一种制备纯化抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白的方法

摘要

本发明涉及一种制备纯化抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白的方法。将重组菌接种于新鲜LB培养基中，摇瓶培养至OD值为0.5-0.6；加入诱导剂，于30-37℃下诱导4-8h，离心，将沉淀于-20℃冷冻后，用平衡缓冲液将沉淀悬起，加溶菌酶，破碎菌体，离心，收集上清液；滤膜过滤上清液，经Ni-NTA亲和层析柱纯化后，得到带组氨酸标签的抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白溶液；用蒸馏水稀释，超滤除盐，再用肠激酶缓冲液稀释，再超滤浓缩，最后用肠激酶酶切去除组氨酸标签，再经过Ni-NTA亲和层析柱得到纯化的抗肿瘤溶栓双效嵌合蛋白。本发明能得到大量抗肿瘤溶栓双效融合蛋白，为其将来在治疗肿瘤及溶栓方面发挥重要作用奠定了基础。