还原力的分析方法以及还原力的分析试剂

摘要

本发明涉及还原力的分析方法以及还原力的分析试剂。本发明提供能够抑制试样中的峰值波长的偏移的还原力的分析方法。为了解决本发明的问题，本发明的还原力的分析方法的特征在于，包括还原步骤，在试样的存在下，在pH2.4以下的条件下，对含有三价铁化合物和氰化物的色素试剂进行还原；以及光学测定步骤，对所述还原步骤中得到的还原体的峰值波长进行光学测定。

说明书

技术领域

本发明涉及还原力的分析方法以及还原力的分析试剂。

背景技术

在氧化应激状态下，通过生物体内发生的过氧化物以及自由基，蛋白 质、脂质、DNA等受损伤。并且，已知通过积累这样的损伤，能够引起例 如心血管疾病、神经系统疾病等。另一方面，已知这样的过氧化物以及自 由基通过生物体内的具有还原力的抗氧化物质而被无害化。因此，通过分 析作为针对氧化应激的抵抗性的指标之一的还原力，尝试预防所述疾病以 及把握所述疾病的病理状态。

由三价铁离子和氰化物的反应产生的血红色的色素试剂通过还原反应 而褪色。由此，作为试样的还原力的分析方法，使用通过使所述色素试剂 和所述试样接触，来由所述试样还原所述色素试剂，并光学测定所述色素 试剂的褪色的程度的方法(专利文献1)。

现有技术文献

专利文献

专利文献

专利文献1：日本专利特开2009-257909号公报

发明内容

发明要解决的问题

在利用所述三价铁离子和所述氰化物的色素试剂的还原力的分析方法 中，本发明者等发现了在分析试样的还原力的情况下，在含有所述色素试 剂和所述试样的反应体系中发生光学信号的峰值波长偏移的问题。所述光 学信号的峰值波长的偏移是指试样所示的本来的光学信号和通过测定而得 到的表面上的光学信号之间的误差的产生。因此，基于光学信号计算出的 还原力中也会产生误差，定量结果的可靠性变得不充分。

由此，本发明的目的在于，提供在分析了试样的还原力的情况下，能 够抑制所述光学信号的峰值波长的偏移的还原力的分析方法。

用于解决问题的手段

为了解决本发明的问题，本发明的还原力的分析方法的特征在于，包 括：还原步骤，在试样的存在下，在pH2.4以下的条件下，对含有三价铁 化合物和氰化物的色素试剂进行还原；以及光学测定步骤，对所述还原步 骤中得到的还原体的峰值波长进行光学测定。

本发明的还原力的分析试剂的特征在于，所述分析试剂包括含有三价 铁化合物和氰化物的色素试剂以及pH调节剂，所述pH调节剂是强酸性试 剂，所述分析试剂用于所述本发明的分析方法中。

发明效果

通过本发明者等的锐意研究，已知在所述试样的还原力的分析中，含 有所述色素试剂和所述试样的反应体系中的光学信号的峰值波长的偏移的 起因是所述试样中含有的白蛋白以及蛋氨酸。并且，虽然原理不明确，但 发现通过在pH2.4以下的条件进行所述还原步骤，来能够抑制所述反应体 系中的光学信号的峰值波长的偏移，并完成了本发明。其结果为，根据本 发明，在所述试样的还原力的分析中，不受到所述试样中的成分的影响， 能够抑制所述反应体系中的光学信号的峰值波长的偏移。因此，根据本发 明，基于所述光学信号，能够降低分析了还原力时的误差，能够以更优异 的可靠性进行试样的还原力的分析。因此，本发明例如在针对源自生物体 等的各种试样的临床检查等中极其有用。

附图说明

图1是示出实施例1中的吸光度的结果的曲线图；

图2是示出实施例1中的吸光度的结果的曲线图；

图3的(A)-(C)是示出实施例2中的吸光度的结果的曲线图；

图4是示出实施例2中的不同的pH中的峰值波长的波长的曲线图；

图5是示出实施例3中的还原力的结果的曲线图。

具体实施方式

<还原力的分析方法>

如前述，本发明的还原力的分析方法的的特征在于，包括：还原步 骤，在试样的存在下，在pH2.4以下的条件下，对含有三价铁化合物和氰 化物的色素试剂进行还原；以及光学测定步骤，对所述还原步骤中得到的 还原体的峰值波长进行光学测定。本发明的分析方法的特征在于，在 pH2.4以下的条件下进行所述还原步骤，对于其他步骤以及条件，没有特 别的限制。如前述，本发明的分析方法能够抑制所述反应体系中的光学信 号的峰值波长的偏移。因此，本发明的分析方法也可以称为抑制峰值波长 的偏移的方法。在本发明中，所述还原步骤的所述色素试剂的还原是通过 所述试样的还原力的还原。在所述光学测定步骤中，“所述还原步骤中得 到的还原体”是指所述色素试剂被进行还原。

本发明的分析方法例如可以是对于所述试样的还原力的有无进行分析 的定性分析，也可以是对所述试样的还原力的程度进行分析的定量分析。

在本发明中，所述还原步骤在pH2.4以下的条件下进行。因此，本发 明的分析方法例如在所述还原步骤中，含有所述试样和所述色素试剂的反 应体系的pH可以为pH2.4以下。所述反应体系的pH例如在所述色素试剂 和所述试样的接触时或者接触之后调节为pH2.4以下。所述反应体系例如 优选液体体系，也可以是含有所述试样和所述色素试剂的反应液或者还原 液。

在本发明的分析方法中，对于所述试样，没有特别的限制。如前述， 根据白蛋白以及蛋氨酸对峰值波长的偏移带来影响，本发明例如能够应用 在含有白蛋白以及蛋氨酸中的至少一者的试样中。所述试样例如为生物体 试样，作为具体例，可以举出血液、唾液、尿、眼泪、汗等。所述血液例 如为红血球、全血、血清、血浆等。在这些之中，优选血液。

所述试样例如从操作容易出发优选液状的试样(液体试样)。所述试 样例如可以将所述试样的未稀释液直接作为液体试样使用，也可以将溶剂 中悬浮、分散或者溶解所述试样的稀释液作为液体试样使用。在所述试样 是固体的情况下，例如可以将所述溶剂中悬浮、分散或者溶解了所述试样 的稀释液作为液体试样使用。对于所述溶剂，没有特别的限制，例如为 水、缓冲液等。对于所述缓冲液，没有特别的限制，例如为Tris缓冲液、 醋酸缓冲液、硼酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、巴比妥缓冲液、各种Good缓 冲液等。对于所述缓冲液的浓度，没有特别的限制，例如为10～100 mmol/L。

在本发明的分析方法中，对于所述色素试剂，没有特别的限制，例如 可以举出混合了所述三价铁化合物和所述氰化物的氰化铁络合物。对于所 述氰化铁络合物，没有特别的限制，例如可以举出硫氰酸铁 ([Fe(NCS)(H₂O)₅]²⁺)铁络合物、铁氰化合物([Fe(CN)₆]^3-)铁络合物等。

在本发明的分析方法中，对于所述三价铁化合物，没有特别的限制， 例如可以举出氯化铁(III)、硫酸铁(III)等。在本发明的分析方法中， 所述三价铁化合物例如可以使用一种，也可以并用两种以上。

在本发明的分析方法中，对于所述氰化物，没有特别的限制，例如可 以举出硫氰酸化合物、铁氰化合物等。对于所述硫氰酸化合物，没有特别 的限制，例如可以举出硫氰酸钾、硫氰酸钠、硫氰酸铵等。在本发明的分 析方法中，所述氰化物例如可以使用一种，也可以并用两种以上。

在所述还原步骤中，例如对于所述色素试剂和所述试样的添加顺序， 没有特别的限制。对于所述添加顺序，例如可以预先将含有所述三价铁化 合物和所述氰化物的氰化铁络合物(以下，也称为“混合色素试剂”)作 为所述色素试剂而与所述试样进行混合，也可以通过混合所述三价铁化合 物、所述氰化物以及所述试样，来混合所述三价铁化合物和所述氰化物的 混合色素试剂与所述试样。在所述还原步骤中，例如还可以添加如前述的 溶剂。

在前者的情况下，对于所述混合色素试剂，例如可以使用将所述三价 铁化合物和所述氰化物分别添加到溶剂中，并以溶液的状态进行混合的混 合液，也可以使用将所述三价铁化合物和所述氰化物添加到溶剂中，并以 溶液的状态使用。所述溶剂例如能够引用前述的例示。在后者的情况下， 可以将所述三价铁化合物、所述氰化物以及所述试样添加到所述溶剂中， 并进行混合。

在所述还原步骤中，对于含有所述试样和所述色素试剂的所述反应体 系的组成比，没有特别的限制。对于所述反应体系中的所述试样的比率 (v/v％)，没有特别的限制，例如为50～99％、优选80～99％、更优选 90～99％。在所述反应体系中，未稀释的试样的比率优选在所述范围中。

在所述反应体系中，对于所述色素试剂的浓度，没有特别的限制。对 于所述反应体系中的所述色素试剂的浓度，例如能够以构成所述色素试剂 的所述氰化物以及所述三价铁化合物的浓度表示。在所述反应体系中，构 成所述色素试剂的所述氰化物的浓度(C)例如为0.006～0.09mol/L、优选 0.018～0.09mol/L、更优选0.05～0.075mol/L，另外，构成所述色素试剂的 所述三价铁化合物的浓度(F)例如为0.0001～0.002mol/L、优选 0.00015～0.001mol/L、更优选0.0002～0.0003mol/L。所述色素试剂的浓度 例如可以是一种色素试剂的浓度，也可以是两种以上的色素试剂的浓度的 总计的浓度(以下，同样)。

在所述反应体系中，对于构成所述色素试剂的所述三价铁化合物和所 述试样的混合比率，没有特别的限制，针对所述试样1mL，所述三价铁化 合物例如为0.0016～0.032mmol、优选0.0024～0.016mmol、更优选 0.0032～0.0048mmol。

在所述反应体系中，对于构成所述色素试剂的所述氰化物和所述试样 的混合比率，没有特别的限制，针对所述试样1mL，所述氰化物例如为 0.096～1.44mmol、优选0.288～1.44mmol、更优选0.8～1.12mmol。

在所述反应体系中，构成所述色素试剂的所述三价铁化合物的比率可 以是一种三价铁化合物的比率，也可以是两种以上的三价铁化合物的比率 的总计的比率(以下，同样)。在所述反应系统中，构成所述色素试剂的 所述氰化物的比率可以是一种氰化物的比率，也可以是两种以上的氰化物 的比率的总计的比率(以下，同样)。

在所述反应体系中，对于所述三价铁化合物(F)和所述氰化物(C) 的比率(摩尔比F∶C)，没有特别的限制，例如为1∶24～1∶357、优选 1∶72～1∶357、更优选1∶200～1∶300。

在所述还原步骤中，混合了所述色素试剂和所述试样的所述反应体系 的pH例如为pH2.4以下、优选pH2.3以下。所述反应体系的pH例如可以 仅通过所述色素试剂和所述试样的混合而被调节，也可以对所述色素试剂 和所述试样进行混合，并且通过pH调节剂的添加而被调节。在前者的情 况下，可以预先调节使得例如所述色素试剂的pH在与所述试样混合时满 足所述pH的条件。此外，在本发明中，如前述，所述还原步骤的所述反 应体系的pH是pH2.4以下。

对于所述pH调节剂，没有特别的限制，例如能够使用强酸性试剂。 所述强酸性试剂例如优选实质性不会变成氧化剂或者还原剂的试剂。具体 而言，所述强酸性试剂例如为硫酸、丙酸、对甲苯磺酸等。所述强酸性试 剂例如可以使用一种，也可以并用两种以上。

在所述反应体系中，对于所述pH调节剂的浓度，没有特别的限制， 例如为0.001～1mol/L、优选0.001～0.1mol/L、更优选0.002～0.01mol/L。 在所述反应体系中，所述pH调节剂的浓度例如可以是一种pH调节剂的浓 度，也可以是两种以上的pH调节剂的浓度的总计的浓度(以下，同 样)。

在所述反应体系中，对于所述pH调节剂和所述试样的混合比率，没 有特别的限制，针对所述试样1mL，所述pH调节剂例如为0.016～16 mol、优选0.016～1.6mol、更优选0.032～0.16mol。

在所述还原步骤中，从所述色素试剂和所述试样的混合至针对所述反 应体系的下一个光学测定步骤为止的处理条件，没有特别的限制。在所述 还原步骤中，所述反应体系例如可以在预定温度下进行孵育，也可以不进 行孵育。所述孵育的温度例如为1～40℃、优选25～30℃。对于所述孵育 的时间，没有特别的限制。

在所述光学测定步骤中，如前述，进行测定的光学信号是所述还原步 骤中得到的还原体的光学信号，例如对含有所述还原步骤中得到的所述试 样和所述色素试剂的所述反应体系进行测定的光学信号对应于所述还原体 的光学信号。对于所述光学信号，没有特别的限制，例如可以举出吸光 度、反射率、透过率等。

在所述光学测定步骤中，对于所述光学测定的峰值波长的范围，没有 特别的限制，能够对应于所述色素试剂的种类而适当决定。在所述色素试 剂为含有氯化铁(III)以及硫氰酸钾的色素试剂的情况下，所述峰值波长 例如为360～630nm的范围、优选400～550nm的范围、更优选450～550nm 的范围。在所述光学测定工序中，所述光学测定可以是所述范围中的一个 点的测定，可以是所述范围中的一部分的范围的测定，也可以是所述范围 的全部的测定。

在所述光学测定步骤中，例如可以将通过所述峰值波长的光学测定得 到的光学信号作为所述试样的还原力，也可以基于通过所述峰值波长的光 学测定得到的光学信号间接地计算出所述试样的还原力。对于所述间接的 计算方法，没有特别的限制，可以举出基于所述光学信号和所述还原力的 相关关系而计算的方法。

以下，关于本发明的分析方法，举例而进行说明，但本发明并不受限 于这些实施方式。具体而言，本实施方式是如下示例：作为所述色素试剂 的构成成分使用作为所述三价铁化合物的氯化铁(III)以及作为所述氰化 物的硫氰酸钾、作为所述试样使用作为所述生物体试样的血液、作为所述 pH调节剂使用作为所述强酸性试剂的硫酸，在所述还原步骤中调制pH2.4 以下的所述还原液(反应液)，关于pH2.4以下的所述还原液，通过光学 测定峰值波长，来分析还原力。

首先，准备所述血液作为所述生物体试样。接着，将所述血液和氯化 铁(III)以及硫氰酸钾进行混合，再添加硫酸。由此，将得到的还原液的 pH调整为pH2.4以下。

对于氯化铁(III)的混合量，没有特别的限制，针对所述血液1 mL，例如为0.0016～0.032mmol、优选0.0024～0.016mmol、更优选 0.0032～0.0048mmol。对于硫氰酸钾的混合量，没有特别的限制，例如为 0.096～1.44mmol、优选0.288～1.44mmol、更优选0.8～1.12mmol。对于硫 酸的添加量，没有特别的限制，针对所述血液1mL，例如为0.016～16 mol、优选0.016～1.6mol、更优选0.032～0.16mol。在硫酸添加后的所述还 原液中，对于硫酸的浓度，没有特别的限制，例如为0.001～1mol/L、优选 0.001～0.1mol/L、更优选0.002～0.01mol/L。硫酸添加后的所述还原液的 pH例如为pH2.4以下、优选pH2.3以下。

对所述还原液进行预定时间孵育，在所述还原液中通过所述血液而对 所述色素试剂进行还原。所述孵育的温度例如为1～10℃，所述孵育的时 间例如为0～5分钟。

接着，关于还原后的所述还原液，光学测定峰值波长。所述峰值波长 例如为450～550nm的范围。

由此，能够分析所述血液的还原力。另外，可以使用通过所述峰值波 长的光学测定得到的光学信号，基于所述光学信号和所述还原力的相关关 系而计算出还原力的值，并将这个值作为还原力。

<还原力的分析试剂>

如前述，本发明的还原力的分析试剂的特征在于，包括含有三价铁化 合物和氰化物的色素试剂、以及pH调节剂，所述pH调节剂是强酸性试 剂，用于所述本发明的分析方法中。本发明的分析试剂的特征在于，包括 所述pH调节剂，对于其他构成以及条件，没有特别的限制。本发明的分 析试剂例如能够引用本发明的分析方法的示例。本发明的分析试剂例如也 可以称为分析试剂盒。

在本发明的分析试剂中，所述色素试剂以及所述pH调节剂例如可以 分别容纳在不同的容器中，也可以以混合或者未混合的方式容纳在同一个 容器中。构成所述色素试剂的所述三价铁化合物以及所述氰化物例如可以 分别容纳在不同的容器中，也可以以混合或者未混合的方式容纳在同一个 容器中。在所述三价铁化合物以及所述氰化物容纳在相同的容器的情况 下，所述色素试剂优选为含有所述三价铁化合物和所述氰化物的溶液。

本发明的分析试剂除了所述三价铁化合物和所述氰化物的色素试剂、 以及所述pH调节剂之外，也可以含有其他试剂。对于所述其他试剂，没 有特别的限制，例如为表面活性剂、有机溶剂、盐等。所述其他试剂例如 可以容纳在与所述色素试剂或者所述pH调节剂不同的容器中，也可以与 所述色素试剂或者所述pH调节剂中的任何一个一起以混合或者未混合的 方式容纳在同一个容器中。另外，在本发明的分析试剂为分析试剂盒的情 况下，本发明的分析试剂例如可以包括使用说明书。

实施例

接着，对本发明的实施例进行说明。此外，本发明不受下述的实施例 的限制。

(实施例1)

在含有白蛋白或者蛋氨酸的试样中，确认峰值波长的偏移的发生，另 外，通过将还原步骤中的还原液(反应液)的pH设为pH2.4以下，确认 了峰值波长的偏移被抑制。

(1)峰值波长的偏移的确认

在生理盐水中添加人血清白蛋白至达到0.5g/L，调制白蛋白试样。另 外，在生理盐水中添加蛋氨酸至达到0.5g/L，调制蛋氨酸试样。

接着，在蒸馏水中添加硫氰酸钾至达到60mmol/L、添加氯化铁 (III)至达到0.25mmol/L，并调制混合色素试剂1。以49∶1的比率(体 积比)混合所述混合色素试剂1和所述白蛋白试样或者所述蛋氨酸试样， 在所述混合之后，在25℃下孵育了3分钟。

然后，对于所述孵育后的还原液，使用吸光光度计(商品名：V- 550，日本分光株式会社制)，测定了400～800nm的吸光度。对照测定了 混合色素试剂1的400～800nm的吸光度。此外，所述还原步骤中的还原 液的pH在含有所述白蛋白试样的还原液的情况下为pH2.7，在含有所述蛋 氨酸试样的还原液的情况下为pH2.7。

图1中示出这些结果。图1是示出所述还原液的吸光度的结果的曲线 图。在图1中，横轴表示波长，纵轴表示吸光度。如图1所示，在对照 中，在480nm附近被观察到峰值波长，与此相对，在所述白蛋白试样以 及所述蛋氨酸试样中，在400nm以下的区域中被观察到峰值波长。从这 些结果中已知，在所述白蛋白试样以及所述蛋氨酸试样中，相对于对照， 峰值波长向短波长侧偏移。

(2)通过强酸性条件对峰值波长的偏移的抑制的确认

蒸馏水中添加硫氰酸钾至达到60mmol/L、添加氯化铁(III)至达到 0.25mmol/L，并且作为所述pH调节剂，添加作为所述强酸性试剂的硫酸 至达到30mmol/L，并调制混合色素试剂2。并且，除了代替所述混合色 素试剂1而使用所述混合色素试剂2，并以80∶1的比率(体积比)混合了 所述混合试剂2和所述白蛋白试样之外，与所述(1)同样，测定了370 nm～650nm的吸光度(实施例)。此外，所述还原液的pH是pH2.1。除 了对照1使用所述生理盐水和所述混合色素试剂1、对照2使用所述白蛋 白试样和所述混合色素试剂1、对照3使用所述生理盐水和所述混合色素 试剂2之外，与所述(1)同样，测定了370nm～650nm的吸光度。

图2中示出这些结果。图2是示出所述还原液的吸光度的结果的曲线 图。在图2中，横轴表示波长，纵轴表示吸光度。如图2所示，在不含有 白蛋白的对照1以及3中，在480nm附近被观察到峰值波长。另外，在含 有白蛋白的对照2中，在440nm附近被观察到峰值波长，相对于不含有 白蛋白以及蛋氨酸的对照1以及3，峰值波长向短波长侧偏移。与此相 对，在所述还原液的pH为pH2.4以下的实施例中，在480nm附近被观察 到峰值波长。从这些结果中已知，通过将还原步骤中的所述还原液的pH 设为pH2.4以下，能够抑制峰值波长的偏移。

(实施例2)

通过使用不同的pH调节剂，将还原步骤中的还原液的pH设为pH2.4 以下，来确认含有白蛋白的试样中的峰值波长的偏移的抑制。

在生理盐水中添加硫氰酸钾至达到60mmol/L、添加氯化铁(III)至 达到0.25mmol/L，并且作为所述pH调节剂，添加作为所述强酸性试剂的 硫酸至和所述试样混合后的还原液中的pH分别达到pH2.1、pH2.3、pH2.5 以及pH2.8，并调制混合色素试剂3～6。并且，代替硫酸使用丙酸，并添 加至与所述试样混合后的还原液中的pH分别达到pH2.0、pH2.3、pH2.6 以及pH2.7，调制混合色素试剂7～10。并且，代替硫酸使用对甲苯磺酸， 并添加至和所述试样混合后的还原液中的pH分别达到pH2.0、pH2.4、 pH2.6以及pH2.8，并调制混合色素试剂11～14。

接着，除了代替所述混合色素试剂2使用所述混合色素试剂3～14之 外，与所述实施例1同样，测定了300～650nm的吸光度。

图3中示出这些结果。图3的(A)-(C)是示出所述还原液的吸光 度的结果的曲线图。在图3中，(A)是使用了硫酸的结果，(B)是使用 了丙酸的结果，(C)是使用了对甲苯磺酸的结果。另外，在图3的(A) -(C)中，横轴表示波长，纵轴表示吸光度。如图3的(A)所示，在作 为所述pH调节剂使用硫酸的情况下，在所述还原液的pH超过pH2.4的混 合色素试剂5以及6中，在470nm附近被观察到峰值波长，与此相对，在 所述还原液的pH为pH2.4以下的混合色素试剂3以及4中，在480nm附 近被观察到峰值波长。另外，如图3的(B)所示，在作为所述pH调节剂 使用丙酸的情况下，在所述还原液的pH超过pH2.4的混合色素试剂9以 及10中，在460～470nm附近被观察到峰值波长，与此相对，在所述还原 液的pH为pH2.4以下的混合色素试剂7以及8中，在480nm附近被观察 到峰值波长。并且，如图3的(C)所示，在作为所述pH调节剂使用对甲 苯磺酸的情况下，在所述还原液的pH超过pH2.4的混合色素试剂13以及 14中，在460～470nm附近被观察到峰值波长，与此相对，在所述还原液 的pH为pH2.4以下的混合色素试剂11以及12中，在480nm附近被观察 到峰值波长。从这些结果中可知，在使用任何一个所述pH调节剂的情况 下，也能够通过将所述还原步骤中的所述还原液的pH设为pH2.4以下， 来抑制峰值波长的偏移。

另外，图4示出总结了使用所述混合色素试剂3～14的情况下的 400～600nm中的峰值波长的曲线图。

图4是示出不同的pH中的峰值波长的曲线图。在图4中，横轴表示 pH，纵轴表示峰值波长。如图4所示，在使用硫酸(○)、丙酸(△)以 及对甲苯磺酸(□)中的任何一个pH调节剂的情况下，也可以与所述还 原步骤中的所述还原液的pH的降低的同时，抑制了峰值波长的偏移。并 且，在所述还原步骤中的所述还原液的pH为pH2.4以下的情况下，峰值 波长几乎固定。从这些结果中已知，在使用不同pH调节剂的情况下，也 能够通过将还原步骤中的所述还原液的pH设为pH2.4以下，来抑制含有 白蛋白的试样中的峰值波长的偏移。

(实施例3)

使用本发明的还原力的分析方法，确认了能够进行生物体试样的还原 力的分析。

除了代替含有白蛋白的试样使用所述人血清试样(n＝4)之外，与所 述实施例2同样，测定了476nm的吸光度(实施例)。另外，通过生理 盐水，对10000μmol/L的标准试样进行2倍连续稀释，制作达到8倍为止 的稀释系列，并将它们作为标准样品。并且，除了代替所述人血清试样， 使用了所述标准样品之外，与实施例1(2)同样，测定了476nm的吸光 度。

接着，基于所述标准样品的还原力以及吸光度，制作了标准曲线。并 且，基于所述标准曲线，计算出了所述人血清试样的还原力。

图5中示出它们的结果。图5是示出所述人血清试样的还原力的结果 的曲线图。在图5中，横轴表示所述人血清试样的种类，纵轴表示还原 力。如图5所示，在任何一个所述人血清试样中，都能够测定还原力。从 这些结果中可知，根据本发明的分析方法，能够进行具有更优异的可靠性 的生物体试样的还原力的分析。

以上，参照实施方式以及实施例说明了本发明，但本发明并不受限于 上述实施方式以及实施例。对于本发明的构成以及细节，能够在本发明的 范围内进行本领域技术人员能够理解的各种变更。

本申请主张2014年3月26日申请的日本申请特愿2014-063735为基 础的优先权，将其中记载的全部内容并入本文中。

工业应用性

根据本发明，能够抑制在分析了所述试样的还原力的情况下的所述吸 收光谱中的峰值波长的偏移。因此，基于所述峰值波长的光学信号，能够 降低分析了还原力的情况下的误差，可以进行具有更优异的可靠性的试样 的还原力的分析。因此，本发明例如在针对源自生物体的各种试样的临床 检查、非诊断或治疗的其他领域等中是极其有用的。