低表达或不表达PERV的肝细胞的制备方法

摘要

本发明公开一种低表达或不表达PERV的肝细胞的制备方法，其包括以下步骤：(1)分别制备含有应用于RNA干扰技术的siRNA的重组载体、应用于CRIPRS/Cas9技术的gRNA的重组载体和含有应用于所述CRIPRS/Cas9技术的Cas9的载体；(2)将所述三种载体共同转染至猪体细胞，培养所述经转染的猪体细胞，筛选并鉴定以获得单克隆转基因猪体细胞；(3)利用体细胞核移植技术获得含有所述转基因猪体细胞的核基因的转基因猪；(4)提取所述转基因猪的肝细胞。本发明低表达或不表达PERV的肝细胞的制备方法对PERV基因实现了转录前敲除和转录后抑制，技术方案有效可行。