一种褐菖鲉CYP1B1基因全长序列及其克隆方法

摘要

一种褐菖鲉CYP1B1基因全长序列及其克隆方法，涉及海洋生物基因工程领域。所述克隆方法：用褐鲳鲉的肝脏组织提取总RNA，进行反转录扩增，采用RACE获得5’端和3’端未知序列，拼接获得其全长cDNA序列。获得了褐菖鲉中CYP1B亚家族唯一成员CYP1B1基因全长CDS序列，补充了褐鲳鲉P450 CYP1B基因家族的空白，可更准确指示海域污染状况，更深入探究海洋生物在污染海域的蛋白表达等问题。通过对材料的处理与准备、RNA提取，5端和3端cDNA合成、RACE技术等获得了CYP1B1基因，该基因cDNA全长为3056bp，基因开放阅读框1724-2995bp，共编码422个氨基酸。