复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量测定方法

摘要

本发明公开了一种复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量检测方法，此法对于同时含酮洛芬与奥美拉唑的其他溶液如复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的释放度溶液也能检测。具体是用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以体积比为45:55的乙腈-0.02 mol/l磷酸二氢钾溶液（用磷酸溶液调节pH值至4.0）混合溶剂作为流动相；检测波长210～240 nm和275～285 nm。分别制备酮洛芬和奥美拉唑的对照品溶液；制备复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的供试品溶液；精密量取供试品溶液和对照品溶液各10～20 μl注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法分别以峰面积计算样品中酮洛芬和奥美拉唑的含量。

说明书

技术领域

本发明属于药物分析检测领域，具体涉及一种复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量及释 放度检查的测定方法。

背景技术

复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊是由酮洛芬和奥美拉唑组成的第一种复方制剂，由瑞典 Meda制药公司研制，商品名为Axorid，在缓解骨关节炎、风湿性关节炎和强直性脊柱炎等疾 病的疼痛时，又能有效防治其不良反应，有效预防胃溃疡及出血，双重保护患者生命健康。 现有技术中没有关于同时测定溶液中酮洛芬和奥美拉唑两种药物成分含量的方法公开。本发 明复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量检测方法，使用一种流动相条件可同时确定该复方制 剂中两种组份的含量；该检测方法的优点是：操作简便；测定结果准确可靠；专属性强；检 测时间较短。

发明内容

本发明的目的是提供一种可方便、快速检测复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量及其释 放度溶液中释放量的HPLC测定方法。

为实现上述目的，本发明采用的以下技术方案实现。

一种复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量检测方法，其特征在于：

(1)色谱条件：

固定相：选用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱；

流动相：以体积比为35:65～55:45的组分A和组分B构成的混合溶剂作为流动相；所述 组分A是乙腈，组分B是浓度为0.01～0.05mol/L磷酸二氢钾溶液、磷酸二氢钠溶液或磷酸二 氢铵溶液，用磷酸溶液调节pH值至2.5～4.5；

优选：体积比为45:55的乙腈-0.02mol/l磷酸二氢钾溶液混合溶剂作为流动相，用磷酸溶 液调节pH值至4.0；

检测波长：210～240nm和275～285nm；优选279nm；

柱温：25～35℃；优选30℃；

流速：流速0.8～1.2ml/min；优选1.0ml/min。

(2)实验材料

a.对照品溶液的制备：精密称取酮洛芬对照品约200mg，置入100ml棕色量瓶，加50 ％乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为酮洛芬贮备液；精密称取奥美拉唑对照品约20mg， 加乙醇20ml与磷酸盐缓冲液(pH11.0)约60ml，振摇使溶解，用磷酸盐缓冲液(pH11.0) 稀释至刻度，摇匀，作为奥美拉唑贮备液。分别精密量取酮洛芬贮备液10，15，20ml与奥 美拉唑贮备液10ml，置入100ml量瓶，加水稀释至刻度，分别作为100mg/20mg、150mg/20 mg和200mg/20mg规格的对照品溶液。

b.供试品溶液的制备：取复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊10粒，取内容物置入500ml 量瓶，加磷酸盐缓冲液(pH11.0)50ml，1mol/L氢氧化钠溶液10ml与乙醇100ml，振摇使 小丸溶解，加磷酸盐缓冲液(pH11.0)稀释至刻度，摇匀，离心处理，精密量取上清5ml置 入100ml量瓶，加水稀释至刻度，摇匀即得。

c.磷酸盐缓冲液(pH11.0)的制备：取0.25mol/L磷酸钠溶液110ml和0.5mol/L磷酸 氢二钠溶液220ml，用水稀释至1000ml，摇匀即得。

(3)分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10～20μl，优选10μl，注入液相色谱仪， 测定，计算得酮洛芬和奥美拉唑的含量。

本发明的优点是通过优化的高效液相色谱法，对复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊中酮洛芬 和奥美拉唑的含量同时进行测定，该方法操作简便，测定结果准确可靠，稳定性好，重复性 好，专属性强，检测时间较短。

附图说明

图1对照品的HPLC图谱(奥美拉唑与酮洛芬的保留时间分别为5.1min和11.8min。)

图2阴性对照溶液的HPLC图谱

具体实施方式

通过以下具体实施方式解释本发明的内容，但不限制本发明。因复方酮洛芬奥美拉唑缓 释胶囊有3个规格，仅将100mg/20mg规格作为实施例提出进行说明。

仪器与试药：

仪器：高效液相色谱仪：SHIMADZU LC-20AT SPD-M20A；色谱柱：R&C(研创)C₁₈柱(250mm×4.6mm，5μm)。

对照品：酮洛芬(中国药品生物制品检定所100337-201104)；奥美拉唑(中国药品生物 制品检定所100367-201305)。

供试品：复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊(山东省药学科学院)。

试剂：色谱级乙睛(Dikmapure公司)，磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵(国药集 团)，磷酸(分析纯)。

溶液配制：

对照品溶液的制备：精密称取酮洛芬对照品约200mg，置入100ml棕色量瓶，加50％ 乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为酮洛芬贮备液；精密称取奥美拉唑对照品约20mg， 加乙醇20ml与磷酸盐缓冲液(pH11.0)约60ml，振摇使溶解，用磷酸盐缓冲液(pH11.0) 稀释至刻度，摇匀，作为奥美拉唑贮备液。分别精密量取酮洛芬贮备液10ml与奥美拉唑贮 备液10ml，置入100ml量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液的制备：取复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊(规格100mg/20mg)10粒，取内 容物置入500ml量瓶，加磷酸盐缓冲液(pH11.0)50ml，1mol/L氢氧化钠溶液10ml与乙 醇100ml，振摇使小丸溶解，加磷酸盐缓冲液(pH11.0)稀释至刻度，摇匀，9000r/min离 心15min，精密量取上清5ml置入100ml量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

以下为本发明复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量测定方法的色谱条件与溶剂的筛选实 验。

1.流动相的选择

参照相关文献并结合试验具体情况，先后选用乙腈-磷酸盐缓冲液(0.01mol/L磷酸二氢 钠，用磷酸调pH值4.0)(55:45，v/v)，乙腈-磷酸盐缓冲液(0.02mol/L磷酸二氢铵，用磷 酸调pH值3.5)(45:55，v/v)，乙腈-磷酸盐缓冲液(0.03mol/L磷酸二氢钾，用磷酸调pH值 为3.0)(35:65，v/v)，乙腈-磷酸盐缓冲液(0.02mol/L磷酸二氢钾，用磷酸调pH值4.0)(45:55， v/v)为流动相，各流动相条件下的分离效果见表1。

表1流动相选择结果

2.流速的选择

选择流速为0.8，l.0和1.2ml/min进行考察，差异较小，最后确定流速为l.0ml/min。

3.柱温的选择

选择柱温为25，30和35℃进行考察，35℃分离变差，最后确定柱温为30℃。

4.溶剂的选择

先后选用乙腈、50％乙腈、磷酸盐缓冲液(pH11.0)、先加磷酸盐缓冲液(pH11.0)50ml， 1mol/L氢氧化钠溶液10ml与乙醇100ml，使小丸溶解后，再加磷酸盐缓冲液(pH11.0)至 刻度为溶剂。溶剂选择结果见表2。

表2溶剂选择结果

以下为本发明含量测定方法的色谱条件确定后，验证其测定效果的实验。

1.色谱条件

以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以乙腈-磷酸盐缓冲液(0.02mol/L磷酸二氢 钾，用磷酸调pH值4.0)(45:55，v/v)为流动相，柱温30℃，流速l.0ml/min，检测波长279 nm。

2.专属性研究

按处方比例将各辅料混合均匀，称取适量置入500ml量瓶，照供试品溶液制备方法制备， 得阴性对照品溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见附图2，由图2可 见，本品辅料不影响两主成分的色谱峰。

3.线性试验与范围

精密称取酮洛芬和奥美拉唑对照品各适量，加稀释液溶解并稀释制成每1ml中约含酮洛 芬1000μg和奥美拉唑200μg溶液，作为贮备液。精密量取贮备液适量，制成每1ml含酮洛 芬/奥美拉唑70μg/14μg、80μg/16μg、90μg/18μg、100μg/20μg、110μg/22μg、120μg/24 μg、130μg/26μg作为线性溶液；精密量取线性溶液各10μl注入色谱仪，记录色谱图。以峰 面积A为纵坐标，浓度(C)为横坐标，进行线性回归，得酮洛芬回归方程：A＝1.445×10⁴C +0.361×10⁴，线性相关系数r＝0.9997，奥美拉唑回归方程：A＝1.552×10⁴C+367.1，线性相 关系数r＝0.9993；其中酮洛芬在69.96～129.92μg/ml范围内与其峰面积呈良好线性关系，奥 美拉唑在14.06～26.11μg/ml范围内与其峰面积呈良好线性关系。

4.稳定性试验

精密吸取供试品溶液10μl，分别于0，3，6，9，12h注入液相色谱仪，记录峰面积，计 算酮洛芬和奥美拉唑的峰面积，RSD分别为0.53％，0.61％，表明供试品溶液在12h内稳 定。

5.精密度试验

精密吸取对照品溶液10μl，重复进样6次，记录峰面积，计算计算酮洛芬和奥美拉唑的 峰面积，RSD分别为0.13％，0.21％。

6.重复性试验

精密吸取供试品溶液10μl，平行6份，按照优选色谱条件测定每份供试品的含量，注入 液相色谱仪，记录峰面积，平均每粒胶囊分别含酮洛芬和奥美拉唑为标示量的99.54％ (RSD＝0.38％)，99.43％(RSD＝0.43％)。

7.回收率试验

按处方比例，精密量取酮洛芬贮备液和奥美拉唑贮备液8，10，12ml各3份，加入辅料， 置入100ml容量瓶，按照上述的优选色谱条件测定，计算回收率。酮洛芬和奥美拉唑的平均 回收率分别为98.83％(RSD＝0.46％)，99.99％(RSD＝0.76％)。

8.复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的含量测定

取复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊(批号FFTA01、FFTA02、FFTA03)10粒，取内容物置 入500ml量瓶，加磷酸盐缓冲液(pH11.0)50ml，1mol/L氢氧化钠溶液10ml与乙醇100ml， 振摇使小丸溶解，加磷酸盐缓冲液(pH11.0)稀释至刻度，摇匀，9000r/min离心15min， 精密量取上清液5ml置入100ml量瓶，加水稀释至刻度，摇匀，用高效液相色谱测定。

a.以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以乙腈-磷酸盐缓冲液(0.02mol/L磷酸 二氢钾，用磷酸调pH值4.0)(45:55，v/v)为流动相，柱温30℃，流速l.0ml/min，检测波 长279nm。

b.分别精密吸取对照品溶液及含量测定项下供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测 定，计算得酮洛芬和奥美拉唑的含量，结果见表3。

表3复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊中酮洛芬和奥美拉唑的含量测定结果

9复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的释放度测定

取复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊(批号FFTA01、FFTA02、FFTA03)的6h时的释放度 溶液，滤过，取续滤液，用高效液相色谱测定：

a.以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以乙腈-磷酸盐缓冲液(0.02mol/L磷酸二 氢钾，用磷酸调pH值4.0)(45:55，v/v)为流动相，柱温30℃，流速l.0ml/min，检测波长 279nm。

b.分别精密吸取对照品溶液及释放度项下供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定， 计算得酮洛芬和奥美拉唑的释放量，结果见表4。

表4复方酮洛芬奥美拉唑缓释胶囊的6h释放度测定结果