含纳米微粒的口服固体剂型和使用鱼胶配制所述剂型的方法

摘要

通过(a)使分散于含鱼胶的溶液中的至少一种药用活性成分的粒径减小，以形成纳米悬浮液和(b)使步骤(a)的纳米悬浮液冻干以形成口服固体剂型，制备含纳米微粒的口服固体剂型。

说明书

发明背景。

发明领域

本发明涉及含纳米微粒的口服固体剂型。本发明也涉及使用鱼胶(fish gelatin)配制口服固体剂型的方法。

相关技术的描述

口服药物传递典型地需要药物产品在胃肠道中释放药物分子以分子形成溶液，这样药物可穿过肠壁吸收并进入体循环。为了产品功效和安全性的理由，药物分子释放应该以可控的方式进行，释放概况(release profile)符合产品的治疗需求。大多数口服产品目的在于在胃肠道中快速且完全释放药物，以产生快速起效的作用并伴随最有效地传递药物分子至生物目标。

药物发现和药物开发领域的专家已经注意到，近年来研发中的新药物分子越来越具有差的水溶性。已证明估计多于40%的新药物分子表现出差的水溶性。参见“水不溶性药物制剂(Water Insoluble Drug Formulation), Rong Liu编著，CRC出版社，第二版，第1页(2008)。水溶性差的药物分子的广泛存在对开发可行的口服药物产品产生重大的挑战。这个问题的原因在于差的水溶性可限制药物分子可进入溶液或在胃肠道溶解的速度和程度。配制水溶性差的药物的技术挑战可在事实上限制某些药物接近上市(reaching the market)，因此拒绝给于患者新产品。

改善水溶性差的药物分子的溶解特性的已证明的途径是，减小固体药物的粒径，因为增加溶解药物粒子的表面积与增加的溶解速率相关。粒径减小到亚微米或纳米微粒范围产生表面积的惊人的增量，并且因此经由此机制产生最大机会的溶解速率的增加。因此，纳米微粒药物传递可提供更快的溶解、改良的生物利用度和最终增强的临床功效。

采用纳米微粒用于口服药物，特别是用于给予溶解性差的药物分子的传递的优点是熟知的，并且已经经过20多年的证明。尽管如此，本发明人相信，在美国仅有约四种宣称含纳米微粒的市售药用口服固体剂型制剂(dosage formulations)，这提示与开发稳定的纳米微粒的产品关联的技术挑战。已知的市售口服固体剂型制剂为Rapamune? (Wyeth Pharmaceuticals Inc., Philadelphia, PA)、Emend? (Merck & Co., Whitehouse Station, NJ)、TriCor? (Abbott Laboratories, North Chicago, IL)和Triglide? (Sciele Pharma Inc., Atlanta, GA)。

开发固体纳米微粒药物传递系统的主要问题是纳米微粒或者在加工期间快速的再聚集倾向或者在延长的储存过程中的再聚集倾向，这导致粒径增加，而因此功效减小。典型地采用归类为空间稳定剂(如合成聚合物)和/或静电稳定剂(如表面活性剂)的稳定化赋形剂克服聚集问题。以上提到的已知的市售产品全部采用湿磨技术以产生纳米悬浮液(nanosuspensions)，随后将纳米悬浮液喷雾干燥在大小尺寸适于加工成单一单位剂型(如片剂或胶囊剂)的固体底物相(solid substrate phase)上。喷雾干燥是通用术语，可包括公认的加工方法，诸如喷雾涂布或喷雾造粒(spray granulation)，藉此在引起快速挥发和去除液体成分条件下，将纳米悬浮液喷雾至固体底物上，留下涂敷在固体底物上的干燥的固相。

冻干是可供选择的工艺规程以喷雾干燥，其可使纳米悬浮液转化为固态，尽管该项技术并不知道已经用于常规的纳米微粒产品。由于在冻干工艺的冷冻和冻干步骤期间承受的强烈的物理力，对于经受冻干的系统而言聚集问题更大。处理聚集问题的常规解决方案典型地包括复杂的制备工艺，需要在研磨之后但是在单位剂型加工之前分离干燥的纳米微粒中间体材料和/或调节赋形剂组分。

美国专利号5,932,245描述了采用沉淀方法，使用当作纳米微粒稳定剂的明胶或其衍生物制备胶体纳溶胶(colloidal nanosols)。该方法包括通过在明胶和表面荷电的活性物质颗粒剂之间部分或完全沉积(setting)等离子点(iso-ionic point) (相当于中性电荷)，使活性物质的胶状分散的溶液稳定。然而，该项专利没有公开或提示使用鱼胶在纳米研磨(nanomilling)过程中作为纳米微粒稳定剂和/或在冻干过程中作为纳米微粒稳定剂。

美国专利号5,145,684和5,510,118描述湿磨加工法以产生低溶解度药物的纳米微粒，其采用非交联的表面改性剂表面以维持粒径在亚微米范围内。优选的表面改性剂包括非离子和阴离子表面活性剂，但是两个专利均公开指出，可从包括明胶在内的广泛的药用赋形剂名单中选择表面改性剂。然而，该两项专利没有公开或提示使用鱼胶在纳米研磨过程中作为纳米微粒稳定剂和/或在冻干过程中作为纳米微粒稳定剂。

美国专利申请公布号2005/0031691公开了含有小于约2000 nm的活性剂、至少一种表面稳定剂和凝胶成形剂的组合物，其中明胶起帮助水分保持的功能以促进剂型中的胶凝。该系统被要求提供可模制成多种剂型的组合物。然而，该项专利没有公开或提示使用鱼胶在纳米研磨过程中作为纳米微粒稳定剂和/或在冻干过程中作为纳米微粒稳定剂。

在W099/38496、美国专利号5,302,401、WO 2004/043440和美国专利号6,316,029中公开了冻干以使液体纳米悬浮液转化为具有良好分散性质(可互换地描述为快速分散、快速溶解、快速崩解、迅速崩解)的固体产物的应用。所有的公开指出，明胶可包括在剂型中。然而，该几项专利没有公开或提示关于与明胶的来源之一，诸如从鱼提取的明胶相关的特别利益。

W099/38496公开在潜在的快速溶解的基质成形剂的长名单中的明胶；然而，该项专利没有公开或提示在纳米悬浮液形成过程中使用鱼胶或在快速溶解的基质的制备中作为纳米微粒稳定剂。

美国专利号5,302,401公开了明胶作为纳米微粒表面改性剂稳定剂的应用。然而，冷冻保护剂(在美国专利号5,302,401中定义为保护纳米微粒避免由冻干法而引起的凝聚的试剂)被公开为独立的成分，其优选为碳水化合物。此外，将冷冻保护剂分子加入到预先成形的纳米悬浮液中，提示在纳米研磨与冻干之间的配方改进(formula modifications)对于成功形成冻干的纳米微粒是至关重要的。

WO 2004/043440还公开了采用冻干法，使一种或多种表面稳定剂分子，诸如明胶联合支链淀粉(pullulan) (一种聚合性碳水化合物)形成含纳米微粒的快速崩解的片剂的的应用。在冻干前将支链淀粉加至预先制备的纳米悬浮液中，没有描述在纳米悬浮液形成之前加入支链淀粉，或者作为表面稳定剂或者为了任何其它的功能。然而，该项专利没有公开或提示使用鱼胶在纳米研磨过程中作为纳米微粒稳定剂和/或在冻干过程中作为纳米微粒稳定剂。

美国专利号6,316,029公开了至少一种表面稳定剂(将明胶看成一个例证)与水溶性或可在水中分散的赋形剂(将明胶看成一个例证)组合，加工以形成含纳米微粒的快速崩解剂型的应用。然而，该专利没有公开或提示使用鱼胶在纳米研磨过程中作为纳米微粒稳定剂和/或在冻干过程中作为纳米微粒稳定剂。此外，该项专利没有公开需要稳定剂以保证在冻干过程中维持纳米颗粒大小。

美国专利号6,709,669公开了采用冻干制备包含药用活性成分和作为载体的鱼胶的快速分散剂型。在该方法中使用鱼胶的优势并公认为具有更快速的崩解时间、更好的口味和口感(mouthfeel)，以及更短的制备加工时间。然而，该项专利没有公开或提示含纳米微粒的固体剂型或使用鱼胶在减小粒径以形成纳米微粒或在纳米微粒系统的冻干中的优势。此外，该项专利没有公开或提示任何类型的鱼胶的稳定特性，包括纳米微粒稳定性。

本发明人不知道任何在先技术，其讲述或提示使用鱼胶在纳米研磨过程中作为纳米微粒稳定剂以及在冻干过程中作为纳米微粒稳定剂两者形成纳米微粒固体口服剂型。也不知道在纳米研磨和冻干步骤之间，在不需要定性和定量的赋形剂组合物的显著调节的情况下，制备纳米微粒固体口服剂型的加工方法的公开或提示。例如，在公共领域中有关制备加工Rapamune?的信息，描述了药用活性成分西罗莫司经在稳定剂的存在下湿磨至纳米大小而缩小。

于是，将纳米分散体加至糖包衣混悬液中并涂敷至之前已经用虫胶外敷的惰性片芯上。另一个实例是Emend?的制备加工方法，这是水性浆液，药用活性成分阿瑞吡坦(aprepitant)和羟丙基纤维素(空间稳定剂)和十二烷基硫酸钠(离子稳定剂)经介质研磨(media-milled)形成胶体分散液。为了转变成固体剂型，将蔗糖加至分散液中，随后将该分散液喷雾至微晶纤维素珠上。两种加工方法均明显包括在形成纳米分散液的步骤和形成含纳米微粒的固体剂型的步骤之间的定性(即，赋形剂的数量)和定量(即，各赋形剂的比例)上的实质性变化。参见从European Medicines Agency网站http://www.emea.europa.eu/可获得的产物特异性科学讨论文件。如可参见的，现有市售纳米微粒产品的组合物和加工方法复杂。再有，本领域专业技术人员应该明白，这些组合物或加工方法不适于所有的药用活性成分。

当前，存在对于替代的含纳米微粒的口服固体剂型的需求，其由不包括复杂的制备工艺的加工方法制备。

发明简述

本发明涉及制备含纳米微粒的口服固体剂型的方法，该方法包括以下步骤：(a)使分散于含鱼胶的溶液中的至少一种药用活性成分的粒径减小，以形成纳米悬浮液；和(b)使步骤(a)的纳米悬浮液冻干以形成口服固体剂型。

本发明也涉及由含包括以下步骤的方法制备的纳米微粒的口服固体剂型：(a)使分散于含鱼胶的溶液中的至少一种药用活性成分的粒径减小，以形成纳米悬浮液；和(b)使步骤(a)的纳米悬浮液冻干以形成口服固体剂型。

本发明也涉及包含至少一种纳米微粒的活性成分和鱼胶的冻干口服固体剂型。

发明详述

本发明涉及以纳米微粒形式呈现的含鱼胶和药用活性成分的口服固体剂型。本发明还涉及制备这样的剂型，而在加工步骤期间不需要赋形剂组合物调节的有效的、可靠的方法。换言之，可使用同样的赋形剂-鱼胶以有利于粒径减小和冻干步骤。

本发明的第一个实施方案涉及制备含纳米微粒的口服固体剂型的方法，该方法包括以下步骤：(a)使分散于含鱼胶的溶液中的至少一种药用活性成分的粒径减小，以形成纳米悬浮液；和(b)使步骤(a)的纳米悬浮液冻干以形成口服固体剂型。

如在本文使用的，“纳米微粒”或“纳米粒子”指的是粒径分布主要在亚微米区域的粒子，如小于约1微米的平均和/或中位粒径值所证实的；更优选，“纳米微粒”或“纳米粒子”指的是为了本发明的目的具有优选(以下讨论)的d50的粒子。如在本文使用的，“固体剂型”指的是单位剂量药用产品，其在储存、处理和给予患者时主要表现出固态物理性质(即，致密的、非流动的、非气态的)。如在本文使用的，“口服”指的是向口给药或经口给药。

在本发明的第一个步骤中，将至少一种药用活性成分分散于含鱼胶的溶液中，并加工形成纳米悬浮液。用于减小粒径的加工方法可为任何高能尺寸减小加工方法，包括，但不限于湿磨或匀化。湿磨法典型地采用介质磨(media mill)，诸如Dyno^? Mill (Glen Mills Inc., Clifton, NJ)，使混悬液通过含由非常硬的、耐用的和基本上是惰性的材料(如锆)所制备的珠子的腔室循环。高能运动和研磨介质与悬浮的药用活性成分的碰撞导致药用活性成分粒径的显著减小。匀化方法采用来自高压、高剪切和高应力的组合的能量以减小悬浮相的粒径，如可采用实验室用高压匀化器，诸如自Niro Soavi (Bedford, NH)或由Microfluidics International Corp. (Newton, MA)制备的M-110Y Microfluidizer^?实现的。在本文使用的，“纳米悬浮液”指的是分散并均一地悬浮在溶液中的纳米微粒。

可通过任何已知手段形成其中分散了药用活性成分的溶液(并且最终，在尺寸减小之后，其中纳米微粒是悬浮的)。最为典型地，将鱼胶加至适宜的溶剂中。适宜的溶剂包括，但不限于水、醇类(如甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇)、丙三醇、聚乙二醇、脂质油类(如橄榄油、花生油或与甘油单-、二-和/或三酯作为主要组分的任何脂质混合物)，及其组合。水是优选的溶剂，因为最易配制为纳米微粒的药用活性成分通常水溶性差。

也可将其他药用赋形剂加至含鱼胶的溶剂中。一个实例是包含调节或缓冲pH以维持使药用活性成分悬浮的最佳条件的一个成分或多个成分。在加入药用活性成分之前，其他药用赋形剂也可包括在溶液中，目的是在本文描述的加工过程中影响并非纳米微粒的形成和稳定的产物特征。这样的药用赋形剂的实例包括，但不限于填充剂(如乳糖一水合物、无水乳糖、蔗糖、海藻糖、果糖、葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、异麦芽酮糖醇(isomalt)、甘氨酸、麦芽糊精、微晶纤维素)、化学稳定增强剂(如抗氧化剂、螯合剂、离子交换树脂、α-、β-,或γ-环糊精或取代的环α-、β-或γ-环糊精)、崩解剂(如交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、羟基乙酸淀粉钠、淀粉、改性淀粉)、粘度调节剂(如牛明胶、猪明胶、海藻酸盐、角叉菜胶、胞外多糖、瓜尔胶、黄原胶、支链淀粉、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、苯二甲酸醋酸纤维素)、甜味剂(如天冬甜素、乙酰舒泛钾、三氯半乳蔗糖、山梨醇、木糖醇、麦力甜(Magnasweet)、奇甜蛋白)、人工或天然来源的芳香剂、着色剂，及其组合。可额外加入一种或多种pH调节剂或缓冲剂，这些可包括，但不限于无机酸(如盐酸、硫酸、磷酸)、无机碱(如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙)、有机酸(如柠檬酸、乙酸、酒石酸、丁二酸、硼酸、依地酸、葡萄糖醛酸、戊二酸、苹果酸、甲酸、葡糖酸、抗坏血酸或脂肪酸)和/或有机碱(如乙醇胺、三乙醇胺)，所有这些可或与或不与相应的相反离子(即，无机酸的盐、有机酸的盐或有机碱的盐)一起应用。如果在步骤(a)的溶液/纳米悬浮液中存在其他药用赋形剂时，本领域普通技术人员可易于确定其适宜的量。

适宜在本发明中应用的鱼胶，当制备为稀溶液时，为从鱼中提取的、非凝胶化的任何非水解的明胶，换言之，一般被本领域普通技术人员认为非凝胶化的和非水解的任何鱼胶。在上下文的明胶描述中，稀释优选指的是明胶在水中的浓度大约为10%或更低。在本发明中应用的鱼胶可包括单一等级的鱼胶，或多种鱼胶等级的混合物，所有这些均为非凝胶化的和非水解的。如在本文使用的，“多个”指的是不止一个，即两个、三个、四个、五个等。鱼胶可从供应商，诸如Norland Products Inc. (Cranbury, NJ)处获得，它们分销两种规格的鱼胶：干鱼胶(DFG)和标准分子量(SMW)鱼胶。存在于步骤(a)溶液中的鱼胶的量在以溶液重量计优选从约0.1%至约30%，更优选从约0.5%至约20%，而最优选从约1.0%至约10%的范围内。

在室温下以固态存在的任何药用活性成分可用于本发明的目的。如在本文使用的，“药用活性成分”指的是具有药理活性的化学实体，其显示潜在的或业已证明的用作药用产品的应用，或指的是药物产品，其可被用于诊断、治疗、缓解、处理或预防疾病。最为有利地，本发明将被用于配制具有水溶性差的药用活性成分。术语“水溶性差的”易于为本领域普通技术人员理解并被以多种方式定义。“水溶性差的”的一个普通的定义是在水相中其溶解度小于约1 mg/mL的固态药用活性成分。基于固有的溶解度数据，即基于纯的、稳定形式的药用活性成分所产生的数据确定<1 mg/mL的标准，在室温下或者在纯水或仅含水的缓冲剂中以控制pH值在大约1-8之间，确定其溶解度。适宜的药用活性成分包括，但不限于非甾体抗炎药(NSAIDs，如，阿司匹林、布洛芬、萘普生、吲哚美辛、双氯芬酸、萘丁美酮)、止痛剂(如对乙酰氨基酚、非那西丁)、5-α-还原酶抑制剂、5-氨基水杨酸盐、5HT3受体拮抗剂、类固醇类、支气管扩张剂、醛固酮受体拮抗剂、烷化剂、α-葡萄糖苷酶抑制剂、抗阿米巴药、氨基糖苷类、雄性激素及蛋白同化甾类(anabolic steroids)、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、血管紧张素II抑制剂、减食欲剂、制酸剂、驱虫剂、抗感染剂、抗肾上腺素能剂、抗心绞痛剂、抗心律失常剂、抗生素、抗胆碱能剂、抗凝血剂、抗惊厥剂、抗抑郁剂、抗糖尿病剂、抗腹泻剂、抗真菌剂、抗痛风剂、抗组胺剂、抗高脂血症剂、抗高尿酸血症剂、抗疟剂、抗代谢剂、抗偏头痛剂、抗帕金森病药、抗血小板剂、抗细菌剂、抗银屑病药、抗精神病药、抗风湿病药、防腐剂和杀菌剂、抗病毒剂、抗焦虑药、镇静剂和催眠药、抗惊厥剂、β-肾上腺素能阻滞剂、多价胆酸螯合剂、双膦酸盐、支气管扩张剂、钙通道阻滞剂、碳酸酐酶抑制剂、头孢菌素、螯合剂、趋化因子(chemokine)受体激动剂、趋化因子受体拮抗剂、氯离子通道激活剂、胆固醇吸收抑制剂、降胆固醇药(如非诺贝特、非诺贝酸)、胆碱能激动剂、胆碱脂酶抑制剂、避孕药、cox-2抑制剂、解充血剂、二肽基肽酶4抑制剂、利尿剂、多巴胺能剂、Xa因子抑制剂、γ-氨基丁酸类似物、γ-氨基丁酸再摄取抑制剂、胃肠药、麻醉剂和其它疼痛调制剂、糖蛋白血小板抑制剂、幽门螺杆菌(H. pylori)根除剂、组胺受体拮抗剂、激素、免疫药剂、免疫抑制剂、阳痿用药、肠促胰岛素类似物(incretin mimetics)、正性肌力药(inotropic agent)、酮内酯类、泻药、白三烯-修饰剂、美格列奈类(meglitinides)、代谢剂、甲基黄嘌呤类、盐皮质激素类、单胺氧化酶抑制剂、mTOR激酶抑制剂、肌松剂、神经氨糖酸苷酶抑制剂、神经肌肉阻滞剂、去甲肾上腺素再摄取抑制剂、去甲肾上腺素-多巴胺再摄取抑制剂、核苷逆转录酶抑制剂(NRTIs)、非核苷逆转录酶抑制剂(NNRTIs)、青霉素类、外周阿片受体拮抗剂、外周血管扩张剂、周边起效的减肥剂、泌乳刺激素抑制剂、蛋白酶抑制剂、质子泵抑制剂、精神治疗剂、肾素抑制剂、选择性5-羟色胺再摄取抑制剂、5-羟色胺-去甲肾上腺素再摄取抑制剂、5-羟色胺能神经肠调制剂(neuroenteric modulators)、他汀类药物(statins)、凝血酶抑制剂、血栓溶解剂、甲状腺药物、肿瘤坏死因子(TNF)抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、血管扩张剂、抗利尿激素拮抗剂、维生素、抗癫痫剂、抗高血压剂、抗毒蕈碱样物质药(anti-muscarinic agents)、抗肿瘤剂、抗原虫剂、抗风湿病药、抗甲状腺剂、精神抑制药、心脏正性肌力药、镇咳剂、细胞毒性剂、酶类、脂质调节剂、硝酸盐类、营养剂、口服疫苗、蛋白质、肽类、基因重组药物(recombinant drug)、刺激剂及其组合。属于这些药物类别的市售药用活性成分的描述可在马丁代尔大药典(Martindale, The Complete Drug Reference) (The Pharmaceutical Press，第35版，2007)中找到；它们的公开通过全文参考结合于本文。这些类别的许多具体实例的名单也可在美国专利号6,709,669中找到，其公开通过全文参考结合于本文。

在步骤(a)的溶液中存在的药用活性成分的量，以溶液重量计，优选范围从约1%至约50%，更优选从约2%至约45%，而最优选从约5%至约40%。在步骤(a)的溶液/纳米悬浮液中存在的药用活性成分的量是适于在最终产品的口服固体剂型中提供药理有效量的药用活性成分的量。如在本文使用的，“药理有效量”指的是在诊断、治愈、缓解、治疗或预防中引起想要的药理效应所需的量。本领域普通技术人员可易于确定适宜的药理有效量。

在本发明方法的步骤(a)过程中，如果需要可使混悬液重复利用，且减小粒径的加工过程一直持续到获得所需的活性成分的纳米粒径。典型地采用熟悉的技术，诸如激光衍射法，使用，如，Malvern Mastersizer 2000粒径分析仪(Malvern Instruments, Westborough MA)测量纳米悬浮液中的纳米微粒的尺寸。典型地使用参数，诸如d50描述粒径测量值，该参数代表在此尺寸之上和之下发现所有粒子体积的50%，也称为体积加权中值(volume weighted median)。从而，d50代表中值粒径值。依据本发明，研磨溶液直至d50的范围优选达到从约1 nm至约900 nm，更优选从约10 nm至约800 nm，而最优选从约50 nm至约700 nm。

一旦获得纳米悬浮液，可在本发明方法的步骤(b)之前实施某些任选的步骤。例如，可将纳米悬浮液稀释成想要的体积，目的是，诸如在最终产品中实现具体的给药剂量。如另一个实例，可加入至少一种额外的药用赋形剂。在实现纳米悬浮液之后所加的这样的额外的药用赋形剂可提供与纳米微粒稳定性不相干的功能性，因为本发明的利益之一是从步骤(a)至步骤(b)的能力而无需添加任何额外的纳米微粒稳定剂，诸如聚合性或离子稳定剂。因此，在本发明的某些实施方案中，没有添加额外的纳米微粒稳定剂至步骤(a)或在步骤(b)过程中的纳米悬浮液中。然而，同时，本领域普通技术人员将易于明白，许多药用赋形剂具有双重-或多重功能。因此，可加入可具有公认的纳米微粒稳定性质的药用赋形剂，以提供其他功能性。这样的药用赋形剂的实例包括，但不限于填充剂(如乳糖一水合物、无水乳糖、蔗糖、海藻糖、果糖、葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、异麦芽酮糖醇(isomalt)、甘氨酸、麦芽糊精、微晶纤维素)、化学稳定性增强剂(如抗氧化剂、螯合剂、离子交换树脂、α-、β-,或γ-环糊精或取代的环α-、β-或γ-环糊精)、崩解剂(如交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、羟基乙酸淀粉钠、淀粉、改性淀粉)、粘度调节剂(如牛明胶、猪明胶、海藻酸盐、角叉菜胶、胞外多糖、瓜尔胶、黄原胶)、甜味剂(如天冬甜素、乙酰舒泛钾、三氯半乳蔗糖、山梨醇、木糖醇、麦力甜、奇甜蛋白)、人工或天然来源的芳香剂、着色剂、pH调节剂，及其组合。如果在步骤(b)之前步骤(a)或在步骤(b)过程中将其他药用赋形剂加至纳米悬浮液中，本领域普通技术人员可易于确定其适宜的量。

在本发明方法的第二个步骤中，将步骤(a)的纳米悬浮液冻干以形成口服固体剂型。在本发明优选的实施方案中，在冻干之前，将步骤(a)的纳米悬浮液分配成单一单位剂量。可采用精确递送混悬液的已知体积或质量的任何手工或自动加工方法实施分配，所述方法为例如正排量吸移管或蠕动计量泵组。可将步骤(a)的纳米悬浮液按剂量给至任何容器中，可将所述容器转移至冷冻干燥机并经历冻干过程，诸如，例如用或不用袋、单位剂量小瓶或预成形剂量装置(pre-formed dosage device) (如注射器)的大批托盘(bulk trays)。最普通的实例是将提供给冻干的最终产品确定的尺寸和形状的泡罩袋(blister pockets)或模子的预成型的托盘。依据本发明，以任何常规手段使用熟悉的技术完成冻干。冻干被定义为任何过程，相继冷冻产物中的溶剂相(典型地为水)以形成固体相(冷冻)，随后在真空下使冷冻相干燥以经由升华(冻干法)引起溶剂(典型地为水)去除。术语冻干法也可被用于描述冻干过程。冷冻和干燥步骤的持续期间，以及或者在任一加工步骤之前或者在任一加工步骤之后额外的保持或退火时间的需求，将由所给定的产物的具体特性规定，并易于由本领域普通技术人员确定。如在本领域所公认的，如需要时，可采用单独的设备或相同的设备实施冷冻和干燥步骤。例如，可采用静态冷冻装置(如由Air Products and Chemicals Inc., Allentown, PA制造的Cryo Freezer CM2000)或采用冷冻管道(freeze-tunnel)，诸如由Air Products and Chemicals Inc制造的，使分配的纳米悬浮液冷冻。可将冷冻的纳米悬浮液转移到预冷的冻干器中，条件是当在冷冻器和预冷的冻干器之间转移产物时要采用必要处理防备措施(handling precautions)以维持产物处于冷冻状态。适于本发明的冻干器的实例为FTS Lyostar II (SP Industries, Warminster, PA)或Usifroid SMH90 (Usifroid, Paris, France)，虽然具有随时间控制搁板温度(shelf-temperature)和腔室压力(chamber pressure)的能力，诸如引起冰升华的任何冻干器将适宜于该目的。也有可能仅使用冻干器，诸如FTS Lyostar II或Usifroid SMH90实施冷冻和干燥步骤两者，只要该设备具有以需要的速率和至需要的温度使产物冷冻的功能。对于本发明，分别使用冷冻器和冻干器或仅使用冻干器的任一选项是可行的。

本领域广为公认的是，在冷冻过程中形成冰的速率影响冻干材料的物理性质。一般来说，较慢的冷却速率产生大的冰结晶，干燥后，所述结晶在冻干的固体结构中导致较大的开口通道或孔。尽管大的通道可似乎是值得的，这样的结构经常缺乏物理鲁棒性(robustness)，故更快的冷冻速率可为值得的。因此，必须小心选择冷冻条件以形成可行的冻干产物。在冻干的纳米悬浮液的情况下，已知纳米微粒聚集的最大风险依冷冻存在，因为冷冻现象在局部环境，即在悬浮的纳米微粒表面之中和周围产生显著机械应力和热能。认识到纳米微粒对冷冻以及在测定最终产品属性中的冷冻的临界状态的灵敏性，值得注意的是，单一赋形剂，鱼胶，可如此有效地作为纳米微粒稳定剂起作用，并且产生具有良好的湿润和崩解性质的冻干基质。

不愿受理论的束缚，相信鱼胶在研磨步骤期间和在冻干步骤期间均起着作为稳定剂的作用。在该两个步骤期间鱼胶作为性能助剂(performance aid)的效力完全出乎意料。如在以下的实施例和比较实施例中将见到的，其他明胶类型，例如，牛明胶在本加工方法中的应用，不产生稳定的口服固体剂型。如在本文中所用的，“稳定的”指的是在加工期间和至延长的储存期维持药学上等价的粒径的含纳米微粒剂型。对于纳米微粒的药学上等价粒径的定义可依产物的性质和应用不同而异，但是一般指南是d50粒径维持在参考粒径的±150nm范围之内并小于1微米。本领域普通技术人员将易于理解术语“药学上等价的”的含义，即在药用效力上是等价的。

有利地，使用鱼胶还避免与其他常用离子型稳定剂，诸如聚山梨醇酯80和十二烷基硫酸钠(SLS)相关的使人不愉快的味道的问题。在本发明优选的实施方案中，含纳米微粒的固体口服剂型基本上没有常规离子型稳定剂，诸如聚山梨醇酯80和十二烷基硫酸钠。如在本文中所用的，“基本上没有”指的是在本发明的固体口服剂型中任何这样的稳定剂以重量计小于约0.1%。本方法也提供商业功效和简化的制备工艺，因为在加工方法中间(mid-process)，诸如冻干步骤之前对纳米悬浮液不需要显著修改。换言之，特别是对于步骤(b)，冻干步骤不需要其他的赋形剂。

本发明人已经发现，将纳米悬浮液分配至预先成形的水泡，随后通过使在预先成形的水泡眼(blisters)中的混悬液冻干的机会，提供制备含纳米微粒的、直接进入药学上可接受的包装材料的冻干的片剂的有效手段。最有利的是有机会应用防潮包装材料以制备预先成形的水泡眼，因为大家熟悉冻干的产物在储存时对潮湿敏感。或者，可从在本方法的步骤(b)期间所用的托盘袋移出含纳米微粒的冻干片剂，并进一步加工和包装以生产可行的最终产品。

在本发明的第二个实施方案中，通过本发明以上描述的第一个实施方案的方法，制备含纳米微粒的口服固体剂型。而本发明的第三个实施方案涉及包括至少一种纳米微粒的药用活性成分和鱼胶的冻干的、口服固体剂型。关于鱼胶、药用活性成分和任选的额外赋形剂的鉴定的细节如同以上关于第一个实施方案的描述一样。

本发明固体口服剂型的纳米微粒药用活性成分的d50范围优选从约1 nm至约900 nm，更优选从约10 nm至约800 nm，而最优选从约50 nm至约700 nm。本发明的第二个或第三个实施方案的固体口服剂型中存在的鱼胶量，以固体口服剂型的重量计，其范围优选从约0.5%至约99%，更优选从约1%至约75%，而最优选从约5%至约50%。存在于本发明第二个或第三个实施方案的固体口服剂型中的药用活性成分的量是如上定义的药学上的有效量，并优选以固体口服剂型的重量计，其范围是从约0.1%至约90%，更优选从约1%至约80%，而最优选从约2%至约75%。

本发明的固体口服剂型可表现出快速崩解。如在本文中所用的，“快速崩解”指的是采用体外测试条件(如含水性介质的USP崩解仪器，于37℃)下测量的崩解时间优选为3分钟或更少，而更优选2分钟或更少，而最优选1分钟或更少。该物理性质的解释是由冻干产生的高度多孔固体结构，而更具体地，冻干法增强固体的崩解性质。最终产品的该项属性特别有益于含纳米微粒的剂型，因为崩解是纳米微粒在体内溶解和药用活性成分吸收的先决条件。公认开发纳米微粒的剂型的主要目的是增加药用活性成分溶解的速率和程度，快速湿润和快速崩解行为将进一步使待生产的高性能产品成为可能。本领域技术人员将会明白的是，溶解性差的药用活性成分最倾向于差的润湿和崩解行为，故实现溶解性差的物质的迅速崩解是本发明的冻干剂型的显著的利益。重要的是，这些纳米微粒剂型的迅速崩解和纳米粒子大小两者在25℃下、延长储存3个月或更长之后维持不变。存在于固体剂型中3个月或更长时间的纳米微粒等价物还显示鱼胶使形成物理上可靠的剂型成为可能。

可操控针对(targeted for)采用本发明制备的产物的崩解时间以实现适宜药代动力学需要及患者需求的特定的崩解性质。将通过改变配方和加工参数，诸如药物装填、赋形剂含量、加至鱼胶中的赋形剂的类型和也有单位大小和尺寸，实现这样的操控。含纳米微粒的冻干的终产物可完成在工业上定义的多个产品类别，包括，但不限于口服崩解片剂、口分散(orodispersible)片、即释片、控释片、咀嚼片、舌下含片、颊下含片、生物粘附片剂、囊形片、锭剂、供重新构成的粉末(powder for reconstitution)、供重新构成的颗粒剂或供重新构成的片剂。多种产品目录由政府管理机构以及患者期待规定，但采用本发明产生的所有可能的产品应该均包括包含至少一种纳米微粒的药用活性成分和鱼胶的冻干口服固体剂型。

现在将通过参考以下的实施例论证本发明具体的实施方案。应该理解，这些实施例通过用阐述本发明的方式公开，但不应该以任何方式限制本发明的范畴。

实施例1A和IB

制备包含活性成分萘普生和作为纳米稳定剂的赋形剂鱼胶(来自Norland Products Inc.的SMW鱼胶等级-实施例1A；和来自Norland Products Inc.的DFG等级-实施例1B)和作为填充剂的甘露醇的口服固体剂型。制备5%鱼胶和3%甘露醇的水性溶液；然后将萘普生加至该溶液中以形成混悬液浆液。将混悬液浆液装入到含锆研磨介质的600cc腔室规模Dyno^? Mill中。研磨浆液中的萘普生浓度为15%重量。采用该设备所默认的(default)研磨条件，经混悬液再循环1.5小时实施研磨。从磨中释放出得到的散装纳米悬浮液，且采用利用Digispense单元控制的IVEK泵将250 mg单位剂量精确地分配入0.25 mL容量泡罩袋中(blister pickets)。采用液氮作为冷却剂和3分钟冷冻时间将泡罩袋在Air Products CM2000冷冻器中冷冻，然后在冷冻器中保持直至转移至预冷的冷冻干燥机架子上。在Lyostar II冷冻干燥机中，采用小于500毫托的真空实施干燥。制备的口服固体剂型包含具有在下表1中列出的粒径参数的萘普生粒子。使用在同一天采用NIST标准在亚微米范围校正的Malvern Mastersizer 2000产生该实施例和所有实施例的粒径数据。在超声模式中利用水性分散剂用于分析所有纳米悬浮液和固体口服剂型测试。

表1

样品信息d50未经研磨的萘普生22 μm实施例1A 研磨1.5 hr后164 nm使用鱼胶制备的冻干片剂167 nm实施例1B 在研磨1.5 hr后205 nm使用鱼胶制备的冻干片剂209 nm

如在表1中所见，两个不同等级的鱼胶在溶解性差的酸性药物，诸如萘普生的纳米研磨期间和冻干单元中均是有效的纳米微粒稳定剂。

实施例2

制备包含活性成分吲哚美辛和作为纳米稳定剂的赋形剂鱼胶(来自Norland Products Inc.的DFG等级)和作为填充剂的甘露醇的口服固体剂型。制备5%鱼胶和3%甘露醇的水性溶液；然后将吲哚美辛加至该溶液中以形成混悬液浆液。将混悬液浆液充入含锆研磨介质的600cc腔室规模Dyno^? Mill中。研磨浆液中的吲哚美辛浓度为15%重量。采用该设备所默认的研磨条件经混悬液再循环1.5小时实施研磨。从磨中释放出得到的散装纳米悬浮液，且采用利用Digispense单元控制的IVEK泵将250 mg单位剂量精确地分配入0.25 mL容量泡罩袋中。采用液氮作为冷却剂和3分钟冷冻时间将泡罩袋在Air Products CM2000冷冻器中冷冻，然后在冷冻器中停留直至转移至预冷的冷冻干燥机架子上。在Lyostar II冷冻干燥机中，采用小于500毫托的真空实施干燥。制备的口服固体剂型包含具有在下表2中列出的粒径参数的吲哚美辛粒子。

表2

样品信息d50未经研磨的吲哚美辛37 μm在研磨1.5 hr后151 nm使用鱼胶制备的冻干片剂142 nm

如在表2中所见，鱼胶在溶解性差的酸性药物，诸如吲哚美辛的纳米研磨期间和冻干单元中是有效的纳米微粒稳定剂。

实施例3

制备包含活性成分非那西丁和赋形剂鱼胶(来自Norland Products Inc.的SMW鱼胶等级)和甘露醇的口服固体剂型。制备5%鱼胶和3%甘露醇的水性溶液；然后将非那西丁加至该溶液中以形成混悬液浆液。将混悬液浆液充入含锆研磨介质的600cc腔室规模Dyno^? Mill中。研磨浆液中的非那西丁浓度为15%重量。采用该设备所默认的研磨条件经混悬液再循环1.5小时实施研磨。从磨中释放出得到的散装纳米悬浮液，且采用利用Digispense单元控制的IVEK泵将250 mg单位剂量精确地分配入0.25 mL容量泡罩袋中。采用液氮作为冷却剂和3分钟冷冻时间将泡罩袋在Air Products CM2000冷冻器中冷冻，然后在冷冻器中停留直至转移至预冷的冷冻干燥机架子上。在Lyostar II冷冻干燥机中，采用小于500毫托的真空实施干燥。制备的口服固体剂型包含具有在下表3中列出的粒径参数的非那西丁粒子。

表3

样品信息d50未经研磨的非那西丁83 μm在研磨1.5 hr后315 nm使用鱼胶制备的冻干片剂324 nm

如在表3中所见，鱼胶在纳米研磨期间和也在即使酸性药物，诸如非那西丁的冻干中是有效的纳米微粒稳定剂。这些数据提示鱼胶稳定作用对于拥有不同的酸性/碱性的药用活性成分是可行的。

实施例4

用额外的药用赋形剂制备包含活性成分非诺贝特和作为纳米稳定剂的鱼胶(来自Norland Products Inc.的DFG等级)的口服固体剂型。制备5%鱼胶、3%甘露醇、0.5%三氯半乳蔗糖和0.5%薄荷调味剂的水性溶液；然后将吲哚美辛(indomethacin)加至该溶液中以形成混悬液浆液。将混悬液浆液充入含锆研磨介质的600cc腔室规模Dyno^? Mill中。研磨浆液中的非诺贝特浓度为14.5%重量。采用该设备所默认的研磨条件经混悬液再循环2.5小时实施研磨。从磨中释放出得到的散装纳米悬浮液，且采用利用Digispense单元控制的IVEK泵将250 mg单位剂量精确地分配入0.25 mL容量泡罩袋中。采用液氮作为冷却剂和3分钟冷冻时间将泡罩袋在Air Products CM2000冷冻器中冷冻，然后在冷冻器中停留直至转移至预冷的冷冻干燥机架子上。在Lyostar II冷冻干燥机中，采用小于500毫托的真空实施干燥。制备的口服固体剂型包含具有在下表4中列出的粒径参数的非诺贝特粒子。

表4

样品信息d50未经研磨的非诺贝特30 μm在研磨2 hr后162 nm使用鱼胶制备的冻干片剂167 nm

如在表4中所见，鱼胶在整个非诺贝特(一种作为游离酸的、水溶性差的药用活性成分)的研磨和冻干中是有效的纳米微粒稳定剂。

实施例5

制备包含活性成分萘普生和赋形剂鱼胶(来自Norland Products Inc.的DFG等级)的口服固体剂型。制备5%鱼胶的水性溶液；然后将萘普生加至该溶液中以形成混悬液浆液。将混悬液浆液充入含锆研磨介质的600cc腔室规模Dyno^? Mill中。研磨浆液中的萘普生浓度为15%重量。采用该设备所默认的研磨条件经混悬液再循环1.5小时实施研磨。从磨中释放出得到的散装纳米悬浮液，且采用利用Digispense单元控制的IVEK泵将250 mg单位剂量精确地分配入0.25 mL容量泡罩袋中。采用液氮作为冷却剂和3分钟冷冻时间将泡罩袋在Air Products CM2000冷冻器中冷冻，然后在冷冻器中停留直至转移至预冷的冷冻干燥机架子上。在Lyostar II冷冻干燥机中，采用小于500毫托的真空实施干燥。制备的口服固体剂型包含具有在下表5中列出的粒径参数的萘普生粒子。

表5

样品信息d50未经研磨的萘普生22 μm在研磨1.5 hr后167 nm使用鱼胶制备的冻干片剂177 nm

如在表5中所见，鱼胶本身足以使在纳米研磨期间和也在冻干的固体口服剂型中的纳米微粒稳定。在该产物中甘露醇对实现纳米微粒的稳定作用并非必需的。

实施例6

制备包含活性成分萘普生和作为纳米稳定剂的赋形剂鱼胶(来自Norland Products Inc.的DFG等级)和作为填充剂的甘露醇的口服固体剂型。制备3%鱼胶和2%甘露醇的水性溶液；然后将萘普生加至该溶液中以形成混悬液浆液。将混悬液浆液充入含锆研磨介质的600cc腔室规模Dyno^? Mill中。研磨浆液中的萘普生浓度为15%重量。采用该设备所默认的研磨条件经混悬液再循环1.5小时实施研磨。从磨中释放出得到的散装纳米悬浮液，且采用利用Digispense单元控制的IVEK泵将250 mg单位剂量精确地分配入0.25 mL容量泡罩袋中。采用液氮作为冷却剂和3分钟冷冻时间将泡罩袋在Air Products CM2000冷冻器中冷冻，然后在冷冻器中停留直至转移至预冷的冷冻干燥机架子上。在Lyostar II冷冻干燥机中，采用小于500毫托的真空实施干燥。制备的口服固体剂型包含具有在下表6中列出的粒径参数的萘普生粒子。

表6

样品信息d50未经研磨的萘普生22 μm用鱼胶研磨1.5 hr后187 nm使用鱼胶制备的冻干片剂191 nm

如在表6中所见，改良浓度的鱼胶(相对于实施例1A和1B降低了3%)在有效使在纳米研磨期间和在冻干的固体口服剂型中的纳米微粒稳定。

比较实施例1A和1B

制备包含活性成分萘普生和赋形剂牛明胶(由Gelita提供的低bloom级的酸法兽皮明胶(acid hide gelatin)- 1A；源于Weishardt的低bloom级的酸法兽皮明胶- 1B)的口服固体剂型。制备3%牛明胶和2%甘露醇的水性溶液；然后将萘普生加至该溶液中以形成混悬液浆液。将混悬液浆液充入含锆研磨介质的600cc腔室规模Dyno^? Mill中。研磨浆液中的萘普生浓度为15%重量。采用该设备所默认的研磨条件经混悬液再循环1.5小时实施研磨。从磨中释放出得到的散装纳米悬浮液，且采用利用Digispense单元控制的IVEK泵将250 mg单位剂量精确地分配入0.25 mL容量泡罩袋中。采用液氮作为冷却剂和3分钟冷冻时间将泡罩袋在Air Products CM2000冷冻器中冷冻，然后在冷冻器中停留直至转移至预冷的冷冻干燥机架子上。在Lyostar II冷冻干燥机中，采用小于500毫托的真空实施干燥。制备的口服固体剂型包含具有在下表7中列出的粒径参数的萘普生粒子。

表7

样品信息d50未经研磨的萘普生22 μm比较实施例1A 在研磨1.5 hr后177 nm使用牛明胶制备的冻干片剂21 μm比较实施例1B 在研磨1.5hr后193 nm使用牛明胶制备的冻干片剂13 μm

如在表7中所见，牛明胶能够使纳米微粒在纳米研磨时形成。然而，两种牛明胶均不使冻干固体口服剂型中的纳米微粒稳定。

比较实施例2

制备包含活性成分吲哚美辛和赋形剂牛明胶(由Gelita提供的低bloom级的酸法兽皮明胶)的口服固体剂型。制备3%牛明胶和2%甘露醇的水性溶液；然后将萘普生加至该溶液中以形成混悬液浆液。将混悬液浆液充入含锆研磨介质的600cc腔室规模Dyno^? Mill中。研磨浆液中的吲哚美辛浓度为15%重量。采用该设备所默认的研磨条件经混悬液再循环1.5小时实施研磨。从磨中释放出得到的散装纳米悬浮液，且采用利用Digispense单元控制的IVEK泵将250 mg单位剂量精确地分配入0.25 mL容量泡罩袋中。采用液氮作为冷却剂和3分钟冷冻时间将泡罩袋在Air Products CM2000冷冻器中冷冻，然后在冷冻器中停留直至转移至预冷的冷冻干燥机架子上。在Lyostar II冷冻干燥机中，采用小于500毫托的真空实施干燥。制备的口服固体剂型包含具有在下表8中列出的粒径参数的萘普生粒子。

表8

样品信息d50未经研磨的吲哚美辛37 μm在研磨1.5 hr后159 nm使用牛明胶制备的冷冻片剂30 μm

如在表8中所见，牛明胶能够使吲哚美辛纳米微粒在纳米研磨时形成。然而，当d50增加到1微米以上时，冻干固体口服剂型中的纳米微粒不能保持。

测试

在指定条件下的本实施例的口服固体剂型的崩解时间的比较列于下表9中。

表9

如在表9中所见，检测包括在控制的条件下经历老化3个月或更长时间的选择原型的冻干口服固体剂型的崩解时间11秒或更少。采用USP体外崩解测试仪器，使用900 mL、37℃的水作为崩解测试介质产生崩解时间数据。对于每一数据组测试五个单元，且报告的崩解时间代表所有5个单元崩解了的时间，这样没有残留明显的质块或固体。也再测试那些经历老化实验的原型的粒径，并在表9中也显示d50数据。经检测，重复的粒径数据确认在延长的储存期维持纳米粒径。

尽管以上已经通过参考其具体的实施方案描述本发明，显然可在不背离本文公开的本发明的概念下作出许多变化、修改和改变。因此，意欲包涵所有归入所附属的权利要求书的精神和宽范围的这样的变化、修改和改变。本文所引用的所有专利申请、专利和其它出版物通过全文参考结合于本文。