法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2023-09-15
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):A61K 8/00 专利号:ZL2012800747428 申请日:20120830 授权公告日:20180327
专利权的终止
2018-03-27
授权
授权
2015-07-22
实质审查的生效 IPC(主分类):A61K8/00 申请日:20120830
实质审查的生效
2015-03-25
公开
公开
发明人
U.桑塔纳姆 14 North Browning Avenue Tenafly,新泽西 07670
洪奇 15 David Drive Whippany,新泽西 07981
S.殷 112 Harvest Lane Lincoln Park,新泽西 07035
技术领域
本发明一般性涉及用于向皮肤局部施用的包括至少一种 DICKKOPF-1表达调节剂的组合物，和这样的组合物向皮肤提供益处 的用途，所述益处包括但不限于：增亮皮肤；治疗色素沉着过度的皮 肤；增加皮肤厚度；减少色素沉着；减少皮肤多毛症；和/或将皮肤表 型从非掌跖改变为掌跖。
背景技术
在化妆品工业中，日益需要开发可以向皮肤局部施用以改善皮肤 状况和外观的产品。消费者关注减轻或延迟时间性(chronologically)- 或激素性(hormonally)-老化的皮肤的皮肤病学迹象，以及由于环境应 激引起的皮肤老化，比如细线、皱纹、皮肤下垂，及由于表皮和真皮 皮层中的细胞生长、增殖和功能的进行性丧失而引起的其它病症。在 老化过程期间，皮肤的肤色即皮肤的颜色和外观随着衰老和/或长期暴 露于环境应激(例如日光)而缓慢变差。已经开发了大量的化妆品和 医学治疗，以尝试治疗环境损伤的、正在老化的或已经衰老的皮肤。 然而，这样的化妆品或治疗通常含有有机酸作为其活性成分或组分， 且经常伴有消费者的不适，比如灼热、发痒和发红。
用于获得白色或苍白肤色的许多方法是已知的，包括皮肤增亮霜 剂、漂白剂、剥落剂、及口服和可注射药物。许多已知的活性成分包 括α羟基酸、曲酸、抗坏血酸、氢醌和谷胱甘肽，以及天然提取物、 甘草、光果甘草(Glycyrrhiza glabra)、熊果苷、熊果、小球藻提取物、 紫苏提取物、和椰果提取物、以及任一种前述活性成分的衍生物。这 些及其它已知的增亮产品以各种方式作用。一些是基于抑制引起色素 沉着的黑色素的产生，例如硫代二丙酸，比如描述在美国专利申请公 开系列号2004/0126344中的，将其全部并入本文用于所有目的。其它 的是通过促进表皮剥落来除去老皮的酸，例如α羟基酸。虽然许多这 些增亮剂确实起作用，但是许多可能具有严重的副作用。
增亮剂的一些副作用包括，但不限于：发红、发痒、刺痛、灼热、 结硬皮、肿胀、反常变色，及更严重的副作用比如黄褐病，即难于消 非常深色斑块的皮肤外观。使用某些已知的增亮剂也可导致白癜风病， 其中皮肤完全丧失产生色素的能力，产生粉红色斑。
DICKKOPF-1，其是在人手掌和足底皮肤的真皮成纤维细胞中 高度表达的蛋白质，已经表明对于黑素细胞具有旁分泌作用，抑制表 皮中黑素细胞的功能和增殖；这被认为是控制掌跖皮肤上色素沉着的 机制之一(J Cell Biol.2004Apr 26；165(2):275-85,J Invest Dermatol. 2007May；127(5):1217-25.FASEB J.2008Apr；22(4):1009-20,J Investig Dermatol Symp Proc.2009Aug；14(1):73-5)。美国专利 8,198,244描述了局部施用DICKKOPF-1以增加皮肤厚度、减少皮肤 色素沉着和/或降低毛发生长。
黄花七筋姑(Clintonia borealis,C.borealis)，更通常称为 Bluebeard Lily，发现于北美东部到中部区域。该多年生植物生长高 达12英寸，具有革质、发亮的叶片，蓝色浆果且从5月-7月在高无 叶茎上盛开黄色钟样花。美国土著印第安人，比如Potawatami和阿 尔冈琴部落(Algonquins)，将黄花七筋姑用于大量医学目的。例如， 利用该植物的抗炎性质，将新鲜糊状的(poulticed)叶子局部施用于灼 热、疮、挫伤和患有狂犬病的动物咬伤上。该植物的根用于帮助分娩， Arch Chemicals随后制备了来自黄花七筋姑的根的提取物，市售为 Clintonia Borealis。JP 2003306424描述含有Uvularia提取物(包 括黄花七筋姑)的化妆品，用于增强皮肤增亮剂的活性。JP2003292416 A描述一种含有黄花七筋姑的植物的提取溶液的皮肤外用剂，具有皮 肤保湿和预防皮肤粗糙和色素沉着的作用，并且该文献包括黄花七筋 姑的乙醇提取的工作实施例。
在不期望的皮肤和毛发的发育中起作用的许多生理学过程在真核 微生物(比如酵母)中具有对应过程，且酵母提取物已经用于化妆品 应用中。例如，响应于热、UV射线或其它应激，已知酵母产生促进 细胞增殖或细胞活力的因子。参见，例如美国专利号2,239,345。已描 述了含有这种因子的应激的酵母溶解产物，且已表明其用于抵抗某些 应激对皮肤的作用有关化妆品应用中。例如，UV-应激的酵母溶解产 物已经用于化妆品应用中。参见，例如美国专利号5,643,587； 5,676,956；和5,776,441。最近，臭氧应激的酵母溶解产物已经描述用 于保护皮肤细胞免于有害的臭氧作用。参见，例如Scholz等人的美国 专利号6,461,857和6,858,212；和美国专利申请公开号2003/0198682 和2006/0110815。美国专利申请公开号2010/0021532描述了一种酵母 /多酚发酵提取物，其包含有益于皮肤的新活性物，其中该新活性物是 在发酵的关键阶段期间，由属于毕赤氏酵母属的酵母暴露于非细胞毒 性量的作为生长因子的多酚而产生的。但是，这些之前的案件都没有 认识到某些化妆品用途，且没有鉴定细胞溶解产物之内的活性成分。
上述讨论仅是提供了对本领域所面对问题的性质的更好理解，而 不应当以任何方式解释为承认其为现有技术，也不应当将本文引用的 任何参考文献解释为承认这样的参考文献构成本申请的“现有技术”。
发明内容
根据上述和其他目的，令人惊奇地发现，通过用酵母发酵黄花七 筋姑提取物足以使酵母代谢黄花七筋姑提取物的时间，裂解该酵母， 然后纯化可溶性酵母溶解产物组分以除去水不溶性组分制备的酵母提 取物可以用于增加DICKKOPF-1表达，且因此可以用于治疗以向皮 肤提供益处的组合物和方法中，所述益处包括但不限于增亮皮肤；治 疗色素沉着过度的皮肤；减少色素沉着；增加皮肤厚度；减少皮肤多 毛症；和/或将皮肤表型从非掌跖改变为掌跖的驱动作用。
通常，所述组合物和方法用于治疗与色素沉着过度；薄皮肤；多 毛皮肤；和/或不期望的暗肤色有关的任何皮肤病症(状态)。这些益 处据认为至少部分地由所述化合物增加DICKKOPF-1蛋白的细胞表 达的能力引起。换句话说，本发明的化合物为DICKKOPF-1表达增 强剂。
本发明的另一个方面涉及含有从黄花七筋姑提取物的酵母代谢得 到的酵母分离物的组合物向人皮肤提供至少一种益处的化妆品用途。 这样的益处包括：
(a)治疗和/或预防细纹或皱纹；
(b)减小皮肤毛孔大小；
(c)增加和/或保持皮肤厚度、丰满度和/或紧固度的改善，包括治 疗和/或预防皮肤变薄；
(d)改善皮肤柔顺度和/或柔软度；
(e)改善肤色、光泽和/或透明度；
(f)改善皮肤纹理和/或促进再纹理化；
(g)改善皮肤屏障修复和/或功能；
(h)改善皮肤轮廓的外观；
(i)恢复皮肤光泽和/或亮度；
(j)补充皮肤中的必需营养素和/或组分；
(k)改善由绝经降低的皮肤外观；
(l)改善皮肤保湿和/或水合；
(m)增加皮肤弹性和/或回弹力和/或防止其损失；
(n)改善前胶原和/或胶原蛋白合成；
(o)治疗和/或预防皮肤下垂或萎缩；
(p)增加表皮剥落和/或减少干燥；
(q)治疗和/或预防皮肤色素沉着过度；
(r)治疗和/或预防痤疮斑和/或炎症后色素沉着过度。
(s)治疗和/或预防过量的皮脂排出；
(t)治疗和/或预防蜂窝组织；
(u)减少色素沉着；
(v)增亮皮肤；
(w)治疗色素沉着过度的皮肤；
(y)将皮肤表型从非掌跖改变为掌跖表型。
不需要的特征和/或整体美学外观的改善可以包括下述的一种或 多种：增亮皮肤；治疗色素沉着过度的皮肤，包括斑点、老年斑、雀 斑(liver spots)、肤色不均匀、痤疮后斑点、褐斑、红斑块、雀斑(freckles) 和肤色蜡黄；减少时间性老化、光老化、激素性老化和/或光化性老化 的皮肤病学迹象；预防和/或减少线和/或皱纹的外观；减少面部的线 和皱纹的可注意性(noticeability)，减少脸颊、前额上的面部皱纹，减 少眼睛之间的垂直皱纹、眼睛上方和嘴周围的平行皱纹、木偶纹、和 深的皱纹或褶皱的可注意性；预防、减少和/或消除线和/或皱纹的出 现和/或深度；改善眼眶下线和/或眼眶周围线的出现；减少鱼尾纹的 出现；恢复和/或复原皮肤，减轻皮肤的脆性；预防皮肤萎缩；改善肤 色、光泽和/或透明度；预防、减轻和/或改善皮肤下垂；改善皮肤硬 度、丰满度、紧固度、柔顺度和/或柔软度；改善皮肤纹理和/或促进 再纹理化；改善皮肤屏障修复和/或功能；改善皮肤轮廓的外观；修复 皮肤光泽和/或明亮度；使疲劳和/或应激的皮肤病学迹象最小化；抵 抗环境应激；补充皮肤中由于老化和/或更年期而减少的水分，比如必 需营养素或其它皮肤组分；改善雌激素不平衡的影响；改善皮肤细胞 之间的交流；增加细胞增殖和/或倍增；增加由于老化和/或更年期而 降低的皮肤细胞代谢；延迟细胞老化；改善皮肤保湿和/或水合；增加 皮肤弹性和/或回弹力；改善前胶原和/或胶原蛋白合成；增加表皮剥 落；改善微循环；减少干燥；减少色素沉着；增加皮肤厚度；减少皮 肤多毛症；和/或将皮肤表型从非掌跖改变为掌跖表型；和其任意组合。
在一个实施方案中，一种用于改善人皮肤的美学外观的方法，包 括向色素沉着过度的区域局部施用包含在化妆用可接受介质中有效量 的DICKKOPF-1表达增强剂的组合物，其中所述DICKKOPF-1表达 增强剂的存在量足以减少所述色素沉着过度的皮肤区域中色素沉着过 度。
在另一个实施方案中，所述DICKKOPF-1表达增强剂为酵母/黄 花七筋姑发酵提取物。
在另一个实施方案中，所述DICKKOPF-1表达增强剂不包括未 代谢的黄花七筋姑提取物。
在另一个实施方案中，DICKKOPF-1表达增强剂在组合物中的存 在量为约0.0001％-10％。
在另一个实施方案中，DICKKOPF-1表达增强剂包括当加入到所 述组合物中时显示出约5.0至约7.0的pH的酵母菌/黄花七筋姑发酵 提取物。
在另一个实施方案中，DICKKOPF-1表达增强剂来源于水性黄花 七筋姑提取物。
在另一个实施方案中，酵母为巴斯德毕赤酵母(Pichia.pastoris)。
在另一个实施方案中，DICKKOPF-1表达增强剂与至少一种选自 硫代二丙酸(TDPA)或其酯衍生物的其它皮肤增亮剂相组合。
在另一个实施方案中，一种用于改善人皮肤的美学外观的方法， 包括向要增亮的皮肤或毛发局部施用包含在化妆品可接受的介质中有 效量的DICKKOPF-1表达增强剂以足够使该要增亮的皮肤或毛发增 亮的时间。
在另一个实施方案中，用于向人皮肤提供益处的方法包括向有此 需要的皮肤局部施用包含在化妆品可接受的介质中有效量的 DICKKOPF-1表达增强剂的组合物。
在另一个实施方案中，所述DICKKOPF-1表达增强剂施用于显 示出非-掌跖表型的皮肤。
在另一个实施方案中，益处为增加皮肤厚度。
在另一个实施方案中，益处为减少多毛症。
在另一个实施方案中，有效量的DICKKOPF-1表达增强剂的存 在量足够治疗至少一种选自下述的皮肤病学病理：皮肤移植、皮肤溃 疡、皮肤擦伤或撕脱伤/切除(比如，留下体积缺陷的)、由反复性撞击 或机械应力引起的损伤或损伤的倾向、年龄相关的皮肤变化(例如，光 老化皮肤或薄皮肤)、由于类固醇治疗引起的皮肤损伤、不均匀的皮肤 色素沉着、色素沉着过度、炎症后色素沉着、雀斑、香精皮炎、白癜 风(例如，其中患有蔓延性白癜风的受试者期望色素脱失)、色素沉着 胎记(例如，咖啡牛奶斑)、雀斑痣(lentigos)、或由慢性单纯性苔癣引 起的皮肤变化、黑斑病、迟发性皮肤卟啉病、阿狄森氏病、色素沉着 一息肉综合征、黑棘皮病、多毛症、先天性肾上腺增生症、多囊卵巢 综合症、毛发过多和神经性厌食。
在另一个实施方案中，皮肤益处选自：(a)治疗或预防皮肤老化 的迹象，(b)治疗和/或预防线或皱纹；(c)减小皮肤毛孔大小；(d)改 善皮肤厚度、丰满度和/或紧固度；(e)改善皮肤柔顺度和/或柔软度； (f)改善肤色、光泽和/或透明度；(g)改善皮肤纹理和/或促进再纹理化； (h)改善皮肤屏障修复和/或功能；(i)改善皮肤轮廓的外观；(j)恢复皮 肤光泽和/或亮度；(k)补充皮肤中的必需营养素和/或组分；(l)改善由 绝经降低的皮肤外观；(m)改善皮肤保湿和/或水合；(n)增加皮肤弹性 和/或回弹力和/或预防其损失；(o)改善前胶原和/或胶原蛋白合成；(p) 治疗和/或预防皮肤下垂或萎缩；(q)增加表皮剥落和/或减少干燥；(r) 治疗和/或预防皮肤色素沉着过度；(s)改善增亮皮肤作用；(t)治疗和/ 或预防过量的皮脂排出；和(u)治疗和/或预防蜂窝组织。
在另一个实施方案中，皮肤色素沉着过度包括老年斑、斑点状区 域、分散的色素沉着过度区域、褐色区域、腋下区域或黑色斑块 (melasmic patch)。
在另一个实施方案中，所述益处包括减少由痤疮损伤、丘疹或刺 激区域组成的炎症。
在另一个实施方案中，局部组合物包含：0.001重量％至5重量％ 的在化妆品可接受介质中的DICKKOPF-1表达增强剂；其中所述局 部组合物为洗剂、霜剂、精油软膏、凝胶或棒状物(stick)的形式。
在另一个实施方案中，一种治疗皮肤的方法，包括向有此需要的 皮肤区域局部施用有效量的调节DICKKOPF-1表达的酵母发酵产物， 其中通过测量与酵母发酵产物接触过的细胞中编码DICKKOPF-1的 mRNA含量的水平来测定酵母发酵产物调节DICKKOPF-1表达的能 力。
附图说明
图1：当用本发明的制剂处理或保留未处理时的MelanodermTM3D皮肤等同组织。在14天之后，定量黑色素含量，并用图形描述。
图2：当用本发明的制剂(实施例13)处理或保留未处理时的 MelanodermTM 3D皮肤等同组织。在14天之后，进行照相以描述该 组织的外观。处理的MelanodermTM显示比未处理的MelanodermTM更浅的色素沉着。
发明详述
本文公开了本发明的详细实施方案；然而，应当理解所公开的实 施方案仅示例性说明可以以各种形式体现的本发明。另外，结合本发 明的多个实施方案给出的每个实施例意味着是示例性的，而不是限制 性的。进一步，附图不必成比例，某些特征可以放大以显示一个实施 方案部分的详细内容。另外，附图中显示的任何量度、说明等意味着 是示例性的，而不是限制性的。因此，本文公开的特定结构和功能的 细节不被认为是一种限定，而仅被认为是教导本领域技术人员以不同 方式实施本发明的代表性基础。
除非另有规定，否则本文使用的“％重量”或“％wt”指一种组分相 对于组合物的总重量(即，包括任何载体、介质、溶剂、填充剂或在应 用于皮肤前加入的其它组分)的重量百分比。
每当术语参引范围进行定义时，该范围应当理解为明确地公开其 每个要素。作为非限制性实例，1-10％的范围应当理解为包括1％、 2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％和10％及1至10％之间的 所有值。
当两个或多个取代物被认为是“独立地选自”所列举替代物的组 时，其是指每个取代物可以为该组的任何要素，与其它取代物的性质 无关。
除非特别地定义，否则如本文使用的所有术语都意味着具有本领 域中其一般含义。为了描述和主张本发明的目的，定义下述术语：
术语“化妆品可接受的介质”指：适合应用于皮肤的本领域已知的 任何介质，可以包括但不限于：水；植物油；矿物油；酯，比如棕榈 酸辛酯、肉豆蔻酸异丙酯和棕榈酸异丙酯；醚，比如二辛基醚和二甲 基异山梨醇酯；醇，比如乙醇和异丙醇；脂肪醇，比如鲸蜡醇、十六 十八烷醇、硬脂醇和联苯醇；异链烷烃，比如异辛烷、异十二烷和异 十六烷；硅酮油，比如环甲硅油；烃油，比如矿物油、凡士林、异二 十烷和聚异丁烯；多元醇，比如丙二醇、甘油、丁二醇、戊二醇和己 二醇；脂质体；蜡；或上述物质的任意组合或混合物。
术语“减少多毛症”指：受试者的毛发生长量降低，利用 Ferriman-Gawley评分测量(Ferriman DM,Gallwey JD.Clinical assessment of body hair growth in women.J Clin Endocrinol 1961:21:1440–1447)。其为女性中以男性模式生长毛发的表现，以四个 不同严重程度显示在11个不同身体部位中：即，上唇、颏、胸、上背、 下背、上腹、下腹、手臂、前臂、大腿和小腿。由从业者使用 Ferriman-Gawley评分系统对男性模式身体毛发过度程度进行评分。 研究的每个身体部位的记分卡以0(末端毛发(终毛)生长没有过度) 开始至4(大量末端毛发生长)，数字加起来最大计数为36。虽然大多 数专家认为8或以上的修订得分诊断为多毛症，但是一些专家提议最 终得分为6或以上足以指示为多毛症。基于该评分模式和其他临床试 验，多毛症可以评价为轻度、中度和重度。
术语“DICKKOPF-1”指：肽，在一个实施方案中指一种典型的 Wnt信号传导的分泌型拮抗剂，其与Wnt受体脂蛋白受体-相关蛋白 6(LRP6)和跨膜蛋白Kremen(Krn)1和2相互作用。DICKKOPF-1 通过诱导LRP6复合物的胞吞作用来阻断典型的Wnt信号传导，而不 会影响Wnt受体Frizzled。在BMP抑制剂的存在下，DICKKOPF-1 诱导非洲爪蟾(Xenopus laevis)中形成异位头(ectopic heads)，并且在脊 椎动物肢体发育(特别是趾间隙形成)期间，通过与BMP相互作用在调 节细胞凋亡中起关键作用。如本文使用的术语DICKKOPF-1包括人 类和非人类DICKKOPF-1蛋白(例如，大鼠、小鼠和鸡DICKKOPF-1)、 以及功能性DICKKOPF-1片段。DICKKOPF-1蛋白序列的特定、非 限制性实例列出为GenBank Accession Nos.gi37183128、gi31542557、 gi7110719、gi13124053、gi4545252、gi10281590、gi118092551、 gi62858825、gi115313025、gi13124044、gi114630593、gi114630591、 gi114630589、gi29504796、gi16306720、gi46394862和gi5360731。 DICKKOPF-1片段的特定、非限制性实例可以在美国专利No. 7,057,017中找到。本领域普通技术人员应当认识到这些DICKKOPF-1 全长蛋白和DICKKOPF-1片段仅作为实例提供；应当认识到落入所 述类型的其它蛋白。
术语“降低黑色素合成”和相关表达指减少皮肤中的和/或毛发中 沉积的生物合成的一种或多种不同类型黑色素的量，在一个实施方案 中，其指减少黑素细胞-介导的色素沉着过度。
术语“来源于水性黄花七筋姑提取物”指：完全使用水提取方法产 生的、采用黄花七筋姑提取物的酵母发酵过程产生的组合物。
术语“治疗色素沉着过度”指：根除、减少、改善、或逆转受试者 色素沉着的程度，所述色素沉着是相对于受试者的基准色素沉着，由 皮肤中和/或毛囊中以及毛发或皮肤中沉积的生物合成的一种或多种 不同类型黑色素的存在增加导致的。
术语“增亮皮肤”指根除、减少、改善和/或逆转受试者色素沉着的 基准程度。增亮皮肤可以通过观察受试者的Fitzpatrick量表值的变化 来测量。Fitzpatrick量表(也称为Fitzpatrick皮肤分型测定或 Fitzpatrick摄影原版量表)是肤色的数值分类法，且仍然是一种皮肤 病学研究肤色的认可的方法。Fitzpatrick量表测量几个部分，包括基 因配置、对日光照射的反应和晒黑习惯。
I型(得分0-7)，白色；非常白皙；雀斑；典型的白化皮肤
总是灼热，从来没有晒黑
II型(得分8-16)白色；白皙
经常灼热，很难晒黑
III型(得分17-24)米色；非常普遍。
有时轻度灼热，逐渐晒黑成浅棕色
IV型(得分25-30)，带浅棕色的米色；典型的地中海高加索人皮 肤。
很少灼热，容易晒黑为中度棕色。
V型(得分超过30)，深棕色.
非常少灼热，非常容易晒黑
VI型，黑色
从未灼热，非常容易晒黑，深度着色。
术语“酵母/黄花七筋姑发酵提取物”指：用黄花七筋姑提取物一起 发酵的经发酵的酵母的细胞质的和细胞外组分的组合，包括但不限于 养营肉汤、细胞蛋白物质、细胞核物质、细胞原生质物质和/或细胞壁 组分。
本文所有提及的中值或平均颗粒大小都是以体积为基准的。除非 另有说明，否则根据重量百分数提供的所有量都是相对于整体组合物。
本发明的一个实施方案涉及酵母提取物、更具体是酵母/黄花七筋 姑发酵提取物、或者更具体地酵母/水性黄花七筋姑提取物发酵提取物 在应用于面部和/或身体的局部组合物中以改善皮肤的病症(状态)和 美学外观的用途。在另一个实施方案中，本发明的酵母/黄花七筋姑提 取物与如下描述的一种或多种其它活性剂组合提供。
应当理解，如本文使用的术语(动词和名词)治疗包括和涵盖减 少、改善、改进、减轻和/或消除皮肤病学老化作用和/或环境应激。 本发明的组合物和方法适用于治疗(处理)许多身体区域中皮肤的皮 肤病学病症(状态)，所述身体区域包括而不限于脸部、前额、唇、 颈、臂、手、腿、膝、足、胸、背、腹股沟、臀、大腿等。在一个实 施方案中，所述组合物被施用于面部。
在另一个实施方案中，如本文使用的术语治疗包括和涵盖皮肤增 亮。本发明的组合物和方法适用于治疗许多身体区域中皮肤的皮肤病 学病症(状态)，所述身体区域包括而不限于脸部、前额、唇、颈、 臂、手、腿、膝、足、胸、背、腹股沟、臀、大腿等。在一个实施方 案中，所述组合物被施用于面部。
在另一个实施方案中，如本文使用的术语治疗包括和涵盖从非掌 跖表型皮肤向掌跖表型皮肤的变化。本发明的组合物和方法适用于治 疗许多身体区域中皮肤的皮肤病学病症(状态)，所述身体区域包括 而不限于脸部、前额、唇、颈、臂、手、腿、膝、足、胸、背、腹股 沟、臀、大腿等。在一个实施方案中，所述组合物被施用于面部。
在另一个实施方案中，如本文使用的术语治疗包括和涵盖降低多 毛症。本发明的组合物和方法适用于治疗许多身体区域中皮肤的皮肤 病学病症(状态)，所述身体区域包括而不限于脸部、前额、唇、颈、 臂、手、腿、膝、足、胸、背、腹股沟、臀、大腿等。在另一个实施 方案中，所述组合物被施用于面部。
在另一个实施方案中，如本文使用的术语治疗包括和涵盖皮肤增 厚和/或治疗薄皮肤。本发明的组合物和方法用于治疗许多身体区域中 皮肤的皮肤病学病症(状态)，所述身体区域包括而不限于脸部(特别 是鼻和上唇之间的区域)、前额、唇、颈、臂、手、腿、膝、足、胸、 背、腹股沟、臀、大腿等。在另一个实施方案中，所述组合物被施用 于面部。
根据上述目的和其它目的，降低DICKKOPF-1表达的组合物可 以用于向皮肤提供益处的治疗用组合物和方法中，所述益处包括但不 限于使皮肤变暗；治疗色素沉着过度或色素减退的皮肤；增加色素沉 着；降低皮肤厚度；增加毛发生长；和/或将皮肤表型从掌跖改变为非 掌跖驱动作用。
通常，所述组合物和方法用于治疗与色素沉着过度或色素减退、 厚皮肤、头皮皮肤、和/或不期望的薄皮肤色度有关的任何皮肤病症(状 态)。这些益处被认为至少特别地是由化合物降低DICKKOPF-1蛋 白的细胞表达的能力导致的。换句话说，本发明的化合物为 DICKKOPF-1表达抑制剂。
在另一个实施方案中，如本文使用的术语治疗包括和涵盖使皮肤 变暗。本发明的组合物和方法适用于治疗许多身体区域中皮肤的皮肤 病学病症(状态)，所述身体区域包括而不限于脸部、前额、唇、颈、 臂、手、腿、膝、足、胸、背、腹股沟、臀、大腿等。在一个实施方 案中，所述组合物被施用于面部。
在另一个实施方案中，如本文使用的术语治疗包括和涵盖掌跖表 型皮肤向非掌跖表型皮肤的变化。本发明的组合物和方法适用于治疗 许多身体区域中皮肤的皮肤病学病症(状态)，所述身体区域包括而 不限于脸部、前额、唇、颈、臂、手、腿、膝、足、胸、背、腹股沟、 臀、大腿等。在一个实施方案中，所述组合物被施用于面部。
在另一个实施方案中，如本文使用的术语治疗包括和涵盖增加毛 发生长。本发明的组合物和方法适用于治疗许多身体区域中皮肤的皮 肤病学病症(状态)，所述身体区域包括而不限于脸部、头皮、眉梢、 眼睫毛、前额、唇、颈、臂、手、腿、膝、足、胸、背、腹股沟、臀、 大腿等。在另一个实施方案中，所述组合物被施用于面部。
在另一个实施方案中，如本文使用的术语治疗包括和涵盖使皮肤 变薄和/或治疗厚皮肤。本发明的组合物和方法用于治疗许多身体区域 中皮肤的皮肤病学病症(状态)，所述身体区域包括而不限于脸部(特 别是鼻和上唇之间的区域)、前额、唇、颈、臂、手、腿、膝、足、胸、 背、腹股沟、臀、大腿等。在另一个实施方案中，所述组合物被施用 于面部。
如通常已知的，皮肤由多层细胞组成，其可以大致分成两部分—— 上表皮层和下真皮层。
表皮
表皮是皮肤的最顶层，其提供防水且充当针对感染和其他外部成 分的屏障。该层主要由角化细胞组成，其来源于角化细胞干细胞分裂 的基底层(表皮的最深层)。角化细胞通过表皮层向上推，经历逐步分 化。当这些细胞移动至皮肤表面时，角化细胞被去核、弄平且高度角 质化。最后，角化细胞死亡且形成角质层(表皮的最外层)，其充当针 对外来物质和传染剂进入体内且是最小化水分损失的有效屏障。在正 常和健康的皮肤中，角化细胞脱落且每30天连续替换。然而，在老化 皮肤中，角质层因为角化细胞更新速率降低而丧失其保持水分的能力， 且皮肤脱水。
真皮
真皮是位于表皮和皮下组织之间的下层皮肤。其是皮层中最厚的， 包括皮肤的细胞外基质，由成纤维细胞保持。成纤维细胞通过连续地 分泌细胞外基质前体保持结缔组织的结构完整性。在老化皮肤中，确 保胶原蛋白和弹性蛋白纤维两者的合成和成熟之间的平衡及其分解的 成纤维细胞使该平衡向着胶原蛋白和弹性蛋白纤维的分解倾斜。
黑素细胞和皮肤色素沉着
分别通过表皮和毛发纤维中存在的黑色素的水平确定皮肤和毛发 色素沉着。例如，表皮中存在三种不同类型的黑色素：DHI-黑色素， DHICA-黑色素和褐黑色素(pheomelanin)。不同类型的黑色素的颜色 或色度不同。DHI-黑色素是最深的，其颜色微黑。DHICA-黑色素颜 色呈浅褐色。褐黑色素是最浅的，颜色微红。
如上所述，黑色素是在产生色素的细胞(黑素细胞)中特殊的被称 为黑素体的细胞器中合成的。黑素细胞对刺激作出反应且调节黑色素 合成。黑素生成受各种环境因素和激素因素调节。黑素细胞，其包括 少于1％的表皮细胞，对改变黑色素合成的多种信号作出反应。黑色 素沉积在被称为黑素体的细胞器中，其转移到角化细胞。
酵母/黄花七筋姑发酵提取物
在一个实施方案中，天然植物材料为但不限于酵母/黄花七筋姑发 酵提取物，包括其组分或来源于其的提取物，其刺激成纤维细胞和角 化细胞增殖、增加胶原蛋白表达和抑制胶原酶活性，使得当向受老化 或环境应激影响的皮肤局部施用具有该天然植物材料的组合物时，受 老化的皮肤病学迹象影响的皮肤的病症(状态)和美学外观得到改善， 例如通过减轻了面部的线、皱纹和下陷皮肤。总之，这是通过增加皮 肤硬度、皮肤丰满度、皮肤柔软度或皮肤厚度证实的老化皮肤美学外 观的改善。每日施用该局部组合物，且保留在受影响的区域上。
如本文公开的，局部组合物可以包括含量足够刺激成纤维细胞增 殖、刺激角化细胞增殖、增加胶原蛋白的表达、抑制胶原酶活性、降 低黑素细胞中黑色素生成、阻断或减慢黑色素从黑素细胞转移到其它 细胞、或其任意组合的至少一种酵母/黄花七筋姑发酵提取物，与化妆 品、皮肤病学、药物学、或生理学可接受的介质一起。
本发明的酵母/黄花七筋姑发酵提取物是通过称为发酵的特定过 程获得的。当在氧(称为需氧发酵)或不存在或减少氧(称为厌氧发酵) 下，活的真核和/或原核微生物在营养培养基上生长时，发生发酵。发 酵过程可以用一种微生物进行，或者用两个或多个微生物同时或顺序 进行(通常称为共同发酵)。营养培养基通常为定义明确的蛋白、糖、 矿物质等的混合物。这样的培养基是本领域技术人员已知的，且可以 通过各种商业来源获得。
代谢酵母的方法可以用多种微生物进行，比如例如酵母菌、杆菌、 霉菌、植物细胞等。特别地，本发明组合物的一个实施方案是使用酵 母进行发酵。如本文使用的术语“酵母”意味着包括单酵母细胞、多酵 母细胞和/或酵母细胞的培养物。本发明的酵母可以属于本领域技术人 员已知的各种真菌家族，包括但不限于：链孢霉属(Neurospora)、 长喙壳菌属(Ceratostomella)、麦角菌属(Claviceps)、炭角菌属 (Xylaria)、炭豆菌属(Rosellinia)、柔膜菌(Helotium)、核盘霉 属(Sclerotinia)、柄灰包属(Tulostoma)、须腹菌属(Rhizopogon)、 截轴包菌属(Truncocolumella)、毛霉菌属(Mucor)、根霉菌属 (Rhizopus)、虫霉菌属(Entomophthora)、网柄菌属(Dictostylium)、 芽枝霉菌属(Blastocladia)、集壶菌属(Synchytrium)、水霉菌属 (Saprolegnia)、霜霉菌属(Peronospora)、白锈菌属(Albugo)、 腐霉菌属(Pythium)、疫霉菌属(Phytophthora)、根肿菌属 (Plasmodiophora)、块菌属(Tuber)、齿菌属(Hydnum)、茶渍 菌属(Lecanora)、石蕊菌属(Roccella)、鸡皮衣菌属(Pertusaria)、 松萝菌属(Usnea)、扁枝衣菌属(Evernia)、石花菌属(Ramalina)、 树发菌属(Alectoria)、山石蕊菌属(Cladonia)、梅衣菌属(Parmelia)、 冰岛衣菌属(Cetraria)、伞菌属(Agaricus)、鸡油菌属(Cantharellus)、 脐菇属(Omphalotus)、鬼伞菌属(Coprinus)、乳菇属(Lactarius)、 小皮伞菌属(Marasmius)、侧耳菌属(Pleurotus)、鳞伞菌属(Pholiota)、 红菇属(Russula)、乳菇属(Lactarius)、球盖菇属(Stropharia)、 粉褶菌属(Entoloma)、环柄菇科(Lepiotaceae)、伏革菌属(Corticium)、 薄膜革菌属(Pellicularia)、口蘑菌属(Tricholoma)、包脚菇属 (Volvaria)、杯伞菌属(Clitocybe)、金针菇属(Flammulina)、酵 母菌属(Saccharomyces)、裂殖酵母菌属(Schizosaccharomyces)、 酵母菌科(Saccharomycetaceae)、散囊菌属(Eurotium)、曲霉菌 属(Aspergillus)、梭孢壳菌属(Thielavia)、盘菌属(Peziza)、暗 盘菌属(Plectania)、羊肚菌属(Morchella)、耳菌属(Wynnea)、 马鞍菌属(Helvella)、鹿花菌属(Gyromitra)、鬼笔目(Phallales)、 竹荪菌属(Dictyophera)、蛇头菌属(Mutinus)、笼头菌属(Clathrus)、 三叉鬼笔菌属(Pseudocolus)、马勃菌属(Lycoperdon)、秃马勃菌 属(Calvatia)、地星菌属(Geastrurm)、地星科(Radiigera)、Astreus、 鸟巢菌科(Nidularia)、胄腹菌属(Gastrocybe)、地红菇属 (Macowanites)、腹牛肝菌属(Gastroboletus)、地花菌属(Albatrellus)、 新香菰菌属(Neolentinus)、黑孔菌属(Nigroporus)、稀孔菌属 (Oligoporus)、多孔菌属(Polyporus)、牛舌菌属(Fistulina)、 层孔菌属(Fomes)、牛肝菌属(Boletus)、褐孔小牛肝菌属 (Fuscoboletinus)、疣柄牛肝菌属(Leccinum)、褶孔菌属 (Phylloporus)、乳牛肝菌属(Suillus)、松塔牛肝菌属(Strobilomyces)、 条孢牛肝菌属(Boletellus)、银耳菌属(Tremella)、木耳菌属 (Auricularia)、胶脑菌属(Dacrymyces)、栅锈菌属(Melampsora)、 柱锈菌属(Cronartium)、柄锈菌属(Puccinia)、胶锈菌属 (Gymnosporangium)、腥黑粉菌属(Tilletia)、条黑粉菌属(Urocystis)、 隔担菌属(Septobasidium)、湿伞菌属(Hygrocybe)、蜡伞菌属 (Hygrophorus)、湿菌髓(Hygrotrama)、新蜡伞菌属 (Neohygrophorus)、丝膜菌属(Cortinarius)、裸伞菌属(Gymnopilus)、 毛癣菌属(Trichophyton)、小孢子癣菌属(Microsporum)、念珠菌 属(Monilia)、假丝酵母菌属(Candida)、小尾孢菌属(Cercosporella)、 青霉菌属(Penicillium)、芽生菌属(Blastomyces)、尾孢属 (Cercospora)、绿核菌属(Ustilaginoidea)、瘤座孢菌属 (Titbercularia)、镰刀菌属(Fusariurm)、丝核菌属(Rhizoctinia)、 菌丝束菌属(Ozoniurm)、菌核菌属(Sclerotiurm)、地舌菌属 (Geoglossum)或蜜环菌属(Armillaria)。在一个实施方案中，感兴 趣的真菌是属于酵母科的真菌。在另一个实施方案中，感兴趣的是属 于毕赤氏酵母属的真菌。在另一个实施方案中，感兴趣的是属于毕赤 氏酵母种的真菌。在一个实施方案中，在发酵过程中使用巴斯德毕赤 酵母。
通常，属于子囊菌门的酵母是兼性厌氧菌；即，它们可以在存在 或不存在氧下生长。为了本发明的目的，酵母是有氧生长的，因此空 气对于生长很重要。
本发明的酵母/黄花七筋姑提取物包括酵母的细胞质和细胞外组 分，其包括但不限于营养肉汤、细胞蛋白物质、细胞核物质、细胞原 生质物质和/或细胞壁组分。通常，提取物是相对水溶性的，例如等于 或多于1g的酵母提取物溶于1g的水中。提取物也可溶于水/有机溶剂 混合物中，比如但不限于二醇水溶液和甘油水溶液。
酵母发酵方法可以在搅拌槽生物反应器中进行。这样的生物反应 器的实例可以包括例如从New Brunswick Scientific,Edison N.J.或 Applikon Biotechnology Foster City Calif可获得的发酵罐。
为了生产本发明的酵母/黄花七筋姑发酵提取物，巴斯德毕赤酵母 细胞培养物可以在生长培养基中，在25℃至32℃之间生长。一个典型 的酵母发酵培养基的实例通常可以在CRC出版社出版的"Handbook of Microbiological Media"中找到。为了本发明的目的，使用酵母发酵 的特定生长培养基。该生长培养基是化学定义的培养基，且不具有任 何动物副产物。在一个实施方案中，本发明的培养基中唯一碳来源是 来自甘油。
酵母/黄花七筋姑发酵提取物可以通过首先分离生物物质，然后从 酵母的细胞外分泌物提取活性成分获得。可选地，可以通过本领域技 术人员已知的方法将酵母细胞裂解，得到酵母/黄花七筋姑发酵溶解产 物。通常，所述方法包括通过化学、酶催化或物理手段或这些的组合 使酵母细胞壁破裂。可以通过色谱、溶剂萃取、离心、倾析、过滤或 活性炭处理、或本领域技术人员已知的其它方式进一步纯化酵母/黄花 七筋姑提取物。在一个实施方案中，通过本领域技术人员已知的任何 方法，例如蒸发、喷雾干燥、冷冻干燥、带式或转鼓式干燥进一步浓 缩该酵母/黄花七筋姑提取物。
在发酵过程的关键阶段期间，将酵母例如巴斯德毕赤酵母暴露于 黄花七筋姑生长因子之后，该酵母与没有经受黄花七筋姑处理的酵母 相比具有显著的基因组和蛋白组学变化。另外，酵母微阵列的检查表 明由于用黄花七筋姑处理，发酵的巴斯德毕赤酵母内各种基因上调或 下调。术语上调和下调指黄花七筋姑对于酵母内信号传导基因的影响 开启(上调)或关闭(下调)。酵母基因上调和下调可导致蛋白表达的变 化，其允许酵母表达如果黄花七筋姑不存在时通常不会表达的蛋白。
另外，巴斯德毕赤酵母可以摄入黄花七筋姑，且可以将黄花七筋 姑转化成其化学衍生物，比如例如黄花七筋姑的糖或蛋白来源的代谢 物。酵母可以以此作为开始消化黄花七筋姑的方式。在一个实施方案 中，如果酵母在黄花七筋姑的一个可用羟基上将蛋白化学连接于黄花 七筋姑，则这样的分子在2D-凝胶电泳中可以以新蛋白出现。很难区 别这些新化学改变的黄花七筋姑分子与酵母通常表达的正常代谢性蛋 白。然而，一些技术比如MALDI-TOF Mass Spectroscopy可用于鉴 定来自2D-凝胶的蛋白。另外，通过高效液相色谱(HPLC)可以检查黄 花七筋姑的蛋白和糖代谢物。不受理论的束缚，据信发酵形成的黄花 七筋姑的次级代谢物可在酵母/黄花七筋姑发酵提取物以有益方式刺 激人皮肤的能力方面起显著作用，其是仅单独的酵母或黄花七筋姑不 可获得的。
在一个实施方案中，用黄花七筋姑提取物使酵母发酵约72至约 140小时的时间段。在一个实施方案中，在酵母达到对数生长期之后， 将黄花七筋姑提取物供应给该酵母1-2天。在另一个实施方案中，酵 母/黄花七筋姑发酵提取物包含在发酵期间从酵母和黄花七筋姑获得 的寡糖、蛋白和糖基化糖的混合物。在另一个实施方案中，酵母/黄花 七筋姑发酵提取物包括具有剩余、未代谢的黄花七筋姑提取物的部分 代谢的混合物。在另一个实施方案中，使用的黄花七筋姑提取物来源 于黄花七筋姑植物的根。
酵母/黄花七筋姑发酵提取物影响人皮肤的作用可以以本领域技 术人员已知的多种方式测量。在一个实施方案中，可以通过应用分析 技术，例如在特定皮肤细胞(比如角化细胞或成纤维细胞)上的人基 因组微阵列、或通过在单独的皮肤细胞、组织模型或离体或体内皮肤 模型上的蛋白表达分析筛选酵母/黄花七筋姑发酵提取物对皮肤的作 用。在这些试验模型中，由于提取物处理，特定基因和/或蛋白可上调 或下调。能够调节皮肤病症(状态)的基因和蛋白是感兴趣的一个实 施方案。在一个实施方案中，用于本发明的目的感兴趣的是与细胞外 基质表达、黑色素调节、皮肤保湿、表皮剥落等有关的基因和蛋白。 在一个实施方案中，感兴趣的是与环氧合酶表达有关的蛋白，在一个 实施方案中，其是环氧合酶-1和2，以及与细胞外基质蛋白表达有关 的蛋白，在一个实施方案中，所述细胞外基质蛋白表达是I、IV和VI 型胶原蛋白表达。另外，提取物对皮肤黑色素表达的影响也是相当感 兴趣的。
酵母/黄花七筋姑提取物对这些及其它重要的皮肤蛋白表达的作 用可以通过人基因组微阵列分析和蛋白表达、以及通过本领域技术人 员熟知的非侵入性测试方法来监测，所述试验方法包括但不限于改善 保湿、减少皱纹、减少色素沉着、改善肤色等。应用酵母/黄花七筋姑 发酵提取物可以导致测定的皮肤皱纹减少，例如，如通过技术比如 SilFlo硅氧烷模式、PRIMOS和VISIO照相系统等来测量。另外，可 以使用经上皮丢失的水分(TEWL)或肤质测量仪(cutometer)或角质仪 (comeometric)量度来测量保湿。同样地，可以使用比色计测量皮肤色 素沉着。这样的测试技术是本领域技术人员熟知的，且可以在 Handbook of non-invasive methods and the skin,2.sup.nd edition, Serup J,Jemec G B E,Grove G L(ed.),Taylor and Francis Boca Raton Fla.2006中找到，将其公开的内容全部并入本文作为参考。
酵母/植物提取物是市售可获得的，例如由Arch Personal Care Products,L.P.,South Plainfield,NJ销售的酵母提取物的Metabiotics 系列。
在一个实施方案中，最近已经发现酵母/黄花七筋姑发酵提取物通 过增加DICKKOPF-1的表达提供用于下述的治疗：增亮皮肤、增厚 皮肤、减少多毛和/或以其它方式驱动从非掌跖向掌跖皮肤的表型变 化。最近，测定这些酵母/黄花七筋姑发酵提取物在用于减慢老化迹象 的组合物和方法中是有效的抗老化或预防试剂。特别地，增加成纤维 细胞和角化细胞的增殖、表皮和真皮中细胞-细胞粘附、向表皮的细胞 营养、角化细胞之间的细胞-细胞固定和粘附、真皮和表皮之间的交流、 胶原酶过量生成、胶原蛋白表达、及皮肤的机械性质的酵母/黄花七筋 姑发酵提取物减轻时间性-或激素性-老化或光-老化的皮肤的皮肤病学 迹象，比如细纹、皱纹、皮肤下垂，及由于表皮和真皮层中细胞生长、 增殖和功能的进行性丧失而引起的其它病症(状态)。
当以每日方式局部施用时，包含这些酵母/黄花七筋姑发酵提取物 的组合物是有效的。不希望受到理论的束缚，酵母/黄花七筋姑发酵提 取物通过上调DICKKOPF-1表达减少色素沉着；增亮皮肤；治疗色 素沉着过度的皮肤；增加皮肤厚度；减少皮肤多毛症；和/或将皮肤表 型从非掌跖改变为掌跖。在没有要求注射或健康从业者的专业知识下， 局部施用酵母/黄花七筋姑发酵提取物也促进了活性组分的靶向递送。
如本文公开的，组合物具有的酵母/黄花七筋姑发酵提取物的浓度 为基于组合物总重量的约0.0001wt％至约90wt％、约0.001wt％至 约25wt％、约0.01wt％至约10wt％、约0.01wt％至5wt％、约 0.05wt％至约1％、和约0.05wt％到约0.5wt％。本领域普通技术 人员将能够根据特定应用或期望的作用调节所使用提取物的量。
在一个实施方案中，本发明的酵母/黄花七筋姑发酵提取物可以包 含在化妆品或皮肤病学可接受的介质、培养基、稀释剂或载体中。在 涵盖局部施用的一个实施方案中，本发明的组合物包括与人类皮肤相 容的培养基(介质、稀释剂或载体)。该组合物可以配制成具有霜剂或 凝胶、微乳剂，或气溶胶的外观的水溶液、醇溶液、或基于水/醇的溶 液，软膏，洗剂，凝胶，油包水、水包油、或水包油包水三重乳液。 另外，该组合物可以为如上所述含有离子和/或非离子脂质的多孔分散 液形式。适用于这样的组合物的剂量单位是根据本领域使用的常规知 识和技术配制的。
使用天然植物材料的方法
在一个实施方案中，本发明涵盖一种改善皮肤病症(状态)和皮 肤美学外观的方法，包括向受影响的皮肤区域施用含有酵母/黄花七筋 姑发酵提取物的组合物，以便减少色素沉着；增亮皮肤；治疗色素沉 着过度的皮肤；增加皮肤厚度；减少皮肤多毛症；和/或将皮肤表型从 非掌跖改变为掌跖。
另一个实施方案涉及局部组合物作为抗老化预防剂用于改善皮肤 病症(状态)和美学外观的用途，包括向皮肤施用、或经由直接递送 方式引入包括单独的酵母/黄花七筋姑发酵提取物或其与一种或多种 另外的天然植物提取物的组合，其含量能有效地改善与皮肤有关的美 学外观或病症(状态)，其中所述酵母/黄花七筋姑发酵提取物减少色 素沉着；增亮皮肤；治疗色素沉着过度的皮肤；增加皮肤厚度；减少 皮肤多毛症；和/或将皮肤表型从非掌跖改变为掌跖。
在一个特定实施方案中，酵母/黄花七筋姑提取物的提取物提供在 药学、生理学、化妆品和皮肤病学可接受的介质、稀释剂或载体中， 其中所述组合物局部施用于受影响的需要治疗的皮肤区域，例如施用 于皱纹、或薄皮肤、或下陷皮肤，且以治疗老化的皮肤病学迹象和改 善皮肤的病症(状态)和美学外观的有效量保留在受影响的区域上。 通常，组合物呈用于待治疗的受影响皮肤的薄膜施用于皮肤，且通常 将该组合物预防性施用于皮肤的其它区域。
如从业者所理解的，包括含有本发明的酵母/黄花七筋姑发酵提取 物(包括提取物、组分和/或成分)的组合物的化妆处理可以通过例如根 据施用这种组合物的常规技术局部施用如本文描述的化妆品组合物来 进行。局部化妆品组合物通常每日施用一次或两次(例如，早晨和晚 上)，施用至少一周的时期，但是可以包括约2、4、8或12周的时期。 消费者可希望继续使用所述组合物持续一段时间。化妆品组合物施用 于脸部和颈部，但是可以施用于需要美学改善的任何皮肤区域，其中 所述化妆品组合物保留在受影响的皮肤区域，而没有被从皮肤除去或 洗除。常规和普通实施技术涵盖向皮肤应用霜剂、洗剂、凝胶、面膜、 浆液、软膏、贴剂、化妆用品(makeup)、卸妆乳、防晒组合物、等。 化妆品组合物为局部保留型(leave on)制剂，其中还预期呈喷雾形式应 用。
在本发明的一个实施方案中，具有天然植物材料比如但不限于酵 母/黄花七筋姑提取物(包括其组分或来源于其的提取物)的局部组合物 通过任一种下述方法用于改善受老化影响的皮肤的病症(状态)和美 学外观，在一个实施方案中用于已成熟的或成熟中的皮肤：减少时间 性老化、光老化、激素性老化和/或光化学老化的皮肤病学迹象；预防 和/或减少线和/或皱纹的外观；减少面部的线和皱纹的可注意性 (noticeability)，减少脸颊、前额上的面部皱纹，减少眼睛之间的垂直 皱纹、眼睛上方和嘴周围的平行皱纹、木偶纹的可注意性，和在一个 实施方案中减少深的皱纹或褶皱的可注意性；预防、减少和/或消除线 和/或皱纹的出现和/或深度；改善改善眼眶下线和/或眼眶周围线的出 现；改善皮肤轮廓的外观、凹陷的双颊、凹陷的双眼，减少鱼尾纹的 出现；恢复和/或复原皮肤(在一个实施方案中，老化的皮肤)；减轻 皮肤的脆性；改善雌激素不平衡的影响；预防和/或治疗皮肤萎缩；改 善肤色紧固度；预防、减轻和/或改善皮肤下垂；预防、减轻和/或改 善薄皮肤，改善皮肤硬度、丰满度、和/或柔软度；改善前胶原和/或 胶原蛋白生成；改善皮肤纹理和/或促进再纹理化；改善皮肤屏障修复 和/或功能；改善皮肤轮廓的外观；使疲劳和/或应激的皮肤病学迹象 最小化；抵抗环境应激；补充皮肤中由于老化和/或更年期而减少的水 分；改善皮肤细胞之间的交流；增加细胞增殖和/或倍增；增加由于老 化和/或更年期而降低的皮肤细胞代谢；延迟细胞老化；改善皮肤保湿； 增加皮肤弹性和/或回弹力；增加表皮剥落；改善微循环；减少和/或 预防蜂窝组织形成；减少色素沉着；增亮皮肤；治疗色素沉着过度的 皮肤；增加皮肤厚度；减少皮肤多毛症；和/或将皮肤表型从非掌跖改 变为掌跖表型；和其任意组合。
第二活性剂
本发明的组合物除了包括酵母/黄花七筋姑提取物之外可以包括 一种或多种活性皮肤处理剂。
本文公开的组合物包括的适合的其它皮肤处理活性剂包括，但不 限于：印度冷杉(Abies pindrow)提取物、儿茶(Acacia catechu)提取 物、宽叶榆绿木(Anogeissus latifolia)提取物、紫萁(Asmunda japonica) 提取物、印度楝树(Azadirachta indica)提取物、紫铆(Butea frondosa) 提取物、雪松(Cedrus deodara)提取物、余甘果(Emblica officinalis)提 取物、孟加拉榕树(Ficus benghalensis)提取物、光果甘草(Glycyrrhiza glabra)提取物、冬青(Ilex purpurea Hassk)提取物、总状土木香 (Innula racemosa)提取物、川芎(Ligusticum chiangxiong)提取物、 Ligusticum lucidum提取物、粗糠柴(Mallotus philippinensis)提取物、 伊朗芷硬胶(Mimusops elengi)提取物、马齿苋(Portulaca oleracea)提 取物、金色马齿苋(Portulaca sativa)提取物、海马齿苋(Atriplex portulacoides)提取物、海巴戟(Morinda citrifolia)提取物、辣木根 (Moringa oleifera)提取物、补血草(Naringi crenulata)提取物、夹竹桃 (Nerium indicum)提取物、补骨脂(Psoralea corylifolia)提取物、大叶 金花草(Stenoloma chusana)提取物、毗黎勒(Terminalia bellerica)提取 物、tomato glycolipid、钟胞魔芋(amorphophallus campanulatus)提取 物、Olisma orientale提取物、紫雪花(Plumbago indica)提取物、依兰 (Cananga odorata)提取物、毛瓣无患子(Sapindus rarak)提取物、 Curcuma xanthorrhiza提取物、小酸浆(Physalis minima)提取物、 Stephania rotunda提取物、灵芝草(Rhinacanthus nasutus)提取物、葎 草(Humulus scandens)提取物、大花田菁(Sesbania grandiflora)提取 物、Pouzolzia pentandra提取物、蒌叶(Piper betel)提取物、双瓣茉莉 (Jasminum sambac)提取物；Eliptica prostrata Linn提取物；三阴蒂 (Clitoria ternatea Linn)提取物；蝶豆(Ozothamnus obcordatus)提取物； 刺桐(Erythrina flabelliformis)提取物；Lonchocarpus capassa提取 物；绒毛槐(Sophora tomentosa)提取物；汉防己碱；香芹酚；视黄醇 石榴酸酯(Retinyl punicate)；MycoFusions Coriolus黑玉米生物质； MycoFusions Maitake Waxy Hulless大麦生物质；两面针 (Zanthoxylum nitidium)提取物；麦冬(Ophiopogon Thunb.P.E.)提取 物；桔梗(Radix platycodonis)提取物；和Cocculus glaucescens提取 物；桩蛋白(paxillin)；红瓜(Coccinia grandis)提取物；杂三叶草 (Trifolium hybridum)提取物；Eremophila mitchellii提取物；Kunzea ambigua提取物；丹参酮HA；汉防己碱；香芹酚；顺式-6-壬烯醇； 视黄醇石榴酸酯；视黄醇油酸酯；雌马酚；毗黎勒(Terminalia belerica)提取物；千金藤(Stephania)固体提取物；和迷迭香提取物、 L-4-噻唑基丙氨酸、四甲吡嗪、(2S,3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酸、 3-羟基-4,5-二甲基呋喃-2(5H)-酮、黑升麻(black cohosh)、总状升麻 (cimicifuga racemosa)提取物、辣椒(Capsicum amuum)提取物、雪 松(cedar)、Derris Scandens Benth提取物、刺桐(Erythrina flabelliformis)提取物、Withania somniferia提取物、枞针(fir needle) (Abies alba)、Helichrysum gymnocephalum提取物、冬青(Ilex)提取 物、月桂时钟藤(laurel clock vine)(Thunbergia laurifloria)提取物、 Leptospermum lanigerum提取物、灰树花(Grifola frondosa)提取物、 Melicope hayesii提取物、挪威云杉(Norway spruce)、Phyllarthron bojeranum提取物、松叶、胡椒(Piper nigrum)提取物、绒毛槐 (Sophora tomentosa)提取物、云杉针(spruce needles)、侧柏提取物、 1-芳酰基-N-(2-氧代-3-哌啶基)-2-哌嗪或其化妆品可接受的盐、脱硫 生物素、及其相容性组合。
当用活性剂使酵母(例如巴斯德毕赤酵母)发酵(任选地，同时处于 压力下)时，其它第二活性剂可以包括其它酵母发酵产物。这样的第二 活性剂包括美国专利公开序列号2011/0052517中描述的那些，将其全 部内容并入本文作为参考用于所有目的。制备这样的第二活性剂的方 法的实例可以在例如美国专利申请公开系列号2010/0021532中找到， 将其全部内容并入本文作为参考用于所有目的。
其它第二活性剂可以包括而不限于，例如，植物材料(例如，如上 所述)；植醇；抗坏血酸及其衍生物、硫代二丙酸(TDPA)及其酯；类 视黄醇(例如，9-顺式-视黄酸、13-顺式视黄酸、所有的-反式视黄酸及 其衍生物、植烷酸、视黄醇(维生素A)及其酯，比如视黄醇棕榈酸酯、 视黄醇乙酸酯和视黄醇丙酸酯、及其盐等)；羟基酸(包括α-羟基酸和 β-羟基酸)、水杨酸和水杨酸烷基酯；剥落剂(例如，乙醇酸、3,6,9-三 氧杂十一烷二酸等)、雌激素合成酶刺激性化合物(例如，咖啡因及衍 生物)；能抑制5α-还原酶活性的化合物(例如，亚麻酸、亚油酸、非那 雄胺及其混合物)；屏障功能增强剂(例如，神经酰胺、甘油酯、胆固 醇及其酯、α-羟基和ω-羟基脂肪酸及其酯等)。示例性的类视黄醇类包 括但不限于，视黄酸(例如，全反式或13-顺式)及其衍生物、视黄醇(维 生素A)及其酯，比如视黄醇棕榈酸酯、视黄醇乙酸酯和视黄醇丙酸酯， 及其盐。
其它第二活性剂可以包括醋酸生育酚；胡萝卜(野胡萝卜， Daucus carota sativa)；大豆和大豆提取物；藻(三角褐指藻， Phaeodactylum tricornutum)及其提取物；γ谷维醇；野葛(Pueraria lobata)及其提取物；抗坏血酸四己基癸基酯；和虎耳草及其提取物。
介质和组合物
根据本发明，含有酵母/黄花七筋姑提取物的组合物可以进一步包 括抗氧剂、抗炎剂、防晒剂、美容剂，包括化妆用品、抗老化制剂， 例如用于细线和/或皱纹的霜剂、局部用制剂、皮肤渗透促进剂、喷雾 剂等。根据本发明，包含植物组分和另外的成分的这种组合物还可以 配制成多种产品形式。所述组合物可以制备成靶向递送系统，例如霜 剂、洗剂、凝胶、浆液、透皮贴剂等，在一个实施方案中，制备成局 部使用制剂。还可以通过离子电渗疗法实现靶向递送和/或渗透增强。
本发明进一步提供包含植物组分的组合物，用于局部施用或用于 靶向递送而不会诱发显著刺激。因此，本发明的组合物特别地适用于 敏感性皮肤。将组合物施用于皮肤上足够改善皮肤的美学外观的一段 时间。组合物每日一次、两次或每日多次施用。每日施用持续一周、 两周、四周或以上的时间。组合物可以配制成可以包含其它添加剂或 物质和/或被改变以更特异性达到或保留在施用后部位的脂质体。
本发明涵盖包含化妆品或皮肤病学可接受的制剂的组合物，其适 合于接触活的动物组织，包括人体组织，而实际上对于使用者无任何 不利生理效应。本发明包括的组合物可以以任何化妆和/或皮肤病学合 适的形式提供，呈洗剂或霜剂，但还可以在无水或水性基质中以及可 喷雾液体形式提供。用于本发明组合物的其它合适的化妆品形式包括， 例如乳液、唇膏、唇彩、洗剂、面膜、软膏、摩丝、贴剂、润发油、 溶液、喷雾剂、蜡基棒状物或小毛巾。另外，本发明预期的组合物可 以包括一种或多种本领域技术人员常用的和已知的相容性化妆品可接 受的助剂，比如着色剂、香料、润肤剂、湿润剂、防腐剂、维生素、 螯合剂、增稠剂、麻醉剂、抗过敏剂、抗真菌剂、抗微生物剂、其它 抗炎剂、抗氧剂、杀菌剂、色素脱失剂、成膜剂、驱虫剂、药用试剂、 光稳定剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂等， 以及其它植物材料，比如芦荟、甘菊等，并且如下进一步所述。
本发明的局部组合物中可以使用的化妆或皮肤病学可接受的介质 包括，但不限于一种或多种含水体系、甘油、C1-4醇、脂肪醇、脂肪 醚、脂肪酸酯、多元醇、二醇、植物油、矿物油、脂质体、层状脂质 物质、硅氧烷油、水或其任意组合。
在本发明中，介质可以为水相、油相、凝胶、水包蜡型乳液、水 包硅氧烷型乳液、硅氧烷包水型、水包油型乳液、或油包水型乳液的 形式。水相为一种或多种水溶性或水可分散的成分的混合物，所述成 分在室温下(25℃)下可以为液体、半固体或固体。介质构成或可以为 悬浮液、分散液或水溶液或水-醇介质的形式，其可以含有增稠剂或胶 凝剂。基于本领域技术人员具有的知识，本领域技术人员可以选择合 适的产品形式(其中含有该成分)，以及其制备方法。
组合物可以包括或为水相，该水相可以含有水或水和至少一种亲 水性有机溶剂的混合物，所述有机溶剂为比如醇，特别是含有2至5 个碳原子的直链或支链的低级一元醇，例如乙醇或丙醇；多元醇，例 如丙二醇、山梨醇、甘油、一缩二甘油、泛醇、或聚乙二醇、及其混 合物。该水相可以占组合物重量的约0.5至约99.99wt％。在一个实 施方案中，酵母/黄花七筋姑提取物可溶于水。
当本发明的组合物为乳液形式时，其也可以任选地包括表面活性 剂，表面活性剂的量为按组合物的重量计0.1至30％，且在一个实施 方案中，约1至约20wt％。
组合物可以为或包括增稠聚合物，比如两亲性聚氨酯、聚丙烯酸 均聚物或共聚物、聚酯和/或烃-基树脂。聚合物可以溶解或分散在化 妆品可接受的介质中，且任选地与增塑剂组合。
本发明的组合物也可包括油相，其含有在室温(25℃)下为液体的 油溶性的或油可分散的成分，和/或在室温下为固体的油状或蜡状物 质，比如蜡、半固体、树胶、及其混合物。该油相也可含有有机溶剂。
在室温下为液体的合适的油性材料通常称为油类，包括动物来源 的烃基油类，比如全氢角鲨烯；烃基植物油，比如4至10个碳原子的 脂肪酸的液体甘油三酯，例如庚酸或辛酸甘油三酯，或油类比如葵花 油、玉米油、大豆油、葡萄籽油、蓖麻油、鳄梨油、辛酸/癸酸甘油三 酯、或西蒙得木油；矿物质或合成来源的直链或支链烃，比如液体石 蜡及其衍生物、凡士林；合成酯类和醚类，在一个实施方案中为脂肪 醇酯，即例如肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸2-乙基己基酯、硬脂酸2-辛基 十二烷基酯、异硬脂酸异硬脂基酯；羟基化酯，比如乳酸异硬脂基酯、 羟基硬脂酸辛酯、羟基硬脂酸辛基十二烷基酯、脂肪醇的庚酸酯、辛 酸酯和癸酸酯；多元醇酯，比如丙二醇二辛酸酯、新戊二醇二庚酸酯、 二甘醇二异壬酸酯和季戊四醇酯；含有12至26个碳原子的脂肪醇， 比如辛基十二烷醇、2-丁基辛醇、2-己基癸醇、2-十一烷基十五烷醇、 油醇；部分烃基氟代油类和/或氟硅酮油类；硅氧烷油类，比如在室温 下为液体或半固体的挥发性或非挥发性的、直链或环状的聚二甲基硅 氧烷(PDMS)，比如环甲聚硅氧烷和二甲基聚硅氧烷，任选地包含苯基， 例如苯基三甲聚硅氧烷、硅氧烷、及其混合物。这些油类的存在量通 常为油相重量的0wt％至约90wt％、约1wt％至80wt％。
本发明的组合物的油相也可以包括一种或多种化妆品可接受的有 机溶剂。这些溶剂的存在量为基于组合物重量的约0wt％至约60 wt％，优选约1wt％至约30wt％，并且可以选自亲脂性有机溶剂、 两亲性有机溶剂、及其混合物。在本发明的组合物中可使用的合适的 溶剂包括乙酸酯，比如乙酸甲酯、乙酯、丁酯、戊酯或2-甲氧基乙酯； 乙酸异丙酯；烃类，比如甲苯、二甲苯、对二甲苯、己烷或庚烷；含 有至少3个碳原子的醚，及其混合物。
本发明的组合物可以进一步包括化妆品领域通常使用的任何成 分。这些成分包括防腐剂、水相增稠剂(多糖生物聚合物、合成聚合物) 和脂肪相增稠剂、香料、亲水性和亲脂性活性剂、及其混合物。这些 各种的成分的含量为化妆品领域中通常使用以获得其预期目的的量， 且通常在组合物重量的约0.01wt％至约20wt％的范围内。这些成分 的性质及其量必须与本发明的组合物的生产相一致。
本发明的组合物也可以任选地包括另外的颗粒相，通常存在量为 组合物的约0wt.％至约30wt％，优选约0.05wt％至约20wt％，并 且其可以包括化妆品组合物中使用的颜料和/或珠光剂和/或填充剂。 合适的无机颜料包括，但不限于氧化钛、氧化锆和二氧化铈，以及氧 化锌、氧化铁、氧化铬和铁兰(ferric blue)。合适的有机颜料包括钡、 锶、钙和铝色淀和炭黑。合适的珠光剂包括涂布氧化钛、氧化铁或天 然颜料的云母。填充剂的存在量通常为基于组合物重量的约0至约20 wt.％，优选地约0.1wt.％至约10wt.％。合适的填充剂包括滑石、二 氧化硅、硬脂酸锌、云母、高岭土、尼龙(在一个实施方案中是orgasol) 粉末、聚乙烯粉末、聚四氟乙烯、淀粉、氮化硼、共聚物微球比如 Expancel(Nobel Industrie)、Polytrap(Dow Corning)、和硅氧烷树脂微 珠(来自Toshiba的Tospearl)。
本发明的组合物的油相可以包含一种或多种蜡、树胶或其混合物。 蜡包括烃基蜡、氟代蜡和/或硅酮蜡，且可以为植物、矿物质、动物和 /或合成来源。在一个实施方案中，蜡具有大于25℃、大于45℃的熔 点。本发明的组合物可以含有组合物重量的0至约20wt.％的蜡。树 胶通常为高分子量PDMS或纤维素胶或多糖，半固体物质通常为基于 烃的化合物，比如羊毛脂及其衍生物或可选地为PDMS。本发明的组 合物可以含有组合物重量的0至约20wt.％，通常约0.1％wt至约10 wt.％的树胶。
本发明的另一个实施方案涉及通过使用靶向递送系统，例如脂质 体、微球(参见，例如Unger等的美国专利No.5,770,222)等递送所描 述的化合物，使得组分和/或活性组分可以更容易地到达且影响施用区 域(例如，面部或颈或皮肤的其它区域)的皮下层。
在另一个实施方案中，本发明的局部组合物也包括下述至少一 个：皮肤渗透促进剂、表面光滑剂、皮肤丰满剂(skin plumper)、光 散射剂、防晒剂、剥脱促进剂(exfoliation promoter)和抗氧剂。关于 这些及其它合适的化妆品成分的详细内容可以在"International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook"，第10版(2004)，由 Cosmetic,Toiletry,and Fragrance Association(CTFA)出版，第 2177-2299页中找到，将其全部内容并入本文作为参考。
防晒剂保护皮肤不受损害性紫外线影响。在本发明的一个示例性 实施方案中，防晒剂通过使用单一防晒剂或防晒剂的组合来提供UVA 和UVB保护。其中，可用于本发明的组合物的防晒剂为阿伏苯宗、 肉桂酸衍生物(比如，肉桂酸辛基甲氧酯)、水杨酸辛酯、氧苯酮、二 氧化钛、氧化锌或其任何混合物。防晒剂的存在量可以为组合物总重 量的约1wt.％至约30wt.％。加入防晒剂可以防止/减少组合物在包装 中的光降解，以及用于保护皮肤免于紫外线损害。
具有防晒剂的本发明的组合物带给皮肤的美学外观另外的改善， 包括下述至少一种：将晒伤降至最低、将晒黑降至最低、及减少发红。
抗氧剂具有从皮肤清除自由基以保护皮肤免于环境侵袭的作用， 以及其他作用。本发明的组合物中可以使用的抗氧剂的实例包括具有 下述的化合物：α羟基酸(AHA)；过氧化苯甲酰；β羟基酸；酮酸，比 如丙酮酸、2-氧代丙酸、2-氧代丁酸、和2-氧代戊酸；如在美国专利 号5,847,003和5,834,513(将其公开内容并入本文作为参考)中公开的 含氧酸(oxa acid)；水杨酸；脲；或其任何混合物。抗氧剂为3,6,9- 三氧杂十一碳二酸(trioxaundecanedioic acid)、乙醇酸、乳酸或其任何 混合物；酚羟基官能团，比如抗坏血酸及其衍生物/酯；β－胡萝卜素； 儿茶素；姜黄素；阿魏酸衍生物(例如，阿魏酸乙酯、阿魏酸钠)；没 食子酸衍生物(例如，没食子酸丙酯)；番茄红素；还原酸；迷迭香酸； 鞣酸；四氢姜黄素；生育酚及其衍生物；尿酸；或其任何混合物。其 它合适的抗氧剂为呈还原或非还原形式的具有一种或多种硫醇官能团 (--SH)的抗氧剂，比如谷胱甘肽、硫辛酸、巯基乙酸及其它巯基化合 物。抗氧剂可以是无机的，比如亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢盐、亚硫酸 盐或其它含硫的无机盐和无机酸。本发明的组合物可以具有组合物总 重量的约0.001wt.％至约10wt.％，且更指约0.001wt.％至约5wt％ 的抗氧剂。
本发明的组合物也可具有一种或多种下述活性剂、成分或助剂： 麻醉剂、抗致敏剂、抗真菌剂、杀菌剂、螯合剂、着色剂、缓和剂、 润肤剂、乳化剂、芳香剂、保湿剂、润滑剂、增湿剂、pH调节剂、 色素改变剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、 维生素或其任何混合物。这些多种物质的量为化妆品或药物领域的通 常用量，例如其可以占组合物总重量的约0.01％至约20％。
除了所描述的天然植物活性物之外，用于配制到本发明的组合物 中的活性剂的非限制性实例包括对于皱纹和/或细线的治疗有作用的 那些试剂，比如角质层分离剂，即具有脱落、去角质或去垢性质的活 性剂，或可以软化皮肤的角质层的活性剂。抗皱纹或抗细线活性剂的 其它实例包括羟基酸和类视黄醇。这些试剂可以以相对于组合物总重 量的约0.0001％至约5％重量配制。
合适的羟基酸包括，例如乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬 酸、2-羟基链烷酸、扁桃酸、水杨酸及其烷基衍生物，包括5-正辛酰 基水杨酸、5-正-十二烷酰基水杨酸、5-正-癸酰基水杨酸、5-正辛基水 杨酸、5-正庚氧基水杨酸、4-正庚氧基水杨酸和2-羟基-3-甲基苯甲酸 或其烷氧基衍生物，比如2-羟基-3-甲氧基苯甲酸。
示例性的类视黄醇类包括但不限于，视黄酸(例如，全反式或13- 顺式)及其衍生物、视黄醇(维生素A)及其酯，比如视黄醇棕榈酸酯、 视黄醇乙酸酯和视黄醇丙酸酯，及其盐。
在一个实施方案中，用于局部施用的组合物可以为用于皮肤、面 部、颈、手、足、或身体其他区域的保护性护理组合物的形式。非限 制性实例包括日用霜或洗剂、夜用霜或洗剂、防晒霜、洗剂或油、身 体乳、化妆用品(粉底)、人工晒黑组合物、脱毛剂和贴剂。
乳化剂在本发明的乳液组合物中的存在量通常为相对于组合物总 重量的约0.1％至约30％重量和约0.5％到约30％重量。然而，并非所 有组合物都应当必然地包括乳化剂。
色素沉着过度
在某些实施方案中，本文所述的化妆品组合物可用于治疗和/或预 防皮肤和/或毛发的色素沉着过度，例如增亮皮肤或毛发。在某一个实 施方案中，包含有效量的酵母/黄花七筋姑发酵提取物的组合物局部施 用于皮肤或毛发，例如色素沉着过度的皮肤或毛发的区域。色素沉着 过度包括个体的皮肤或毛发的任何着色，其比个体所需的更深且由黑 素细胞造成。这种不需要的色素沉着也可称为变色。皮肤的色素沉着 过度区域包括分散的或斑点状色素沉着过度的区域。分散的色素沉着 过度的区域可以为较深颜色的独特均一区域，且可以表现为皮肤上的 棕色斑或雀斑，包括通常称为色素斑或“老年斑”的标记。皮肤的斑点 状色素沉着过度的区域可以为深色斑点，其在大小和形状上比分散的 色素沉着的区域更大且更不规则。色素沉着过度的区域也包括晒黑的 皮肤区域，例如由于UV暴露引起的晒黑的皮肤。色素沉着过度的毛 发包括比所需更深的毛发的任何色度。
皮肤色素沉着过度可由多种因素造成，包括例如遗传、UV或日 光暴露、年龄、瘢痕形成、或由于皮肤损伤引起的变色，所述皮肤损 伤包括撕裂、灼热、晒伤、痤疮或其它皮肤病学状况等。例如，皮肤 色素沉着过度的区域包括黑色素斑块。黑斑病是涉及面部皮肤变色的 常见皮肤病症(状态)，一个孕妇中普遍的实施方案，其称为面部黄 褐斑或黄褐斑。黑色斑块(或黄褐斑)可以呈深棕色、不规则的斑块出 现在面部，一个实施方案，其出现在上面颊、鼻、唇、上唇和前额。 斑块通常随时间推移逐渐发展，而一般不发痒或以其它方式损刺痛， 但可以对个体的外观有不利影响。皮肤色素沉着过度也指例如变成或 正变成比所需更深的腋下区域。
皮肤色素沉着过度可以包括或可以不包括比个体所期望的更深的 个体眼部下区域，通常称为“眼部下深色环”或“深色环”。深色环通常 为各眼下圆形均一的色素沉着区域，其可以由遗传、过敏、疲劳或其 它原因引起。在某些实施方案中，治疗色素沉着过度不包括治疗面部 皮肤中眼部下的变色和/或下垂(bagginess)。值得注意地是，眼部下的 色素沉着过度不是简单的黑素细胞介导的色素沉着问题。病源包括循 环机能不良，比如血管通透性增加引起皮肤表面下渗漏，和暴露于环 境，且该问题通常对已知的色素减少或皮肤增白化合物反应不好。实 际上，在该情况下，用于眼部下变色的局部组合物包括高比例的抗坏 血酸基磷酸酯，其本身为已知的皮肤增亮剂，且因此可能是造成眼部 下皮肤增亮的原因。色素沉着过度的皮肤也可包括腋窝(即，腋下)区 域中的皮肤。
治疗色素沉着过度或色素沉着过度的皮肤/毛发指根除、减轻、改 善或逆转一种或多种与色素沉着过度有关的不需要的特征，比如在受 影响的区域中产生可感觉到的皮肤或毛发的增亮。增亮皮肤的色素沉 着过度的区域可能是需要的，在一个实施方案中，用于减少老年斑； 增亮晒黑的皮肤；均匀化或最佳化肤色，例如在斑点状色素沉着过度 的区域中；用于治疗黑斑块和黄褐斑块、雀斑、烧伤后瘢痕和损伤后 色素沉着过度。预防色素沉着过度或色素沉着过度的皮肤是指还没有 受色素沉着过度影响的皮肤提供益处，益处用于避免、延迟、防止或 最小化一种或多种与皮肤色素沉着过度有关的不需要的特征，比如减 少最终发展出的色素沉着过度区域的暗度或大小。
能够治疗和/或预防色素沉着过度的皮肤的酵母/黄花七筋姑发酵 提取物可称为“皮肤增亮剂”。当用于增亮毛发时，其可以称为“毛发增 亮剂”。在一个实施方案中，本发明的酵母/黄花七筋姑提取物可以以 非漂白方式用于增亮毛发-即，通过抑制从毛囊黑素细胞中黑色素的形 成和/或转运，而不是通过漂白毛发本身。在一个实施方案中，相对于 头皮毛发，本发明增亮的毛发包括面部毛发和身体毛发。在一个实施 方案中，毛发增亮剂施用于位于上唇的面部毛发。
皮肤(包括唇)和毛发的色素沉着是通过表皮或毛发纤维中存在的 黑色素的含量和类型测定的。例如，DHI-黑色素(最深类型的黑色素) 的表皮含量越高，则皮肤越深。如上所述，黑色素是在色素细胞(也称 为色素产生细胞或黑素细胞)内称为黑素体的特定细胞器中合成的，且 该过程是由酪氨酸酶将氨基酸酪氨酸转化为多巴醌开始。
因此，本发明的另一个方面涉及除了所述酵母/黄花七筋姑发酵提 取物之外进一步包含钙流入抑制剂的组合物用于皮肤和/或毛发增亮 的化妆品用途。如本文使用的“钙流入抑制剂”指用于降低、减少、阻 断、或以其它方式抑制钙进入色素细胞作用的任何化合物。该术语在 本文中与“钙离子通道抑制剂”可互换地使用。钙流入抑制剂包括本领 域已知用于调节钙进入色素细胞的化合物，比如而不限于二苯基硼酸 2-氨基乙基酯(2-APB)。例如，已知该化合物特定地阻断钙进入细胞中， 包括进入色素细胞中。其它已知的钙流入抑制剂包括，而不限于氨基 六氢芴、苄普地尔、钙阻蛋白(Calcicludine)、Calciseptine、氯化卡米 达佐(Calmidazolium chloride)、硝苯地平、维拉帕米、FS2(Dendroaspis polylepis polylepis)、加兰肽、普罗托平、四氢巴马汀、生长抑素-14、 L-Stepholidinealverine及其盐；以及锰和其盐、镁和其盐。参见，例 如EP 1419764；国际专利申请公开号WO 2006048671；和美国专利 申请公开号2009/0028826；和修饰的应激的酵母提取物，例如在美国 专利公开系列号2011/0052517中描述的，将其全部内容并入本文作为 参考用于所有目的。包含钙流入抑制剂的化妆品组合物令人惊奇地起 减少黑色素合成作用，且相应地在皮肤或毛发增亮产品中得到应用， 例如用于治疗和/或预防皮肤色素沉着过度，或漂白毛发。能够治疗和 /或预防色素沉着过度的皮肤的钙流入抑制剂也可称为“皮肤增亮剂”。 当用于增亮毛发时，它们也可以称为“毛发增亮剂”。在色素沉着过度 应用中使用的组合物应当包括有效量的一种或多种钙流入抑制剂，以 治疗和/或预防色素沉着过度，例如增亮受影响区域中的皮肤/毛发。
在某些实施方案中，本发明的组合物包括酵母/黄花七筋姑发酵提 取物与至少一种钙流入抑制剂的组合，所述酵母/黄花七筋姑发酵提取 物的量当在局部施用至给定皮肤(或毛发)区域之后足以减少其中的黑 色素合成。
在某些实施方案中，用于治疗和/或预防色素沉着过度(例如，增 亮皮肤(或毛发))的化妆品组合物进一步包括至少一种其它皮肤增亮剂 (或一种其它毛发增亮剂)。例如，化妆品组合物可以包括有效地治疗 和/或预防色素沉着过度的量包含含金属-复合肽的修饰的肽(包含酵 母/黄花七筋姑发酵提取物和/或钙流入抑制剂)，可以进一步包括至 少一种其它皮肤增亮剂(或至少一种其它毛发增亮剂)。例如，在某些 实施方案中，可以包括酪氨酸抑制剂，包括在KR 2005095167；JP 2003252743；和JP 61260009中公开的任一种酪氨酸抑制剂。可以施 用于皮肤(或毛发)以增亮皮肤(或毛发)的任何其它物质也可以用作另 外的皮肤(或毛发)增亮剂与本文所述组合物一起使用。皮肤增亮剂的 实例包括而不限于氢醌、曲酸、N-乙酰基葡萄糖胺、甘草和/或其衍生 物、抗坏血酸和/或其衍生物、熊果苷、熊果、光果甘草及其衍生物、 小球藻提取物、紫苏提取物、椰果提取物、和/或其它脱色试剂。紫苏 提取物作为增白剂公开在例如美国专利号5,980,904和日文公开号 07025742、07187989、10265322、2001163759和2001181173中。椰 果提取物作为增白剂公开在日本专利号2896815B2中。
其它皮肤增亮剂包括紫铆(Butea frondosa)、补血草(Naringi crenulata)、乌蕨(Stenoloma chusana)、印度苦楝(Azadirachta indica)、光果甘草(Glycyrrhiza glabra linn.)、檄树(Morinda citrifolia)、番茄糖脂、硫代二丙酸(TDPA)和/或其衍生物、或其任意 组合。以及抗坏血酸基糖苷、维生素C、视黄醇和/或其衍生物、熊 果苷、皱叶酸模(rumex crispus)提取物、乳蛋白(包括水解的乳蛋 白)、N,N,S-三(羧甲基)半胱胺、齐墩果酸、紫苏油、胎盘提取物、 saxifragia sarmentosa、桧酸、硫代二丙酸(TDPA)和/或其衍生物、川 芎(ligusticum chiangxiong hort.)、asmunda japonica thunb.、繁缕 (stellaria medica(L.)cyr.)、垂盆草(sedum sarmentosum bunge)、 女贞子(ligusticum lucidum Ait.)、冬青(ilex purpurea hassk)、余甘 子(emblica)、芹菜素(apigenin)、抗坏血酸棕榈酯、carruba黄 花七筋姑、橙皮素、稻田氏(inabata)黄花七筋姑、异甘草素 (isoliquirtigenin)、kaempherol-7-新橙皮糖、L-含羞草碱、木樨草素 (luteolin)、油溶性甘草提取物P-T(40)、含氧酸、异硫氰酸苯酯、 cococin、水飞蓟素、T4CA、四氢姜黄素、unitrienol、熊果酸-齐墩 果酸、UVA/URSI、或其任意组合。进一步，在某些实施方案中，预 期可以用一种或多种这种另外的皮肤(或毛发)增亮剂与本发明的组合 物的组合得到协同改善。例如，在某些实施方案中，本发明涉及一种 或多种本文所述组合物与TDPA的协同作用，例如用于向皮肤提供增 加皮肤增亮益处。
皮肤厚度
除了DICKKOPF-1表达增强剂对皮肤色素沉着的作用之外， DICKKOPF-1表达增强剂也增加非掌跖皮肤中的皮肤厚度。这可用于 治疗各种皮肤病学病症(状态)，例如皮肤移植、皮肤溃疡、皮肤擦 伤或撕脱伤/切除(比如，留下体积缺陷的那些)、由反复性撞击或机械 应力引起的损伤或损伤的倾向、年龄相关的皮肤变化(例如，变薄或起 皱皮肤)、或由于类固醇治疗引起的皮肤损伤。
在皮肤的掌跖区域中的表皮比在非掌跖区域中的更厚且着色更 少。在掌跖真皮中的成纤维细胞经由间质细胞-上皮细胞相互作用来诱 导厚表皮和非掌跖角化细胞中角蛋白9的表达，而非掌跖真皮中的成 纤维细胞不会(Yamaguchi et al.,J.Invest.Dermatol.112:483-488, 1999)。
非掌跖表皮(不包括真皮部分)可以被移植以治疗(例如，由糖尿病 (Yamaguchi et al.,Brit.J.Dermatol.151:1019-1028,2004)和风湿性 疾病(Yamaguchi et al.,Brit.J.Dermatol.152:664-672,2005)引起的) 掌跖皮肤缺损，因为其可以经由间质细胞-上皮细胞相互作用获得掌跖 表型(Yamaguchi et al.,Arch.Dermatol.137:621-628,2001； Yamaguchi and Yoshikawa,J.Dermatol.28:521-534,2001)。
与Wnt受体脂蛋白受体-相关蛋白6(LRP6；Mao et al.,Nature 411:321-325,2001)相互作用的DICKKOPF-1为典型的Wnt信号通路 的分泌型拮抗剂，其涉及β-连环蛋白和含有糖原合酶激酶3β (GSK3β)、axin、结肠腺瘤样息肉(APC)和Akt的多种蛋白复合物 (Kawano&Kypta,J.Cell Sci.116:2627-2634,2003)。
HOX基因家族成员是调节胚胎发育的主轴和副轴中模式的的转 录因子，其也控制趾数和形态发生(Zakany et al.,Science 304:1669-1672,2004)。在肢体发育期间HOX基因的共线调节类似于 在躯干中看到的：位于HoxD复合物(HoxD8)中间的基因在肢芽的近 端区域中表达，而位于上游的基因具有更远端的表达(HoxD12； Kmita et al.,Nature 420:145-150,2002)。也已知HOX基因随生长因 子而引导局部解剖的/位点特异性的胚胎神经元分化，特别是由成纤维 细胞分泌的那些生长因子(Dasen et al.,Nature 425:926-933,2003)， DICKKOPF-1对HOX基因表达的作用—通过施用DICKKOPF-1表 达增强剂比如酵母/黄花七筋姑发酵提取物来介导的DICKKOPF-1的 过表达而增强—可引起掌跖表型和/或一种或多种其特征的表达。
本文提供用于治疗具有薄皮肤(例如，由于老化或用局部类固醇 治疗引起的)的受试者的示例性的方案。然而，本领域技术人员可看 到这样的治疗方案也适用于治疗其它引起薄皮肤的病症(状态)，例 如当受试者具有皮肤移植、溃疡、磨损或由反复性撞击或机械应力引 起的外伤时。在某些实施方案中，治疗的皮肤位于手上，例如在年龄 相关的皮肤变薄中，且在某些实施例中，DICKKOPF-1表达增强剂以 手乳剂(creme)或洗剂的形式提供。
在某些实施方案中，受试者具有掌跖灼热、足溃疡(例如糖尿病 足溃疡)、或另一种类型的侵蚀性损伤，比如由胶原蛋白疾病产生的 那些损伤，比如全身性硬化症、多发性结节性动脉炎(poly arthritis nodosa)和类风湿性关节炎。在某些实施例中，这些类型的皮肤损伤用 来源于躯体的表皮或来自成纤维细胞工程化的组织的移植物进行治 疗，该移植物是通过DICKKOPF-1诱导以获得跖表型。跖表型产生 对进一步损害具有抵抗性的更持久的皮肤移植。因此，以其它方式难 处理的掌跖伤口例如具有暴露骨骼的伤口，可以例如用骨髓暴露、闭 合敷料、表皮移植处理，和用DICKKOPF-1处理。参见，例如Atiyeh et al.,(2005)Burns,31:944-956，闭合灼热及其它伤口的方法的综述； Wong et al.,(2007)Br.J.Dermatol.156:1149-1155，使用成纤维细胞 用于组织工程化的方法的综述；和Yamaguchi et al.(2004)Br.J. Dermatol.151:1019-1028，愈合具有暴露的骨骼的难治疗的糖尿病足 溃疡的方法，将其全部并入本文作为参考。在每种情况下，移植物组 织在移植之前或之后暴露于DICKKOPF-1，以便诱导持久的掌跖表 型。
局部DICKKOPF-1表达增强剂治疗法适于治疗急性变薄皮肤或 皮肤移植，以及用于维持在治疗急性状况之后所看到的改善。简而言 之，基于乳液的DICKKOPF-1表达增强剂制剂每日局部施用于受试 者的受影响的区域一次、两次或多次，通常为早晨和晚上。 DICKKOPF-1表达增强剂的典型的剂量为每kg体重0.1μg至每kg体 重1μg，取决于病症的严重程度、受试者的年龄、受试者对不良副作 用(比如灼热或发红)的敏感性。在某些实例中，局部施用约10-1,000 ng/mL的DICKKOPF-1表达增强剂，例如约50ng/mL到约500 ng/mL，或约100ng/mL。治疗持续至少六周或直到获得预期效果。 在某些情况下，治疗持续12、24、36或更多周。
一旦达到期望的皮肤增厚程度，将DICKKOPF-1表达增强剂施 用减少为每日一次。在某些情况下，治疗会无限期地持续，而在其它 情况下，在一段时期的维持治疗之后中止治疗。
无需进一步详细描述，据信本领域技术人员可以使用本说明书， 以最大范围地利用本发明。下述实施例仅仅为示例性的，而不以任何 方式限制本发明。
具体实施方式
实施例1：黄花七筋姑提取物的制备
收集黄花七筋姑，并制备成1:5水浸出液，其中200mg的无水植 物材料得到1ml的提取物。浸出液为无溶剂的水性制剂。
实施例2：酵母/黄花七筋姑发酵提取物的制备
将如上所述的黄花七筋姑提取物用标准巴斯德毕赤酵母发酵培养 基发酵72-140小时的时间段，直到如通过光密度测量评价植物组分至 少部分被代谢。将粗酵母/黄花七筋姑提取物溶解，并研磨以释放水可 溶性细胞壁组分，包括多糖。通过过滤除去不溶性组分，以便改善颜 色和气味。保存最终液体发酵提取物产品。
实施例3：成纤维细胞的组织培养
使成年人的人真皮成纤维细胞(22岁；级联；#5C0759)在含有10％ FBS、1％L-谷氨酰胺和1％P/S的成纤维细胞生长培养基中生长。将 成纤维细胞以350,000细胞/孔的密度接种在6-孔培养板上，并培养过 夜。从各孔移除上清液。向细胞中加入含有介质或酵母/黄花七筋姑发 酵提取物的无血清培养基(1％L-谷氨酰胺、1％P/S，且无FBS)。在 处理后48小时，收集细胞溶解产物。
实施例4：蛋白浓度的测定
通过考马斯蛋白测定(Coomassie protein assay)来测定蛋白浓 度。简而言之，使用牛血清白蛋白(BSA)制成标准品。制备1:100稀释 的细胞溶解产物。将标准品与溶解产物与等量的考马斯溶液 (#1856209；Thermo Scientific)混合。向96孔板中加入0.2ml的混合 物，并在570nm读取。
实施例5：DICKKOPF-1的量的测定
使用来自R&D System(DY1906E)的DICKKOPF-1ELISA试剂 盒测定DICKKOPF-1的量。遵照制造商的方案。简而言之，用4 microG/ml的俘获抗体以100微升/孔涂布96孔板过夜。将培养板洗 涤3次，使用300微升/孔的试剂稀释剂(在PBS中的1％)阻断1小时。 洗涤培养板3次。使用来自考马斯蛋白测定的数据制备试验样品；因 此，所有样品都具有等量的蛋白。将DICKKOPF-1标准品和试验样 品以100微升/孔加入到培养板2小时。洗涤培养板3次，然后加入100 微升的检测抗体(50ng/mL)，并培养2小时。洗涤培养板3次，接着 加入100微升/孔的抗生蛋白链菌素-HRP 20分钟。洗涤培养板3次， 然后加入100微升/孔的基质溶液20分钟。加入50微升/孔的终止溶 液，接着温和地轻拍培养板。在450nm读取培养板。
实施例6：在用黄花七筋姑/酵母发酵提取物处理后体外 DICKKOPF-1表达增加
如表1所示，用酵母/黄花七筋姑发酵提取物处理的成纤维细胞诱 导DICKKOPF-1在蛋白含量中的表达。
表1
实施例7：采用酵母/黄花七筋姑发酵提取物体外增亮皮肤
设计实验以评价酵母/黄花七筋姑发酵提取物在已知的皮肤增亮 剂的存在下证实体外增亮皮肤功效的能力。制备两种成分掺合物：掺 合物1含有硫代二丙酸/酯、抗坏血酸四己基癸基酯、应激的酵母提取 物(例如如在美国专利公开序列号2011/0052517中描述的)、酵母提 取物/刺豚鼠肽、抗坏血酸葡萄糖苷，掺合物2含有掺合物1的成分+ 酵母/黄花七筋姑发酵提取物。使用酪氨酸酶表达作为皮肤增亮功效的 量度，因为该酪氨酸酶表达率限制用于黑色素合成的酶。
使用MelanodermTM FTB(MEL-300-FTB；Mattek,Ashland, MA)，一种含有正常角化细胞、黑素细胞(来源于非洲裔美国人)和成 纤维细胞的重构三维人皮肤等同组织模型进行测试。如制造商推荐 的，将组织在MEL-300-FT-NMM-113培养基中培养。在平衡24小时 之后，用100微升的介质对照或掺合物处理组织。在培养24小时之 后，收集组织的表皮部分以用于mRNA分析。裂解组织，并按照制 造商的方案，使用Qiagen试剂分离总RNA。按照Applied Biosystems, Inc提供的方案和试剂，通过qPCR方法定量酪氨酸酶mRNA。
两种掺合物相对于介质对照均证实酪氨酸酶mRNA表达的下调。掺 合物1相对于介质对照显示32.7％抑制。然而，含有酵母/黄花七筋姑 发酵提取物的掺合物2显示42.2％抑制，其比掺合物1超出26％。这 证实酵母/黄花七筋姑发酵提取物可以经由抑制酪氨酸酶提供皮肤增 亮功效。
实施例8：含有酵母/黄花七筋姑发酵提取物的制剂用于体外增亮 皮肤
使用MelanodermTM FTB(MEL-300-FTB；Mattek,Ashland, MA)，一种含有正常角化细胞、黑素细胞(来源于非洲裔美国人)和成 纤维细胞的重构三维人皮肤等同组织模型评价含有酵母/黄花七筋姑 发酵提取物作为皮肤护理制剂抑制黑色素合成的能力。如生产商推荐 的，使组织在MEL-300-FT-NMM-113培养基中生长。在第1、2、4、 7、9和11天，局部施用10微升的精华素配方(类似于实施例13)。在 每次施用之前，用300微升的磷酸盐缓冲盐水洗涤该组织(n＝4或5) 两次。在第14天，测定组织中的黑色素含量。简而言之，将该组织在 0.4ml的1％SDS、50mM EDTA和10mM Tris、pH 6.8中均质化。 向每个均质物中加入20微升的蛋白酶K(5mg/mL)，并在45℃下培 养过夜。加入另外20微升的蛋白酶K，并在45℃下培养4小时。然 后，加入50微升的0.5M碳酸钠和10微升的30％H2O2，并在80℃ 下培养30分钟。将该组织冷却，并用100微升的氯仿/甲醇(2:1)萃取 该混合物。在以10,000g离心10分钟之后，在405nm处测量上部相 的吸收。在黑色素分离之前获取组织图像。
未处理的组织的黑色素含量为23.4单位，而用皮肤护理制剂处理 的组织的黑色素含量为12.4单位。用精华素配方(实施例13)处理的皮 肤相对于未用精华素配方处理的皮肤而言相对的黑色素含量降低描绘 在图1中，同时在14天之后MelanodermTM皮肤等同组织的外观的视 觉描绘显示在图2中。
实施例9：消费者小组测试
可以在多个受试者(小组)上测试本发明的组合物，并例如与市售 可获得的局部组合物比较。如专业人员应当理解的，可以要求小组将 对照组合物和范例施用于他们的皮肤数小时、数天或数月，并基于调 查表评价该制剂。例如，可以询问小组范例是否减少色素沉着；增亮 皮肤；治疗色素沉着过度的皮肤；增加皮肤厚度；减少皮肤多毛；和/ 或将皮肤表型从非掌跖改变为掌跖。结果可以证实由于施用范例导致 的改善：增亮皮肤；治疗色素沉着过度的皮肤；减少色素沉着；增加 皮肤厚度；减少皮肤多毛；和/或将皮肤表型从非掌跖改变为掌跖。
实施例10：含有酵母/黄花七筋姑发酵提取物的局部制剂提供的皮 肤益处的体内评价
进行临床功效研究以评价局部施用含有酵母/黄花七筋姑发酵提 取物与其他选择性的皮肤增亮成分的皮肤护理精华素制剂影响与面部 光致损伤皮肤的特性有关的能力。进行随机、双盲研究，其中征募34 名25-40岁年龄范围的女性，每日两次在面部上施用基本上在实施例 13中描述的产品12周。在基准时、第2、4、8和12周进行照相。由 委员会-认证的皮肤科医生针对下述皮肤特性以0-9量表评价照片，其 中9级对应于最严重的状况：分散的色素沉着、斑点状色素沉着、鱼 尾纹细线和皱纹、鱼尾纹粗线和皱纹、甚至肤色、透明度和肤色蜡黄。 对于每个这些参数，使用成对t检验将每个时间点从基准开始的平均 变化％与基准值进行比较。p值≤0.05被认为是显著的。也计算从基 准开始显示出改善的受试者的百分比。
表2
NS：基于成对t检验，在p≤0.05显著性水平，从基准改善的平均 量是非显著的。
实施例11：体内皮肤增厚
使用皮肤等同3D组织，比如MelanodermTM FTB(MEL-300-FTB； Mattek,Ashland,MA)评价本发明的提取物对刺激OICKKOPF-1调 节的皮肤增厚的作用。将含有黄花七筋姑酵母提取物的组合物局部施 用于组织上或底外侧施于介质(medium basolaterally)数天时间。在治 疗结束时，用4％低聚甲醛固定组织切片，并进行Fontana-Masson染 色。使用显微镜测量皮肤等同物的厚度。
实施例12：皮肤增亮和/或抗老化精华素制剂
如下提供用于向皮肤局部施用的包含修饰的酵母肽级分的示例性 化妆品组合物，所述修饰的酵母肽级分包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物。该组合物以在抗老化和/或皮肤增亮方面得到应用的精华素形式提 供。
实施例13皮肤增亮和/或抗老化精华素制剂
如下提供用于向皮肤局部施用的包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物的其它示例性化妆品组合物。该组合物再次以在抗老化和/或皮肤增 亮方面得到应用的精华素形式提供，并且以全部示例性化妆品组合物 的w/w百分比指示。
实施例14止汗剂/除臭剂制剂
如下提供用于向皮肤局部施用的包含修饰的酵母肽级分的示例性 化妆品组合物，所述修饰的酵母肽级分包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物。该组合物以在抗老化和/或皮肤增亮方面得到应用的除臭剂形式提 供。
实施例15：调色剂
如下提供用于向皮肤局部施用的包含修饰的酵母肽级分的示例性 化妆品组合物，所述修饰的酵母肽级分包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物。该组合物以在抗老化和/或皮肤增亮方面得到应用的调色剂形式提 供。
调色剂
实施例16：日用霜剂
如下提供用于向皮肤局部施用的包含修饰的酵母肽级分的示例性 化妆品组合物，所述修饰的酵母肽级分包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物。该组合物以在抗老化和/或皮肤增亮方面得到应用的日用霜剂形式 提供。
日用霜剂
实施例17：乳状洗剂
如下提供用于向皮肤局部施用的包含修饰的酵母肽级分的示例性 化妆品组合物，所述修饰的酵母肽级分包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物。该组合物以在抗老化和/或皮肤增亮方面得到应用的乳状洗剂形式 提供。
乳状洗剂
实施例18：夜用霜剂
如下提供用于向皮肤局部施用的包含修饰的酵母肽级分的示例性 化妆品组合物，所述修饰的酵母肽级分包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物。该组合物以在抗老化和/或皮肤增亮方面得到应用的夜用霜剂形式 提供。
夜用霜剂
实施例19：防晒霜SPF50
如下提供用于向皮肤局部施用的包含修饰的酵母肽级分的示例性 化妆品组合物，所述修饰的酵母肽级分包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物。该组合物以在抗老化和/或皮肤增亮方面得到应用的防晒霜SPF50 形式提供。
实施例20：清洁剂
如下提供用于向皮肤局部施用的包含修饰的酵母肽级分的示例性 化妆品组合物，所述修饰的酵母肽级分包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物。该组合物以在清洁剂应用方面得到应用的清洁剂形式提供。 清洁剂
实施例21：21面膜
如下提供用于向皮肤局部施用的包含修饰的酵母肽级分的示例性 化妆品组合物，所述修饰的酵母肽级分包含酵母/黄花七筋姑发酵提取 物。该组合物以在面膜应用方面得到应用的面膜形式提供。
21面膜
本文描述和主张的本发明不受本文公开的特定实施方案的限制， 因为这些实施方案旨在示例说明本发明的一些方面。任何等同实施方 案都意味着在本发明的范围内。实际上，从前面描述、实施例和附图， 除了本文显示和描述的那些之外，对本发明的各种修饰对于本领域技 术人员来说都将变得显而易见。这样的修饰也意欲落入附加权利要求 的范围之内。将本文引用的所有公开文献的全部内容并入作为参考。
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