一种帕米磷酸二钠葡萄糖注射液及其制备方法

摘要

本发明公开了一种帕米磷酸二钠葡萄糖注射液及其制备方法，该注射液含有帕米磷酸二钠、2-氨基异丁酸和葡萄糖。本发明的帕米磷酸二钠注射液处方中加入2-氨基异丁酸后，对晚期肿瘤骨转移有更为良好的姑息治疗作用，同时降低了帕米磷酸二钠的用量，减轻了药物的毒副作用，降低了生产成本。

说明书

技术领域

本发明属于西药注射液制备领域，涉及一种帕米磷酸二钠注射液，特别涉及一种帕米磷 酸二钠葡萄糖注射液及其制备方法。

背景技术

在恶性肿瘤晚期有30％-70％患者发生骨转移,出现顽固性疼痛,并且骨转移发生在脊 椎、骨盆、髋关节等负重部位约占70％(董志伟,谷铣之.临床肿瘤学[M].北京:人民卫生出 版社,2002:371),严重影响病人生存质量。一般认为骨转移癌引起疼痛的机理为:肿瘤转移 至骨组织,引起破骨细胞活性增加导致骨质溶解即骨破坏；同时肿瘤细胞能分泌一些致痛介 质如前列腺素、乳酸等,从而加重疼痛。

帕米磷酸二钠为双磷酸盐类药物,是破骨细胞活动的强力抑制剂,可选择性地吸附于 骨组织,抑制破骨细胞前体向成熟破骨细胞转化,减轻肿瘤引起的骨质破坏,改善骨痛症 状,使用方便,但常规剂量对部分病例无效或疗效维持时间短、多疗程治疗后疗效下降(廖 思海，不同剂量帕米磷酸二钠治疗骨转移癌疼痛的疗效观察[J]，齐齐哈尔医学院学报，2006 年第27卷第10期)。如果采用大剂量给药，虽然疗效更为显著，但是同时会增加发热、恶 心、胸痛、胸闷、头晕乏力等毒副作用。

发明内容

鉴于不同剂量帕米磷酸二钠存在的各种不足，本发明的目的在于通过对帕米磷酸二钠注 射液的处方进行研究，提供了一种毒副作用低、疗效更为显著的帕米磷酸二钠注射液及其制 备方法。

为了实现本发明的目的，发明人在筛选药用辅料的试验中意外地发现，在注射液处方中 加入低剂量的2-氨基异丁酸(2-Aminoisobutyricacid)，不仅可以提高注射液的稳定性，而且 可以显著增强药物的癌转移疼痛缓解疗效。具体地，本发明的目的是这样实现的：

一种帕米磷酸二钠葡萄糖注射液，该注射液含有帕米磷酸二钠、2-氨基异丁酸和葡萄糖。

优选地，如上所述的帕米磷酸二钠葡萄糖注射液该注射液中帕米磷酸二钠与2-氨基异丁 酸的质量比为1:0.02-0.30。

进一步优选地，如上所述的帕米磷酸二钠葡萄糖注射液，其中帕米磷酸二钠与2-氨基异 丁酸的质量比为1:0.04-0.0.16。

再进一步优选地，如上所述的帕米磷酸二钠葡萄糖注射液，其中帕米磷酸二钠与2-氨基 异丁酸的质量比为1:0.08。

本发明所述的帕米磷酸二钠葡萄糖注射液，其经过配制后含有帕米磷酸二钠 0.06-0.24mg/mL，2-氨基异丁酸4-10μg/mL和葡萄糖0.02-0.2g/mL。

进一步优选地，如上所述的帕米磷酸二钠葡萄糖注射液，其经过配制后含有帕米磷酸二 钠0.12mg/mL，2-氨基异丁酸4.8-9.6μg/mL和葡萄糖0.05g/mL。

在本发明所优选的实施例中，如上所述的帕米磷酸二钠葡萄糖注射液，其由如下用量的 组分组成：帕米磷酸二钠0.12mg/mL，2-氨基异丁酸4.8-9.6μg/mL，葡萄糖0.05g/mL，pH 调节剂适量，余量为注射用水。

进一步优选地，如上所述的帕米磷酸二钠葡萄糖注射液，所述的pH调节剂为磷酸。

另外，本发明所述帕米磷酸二钠注射液的制备方法，其包括以下步骤：将葡萄糖和2- 氨基异丁酸加入注射用水中，搅拌至溶解，加入针用活性炭，充分搅拌，过滤脱炭，所得滤 液用磷酸调节至pH5.5-6.5，然后加入帕米磷酸二钠，搅拌至帕米磷酸二钠完全溶解，加入 余量注射用水定容，微孔滤膜除菌过滤，灌装，湿热灭菌，得注射液。

与现有技术相比，本发明涉及的帕米磷酸二钠葡萄糖注射液在降低给药剂量的同时增加 了癌转移疼痛缓解疗效，具体通过表1的试验结果可以看出，与空白组相比，大鼠于骨癌痛 模型制备后的第8天机械缩足阈值明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。与模型组相比， 各治疗组大鼠于骨癌痛模型制备后的第13天起机械缩足阈值提高，其中2-Amin+Pam组机 械缩足阈值升高明显，差异有统计学意义(P＜0.05)；2-Amin组、Pam组仅表现出机械缩足 阈值升高趋势，但差异无统计学意义(P＞0.05)。于骨癌痛模型制备后的第18天起，帕米磷 酸二钠和联合用药治疗组机械缩足阈值较模型组提高，差异有统计学意义(P＜0.05、P＜ 0.01)。通过各组机械缩足阈值的比较来看，2-氨基异丁酸可以协同帕米磷酸二钠对癌性骨 痛大鼠提高机械缩足阈值，二者联用具有降低机械痛敏的协同作用。这预示着本发明的帕米 磷酸二钠注射液处方中加入低剂量的2-氨基异丁酸后，对晚期肿瘤骨转移有更为良好的姑息 治疗作用，同时降低了帕米磷酸二钠的用量，减轻了药物的毒副作用，降低了生产成本。

具体实施方式

以下是本发明的具体制备例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护 范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护 范围之内。

实施例1-4：帕米磷酸二钠葡萄糖注射液的制备

表1实施例1-4帕米磷酸二钠葡萄糖注射液的处方含量

组分含量 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 帕米磷酸二钠(mg/mL) 0.06 0.12 0.12 0.24 2-氨基异丁酸(μg/mL) 4.8 4.8 9.6 9.6 葡萄糖(g/mL) 0.05 0.05 0.05 0.05 pH 6.5 6.0 5.5 6.0

制备工艺：将葡萄糖和2-氨基异丁酸加入80％注射用水中，搅拌至溶解，加入0.1％(W/V) 的针用活性炭，充分搅拌，过滤脱炭，所得滤液用磷酸调节至pH5.5-6.5，然后加入帕米磷 酸二钠，搅拌至帕米磷酸二钠完全溶解，加入余量注射用水定容，0.22μm微孔滤膜除菌过 滤，灌装，湿热灭菌，得澄明溶液。

实施例5：药物对大鼠乳腺癌骨转移癌痛模型的影响试验研究

取出乳腺癌Walker256细胞冻存管，迅速放入37℃水浴箱中快速解冻。擦干冻存管上 的水渍，用体积分数75％酒精消毒管口，超净工作台上旋开管口，用吸管吸出细胞悬液，移 入离心管中，再补加适量含质量分数10％胎牛血清的RPMI-1640培养基，吹打使细胞悬浮， 1000r/min离心5min，弃上清，重复用培养基漂洗1次，加入适量培养基后接种于培养瓶中， 置于培养箱中培养，次日更换1次培养基继续培养，观察生长情况，选取对数生长期细胞， 于Wistar大鼠腹腔内接种，接种量为Walker256细胞0.5mL(细胞浓度2×10⁷mL^-1)，饲养1 周，大鼠腹腔内有大量腹水，取微黄色瘤性腹水3mL，加质量分数0.9％生理盐水7mL混匀， 1500r/min离心5min，取沉淀，用质量分数0.9％生理盐水10mL漂洗后，1200r/min再次离 心5min，弃上清，细胞沉淀用3mL质量分数0.9％生理盐水悬浮，细胞计数后将细胞悬液稀 释到2×10⁷mL^-1备用。

雌性Wistar大鼠40只，体质量180-200g。随机分为空白组、模型组、2-Amin组、Pam 组和2-Amin+Pam组，每组8只动物。按如下方法建立大鼠乳腺癌骨转移癌痛模型:以质量 分数4％水合氯醛400mg/kg腹腔注射麻醉后，以大鼠脚趾对有齿镊钳夹无反应为麻醉满意指 标，消毒并切开左侧胫骨下1/3皮肤，分离肌肉，暴露胫骨骨面。取5号钢针头垂直于骨面 进针，待有骨突破感后拔出针头，用注射器取制备的乳腺癌Walker256细胞悬液5μL注入 骨髓腔内，用无菌骨蜡封孔，逐层用质量分数0.9％生理盐水冲洗并缝合。接种肿瘤细胞手术 后将动物放置于笼中继续饲养。假手术大鼠(即空白组)注入等量的质量分数0.9％生理盐 水。

接种肿瘤细胞手术后第8天始给药。2-Amin组:骨癌痛模型制备成功后，皮下注射2- 氨基异丁酸0.8mg/d；Pam组:骨癌痛模型制备成功后，缓慢皮下注射帕米磷酸二钠20mg/kg； 2-Amin+Pam组:骨癌痛模型制备成功后，皮下注射2-氨基异丁酸0.8mg/d+缓慢皮下注 射帕米磷酸二钠10mg/kg；模型组:骨癌痛模型制备成功后，皮下注射质量分数0.9％生理 盐水；空白组:皮下注射质量分数0.9％生理盐水。各组的给药频次均为2次/周，共给药4 周。接种肿瘤细胞手术后的第8、13、18、23、28天，用电子vonFrey测痛仪刺激大鼠足 底柔软部位，接触时间2～3s，出现缩足或舔足反应时的读数为机械缩足阈值，统计各组试 验测定结果。

根据表1的试验结果可以看出，与空白组相比，大鼠于骨癌痛模型制备后的第8天机械 缩足阈值明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。与模型组相比，各治疗组大鼠于骨癌痛 模型制备后的第13天起机械缩足阈值提高，其中2-Amin+Pam组机械缩足阈值升高明显， 差异有统计学意义(P＜0.05)；2-Amin组、Pam组仅表现出机械缩足阈值升高趋势，但差异 无统计学意义(P＞0.05)。于骨癌痛模型制备后的第18天起，帕米磷酸二钠和联合用药治疗 组机械缩足阈值较模型组提高，差异有统计学意义(P＜0.05、P＜0.01)。通过各组机械缩足 阈值的比较来看，2-氨基异丁酸可以协同帕米磷酸二钠对癌性骨痛大鼠提高机械缩足阈值， 二者联用具有降低机械痛敏的协同作用。

表1：术后不同时间点大鼠机械缩足阈值的比较(g)

续表1：术后不同时间点大鼠机械缩足阈值的比较(g)

模型组与空白比较，^★P＜0.05，^★★P＜0.01；

治疗组与模型组比较，^▲P＜0.05，^▲▲P＜0.01。