一种基于热力学优化的双链置换核酸探针高特异性检测单碱基改变的方法

摘要

本发明涉及一种基于热力学优化的双链置换核酸探针高特异性检测单碱基改变的方法，包括：(1)针对预检测的目的序列，设计双链置换探针，并设计出相应的PCR扩增引物；通过引物扩增出目的靶序列；通过探针和引物设计，使反应1的自由能变化量接近于0，达到理论最优的特异性；(2)根据步骤(1)的设计，合成出实际的探针与引物，实现目的靶序列的高特异性检测。本发明设计出的双链置换探针进一步提高了单碱基改变检测特异性；不受检测序列长度影响；稳定性好，保存时间长；检测过程及其简单；且检测时间短；检测过程不受环境温度影响，同时不受溶液中盐离子浓度影响。