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一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的采集和保存方法

摘要

本发明公开了一种聚丙烯酰胺凝胶银染分析图谱的采集和保存方法,采用了特定的软化活性反应试剂减小了玻璃板与聚丙烯酰胺凝胶银染分析图谱之间的吸附力,保证了从玻璃板上分离聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱时聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的完整性,防止由于两者粘附比较牢固而导致分离时损坏聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的情况的发生;同时还利用纤维素膜作为聚丙烯酰胺凝胶银染分析图谱的承载体,纤维素膜在干燥后很轻便,并且还具有一定的韧性,即轻便易携,又方便保存。

著录项

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2017-07-21

    授权

    授权

  • 2015-10-14

    实质审查的生效 IPC(主分类):G01N27/447 申请日:20150616

    实质审查的生效

  • 2015-09-16

    公开

    公开

说明书

技术领域

本发明涉及医学检测样本的采集和保存方法,尤其涉及一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的采集和保存方法。

背景技术

在医学检验的过程中,聚丙烯酰胺凝胶电泳银染、显色后,聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱样本将粘附在玻璃板上,如果要保存分析图谱,需要用凝胶成像分析仪进行图谱采集保存,但凝胶成像分析仪的价格昂贵,不适合中小医疗、研究单位的推广应用;而传统的保存方法通常是拍照或连同玻璃板和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱一并保存,但是一方面,拍照图片对于弱显带的分辨率不高,很容易将有价值的分析图谱丢失;另一方面,玻璃板沉重且易碎,也不利于聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱样本的保存。

发明内容

本发明提供了一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的采集和保存方法,用以解决背景技术中聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的采集和保存方法存在的问题。

为解决上述问题,本发明采用以下技术方案:

一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的采集和保存方法,包括以下五个步骤:

第一步:将医用振荡器的反应槽中加入软化活性反应试剂;

第二步:将粘附有聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的玻璃板板放入软化活性反应试剂中进行加热、振荡,使聚丙烯酰胺凝胶和软化活性反应试剂充分反应,减小聚丙烯酰胺凝胶与玻璃板之间的吸附力;

第三步:用经过活化处理的纤维素膜覆盖在粘附在玻璃板上的聚丙烯酰胺凝胶样本上,再用刮板除去纤维素膜与聚丙烯酰胺凝胶样本之间的气泡;

第四步:揭下纤维素膜;

第五步:将上一步中加下的纤维素膜放入医用干燥器中进行干燥,干燥完成后,取出纤维素膜并放置在指定的位置保存即可。

第一步中所述的软化活性反应试剂的成分主要由两性表面活性剂、碳酸钠、碳酸镁、三聚磷酸钠、硅烷、冰醋酸和去离子水组成,两性表面活性剂占软化活性反应试剂质量百分比的3%-4%,碳酸钠占软化活性反应试剂质量百分比的7%-10%,碳酸镁占软化活性反应试剂质量百分比的2%-3%,三聚磷酸钠占软化活性反应试剂质量百分比的12%-14%,硅烷占软化活性反应试剂质量百分比的2%-3%,冰醋酸占软化活性反应试剂质量百分比的11%-13%,去离子水占软化活性反应试剂质量百分比的56%-59%。

第一步中所述的医用振荡器包括振荡器主体和反应槽,所述的反应槽包括槽体、槽盖、固定件和电磁振动仪,所述的固定件设置在槽体内,固定件由支柱、摇摆臂和塑料螺栓构成,支柱的下表面与槽底固定连接,支柱的上端与摇摆臂的第一端铰接,摇摆臂的第二端设置有螺孔,螺孔的直径与塑料螺栓的直径相匹配,电磁振动仪的非振荡端与槽体底面固定连接。

所述的固定件不少于四个,固定件的支柱沿槽体边沿对称设置。

所述的电磁振动仪不少于四个,电磁振动仪均匀设置在槽底中部。

第三步中所述的纤维素膜的孔径与凝胶颗粒的大小相匹配。

首先,本发明采用了利用特定的活性软化反应试剂来减小玻璃板与聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱之间的吸附作用,保证了从玻璃板上分离聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱时聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的完整性,防止由于两者粘附比较牢固而导致分离时损坏聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的情况的发生;其次,本发明采用与聚丙烯酰胺凝胶颗粒大小相匹配的纤维素膜来作为聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的承载体,一方面,可以保证从玻璃板上分离聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱时聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的完整性;另一方面,纤维素膜干燥后既轻便易携,又方便保存。

附图说明

图1为本发明的流程示意图;

图2为本发明所述的医用振荡器的结构示意图。

具体实施方式

如图1和图2所示,本发明所述的一种聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的采集和保存方法,包括以下步骤:

第一步:将医用振荡器的反应槽中加入软化活性反应试剂,所述的软化活性反应试剂的

主要成分按质量分数百分比混合,软化活性反应试剂的主要成分包括占质量比3.5%的两性表面活性剂、 占质量比8.5%的碳酸钠、占质量比2.3%的碳酸镁、占质量比13.5%的三聚磷酸钠、占质量比2.5%的硅烷、占质量比12%的冰醋酸和占质量比57.7%的去离子水,调节软化活性反应试剂的PH值至5.5,进入下一步;

第二步:将粘附有聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱的玻璃板放入医用振荡器进行加热、振荡,使玻璃板上的聚丙烯酰胺凝胶与振荡器反应槽中的软化活性反应试剂充分反应,首先,两性表面活性剂易吸附于固-水界面,能够减少聚丙烯酰胺凝胶与玻璃板之间的吸附力;其次,软化活性反应试剂中其它介质通过加热、振荡,能够增加分子间的运动,加速物化反应,使聚丙烯酰胺凝胶与玻璃板之间缔合链状的大分子,断裂成单个小分子,溶解盐类的正负离子被单个水分子包围,使软化活性反应试剂中盐离子结合物的针状结晶体变为粒状结晶体,相互粘附与积聚性受到破坏,减少聚丙烯酰胺凝胶与玻璃板之间吸附力;进入下一步;

第三步:用经过活化处理的纤维素膜覆盖在粘附在玻璃板上的聚丙烯酰胺凝胶样本上,

再用刮板除去纤维素膜与聚丙烯酰胺凝胶样本之间的气泡,使纤维素膜与聚丙烯酰胺凝胶完全吸附,本步骤中纤维素膜的孔径与聚丙烯酰胺凝胶颗粒的大小相匹配,以保证聚丙烯酰胺凝胶颗粒能够进入纤维素膜缝隙,从而使聚丙烯酰胺凝胶颗粒与纤维素膜缝隙形成机械性粘合,使得聚丙烯酰胺凝胶与纤维素膜完全吸附,然后进入下一步;

第四步:揭下纤维素膜,由于步骤三中的聚丙烯酰胺凝胶与纤维素膜完全吸附,所以聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱就粘附在了揭下的纤维素膜上了,然后进入下一步;

第五步:将上一步中揭下的纤维素膜放入医用干燥箱中进行干燥,干燥完成后取出,并放置在指定的位置保存即可。

由于传统的医用振荡器并不能加热、振荡大体积的器皿,比如玻璃板和大托盘等,并且传统的医用振荡器也只能在水平方向上晃动,振荡并不充分,因此本发明所述的医用振荡器包括振荡器主体1和反应槽2,所述的反应槽2包括槽体、槽盖、固定件和电磁振动仪7,其中,固定件设置在槽体内,固定件由支柱3、摇摆臂4和塑料螺栓5构成,为了保证槽体内空间的充裕,支柱3紧贴槽体的外边框设置且支柱3的侧面与槽体的外边框固定连接,支柱3的上端与摇摆臂4的第一端铰接,摇摆臂4的第二端设置有螺孔,螺孔的直径与塑料螺栓5的直径相匹配,塑料螺栓5的底端设置有橡胶触头8,防止塑料螺栓5在固定器皿时磨损器皿,同时塑料材质的化学性质不活跃,也可以防止塑料螺栓5因与反应槽2中的反应试剂发生化学反应而损坏;电磁振动仪7的非振荡端与槽底6固定连接且电磁振动仪7的高度值低于槽体的深度值,大体积的托盘等器皿可以放置在电磁振动仪7的振荡端上,并且利用固定件固定,电磁振动仪7的振荡端上还设置有缓冲层,防止器皿在电磁振动仪7上振荡时受到大的撞击而破碎;为了保证大体积的托盘等器皿在加热振动时的稳定性,优选方案为采用四个完全相同的电磁振动仪7,且四个电磁振动仪7均匀的设置在槽底6,还需采用四个完全相同的固定件,四个固定件沿槽体外边框对称设置,这样做一方面可以保证大体积的托盘等器皿在加热和振动时的稳定性,另一方面也可以对器皿进行上下振荡,使反应试剂反应更加充分。

在使用本发明所述的医用振荡器对粘附有聚丙烯酰胺凝胶的玻璃板进行加热、振荡时,先将医用振荡器的反应槽2中加入足量的活性软化反应试剂,然后将粘附有聚丙烯酰胺凝胶的玻璃板浸入活性软化反应试剂并放置在四个电磁振动仪7的振荡端上,然后用塑料螺栓5将玻璃板固定,盖上槽盖并开启医用振荡器即可。

本发明所述的采集和保存方法与现有技术相比具有较大的优势,首先,本发明采用软化活性反应试剂减小了玻璃板与聚丙烯酰胺凝胶之间的吸附力,保证了利用纤维素膜可以将聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱完整的从玻璃板上分离开来,放置聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱在从玻璃板上分离时受到损害;其次,本发明利用的纤维素膜与聚丙烯酰胺凝胶颗粒的大小相匹配,在分离时,能够保证聚丙烯酰胺凝胶和纤维素膜完全吸附,这样就能够轻易的将聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱完整的从玻璃板上吸附到纤维素膜上,纤维素膜干燥后,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析图谱可以完好的保存,与玻璃板相比,既轻便易携,又方便保存。

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