一种改良养殖池塘底泥环境复合菌剂及其制作方法和用途

摘要

本发明公开了一种改良养殖池塘底泥环境复合菌剂及其制作方法和用途，所述的复合菌剂是由菌粉1、菌粉2和菌粉3组成，所述的菌粉1是嗜热紫色光合细菌粉剂；所述的菌粉2是脱氮硫杆菌粉剂；所述的菌粉3是反硝化无色杆菌和木糖氧化无色杆菌反硝化亚种菌粉剂；菌粉1、菌粉2和菌粉3的重量比为1-2:1-2:1-2。本发明的复合菌剂可深入渗透到池塘底部，能快速高效降解池塘底部沉积的残饵、排泄物、动植物尸体及有机碎屑，显著降低池底氨氮、亚硝酸盐及硫化物等有害物质，进而达到改善养殖池塘底泥环境、净化水质的目的。

说明书

技术领域

本发明涉及养殖鱼塘底泥改良技术领域，尤其涉及一种改良养殖池塘底泥环 境复合菌剂及其制作方法和用途。

背景技术

目前国内以高密度池塘养殖方式为主，这种集约化水产养殖虽然在很大程度 上满足了人们对水产品的需求，但养殖环境和养殖安全成为消费者最为关注的问 题。这种高密度、集约化养殖方式中营养物质的利用率偏低，只有少部分饲料被 养殖动物吸收利用进而形成生物量，大部分则与其排泄物、尸体残骸等一起通过 物理、化学或生物作用逐渐沉降到池塘底部淤泥中。这种相对封闭的半静态养殖 环境，其自净能力相对薄弱。随着养殖期的增长，池塘底部有机物、营养物质等 大量积累，导致养殖池塘底部缺氧，氨氮、亚硝酸盐、硫化物等有害物质含量急 剧上升，进而整体水质恶化，滋生细菌病原体，这已经成为我国水产养殖发展过 程中必须面对的关键性问题。

发明内容

本发明目的在于提供一种改良养殖池塘底泥环境复合菌剂及其制作方法和 用途。

本发明采取的技术方案是：

本发明的改良养殖池塘底泥环境复合菌剂是由菌粉1、菌粉2和菌粉3组成， 所述的菌粉1是嗜热紫色光合细菌Thermochromatium tepidum ATCC 43061菌粉 剂；所述的菌粉2是脱氮硫杆菌Thioalkalivibrio denitrificans DSM13742菌粉剂； 所述的菌粉3是反硝化无色杆菌Achromobacter denitrificans DSM 30026和木糖氧 化无色杆菌反硝化亚种Achromobacter xylosoxidans subsp.denitrificans ATCC 15173菌粉剂；菌粉1、菌粉2和菌粉3的重量比为1-2:1-2:1-2。

优选：菌粉1、菌粉2和菌粉3的重量比为1:1:1。

本发明的改良养殖池塘底泥环境复合菌剂的制作方法的具体步骤如下：

(1)制作菌粉1：

将对数生长中期的嗜热紫色光合细菌Thermochromatium tepidum ATCC 43061菌株培养液10L接入到1000L发酵罐中培养，培养条件为：酵母粉3g/L， 碳酸氢钠1.5g/L，乙酸钠3.5g/L、酸氢二钾0.8g/L、氯化钠5.5g/L、六水氯化 镁0.5g/L、氯化铵1.5g/L、乙二胺四乙酸铁钠0.8g/L，初始pH7，发酵温度48℃、 发酵48h后培养液中菌体密度可达1.51～2.23×10¹⁰CFU/mL；发酵液经80目过滤 器过滤，在滤液中添加滤液重量18％的多孔淀粉、滤液重量15％的麦芽糊精以及 滤液重0.15％聚乙烯吡咯酮和0.15％硫脲，经喷雾干燥后，添加滤液重量6％磷 酸三钙做填充剂，平板计数法检测菌数，得到活菌数约为10¹⁰～10¹¹CFU/g的嗜 热紫色光合细菌Thermochromatium tepidum ATCC 43061菌粉剂；

(2)制作菌粉2：

将对数生长中期的脱氮硫杆菌Thioalkalivibrio denitrificans DSM13742菌株 培养液10L接入到1000L发酵罐中培养，培养条件为：五水硫代硫酸钠5.5g/L、 硝酸钾3g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、碳酸氢钠2g/L、六水氯化镁0.8g/L、七水硫 酸铁0.02g/L，初始pH6.9，发酵温度29.5℃、发酵48h后培养液中菌体密度可 达1.72～2.31×10¹⁰CFU/mL；发酵液经80目过滤器过滤，在滤液中添加滤液重量 18％的多孔淀粉、滤液重量15％的麦芽糊精以及滤液重0.15％聚乙烯吡咯酮和 0.15％硫脲，经喷雾干燥后，添加滤液重量6％磷酸三钙做填充剂，平板计数法检 测菌数，得到活菌数约为6.51～8.94×10¹⁰CFU/g的脱氮硫杆菌Thioalkalivibrio  denitrificans DSM13742菌粉剂；

(3)制作菌粉3：

分别将对数生长中期的反硝化无色杆菌Achromobacter denitrificans DSM 30026菌株和木糖氧化无色杆菌反硝化亚种Achromobacter xylosoxidans  subsp.denitrificans ATCC 15173菌株的培养液各5L接入到1000L发酵罐中共培 养，培养条件为：氯化铵1.5g/L、磷酸氢二钾1.5g/L、氯化钠0.8g/L、氯化钾 0.5g/L、七水硫酸镁0.5g/L、硫酸铁0.002g/L、氯化钙0.015g/L，微量元素混 合溶液1mL，组成为：硼酸55mg/L、七水硫酸锰40mg/L、七水硫酸锌40mg/L、 五水硫酸铜42mg/L、四水钼酸铵35mg/L、六水硝酸钴28mg/L；初始pH7，发 酵温度26℃、发酵48h后，培养液中菌体密度维持在1.52～1.85×10¹⁰CFU/mL， 其中Achromobacter denitrificans DSM 30026在7.97～9.14×10⁹CFU/g和 Achromobacter xylosoxidans subsp.denitrificans ATCC 15173在8.23～ 9.36×10⁹CFU/g，发酵液经80目过滤器过滤，在滤液中添加滤液重量18％的多孔 淀粉、滤液重量15％的麦芽糊精以及滤液重0.15％聚乙烯吡咯酮和0.15％硫脲， 经喷雾干燥后，添加滤液重量6％磷酸三钙做填充剂，平板计数法检测菌数，菌 粉中反硝化无色杆菌Achromobacter denitrificans DSM 30026在5.64～ 6.85×10¹⁰CFU/g和木糖氧化无色杆菌反硝化亚种Achromobacter xylosoxidans  subsp.denitrificans ATCC 15173在6.32～7.16×10¹⁰CFU/g；

(4)制作复合菌剂：

将菌粉1、菌粉2和菌粉3按配比混合，并经真空包装即成为改良养殖鱼塘 底泥环境复合菌剂。

步骤(1)中，所述的嗜热紫色光合细菌Thermochromatium tepidum ATCC 43061菌株来自于美国典型微生物菌种保藏中心，菌种编号ATCC 43061。

步骤(2)中，所述的脱氮硫杆菌Thioalkalivibrio denitrificans DSM13742菌 株来自于德国微生物菌种保藏中心，菌种编号DSM13742。

步骤(3)中，所述的反硝化无色杆菌Achromobacter denitrificans DSM 30026 菌株来自于德国微生物菌种保藏中心，菌种编号DSM 30026；所述的木糖氧化无 色杆菌反硝化亚种Achromobacter xylosoxidans subsp.denitrificans ATCC 15173菌 株来自于美国典型微生物菌种保藏中心，菌种编号ATCC 15173。

本发明的复合菌剂可用于改良养殖池塘底泥环境，用法为：全塘直接均匀抛 洒，1～1.5米水深每亩用1200克，水深、老化池塘和污染严重的池塘用1500～ 2000克，每10天施用一次，有杀菌作用的化学药品和抗生素药物在使用该复合 菌剂前五天、后五天内均不能使用。

本发明的积极效果如下：

本发明通过从健康养殖池塘底泥中筛选分离多种高效降污活菌菌种，组成改 良养殖池塘底泥复合菌剂，本发明的复合菌剂可深入渗透到池塘底部，能快速高 效降解池塘底部沉积的残饵、排泄物、动植物尸体及有机碎屑，显著降低池底氨 氮、亚硝酸盐及硫化物等有害物质，进而达到改善养殖池塘底泥环境、净化水质 的目的。

具体实施方式

下面的实施例是对本发明的进一步详细描述。

本发明提供了一种改良养殖鱼塘底泥环境复合菌剂及其制作方法。该微生物 菌剂包括菌粉1、菌粉2和菌粉3，其制作方法为：

制作菌粉1：将对数生长中期的嗜热紫色光合细菌ATCC 43061菌株 (Thermochromatium tepidum ATCC 43061，购买自美国典型微生物菌种保藏中 心)培养液10L接入到1000L发酵罐中培养，培养条件为：酵母粉3(g/L,下文 未特殊说明的均为g/L)，碳酸氢钠1.5，乙酸钠3.5、酸氢二钾0.8、氯化钠5.5、 六水氯化镁0.5、氯化铵1.5、乙二胺四乙酸铁钠0.8，初始pH7，发酵温度48℃、 发酵48h后培养液中菌体密度可达1.51～2.23×10¹⁰CFU/mL；发酵液经80目过滤 器过滤，在滤液中添加滤液重量18％的多孔淀粉、滤液重量15％的麦芽糊精以及 滤液重0.15％聚乙烯吡咯酮和0.15％硫脲，经喷雾干燥后，添加滤液重量6％磷 酸三钙做填充剂，平板计数法检测菌数，得到活菌数约为10¹⁰～10¹¹CFU/g的嗜 热紫色光合细菌Thermochromatium tepidum ATCC 43061菌粉剂。

制作菌粉2：将对数生长中期的脱氮硫杆菌DSM13742菌株(Thioalkalivibrio  denitrificans DSM13742，购买自德国微生物菌种保藏中心)培养液10L接入到 1000L发酵罐中培养，培养条件为：五水硫代硫酸钠5.5(g/L,下文未特殊说明的 均为g/L)、硝酸钾3、磷酸二氢钾1.5、碳酸氢钠2、六水氯化镁0.8、七水硫酸 铁0.02，初始pH6.9，发酵温度29.5℃、发酵48h后培养液中菌体密度可达1.72～ 2.31×10¹⁰CFU/mL；发酵液经80目过滤器过滤，在滤液中添加滤液重量18％的多 孔淀粉、滤液重量15％的麦芽糊精以及滤液重0.15％聚乙烯吡咯酮和0.15％硫脲， 经喷雾干燥后，添加滤液重量6％磷酸三钙做填充剂，平板计数法检测菌数，得 到活菌数约为6.51～8.94×10¹⁰CFU/g的脱氮硫杆菌Thioalkalivibrio denitrificans  DSM13742菌粉剂。

制作菌粉3：分别将对数生长中期的反硝化无色杆菌DSM 30026菌株 (Achromobacter denitrificans DSM 30026，购买自德国微生物菌种保藏中心)和 木糖氧化无色杆菌反硝化亚种ATCC 15173(Achromobacter xylosoxidans  subsp.denitrificans ATCC 15173，购买自美国典型微生物菌种保藏中心)的培养液 各5L接入到1000L发酵罐中共培养，培养条件为：氯化铵1.5(g/L,下文未特殊 说明的均为g/L)、磷酸氢二钾1.5、氯化钠0.8、氯化钾0.5、七水硫酸镁0.5、硫 酸铁0.002、氯化钙0.015，微量元素混合溶液1mL，组成为(mg/L)：硼酸55、 七水硫酸锰40、七水硫酸锌40、五水硫酸铜42、四水钼酸铵35、六水硝酸钴 28；初始pH7，发酵温度26℃、发酵48h后，培养液中菌体密度维持在1.52～ 1.85×10¹⁰CFU/mL。其中Achromobacter denitrificans DSM 30026在7.97～ 9.14×10⁹CFU/g和Achromobacter xylosoxidans subsp.denitrificans ATCC 15173在 8.23～9.36×10⁹CFU/g，发酵液经80目过滤器过滤，在滤液中添加滤液重量18％ 的多孔淀粉、滤液重量15％的麦芽糊精以及滤液重0.15％聚乙烯吡咯酮和0.15％ 硫脲，经喷雾干燥后，添加滤液重量6％磷酸三钙做填充剂，平板计数法检测菌 数，菌粉中反硝化无色杆菌DSM 30026在5.64～6.85×10¹⁰CFU/g和木糖氧化无 色杆菌反硝化亚种ATCC 15173在6.32～7.16×10¹⁰CFU/g。

制作复合菌剂：将菌粉1、菌粉2和菌粉3按配比混合，并经真空包装即成 为改良养殖鱼塘底泥环境复合菌剂。

实施例1

菌粉1、菌粉2和菌粉3按照1:2:1(重量比)混合，并经真空包装即成为改 良养殖池塘底泥环境复合菌剂。

实施例2

菌粉1、菌粉2和菌粉3按照2:1:2(重量比)混合，并经真空包装即成为改 良养殖池塘底泥环境复合菌剂。

实施例3

菌粉1、菌粉2和菌粉3按照1:1:1(重量比)混合，并经真空包装即成为改 良养殖池塘底泥环境复合菌剂。

将实施例1-3制备的复合菌剂进行养殖鱼塘底泥复合环境的改良：

按照每10天施用一次，一米水深每亩使用复合菌剂1200克，直接均匀抛洒 至养殖池塘。

使用复合菌剂处理前氨氮为0.9mg/L、亚硝酸盐为0.4mg/L，施用复合菌剂 后氨氮为0.05mg/L、亚硝酸盐为0.02mg/L，氨氮和亚硝酸盐的降解率达到94％ 以上。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以 理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修 改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。