重组酿酒酵母表达HBsAg的制备工艺及其分离纯化工艺、HBsAg和乙肝疫苗

摘要

本发明公开一种重组酿酒酵母表达HBsAg的制备工艺及其分离纯化工艺，所述分离纯化工艺包括：细胞破碎步骤，将经过发酵后提取的酵母细胞供入高压匀浆器内，在15000±1500PSIG压力下对其进行细胞破碎；纯化步骤，对破碎后的料液进行纯化，制备HBsAg原液；在所述细胞破碎步骤后、纯化步骤之前还包括：料液加热步骤，对破碎后的料液进行加热操作，使其温度上升到50-80℃后，再将其降温到2～8℃。本发明还公开了相应的乙肝疫苗和HBsAg。本发明可在无需在细胞破碎前加入蛋白酶抑制剂的情况下使蛋白酶失去活性，从而避免蛋白酶抑制剂带来的二度污染，且可明显提高后续纯化得到的原液收率，并大大改善原液的“比活”、“Sub-p24”等质量指标，具有很高的经济效益及社会效益。