小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3电转染的方法

摘要

本发明公开了一种小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3电转染的方法，该法主要采用等渗透压的电转染缓冲液，对小鼠成纤维细胞NIH/3T3进行一次放电，通过等渗透压和高压脉冲电场压组合，使得细胞体积增大，高脉冲电压破坏细胞膜电位，DNA通过膜上形成的小孔导入细胞质中，从而提高电转效率。实际试验表明，应用本发明质粒pmaxGFP(绿色荧光蛋白)转染到小鼠成纤维细胞NIH/3T3，转染效率最高可以达到55％左右。本发明可以缩短试验周期，节约成本，减少繁琐的操作步骤，并且安全无害，为小鼠成纤维细胞NIH/3T3细胞系的后续研究提供了关键的技术支持。