一种超临界CO2流体从川芎药材中制备洋川芎内酯A的方法

摘要

本发明的目的在于提供一种超临界CO2流体从川芎药材中制备洋川芎内酯A的方法，步骤为：（1）超临界CO2萃取，（2）反相色谱纯化。通过本发明的制作方法，解决了现有技术中制备手段繁琐，产率极低的技术问题，提高了洋川芎内酯A的提取率，减少了环境污染。

说明书

技术领域

本发明涉及中药化学及医药技术领域，具体涉及从川芎中分离制备洋川芎内酯A的方法。 

背景技术

川芎为伞形科川芎属植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎及根，其药用部位为根茎。川芎为我国传统中药，具有祛风胜湿，散寒止痛的功效，是治疗偏头痛的常用中药之一。 

苯酞类化合物是存在于川芎中的一类化合物，被证明在心血管、血液和平滑肌方面有活性。其中研究较多的洋川芎内酯A具有抗脑缺血、对心脑血管，循环系统及免疫功能均有较强的药理作用。研究表明，洋川芎内酯A有很强的解痉，平喘，镇静作用，能改善微循环，松弛平滑肌，抑菌，提高机体免疫调节功能。可以被认为是川芎药效的物质基础之一。洋川芎内酯A结构不稳定，在制备过程中容易异构化。目前，洋川芎内酯A的制备方法大多采用回流提取等方法制备，该方法操作过程繁琐，周期长，产品得率低。因此，洋川芎内酯A分离手段的不足是限制其医药用途的一个主要原因。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种洋川芎内酯A的制备方法，以解决现有技术中制备手段繁琐，产率极低的技术问题。 

本发明所述洋川芎内酯A的制备方法包括如下步骤： 

(1)超临界CO₂萃取步骤：将川芎药材粉碎成40-80目的粗粉，采用超临界CO₂萃取，体积百分浓度比为30-80％的乙醇或丙酮作为夹带剂，采用连续泵输入夹带剂，萃取条件为萃取釜压力为22-35MPa，解析釜压力为5-10MPa，萃取釜温度为30-60℃，解析釜 温度为20-40℃，CO₂流量控制在20-40L/h，夹带剂加入量是萃取物料量的5-15％，萃取过程中使用甘油脂肪酸酯作为添加剂，经过1-3小时的萃取，解析得到萃取物。 

(2)反相色谱纯化步骤：将萃取物浸膏用10％的甲醇溶解后，反相C₁₈柱色谱分离(样品:硅胶＝1:100)。10％甲醇-水洗脱5BV弃去洗脱液，再用30％甲醇-水洗脱5BV，收集洗脱液并减压回收溶剂，即得纯化的洋川芎内酯A。 

(3)本发明中CO₂超临界萃取洋川芎内酯A的过程中使用维生素C作为添加剂。洋川芎内酯A容易氧化分解，为防止萃取过程中洋川芎内酯A氧化分解，萃取过程使用维生素C作为稳定剂，维生素C的用量为药材用量的0.1-1％。最佳为0.45％。 

(4)本发明中CO₂超临界萃取洋川芎内酯A的过程中使用聚甘油脂肪酸酯作为添加剂。由于超临界CO₂和乙醇对洋川芎内酯A的溶解能力有限，为提高收率，在萃取过程中添加聚甘油酯脂肪酸酯作为添加剂。聚甘油酯脂肪酸酯可以选用一下一种或多种：十聚甘油单月桂酸酯、十聚甘油单肉蔻酸酯、六聚甘油单硬脂酸酯。添加剂用量为萃取釜体积的0.1-0.5％最佳为0.3％。 

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。 

实施例1 

川芎饮片1kg，去除杂质后粉碎成粉末，加入0.2％的维生素C，0.1％的十聚甘油单月桂酸酯，投入萃取釜中，进行超临界CO₂流体；经加热交换器分别加热萃取釜至35℃，解析釜I、II至20℃，CO₂流量为30L/h,打开加压泵升高萃取釜压力至25MPa，解析釜至6MPa，关闭CO₂钢瓶阀门，打开循环，加入100mL的80％丙酮夹带剂至夹带剂储存罐中，再打开夹带剂高压泵阀门，使夹带剂泵入萃取釜，萃取3小时后打开解析釜I、II出料口，收集放入的萃取物，萃取物用10％甲醇溶解后加入到预先处理好的反相硅胶柱上，将萃取物浸膏用10％的甲醇溶解后，反相C₁₈柱色谱分离(样品:硅胶＝1:100)。10％甲醇-水洗脱5BV弃去洗脱液，再用30％甲醇-水洗脱5BV，收集洗脱液并减压回收溶剂，即得纯化的洋川芎内酯A12.2g。 

实施例2 

川芎饮片1kg，去除杂质后粉碎成粉末，加入0.6％的维生素C，0.3％的十聚甘油单肉蔻酸酯，投入萃取釜中，进行超临界CO₂流体；经加热交换器分别加热萃取釜至25℃， 解析釜I、II至25℃，CO₂流量为40L/h,打开加压泵升高萃取釜压力至30MPa，解析釜至10MPa，关闭CO₂钢瓶阀门，打开循环，加入100mL70％乙醇夹带剂至夹带剂储存罐中，再打开夹带剂高压泵阀门，使夹带剂泵入萃取釜，萃取2小时后打开解析釜I、II出料口，收集放入的萃取物，萃取物用10％甲醇溶解后加入到预先处理好的反相硅胶柱上，将萃取物浸膏用10％的甲醇溶解后，反相C₁₈柱色谱分离(样品:硅胶＝1:100)。10％甲醇-水洗脱5BV弃去洗脱液，再用30％甲醇-水洗脱5BV，收集洗脱液并减压回收溶剂，即得纯化的洋川芎内酯A14.2g。 

实施例3 

川芎饮片1kg，去除杂质后粉碎成粉末，加入1％的维生素C，0.5％的六聚甘油单硬脂酸酯，投入萃取釜中，进行超临界CO₂流体；经加热交换器分别加热萃取釜至30℃，解析釜I、II至30℃，CO₂流量为20L/h,打开加压泵升高萃取釜压力至23MPa，解析釜至7MPa，关闭CO₂钢瓶阀门，打开循环，加入100mL90％乙醇夹带剂至夹带剂储存罐中，再打开夹带剂高压泵阀门，使夹带剂泵入萃取釜，萃取1小时后打开解析釜I、II出料口，收集放入的萃取物，萃取物用10％甲醇溶解后加入到预先处理好的反相硅胶柱上，将萃取物浸膏用10％的甲醇溶解后，反相C₁₈柱色谱分离(样品:硅胶＝1:100)。10％甲醇-水洗脱5BV弃去洗脱液，再用30％甲醇-水洗脱5BV，收集洗脱液并减压回收溶剂，即得纯化的洋川芎内酯A11.2g。 

以上实验结果表明，本方法用于制备阿枯米定碱，工艺简单，得率在万分之一以上，因此，本发明可用于阿枯米定碱的工业制备。