雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在酸性介质中释放曲线的建立方法

摘要

本发明公开一种雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在酸性介质中释放曲线的建立方法，取雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊，采用桨法装置，以酸性介质为释放介质，分别以不同的转速和时间点取溶液，滤过，量取溶出滤液经适当处理后作为供试品溶液；另取雷贝拉唑钠对照品加酸性介质经适当处理后制成对照品溶液；采用紫外-可见分光光度法测定吸光度，计算释放度并绘制释放曲线。本发明克服了雷贝拉唑钠在酸性介质中易降解、难以用高效液相色谱色谱法有效检测、用紫外-可见分光光度法中肠溶辅料严重干扰测定结果的缺点，创新采用简单的加酸沉淀离心除去辅料干扰检测雷贝拉唑钠的降解产物，间接检测雷贝拉唑钠释放度，具有简单、快捷、准确的优点。

说明书

技术领域

本发明属于药学制剂分析检测领域，更具体地，本发明涉及一种雷贝拉唑 钠肠溶微丸胶囊在酸性介质中释放曲线的建立方法。

背景技术

雷贝拉唑钠解离常数较大，是一种部分可逆的H+/K+-ATP酶抑制剂，副作 用较小，并且还具有结合靶点较多，较其他药物作用更快、制酸强度更强的优 点，主要用于胃溃疡、十二指肠溃疡、反流性食管炎、卓-艾(Zollinger-Ellison) 综合征(胃泌素瘤)。

目前已有文献报道雷贝拉唑钠肠溶制剂在pH6.8磷酸盐缓冲液中释放量可 采用紫外-可见分光光度法于282nm处测定吸光度来进行检测；但此方法是基于 制剂辅料干扰可以忽略的情况下进行的。

雷贝拉唑钠肠溶胶囊(Sprinkle^TM)的内容物产品，处方中的主 要辅料为二乙酰单甘油酯、乙基纤维素、羟丙纤维素、羟丙甲纤维素邻苯二甲 酸酯、卡拉胶等。本品原料药在酸性介质中非常容易降解，在高效液相色谱仪 难以进行有效检测，降解产物与原料药结构中均有发色基团，在紫外区有吸收， 因此可通过紫外-可见分光光度法进行有效检测。但本品肠溶材料羟丙甲纤维素 邻苯二甲酸酯在紫外区亦有强吸收，在pH5.5以上才溶解，在pH5.5以下会析 出，若采用紫外-可见分光光度法，肠溶辅料严重干扰测定结果。因此，在pH6.0 磷酸盐缓冲液及pH6.8磷酸盐缓冲液酸性介质条件下，均采用加酸析出沉淀离 心去除羟丙甲纤维素邻苯二甲酸酯，取上清液作为供试品溶液，从而可排除肠 溶材料的干扰，采用紫外-可见分光光度法进行有效检测。

发明内容

基于此，为了克服上述现有技术的缺陷，本发明提供了一种雷贝拉唑钠肠 溶微丸胶囊在酸性介质中的释放量，进而建立其释放曲线的方法。

为了实现上述发明目的，本发明采取了以下技术方案：

一种雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在酸性介质中释放曲线的建立方法，包括以 下步骤：

(1)、供试品溶液的配制

取雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊，采用桨法装置，以0.1mol/L盐酸溶液为释放 介质，在50～100rpm的转速下，于5～120min的时间分别取溶液，过滤，滤液 即为供试品溶液；或

取雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊，采用桨法装置，以pH6.0磷酸盐缓冲液为释 放介质，在50～100rpm的转速下，于5～120min的时间分别取溶液，过滤，滤 液于37.0℃±0.5℃条件下水浴1±0.5小时，取滤液加入酸，静置15～60min，3000～ 5000rpm离心5～20min，上清液即为供试品溶液，所述滤液与加入酸的体积比 为9：0.5～2.0；或

取雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊，采用桨法装置，以pH6.8磷酸盐缓冲液为释 放介质，在50～100rpm的转速下，于5～120min的时间分别取溶液，过滤，取 滤液加入酸，静置15～60min，3000～5000rpm离心5～20min，上清液即为供 试品溶液，所述滤液与加入酸的体积比为9：0.5～2.0；

(3)、对照品溶液的配制

当释放介质为0.1mol/L盐酸溶液时，取雷贝拉唑钠对照品，加入0.1mol/L 盐酸溶液，制成约相当于雷贝拉唑钠含量为1.3μg/ml的对照品溶液；或

当释放介质为pH6.0磷酸盐缓冲液时，取雷贝拉唑钠对照品，加入甲醇溶 解并制成0.5mg/ml的溶液，再用pH6.0磷酸盐缓冲液制成约相当于雷贝拉唑钠 含量为10μg/ml的溶液，于37.0℃±0.5℃条件下水浴1±0.5小时，取溶液加入酸， 静置15～60min，即为对照品溶液，所述溶液与加入酸的体积比为9：0.5～2.0；

当释放介质为pH6.8磷酸盐缓冲液时，取雷贝拉唑钠对照品，加入pH6.8 磷酸盐缓冲液制成约相当于雷贝拉唑钠含量为10μg/ml的溶液，加入酸，静置 15～60min，即为对照品溶液，所述溶液与加入酸的体积比为9：0.5～2.0；

(3)、检测

当释放介质为0.1mol/L盐酸溶液时，以0.1mol/L盐酸溶液为空白溶剂；或

当释放介质为pH6.0磷酸盐缓冲液时，以体积比为9：0.5～2.0的pH6.0磷 酸盐缓冲液-1mol/L盐酸溶液为空白溶剂；或

当释放介质为pH6.8磷酸盐缓冲液时，以体积比为9：0.5～2.0的pH6.8磷 酸盐缓冲液-1mol/L盐酸溶液为空白溶剂；

采用紫外-可见分光光度法，光程为1cm～3cm，取步骤(1)的供试品溶液和 步骤(2)的对照品溶液，于280nm～320nm波长测定吸光度，计算释放度，绘制 释放曲线。

在其中一些实施例中，步骤(1)所述的转速为60～75rpm。

在其中一些实施例中，步骤(1)和步骤(2)中所述酸选自0.9～1.1mol/L盐酸溶 液、0.9～1.1mol/L硫酸溶液或0.9～1.1mol/L磷酸溶液。

在其中一个实施例中，步骤(1)和步骤(2)中所述酸为1mol/L盐酸溶液。

在其中一些实施例中，当释放介质为pH6.0磷酸盐缓冲液时，步骤(1)和步骤 (2)中所述滤液与加入酸的体积比为9：1。

在其中一些实施例中，当释放介质为pH6.8磷酸盐缓冲液时，步骤(1)和步骤 (2)中所述滤液与加入酸的体积比为9：1.2。

在其中一些实施例中，步骤(1)中静置25～35min，离心转速为4000～ 4200rpm，离心时间为10～15min。

在其中一些实施例中，步骤(1)中所述光程为2～3cm；所述检测波长为290～ 305nm，优选为298nm±2nm，更优选为298nm。

在其中一个实施例中，所述检测波长为298±2nm。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、本发明的释放曲线的建立方法通过对溶出液采用一系列的处理后，使用 紫外-可见分光光度法检测雷贝拉唑钠肠溶微丸在酸性介质中释放曲线，克服了 雷贝拉唑钠肠溶微丸在酸性介质中易降解、在高效液相色谱仪难以有效检测、 在紫外-可见分光光度法中辅料严重干扰的缺点，且创新使用简单的加酸沉淀离 心除去肠溶材料为主的辅料干扰，可间接检测雷贝拉唑钠释放量情况，具有快 速、准确的优点；

2、本发明的释放曲线的建立方法准确，操作可行，重现性好，灵敏度高， 在工作中实用性强。

附图说明

图1为本发明实施例1中0.1mol/L盐酸溶液下对照品溶液的稳定性光谱图；

图2为本发明实施例2中pH6.0磷酸盐缓冲液下对照品溶液的稳定性光谱 图，298nm处从上往下第一和第二光谱线为37.0℃水浴中放置30min的室温0h 和1h的光谱线，其他光谱线为37.0℃水浴中放置0、60、90、120min的室温0h 和1h的光谱线；

图3为本发明实施例3中pH6.8磷酸盐缓冲液下对照品溶液的稳定性光谱 图；

图4为本发明实施例4在0.1mol/L盐酸溶液中的释放曲线图；

图5为本发明实施例5在pH6.0磷酸盐缓冲液中的释放曲线图；

图6为本发明实施例6在pH6.8磷酸盐缓冲液中的释放曲线图。

具体实施方式

以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案进一步描述，但是本发 明的保护范围并不限于这些实施列。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代 均包括在本发明的保护范围之内。

除特别说明外，以下实施例中所使用的原料和试剂均为市售。

实施例1.

精密称取雷贝拉唑钠对照品10mg，加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每 1ml中含1μg的溶液，置37.0℃±0.5℃水浴中，分别于0、30、60、90、120min 时取适量溶液，冷至室温，照紫外-可见分光光度法，分别于不同的时间在200～ 400nm波长下扫描。0.1mol/L盐酸溶液下对照品溶液的稳定性光谱图见图1。各 溶液紫外光谱图于298nm处有稳定的吸光度。

实施例2.

精密称取雷贝拉唑钠对照品10mg，加pH6.0磷酸盐缓冲液溶解并稀释成每 1ml中含10μg的溶液，置37.0℃±0.5℃水浴中，分别于0、30、60、90、120min 时取适量溶液，冷至室温，分别精密量取9ml精密加入1ml 1mol/L盐酸溶液， 照紫外-可见分光光度法，分别于不同的时间在200～400nm波长下扫描。pH6.0 磷酸盐缓冲液下对照品溶液的稳定性光谱图见图2。图2中298nm处从上往下 第一和第二光谱线为37.0℃水浴中放置30min的室温0h和1h的光谱线，除 37.0℃水浴中放置30min外其他各溶液的紫外光谱图于298nm处有稳定的吸光 度。故pH6.0磷酸盐缓冲液介质中溶出液和对照品溶液在37.0℃水浴中放置1h 是必要的。

实施例3.

精密称取雷贝拉唑钠对照品10mg，加pH6.8磷酸盐缓冲液溶解并稀释成每 1ml中含10μg的溶液，置37.0℃±0.5℃水浴中，分别于0、30、60、90、120min 时取适量溶液，冷至室温，分别精密量取9ml精密加入1.2ml 1mol/L盐酸溶液， 照紫外-可见分光光度法，分别于不同的时间在200～400nm波长下扫描。pH6.8 磷酸盐缓冲液下对照品溶液的稳定性光谱图见图3。各溶液紫外光谱图于298nm 处有稳定的吸光度。

实施例4.雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在0.1mol/L盐酸溶液中的释放曲线的建立 方法

主要仪器：RC806型溶出实验仪，UV-2450型紫外分光光度计。

包括以下步骤：

(1)样品溶液的配制

分别取三批雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊，采用照释放度测定法(中国药典 2010年版二部附录X D第二法)，采用溶出度测定法(中国药典2010年版二 部附录X C第二法)装置，以0.1mol/L盐酸溶液750ml为释放介质，转速为 75rpm，经5、10、15、30、45、60、90、120min，分别取溶液10ml，滤过，并 即时补充释放介质10ml，量取续滤液为供试品溶液；

(2)对照品溶液的配制

另精密称取雷贝拉唑钠对照品适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml约 1.3μg的溶液作为对照品溶液。

(3)测定

按紫外-可见分光光度法，光程为3cm，以0.1mol/L盐酸溶液为空白溶剂， 于298nm处测定吸光度。计算释放度(以平均值±SD表示)。雷贝拉唑钠肠溶微 丸胶囊在0.1mol/L盐酸溶液中的溶出曲线图见附图4，释放度结果见表1。

表1 雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在0.1mol/L盐酸溶液中释放度结果(n＝6)

本实施例的方法间接地检测出每个制剂单位在0.1mol/L盐酸溶液介质中 5～120min的释放量应为标示量的0％～10％。

实施例5.雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在pH6.0磷酸盐缓冲液中的释放曲线的建立 方法

主要仪器：RC806型溶出实验仪，UV-2450型紫外分光光度计。

包括以下步骤：

(1)样品溶液的配制

分别取三批雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊，采用照释放度测定法(中国药典 2010年版二部附录X D第二法)，采用溶出度测定法(中国药典2010年版二 部附录X C第二法)装置，以pH6.0磷酸盐缓冲液1000ml为释放介质，转速为 75rpm，经20、30、35、40、45、50、60、70min，分别取溶液10ml，滤过， 并即时补充释放介质10ml，取续滤液于37.0℃±0.5℃水浴中放置1h，精密量取 9ml精密加入1mol/L盐酸溶液1ml，摇匀，静置30min后，离心(4000rpm，10min)， 上清液为供试品溶液。

(2)对照品溶液的配制

另精密称取雷贝拉唑钠对照品适量，加甲醇溶解并制成每1ml约0.5mg的 溶液，再用pH6.0磷酸盐缓冲液稀释制成每1ml约10μg的溶液，于37.0℃±0.5℃ 水浴中放置1h，精密量取9ml精密加入1mol/L盐酸溶液1ml，摇匀，静置30min， 作为对照品溶液。

(3)测定

按紫外-可见分光光度法，光程为3cm，以pH6.0磷酸盐缓冲液-1mol/L盐酸 溶液(9：1)为空白溶剂，于298nm处测定吸光度。计算释放度(以平均值±SD 表示)。雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在pH6.0磷酸盐缓冲液中的溶出曲线图见附图 5，释放量结果见表2。

表2 雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在pH6.0磷酸盐缓冲液中释放度结果(n＝6)

本实施例的方法间接地检测出每个制剂单位在pH6.0磷酸盐缓冲液介质中 35、45、60min的释放度应为标示量的20％～30％、75％～85％、85％～95％。

实施例6.雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在pH6.8磷酸盐缓冲液中的释放曲线的建立 方法

主要仪器：RC806型溶出实验仪，UV-2450型紫外分光光度计。

包括以下步骤：

(1)样品溶液的配制

分别取三批雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊，照释放度测定法(中国药典2010年 版二部附录X D第二法)，采用溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录 X C第二法)装置，以0.1mol/L盐酸溶液750ml为酸介质，转速为75rpm，经 2h后，加入250ml 0.2mol/L磷酸钠溶液，使成为pH6.8磷酸盐缓冲液(0.05mol/L)， 转速为60rpm，经10、15、20、25、30、45min，分别取溶液10ml，滤过，并 即时补充释放介质10ml，精密量取9ml精密加入1mol/L盐酸溶液1.2ml，摇匀， 静置30min后，离心(4000rpm，10min)，上清液为供试品溶液。

(2)对照品溶液的配制

另精密称取雷贝拉唑钠对照品适量，加pH6.8磷酸盐缓冲液制成每1ml约 10μg的溶液，精密量取9ml精密加入1mol/L盐酸溶液1.2ml，摇匀，静置30min， 作为对照品溶液。

(3)测定

按紫外-可见分光光度法，光程为3cm，以pH6.8磷酸盐缓冲液-1mol/L盐酸 溶液(9：1.2)为空白溶剂，于298nm处测定吸光度。计算释放度(以平均值 ±SD表示)。雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在pH6.8磷酸盐缓冲液中的溶出曲线图见 附图6，释放量结果见表3。

表3 雷贝拉唑钠肠溶微丸胶囊在pH6.8磷酸盐缓冲液中释放度结果(n＝6)

本实施例的方法间接地检测出每个制剂单位在pH6.8磷酸盐缓冲液介质中 15、20、25、45min的释放量应分别为标示量的35％～45％、60％～70％、75％～ 85％、85％～95％。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细， 但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域 的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和 改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附 权利要求为准。