人蛋白赖氨酸甲基转移酶SET9融合蛋白的制备方法

摘要

人蛋白赖氨酸甲基转移酶SET9融合蛋白的制备方法，将SET9基因片段连接至含可编码谷胱甘肽S-转移酶读码框架的载体质粒，再转化宿主菌，宿主菌经诱导表达后通过GlutathioneAgarose吸附柱纯化。利用大肠杆菌BL21（DE3）表达菌的T7RNA聚合酶基因可受IPTG诱导表达、该菌没有膜结合性蛋白分解酶活性则可抑制表达的融合蛋白质分解等优点，本发明将重组载体pGEX-SET9转入BL21（DE3）表达菌，成功地构建了GST-SET9融合蛋白的原核表达系统，并提纯了高活性的融合蛋白。可用于非组蛋白甲基化效应、SET9抗体开发等实验室研究。