长、保持不变和持续的释放，从其安置开始长达约5-6 个月的时间段。也没有预料到尺寸显著大于现有技术中公开的含孕酮 装置(如，例如，阴道环)的子宫托中，激素均匀分布并且在长时间 治疗期过程中以足够的含量释放，同时确保环扎子宫托的机械作用。

发明详述

对于预防早产的改进疗法存在需求，所述疗法安全、有效、易于 使用、确保依从性以及对母亲和胎儿需要最小的干预。

本发明的加药装置由环扎子宫托组成，所述子宫托由含有均匀分 布的孕酮的二甲基硅氧烷弹性体形成，其具有延长的激素释放，持续 至少5至6个月的长时间段，并且安置在具有早产风险的妇女体内， 从妊娠16周开始，在母体中不再有干预，直至在366/7周或在分娩时 取出子宫托时。孕酮在聚合物中持续扩散，没有改变子宫托的形状和 完整性，因为形成本发明中所用的聚合物基质的弹性体不是生物可降 解的。这确保了子宫托的形式保持完整，直至治疗结束。

现有技术不存在如本文中所述的，由具有室温硬化(RTV)的二 甲基硅氧烷弹性体制得的环扎子宫托，也不存在包含均匀分布在整个 子宫托体的孕酮环扎的子宫托。这种子宫托的设计令人惊讶地允许发 明人添加足够的孕酮并且获得保持不变和延长的释放，持续长达六个 月的时间段。

一旦将子宫托安置在母体内，不应当取出再填充活性成分，因为 其设计和配制成在装置内含有整个治疗期以及延长和保持不变的激素 释放所需的孕酮含量，直至应当取出时，在妊娠366/7周或更晚时， 或之前，如果治疗医生认为需要时。

附图简述

图1.为制备本发明子宫托设计和使用的模具设计。在横截面图 中，可以看到刺穿子宫托的针的位置。

图2.用于生产本发明子宫托的青铜模具的数码相片，与加热系统 连接。

图3.用于生产本发明子宫托的青铜模具的数码相片，静止，以及 该模具中所含的子宫托。

图4.本发明的子宫托的数码相片，表A：顶端视图，将其朝向子 宫安置在子宫颈中；表B：侧视图，其显示出子宫托曲面中的孔；表 C：子宫托的下端视图，其中可以看到它们的圆形端。

图5.本发明的加药环扎子宫托的设计。显示了子宫托的主要尺寸 的位置。D1：较大的外径；D2：加大的内径；D3：较小的直径；H1： 高度。

图6.从包含22.5％、28％和30％孕酮的环扎子宫托的孕酮体外 释放谱。子宫托包含8:1比例的聚合物A和B(R＝8:1)。

图7.从包含22.5％孕酮的环扎子宫托的孕酮体外释放谱。子宫托 包含6:1、8:1、10:1、12:1和14:1比例(R)的聚合物A和B。

图8.经阴道超声波(EcoTV)、核磁共振(NMR)和数码照相 的图片。表A：具有早产风险的妇女的EcoTV，其具有围绕子宫颈安 置的本发明的子宫托；表B：相同妇女的NMR图像，其中展示了包 含和附着到子宫颈的子宫托；表C：具有短子宫颈的妇女的数码相片， 本发明的子宫托位于子宫颈内。

加药子宫托的制造方法：

对于本发明的加药子宫托的制造，通过注射进行模具的设计和构 造。模具从青铜SAE640材料制得，用于形成根据图1中所示规格和 设计的加压子宫托。模具具有六根穿刺针、温控系统(其含有加热器、 热电偶、电子温度控制板)和结合的板基，如图2和3中所示。为了 获得子宫托，将活性成分和聚合物的混合物通过位于模具顶部的孔注 入，填充指示器位于上端一侧。

制造方法的步骤：

1.原材料的称重

·在合适容量的制药级不锈钢容器中，称重按照表1中所述的根 据将要使用的制剂的每种成分的所需量。然后转移至搅拌器中。

·在聚乙烯薄膜袋中称重根据待测试配方的微粉化孕酮，如表1 中所示。

2.混合程序

·使用手动搅拌将微粉化孕酮缓慢加入基料聚合物A中，避免加 入空气；必须记录将微粉化孕酮掺入聚合物中的日期。进行质量控制， 以评价混合物均一性。

3.聚合过程

·根据所用的聚合物A和B的比例，如表1中针对每种制剂所示 的，将段落2中获得的等份混合物提取、称重并转移至不锈钢容器中

·在聚合物添加后立即混合，直至混合物均匀(均一且鲜亮的外 观)，在时间表中记录每个等份制备的日期和时间。

·将这最终的混合物加入合适容量的不锈钢注射器中，并引入模 具进口中。

·将注入模型中的混合物在80±10℃的温度下保持15-20分钟，在 时间表中记录时间和温度。

·一单完成该程序，则打开模具并移出子宫托。

本发明的孕酮环扎子宫托的物理特征

本发明的环扎子宫托是由具有RTV反应机理的二甲基硅氧烷弹 性体制成。

其是白色、柔性、圆锥形圆形装置，具有紧实的稠度，在其表面 上分布有中心孔和六个孔，如图4中所示。

已经报道了使用子宫托和阴道环出现增加的阴道排出物，因此在 本发明中，为了促进排泄，优选使用在整个部分分布有孔的子宫托。 所述孔具有3.0mm±0.2mm的直径。

在图5中所示的图解中，显示了针对本发明的子宫托的以下尺寸 的位置：

·较大的外径(D1)：65mm±5mm

·较大的内径(D2)：50mm±5

·高度(H1)：25mm±2mm

·较小的直径(D3)：33.5mm±1.5mm

加药子宫托的重量为30g±5g

示例性配方

制得了包含不同含量孕酮的坏扎子宫托，孕酮以20％至30％w/w 的含量均匀地分布于装置体中。这些配方包含不同比例的RTV硅酮 弹性体。

在表1中，描述了本发明的一般配方(GF)。详细说明了使用的 聚合物的不同比例。

表1.具有不同聚合物A和聚合物B比例的含有孕酮的环扎子宫 托的配方。每种配方以％w/w表示为一般配方(GF)

加药子宫颈子宫托的特定配方：

制得了通过二甲基硅氧烷聚合物形成的含有20至30％孕酮的子 宫托，含有可变比例的聚合物A和聚合物B，其中第一种是含有25％ 无定形硅石和铂催化剂的聚二甲基硅氧烷-乙烯基聚合物，而第二种是 20％二甲基甲基氢硅氧烷和聚二甲基硅氧烷的共聚物。

在以下表2至6中，显示了本发明的子宫托配方。所有包含相同 的弹性体，但由不同比例的起始聚合物形成。

表2：以聚合物A:聚合物B＝6:1和7:1比例的用孕酮加药的子宫 托配方

表3：以聚合物A:聚合物B＝8:1和9:1比例的用孕酮加药的子宫 托配方

表4：以聚合物A:聚合物B＝10:1和11:1比例的用孕酮加药的子 宫托配方

表5：以聚合物A:聚合物B＝12:1和13:1比例的用孕酮加药的子 宫托配方

表6：以聚合物A:聚合物B＝14:1比例的用孕酮加药的子宫托配 方

制备了含有5g至10.5g孕酮的子宫颈子宫托，聚合物A和B的 比例如表1至6中所示。

本发明的加药子宫托中的活性成分的性质和评价：

为了确定子宫托中含有的孕酮的性质和评价，使用了以下条件和 程序：

色谱条件：

柱：AgilentEclipseXDBC-18(4.6×150mm)(5μM)

移动相：乙腈：60％

水：40％

流动速率：1.0mL/min

波长：240nm

注射体积：50μL

大约的停留时间：8.0min

标准溶液：

在100mL容量瓶中精确地称重约50mg±1mg孕酮第二标准品。 加入60mL甲醇，超声波处理2分钟，用甲醇定容。取2.0mL的等份， 并转移至含有移动相的100mL烧瓶中。均化。通过0,45μm的膜滤器 过滤(C＝0.01mg/mL)。

样品溶液：

称重10个子宫托并确定它们的平均重量：取子宫托并切割以打 开。小心地纵向切成约2mm的碎片并且将碎片放在清洁干燥的容器 中。称重相等的子宫托并且放入具有密封盖的250mLErlenmeyer烧 瓶中，加入150mL二氯乙烷，盖上盖子，放在磁搅拌器上并搅拌18 小时。将所获得的提取物定量转移至200mL容量瓶中，用少量二氯乙 烷冲洗子宫托残留物，用二氯乙烷定容，均化。

取2.0mL这种溶液的等份试样并转移至200mL烧杯中，在氮蒸 汽下小心地蒸发至干，用25mL甲醇溶解残余物，温和地超声波处理 2分钟并定量转移至50ml容量瓶，用少量甲醇冲洗，用甲醇定容，均 化。从这溶液中取出5.0mL体积等份试样，并放入含有移动相的 100mL容量瓶中，均化。通过0,45μm膜滤器过滤(C＝0.01mg/mL)。

按照需要，调节子宫托的稀释度

程序：

分开注入50mL标准品和样品溶液，获得相应的色谱图并测定峰 下面积。

计算：

其中：

As＝样本溶液中孕酮峰下的平均面积

Ast＝标准溶液中孕酮峰下的平均面积

Wst＝孕酮标准品的重量，mg

％R＝标准品的纯度，以％计

Wspl＝以mg计的样品重量

PAW＝以mg计的子宫托平均重量

使用执行过的和确认过的分析方法，将以上测试接受物理-化学分 析，遵照基于设计需要建立的产品规格

体外释放研究

研发了实验方案，用于体外激素释放至少五个月时间段的研究， 以评价释放谱，在所示的时间段内每天定量释放的孕酮mg量。

方法学：

方法：UV分光光度法

波长：262.4nm(扩散介质)

240nm(样品)

石英比色皿：1cm深度

扩散介质：

将约64.26mL的50％苯扎氯铵加入沉淀容器中，加入约200mL 的重蒸水，溶解，直至完全溶解。将苯扎氯铵溶液定量转移至1.0L烧 瓶中，并用重蒸水稀释。然后将所得到的溶液转移至里面含有23L重 蒸水的具有排出口的聚乙烯鼓中，搅拌直至均质。所获得的浓度为 1:750。

在1cm的比色皿中在262.4mm测量扩散介质的吸光值，使用蒸 馏水作为空白。吸光值范围必须在1.3至1.6，否则溶液应当被丢弃。

标准溶液的母液

精确称重约25mg标准孕酮，转移至50mL容量瓶中，加入25mL 乙醇，溶解，并用乙醇定容。分配至5mL具有螺帽的试管中，标上名 称、浓度和日期。冷藏保存。

稀释的标准溶液：

从之前加热至室温的标准溶液的母液，取200μL等份试样，并转 移至10mL容量瓶中，并用扩散介质定容(C＝0.01mg/mL)。将该程 序重复四次。

样品溶液：

将900mL扩散介质加入六个1000mL聚乙烯宽口螺帽瓶中。单独 称重6个子宫托，记录它们的重量并给每一个分配一个数字。给每个 子宫托系上合适长度的聚乙烯纱线，以完全浸没在扩散介质中，将子 宫托引入瓶子中，然后用胶带将纱线固定在其外表面上。

子宫托必须放置在离瓶子基底2±0.2cm处。

给每个瓶子标记重量和相应的子宫托数量。盖上每个瓶子，并且 将它们放入37±0.5℃的合适水浴中，并且在100rpm±5rpm下搅拌。

每天检查和记录水浴槽的温度和搅拌速度。

每24小时，在相同的时间，更换每个瓶子的扩散介质。在每个周 日，获取每个瓶子的20mL等份试样，并丢弃剩余的扩散介质。从相 同批次获取10mL等份试样，并转移至50mL容量瓶中，并用扩散介 质定容。按照需要，必须获得0.3至0.7吸光值读数，否则必须用相同 批次的扩散介质调节。

在1cm石英比色皿中在240nm下测量等份试样和稀释的标准溶 液的吸光值，并使用扩散介质作为空白。

以相同的方式继续进行测试，直至完成150天。

计算稀释的标准溶液的平均吸光值时，变异系数应当不超过 2.0％。如果没有满足这一要求，必须重复稀释。根据以下公式，计算 每天释放的孕酮mg数：

孕酮的mg数＝吸光系数×As

其中：

As＝样品的吸光值

其中：

Cds：稀释的标准溶液的浓度。

Vt：扩散介质900mL的总体积

Vds：样品的最终稀释体积。

AAs：稀释的标准溶液的平均吸光值。

Vs：获取用于稀释的样品体积。

使用所述的分析程序，使用表2-6中所述的加药子宫托，进行了 体外释放研究。

在图6中，观察了从含有不同含量孕酮(22.5％、28％和30％， 分别对应于每个子宫托中6.75g、8.4g和9g孕酮)的用A:B＝8:1(R＝8:1) 聚合物比例制备的三个子宫托的孕酮释放。即使从22.5％子宫托的孕 酮释放趋于低，但没有观察到三个曲线之间的显著差异。初始释放(第 1天)分别为59、62.1和63.1mg，在第150天(5个月孕酮释放)达 到21.4、22.4和23mg，并且在第182天(6个月孕酮释放)达到17.9、 18.8和22.3mg。在120到150天之间释放的孕酮的平均含量分别为 22.4、18.8和22.3mg。

这些结果表明了从含有22.5％、28％和30％激素的子宫托的孕酮 释放没有显著差异，可能这是由于子宫托加载和活性成分释放都达到 了饱和的事实引起的。

另外，由于聚合物固化过程中的复杂性和比例不恰当时发生聚合 的困难性，评价了不同比例的聚合物A和B对激素释放谱的影响。

图7显示了从6:1、8:1、10:1、12:1和14:1聚合物比例(R)的 含有22.5％孕酮的子宫托的释放。结果是令人惊讶的，因为释放谱实 质上是相同的，并且在初始释放(第1天)和最后一个月(120-150 天)中释放的孕酮含量(分别达到24.6、23.3、23.0、22.4和23.9mg) 中，都没有观察到差异。

因此，本发明的聚合物A相对于聚合物B的优选比例为6:1至 14:1，因为其没有显著影响开始时和最后一个月中释放的孕酮含量， 以及没有改变激素从子宫托的释放谱。

具有早产风险的妇女的临床研究

临床病例1：

在2011年具有阴道早产史的26岁妇女。

在当前的妊娠中，因为她具有双绒毛膜双羊膜性双胎妊娠，胎儿 形态学上正常，因此她处于高风险产科临床控制下。在妊娠控制中， 在18周时，进行了经阴道超声波测量子宫颈长度，为35mm(对于所 述孕龄，低于25百分点)。她在20周1天住院，因为在最后2周检 查到子宫颈缩短至28mm。未能提供一些措施用于早产的有效预防， 给病人提出使用本发明的用孕酮加药的子宫托。她欣然同意其安置， 在签署知情同意书后没有困难地进行了安置。在妊娠21周4天时安置 了子宫托。在子宫托安置后，子宫颈长度为30mm，在以后的控制中 维持该长度。在之后的控制中，她没有感到不适，如增加的阴道排出 物或便秘。在妊娠32周感到子宫收缩时，她再次住院。在那时，进行 了新的子宫颈长度测量，为23mm长度，具有良好放置的子宫托。由 于该事件没有发展成早产，她在32周4天时出院。

她在34周2天时关于前一夜取出子宫托(34周1天)再次求助 医疗顾问。在临床上重新评价该病例，因为超过34周妊娠，决定不再 安置子宫托，表明部分静止。

该病人在37周1天时通过选择性剖腹产术分娩。2,200和2,780 克的新生男孩出生状况良好，并且在第八天与母亲一起出院。

临床病例2：

之前具有三次流产史并且没有分娩的38岁经产孕妇。

在对于单胎妊娠控制的私人事件咨询中，检测到12周妊娠时的子 宫颈长度为38mm。在随后的控制中，在24周4天时，发现了子宫颈 长度为10mm，具有子宫颈楔或漏斗。她入院决定控制的替换方案。 在休息五天后，新的经阴道超声波检测到20mm宫颈长度。建议病人 使用用孕酮加药的子宫托，她欣然同意。签署知情同意书后，在25 周4天安置子宫托，病人没有困难或不适。定期控制，并且病人没有 提及子宫托的不适(没有增加的阴道排出物或便秘)。在控制中，在 29周4天时，发现子宫颈长度为15.8mm，子宫托安置良好。病人每 个月在临床上和通过超声波控制，检测到没有更多的子宫颈缩短或由 于使用子宫托引起的不适。在36周时取出子宫托，并且病人在妊娠 38周时自发阴道分娩。

经阴道超声波和核磁共振成像

临床病例2的病人接受经阴道超声波(EcoTV)和核磁共振 (NMR)，来测量和评价子宫颈长度，以及本发明的加药子宫托的安 置和放置。如图8中所示，EcoTV(表A)显示出子宫托在子宫颈中 的位置，并且NMR(表B)清楚地显示出本发明的含有孕酮的子宫托 怎样围绕子宫颈，支持和保护其免受子宫重量。在数码照相(表C) 中，看到了安置在病人中的本发明的子宫托并且观察到子宫托内的颈。 尽管该名病人最初具有相当短的宫颈长度(10mm)，但非常好地安 置了子宫托。

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