基于巴氏杜氏藻代谢途径的β-胡萝卜素工程菌及构建方法

摘要

本发明公开了一种基于巴氏杜氏藻代谢途径的β-胡萝卜素工程菌的构建方法，包括如下步骤：(1)从巴氏杜氏藻中获取相关基因的cDNA；(2)巴氏杜氏藻八氢番茄红素合成酶Psy启动子的获取；(3)p15A复制起始位点和氯霉素抗性基因的获取；(4)构建质粒pDbcrtB，质粒pDbcrtB转化大肠杆菌DH5α后获得β-胡萝卜素工程菌。该菌株呈橙黄色，利用巴氏杜氏藻的八氢番茄红素合成酶、八氢番茄红素脱氢酶、ζ-胡萝卜素脱氢酶和番茄红素β环化酶来合成β-胡萝卜素。该菌株在2YT培养基下37℃摇瓶培养24小时的β-胡萝卜素的产率为2.7～3.4mg/g(细胞干重)。