一种广豆根组培种苗工厂化生产方法

摘要

一种广豆根组培种苗工厂化生产方法，包括如下步骤：广豆根组培种苗繁殖复壮、生根驯化以及移栽步骤。采用本发明能够在短时间内提供大量优质的、适宜山区栽培、移栽成活率达98%以上的广豆根组培种苗，以满足生产上的需要。

说明书

 

技术领域

本发明涉及一种植物组培种苗工厂化生产方法，特别是一种广豆根组培种苗工厂化生产方法。

背景技术

广豆根，也称山豆根、南豆根，为豆科植物越南槐（Sophora tonkinensis Gapnep.）的干燥根及根茎，分布于我国南部，以广西产量最大。具有清火解毒、消肿止痛等功效，可以治疗喉痈、喉风、喉痹、牙龈肿痛、喘满热咳、肝炎、便秘、黄疸、下痢、痔疾、秃疮、疥癣及蚊、虫、犬咬伤等。医药工业用广豆根作为原料，大量研制开发治疗肝炎的针剂、咽喉肿痛的片剂以及抗肿瘤的中成药。 

广豆根地域分布范围相当有限，且常零星生长于石山岩缝之中，随着市场需求量的不断增加，野生广豆根资源濒临枯竭。在自然条件下，广豆根主要依靠种子进行繁育，但在开花结荚期广豆根的病虫害严重，且种子成熟时自然脱落的特性常造成种子产量低，生产上难以实现大面积栽培。采用生物技术组织培养技术，是最为快速有效地生产广豆根种苗的途径，但目前广豆根的组织培养体系存在周期长、种苗质量偏低、成活率不高等问题，通过本发明的生产工艺，可以大大缩短生产周期，减低生产成本，提高种苗质量，从而提高种苗成活率及药材产量。

发明内容

本发明的目的是提供一种广豆根组培种苗工厂化生产方法，它能够缩短生产周期，降低生产成本，提高种苗质量，从而提高种苗成活率及药材产量。

本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种广豆根组培种苗工厂化生产方法，该方法的具体步骤和操作条件为：

（1）繁殖复壮一体化培养：繁殖复壮一体化培养基为：MS+1.0~1.5mg/L BA+ 0.3mg/L KT+ 0.3mg/L IAA +0.2~0.5mg/L NAA，繁殖复壮一体化培养方法为：将广豆根种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+ 0.3mg/L IAA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.5~2.5cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，再用镊子将茎段的1/2压入到培养基内，接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为8小时/天，然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度4000~5000lux。获得叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条。 

（2）生根炼苗同步化培养：生根炼苗同步化培养基为MS+2.0mg/LNAA+ 0.2mg/L IBA +0.2mg/LABT，生根炼苗同步化培养方法为：将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入玻璃大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株，其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为15~30%，相对湿度为85~90%。

（3）生根苗的移栽：在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出生根苗，洗净根部残留培养基，于阴天傍晚移栽至平整精耕的育苗床上，育苗要求相对湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%，加盖两层黑色遮阳网，基质为沙子：泥土：有机肥＝20:75:5；或移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%，基质为沙子：泥土：有机肥＝20:75:5。

其中，MS为MS基本培养基，BA为6-苄基腺嘌呤，IAA为吲哚乙酸，NAA为萘乙酸，KT为激动素，IBA为吲哚丁酸，ABT为生根粉。

本发明的突出优点在于：

（1）通过生物技术对广豆根进行组织培养快速繁殖，在短时间内培育出大量可供大田栽培的广豆根幼苗，显著提高了广豆根种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。

（2）通过繁殖复壮一体化培养、生根炼苗同步化培养两步培养法进行广豆根组培苗的工厂化生产，缩短了培养时间，减少培养步骤，降低了培养成本，提高了广豆根组培种苗的生产效率。

（3）在繁殖复壮一体化培养基上培养获得的无菌枝条健康粗壮、无玻璃化现象，展叶良好，木质化程度较高，接种到生根培养基上生根情况良好，生根率在96%以上，移栽育苗大棚后成活率在98%以上。

具体实施方式

    下面结合实施例对本发明的技术方案进一步说明。

实施例1

一种广豆根组培种苗工厂化生产方法，包括以下步骤：

（1）繁殖复壮一体化培养：繁殖复壮一体化培养基为：MS+1.0mg/L BA+ 0.3mg/L KT+ 0.3mg/L IAA +0.2mg/L NAA。繁殖复壮一体化培养方法为：将广豆根种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IAA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.5~2.5cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，再用镊子将茎段的1/2压入到培养基内，使其能够充分吸收培养基中的营养。接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为8小时/天。然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度4000~5000lux。获得叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条。 

（2）生根炼苗同步化培养：生根炼苗同步化培养基为MS+2.0mg/L NAA+ 0.2mg/L IBA +0.2mg/L ABT。生根炼苗同步化培养方法为：将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入玻璃大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株。其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为15~30%，相对湿度为85~90%。

（3）生根苗的移栽：在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出20瓶生根苗，每瓶15株，共300株，洗净根部残留培养基后统计生根植株为292株，生根率为97.3%。于阴天傍晚将292株生根苗移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%，基质为沙子：泥土：有机肥=20:75:5。30天后统计成活植株为288株，成活率为98.6%。

实施例2

一种广豆根组培种苗工厂化生产方法，包括以下步骤：

（1）繁殖复壮一体化培养：繁殖复壮一体化培养基为：MS+1.5mg/L BA+ 0.3 mg/L KT+0.3mg/L IAA +0.4mg/L NAA。繁殖复壮一体化培养方法为：将广豆根种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+ 0.3mg/L IAA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.5~2.5cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，再用镊子将茎段的1/2压入到培养基内，使其能够充分吸收培养基中的营养。接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为8小时/天。然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度4000~5000lux，获得叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条。

（2）生根炼苗同步化培养：生根炼苗同步化培养基为MS+2.0mg/L NAA+ 0.2mg/L IBA +0.2mg/L ABT。生根炼苗同步化培养方法为：将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入玻璃大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株。其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为15~30%，相对湿度为85~90%。

（3）生根苗的移栽：在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出20瓶生根苗，每瓶15株，共300株，洗净根部残留培养基后统计生根植株为295株，生根率为98.3%。于阴天傍晚将295株生根苗移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%，基质为沙子：泥土：有机肥=20:75:5。30天后统计成活植株为293株，成活率为99.3%。

实施例3

一种广豆根组培种苗工厂化生产方法，包括以下步骤：

（1）繁殖复壮一体化培养：繁殖复壮一体化培养基为：MS+1.5mg/LBA+ 0.3 mg/L KT+ 0.3mg/L IAA +0.5mg/L NAA。繁殖复壮一体化培养方法为：将广豆根种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IAA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.5~2.5cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，再用镊子将茎段的1/2压入到培养基内，使其能够充分吸收培养基中的营养。接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为8小时/天。然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度4000~5000lux，获得叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条。

（2）生根炼苗同步化培养：生根炼苗同步化培养基为MS+2.0mg/L NAA+ 0.2mg/L IBA +0.2mg/L ABT。生根炼苗同步化培养方法为：将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入玻璃大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株。其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为15~30%，相对湿度为85~90%。

（3）生根苗的移栽：在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出20瓶生根苗，每瓶15株，共300株，洗净根部残留培养基后统计生根植株为296株，生根率为98.6%。于阴天傍晚将296株生根苗移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%，基质为沙子：泥土：有机肥=20:75:5。30天后统计成活植株为290株，成活率为98.0%。

实施例4

一种广豆根组培种苗工厂化生产方法，包括以下步骤：

（1）繁殖复壮一体化培养：繁殖复壮一体化培养基为：MS+1.2mg/LBA+ 0.3 mg/L KT+ 0.3mg/L IAA +0.4mg/LNAA。繁殖复壮一体化培养方法为：将广豆根种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+ 0.3mg/L IAA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.5~2.5cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，再用镊子将茎段的1/2压入到培养基内，使其能够充分吸收培养基中的营养。接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为8小时/天。然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度约为4000~5000lux，获得叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条。

（2）生根炼苗同步化培养：生根炼苗同步化培养基为MS+2.0mg/LNAA+ 0.2mg/L IBA +0.2mg/LABT。生根炼苗同步化培养方法为：将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入玻璃大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株。其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为15~30%，相对湿度为85~90%。

（3）生根苗的移栽：在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出20瓶生根苗，每瓶15株，共300株，洗净根部残留培养基后统计生根植株为290株，生根率为96.7%。将290株生根植株于阴天傍晚移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%，基质为沙子：泥土：有机肥=20:75:5。30天后统计成活植株为286株，成活率为98.6%。