确定病毒RNA分子3’末端序列的方法

摘要

一种确定病毒RNA分子3’末端序列的方法，包括提取病毒RNA、加尾病毒RNA的纯化、加尾病毒RNA的逆转录反应、病毒逆转录产物的聚合酶链式反应扩增步骤。病毒RNA的末端转移反应本发明通过末端转移反应加尾后，可利用逆转录反应准确地确定病毒RNA分子的3’末端序列，方便快捷。由于可以使用Oligo dT或是修饰的Oligo dT引物进行逆转录反应，省去了针对某一特定病毒RNA分子设计及合成特异性引物的过程，使得实验周期大大简化，并且节约了实验成本。同时，本发明也可以应用于其他3’末端不具有PolyA尾结构的RNA分子的3’末端序列的确定。