健脾疏肝的中药复方制剂及其用途

摘要

本发明涉及一种健脾疏肝的中药复方制剂，其是由重量份的大枣1～20份、山药1～20份、山楂1～10份，佛手1～10份，玉米须1～10份，荷叶1～10份作为原料药制成。本发明还公开了该中药复方制剂的制备方法。本发明中药复方制剂具有健脾疏肝的功效，经多年临床应用和药理学研究确证，可用于包括病毒性肝炎、肝硬化、肝纤维化在内的肝癌癌前病变的治疗，以及用于延缓和阻止肝癌前病变向肝癌的发展，具有疗效确切，无毒副作用，成本低廉的优势。

说明书

技术领域

本发明涉及一种健脾疏肝的中药复方制剂，此外，本发明还涉及该中药复方制剂的用途。

背景技术

肝癌是我国常见恶性肿瘤之一，恶性程度高，易于复发、转移，致死率高。虽然近十几年来该病在治疗上已有不少进展，但总体而言，肝癌远期疗效仍然较差，预后十分险恶。由于肝癌是基因发生变化的结果，采取手术切除、化疗等杀死肿瘤细胞的治疗手段，并不是一种积极主动和彻底的方法，因为已有的肿瘤细胞被切除或被杀死，但发生肿瘤的内环境并没有改变，肿瘤发生的条件和基因背景还存在，经过量变到质变的过程，肿瘤会再次复发。流行病学研究结果表明，绝大多数肝癌都是由癌前病变(包括病毒性肝炎、肝硬化、肝纤维化等)发展而来，也就是说之所以罹患肝癌，是存在一个从癌前病变到肿瘤的发展转化过程。因此积极治疗癌前病变，减缓或阻止癌前病变向肝癌的发展，对于降低肝癌的发病率具有重要意义。这就需要在现有的治疗手段之外，针对肝炎病毒携带者、肝炎后肝硬化患者及肝癌高发区居民等肝癌高危人群，寻求一种能影响或纠正基因改变、积极主动的预防措施。

目前，中医药在肿瘤预防领域的作用越来越受到人们的重视，已有大量研究证实部分中药可在一定程度上起到预防肝癌的作用。肝癌的中医病机涉及到气滞、血瘀、痰凝湿聚、热毒及脏腑虚弱等方面。近年来，研究发现从肝炎、肝硬化发展到肝癌过程中的众多症状多与脾胃有关，由此推测肝癌发生、发展的全过程可能有一个主导因素起作用-脾虚[程学莲，王伯庆.浅谈脾虚与肝癌的相关性.吉林中医药，2007，27(8)：5-7；王家晓.原发性肝癌从脾虚论治浅析.广州中医药，2004，27(6)：31-33]。发明人在此理论的指导下，结合自己的临床实践，以“健脾疏肝”为法，研制了一种中药复方制剂。该制剂以大枣、山药、山楂、佛手、玉米须、荷叶按一定比例配制而成，具有无毒、可长期服用的特点，作为基础方在肝病患者的临床应用中取得了较好的疗效，具有较好的应用前景。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种用于健脾疏肝的中药复方制剂，确切地讲是治疗肝癌癌前病变的中药复方制剂，并提供其医药学上的用途。

本发明提供的中药复方制剂由大枣、山药、山楂、佛手、玉米须、荷叶组方，系发明人在多年临床实践基础上，以传统中医理论为指导，精心选药组方而成。方中大枣，味甘性温，归心脾胃经，功能补脾胃，益气血，安心神，调营卫。《本经》言其“安中养脾，助十二经。平胃气，通九窍，补少气、少沣液，身中不足”，《本草汇言》则谓其“补中益气，壮心神，助脾胃，养肝血，保肺气，调营卫”。本方用大枣健脾益气，又能养血安神，为方中君药。山药，味甘性平，归脾肺肾经，功能补脾，养肺，固肾，益精。《本经》言其“补中益气力，长肌肉。久服耳目聪明，轻身不饥延年”，《别录》指出“补虚劳羸瘦，充五脏”，用之助君药益脾气，养脾阴，平补阴阳，为方中臣药。佛手，味辛、苦，性温，归肝脾肺经，功能疏肝理气，和胃化痰。《滇南本草》言其“补肝暖胃，和中行气”，用之疏肝和胃，且与君臣配伍，可使补而不滞；山楂，味酸、甘，性微温，归脾胃肝经。为治一切食积要药，且能化血中瘀滞。《日用本草》谓“化食积，行结气，健胃宽膈，消血痞气块”，《本草纲目》云“消肉积，癥瘕，痰饮痞满吞酸，滞血胀痛”，与佛手配伍，气血并调，化滞生新，共为佐药；玉米须甘、淡，平，归膀胱、肝、胆经，功能利湿退黄；荷叶苦涩、平，归心肝脾经，功擅清热利湿，升阳化浊，二者相伍，一升一降，清化有余之湿热，亦为佐药。诸药合用，肝脾同治，气血并调，兼清湿热，共奏健脾疏肝利湿之功。

现代药学研究表明，山药富含多种糖类、氨基酸及微量元素，对细胞免疫和体液免疫均有促进作用，且能促进消化功能、降血糖等；大枣含多种果酸、糖类、维生素、氨基酸及微量元素，有较明显的保肝作用，能够抗突变，对降低消化道肿瘤的发生率似有一定作用；佛手含挥发油及黄酮类成分，对消化系统有促进作用；山楂主要含果酸和糖类，具有促消化，降血脂，降血压，抗氧化及防癌作用；荷叶富含黄酮类物质，是大多数氧自由基的清除剂；玉米须含大量硝酸钾、维生素K、谷固醇、豆固醇，能利尿、利胆、降低血糖。因此，本方能够为机体代谢提供多种必须的营养物质，并能改善慢性肝病的免疫低下状态，提高消化机能。已有的实验表明，该方可延缓DEN诱导的大鼠肝纤维化的进程，并对DEN诱导的肝癌前病变有一定的阻断作用。

本发明中药复方制剂原料配比发明人结合中医辨证组方，并经长期临床实践和大量病历的应用摸索得出，各组分的用量比例在下述范围内都具有较好疗效：大枣1～30份、山药1～30份、山楂1～15份、佛手1～10份、玉米须1～10份、荷叶1～10份；优选大枣1～15份、山药1～15份、山楂1～10份、佛手1～5份、玉米须1～5份、荷叶1～5份；最优选大枣10份、山药10份、山楂10份、佛手6份、玉米须5份、荷叶5份。

本发明所述中药复方制剂可采用常规制备方法制备，经药理研究和临床应用，表明其具有显著的治疗肝癌癌前病变的作用。

本发明中药复方制剂所用原料价廉，制备简便，使用方便，经多年临床应用，对治疗肝癌癌前病变(病毒性肝炎、肝硬化、肝纤维化)具有较好的疗效，对肝炎后肝硬化患者同样具有较好的疗效。鉴于需要应用该制剂的发病人群数量巨大，本发明提供的中药复方制剂具有良好的应用前景。

附图说明

图1本发明中药复方制剂对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的大鼠肝硬化形成过程中胶原纤维沉积作用的影响效果图(n＝5，与对照组比较^**P＜0.01)。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。

实施例1

称取大枣1000g、山药1000g、山楂1000g、佛手600g、玉米须500g、荷叶500g，用水回流提取3次(50000ml，1小时；40000ml，1小时；40000ml，1小时)，合并提取液，浓缩，烘干，粉碎，此提取物直接可以包装、冲服。

实施例2

称取大枣3000g、山药500g、山楂200g、佛手200g、玉米须200g、荷叶100g，用水回流提取3次(50000ml，1小时；40000ml，1小时；40000ml，1小时)，合并提取液，浓缩，烘干，粉碎，此提取物直接可以包装、冲服。

实施例3

称取大枣500g、山药3000g、山楂500g、佛手100g、玉米须100g、荷叶100g，用水回流提取3次(50000ml，1小时；40000ml，1小时；40000ml，1小时)，合并提取液，浓缩，烘干，粉碎，此提取物直接可以包装、冲服。

实施例4

称取大枣500g、山药2000g、山楂2000g、佛手1000g、玉米须2000g、荷叶1000g，用水回流提取3次(50000ml，1小时；40000ml，1小时；40000ml，1小时)，合并提取液，浓缩，烘干，粉碎，此提取物直接可以包装、冲服。

实施例5

称取大枣500g、山药200g、山楂3000g、佛手100g、玉米须300g、荷叶100g，用水回流提取3次(50000ml，1小时；40000ml，1小时；40000ml，1小时)，合并提取液，浓缩，烘干，粉碎，此提取物直接可以包装、冲服。

实施例6

称取大枣4000g、山药200g、山楂500g、佛手200g、玉米须500g、荷叶500g，用水回流提取3次(50000ml，1小时；40000ml，1小时；40000ml，1小时)，合并提取液，浓缩，烘干，粉碎，此提取物直接可以包装、冲服。

实施例7(颗粒剂的制作)

按实施例1方法制备的提取物150g，加糊精300g，混匀，加入适量60％乙醇制成软材，过24目筛制粒，50℃干燥2小时，干燥颗粒过30目筛整粒，分装，即得。

实施例8(片剂的制作)

按上述配比将提取物、微晶纤维素、淀粉混匀，加入适量60％乙醇制成软材，过24目筛制粒，50℃干燥2小时，干燥颗粒过30目筛整粒，加入硬脂酸镁，混匀，压片，即得。

实施例9(该中药复方制剂的药理作用研究)

试验一、对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的大鼠肝硬化形成过程中胶原纤维沉积作用的影响

1材料

1.1动物SD雄性大鼠，体重180±20g，由第二军医大学实验动物中心提供。

1.2试剂及药物DEN购自Sigma公司；天狼红：中国人民解放军第475医院赠送；中药饲料：该中药复方制剂按实施例1方法制备，按成人每日每公斤体质量换算成大鼠用量将中药30.4g/kg均匀混合于基础饲料中，压制成条块状药物饲料。

2方法

2.1大鼠模型的建立

大鼠适应环境3天，随机分为模型组、中药组，每组30只大鼠，分别以0.1g/LDEN自由饮水，同时分别给予基础饲料或含中药的饲料喂养。16周时停用DEN饮水，改中药饲料为基础饲料，20周为实验终点。于模型复制后每4周，两组各处死5只大鼠取肝组织固定于甲醛溶液，石蜡包埋，切片厚4μm。常规苏木精-伊红染色及切片胶原特殊染色。

2.2切片胶原染色

按天狼红-饱和苦味酸法，普通石蜡切片。常规脱蜡至水，0.1mol/L天狼红-饱和苦味酸，避光室温孵育20min；950ml/L乙醇脱水，二甲苯透明封片。

2.3阳性结果判定

肝脏背景为淡黄色，胶原阳性着色呈红色，采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统，随机选择5个汇管区进行染色胶原的定量分析(面积占视野面积)，取其平均值。

2.4统计学方法

NoSA统计分析软件对所获得的数据进行组间t检验。

3结果

模型复制4周后模型组大鼠肝内即出现少量胶原纤维阳性染色，多集中于汇管区，8周后病变加重、纤维组织增生及假小叶形成，肝脏胶原沉积量呈逐渐增多趋势，16周时大鼠肝内病变均以结节性肝硬化为主，切片胶原沉积量亦达到顶峰，20周时大鼠肝脏胶原沉积量略有所下降。中药组大鼠肝内病变比同期模型组大鼠明显减轻，12周时有结节性肝硬化发生，中药组肝内胶原沉积明显低于模型组，两组间t检验显示差异有显著性，P＜0.01。见图1。

另又采用实施例2-8制备获得的中药复方制剂，重复上述实验，亦获得相似的实验结果。

试验二、对大鼠肝癌诱发过程C-myc、IGF-II蛋白表达变化的影响

1材料

1.1动物SD雄性大鼠，体重180±20g，由第二军医大学实验动物中心提供。

1.2试剂及药物DEN购自Sigma公司，C-myc，IGF-II原位杂交试剂盒购自武汉博士德公司。该中药复方制剂按实施例1方法制备，按成人每日每公斤体质量换算成大鼠用量将中药30.4g/kg均匀混合于基础饲料中，压制成条块状药物饲料。

2方法

2.1大鼠模型的建立

大鼠适应环境3天，随机分为模型组、中药组，每组30只大鼠，分别以0.1g/LDEN自由饮水，同时分别给予基础饲料或含中药的饲料喂养。16周时停用DEN饮水，改中药饲料为基础饲料，20周为实验终点。诱癌开始后每4周两组各处死5只大鼠，取肝组织固定于甲醛溶液，石蜡包埋，切片厚4μm。常规苏木精-伊红染色及切片胶原特殊染色。

2.2切片胶原染色

实验方法按购买的试剂盒步骤进行，阴性对照以PBS取代含探针杂交液。

2.3阳性结果判定

含C-myc，IGF-II的肝细胞胞质呈棕黄色，采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统对其平均灰度进行测量。平均灰度值越大阳性信号越强。

2.4统计学方法

NoSA统计分析软件对所获得的数据进行组间双尾t检验。

3结果

大鼠在C-myc、IGF-II阳性信号伴随着大鼠肝癌诱发的全过程，其表达量呈不断升高趋势，于诱癌晚期达到最高峰。中药预防组大鼠C-myc，IGF-II平均灰度均较单纯诱癌组明显增加，即中药组大鼠肝脏两基因的阳性表达在整个诱癌过程均较单纯诱癌组显著降低。两组间t检验均显示差异有显著性，^*P＜0.05，^**P＜0.01。见表1。

表1.该中药复方制剂对大鼠诱肝癌过程C-myc、IGF-II mRNA表达的影响(灰度值)(n＝5，)

注：与对照组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

另又采用实施例2-8制备获得的中药复方制剂，重复上述实验，亦获得相似的实验结果。

实施例10

戴某，男，1971年9月出生，江苏启东。门诊病案号：2258。有家族性乙肝病史，1990年体检时发现“大三阳”(乙肝表面抗原、乙肝E抗原和乙肝核心抗体三项指标阳性)，曾先后使用拉米夫定、阿德福韦酯等抗病毒治疗，间断使用干扰素、胸腺肽等免疫药物治疗，先后服用甘利欣，垂盆草冲剂等治疗，肝功能和乙肝病毒时有波动，超出正常值范围。就诊前2年复查HBV-DNA维持在10⁴拷贝/毫升左右，就诊前半年复查时发现甲胎蛋白高于正常值，维持在低阳性范围内，因其母和哥已因肝癌而去世，故近半年四处求医。2007年5月20日于长海医院就诊时自诉乏力，纳差，口干喜饮，胸胁胀痛，急躁易怒，情绪紧张，手足心热，伴有便溏不爽，小便黄赤，舌红略紫，舌苔薄黄，脉弦细。近期查乙肝病毒DNA定量检查示1.053×10⁴拷贝/毫升，甲胎蛋白46μg/L，谷丙氨酸氨基转移酶53U/L，门冬氨酸氨基转移酶96U/L，γ-谷氨酰转肽酶126U/L。辨证属肝郁脾虚，阴虚内热，给健脾疏肝中药复方加减，大枣10g、山药10g、山楂10g、佛手15g、玉米须30g、垂盆草30g，五味子6g水煎服，每日一剂，早晚分服。两周后复诊，患者诉自觉乏力好转，纳可，烦躁较前好转，二便正常，口不干。治拟用原方去五味子。3个月后复查肝功正常，自觉无特殊不适，改服制备好的中药复方制剂15克，每日2次，治疗7月后，甲胎蛋白转为阴性，肝功能正常。患者继续服用中药复方制剂15克，每日1次，坚持服用至今，自觉无不适症状，HBV-DNA降至检测限以下，2010年4月10日复查，病毒滴度仍在检测限以下，甲胎蛋白阴性，乙肝两对半检查显示“小三阳”。

实施例11

李某，男，浙江慈溪人，1964年5月出生，门诊病案号：6698。1998年发现乙肝小三阳，其后定期体检，2005年肝脏B超检查时发现肝硬化中度，多处就医服用中药治疗。2008年来就诊时诉神疲乏力，纳差，遇事容易急躁，每年就医药费花费甚多，无心工作影响家庭，经常胁痛，食后脘闷，大便稀溏、一日2～3次，面暗，舌淡胖边有齿印，苔薄白，脉细弦。辨证属肝郁脾虚，予以中药复方制剂15克，每日2次。连续服用半年后复诊，胁胀脘闷诸症消失，面色红润，舌淡红苔薄白，脉滑，B超显示肝硬化轻度。2011年3月随访，仍无不适主诉，定期检查肝功能正常，B超报告未提示肝硬化。患者及其家属甚是感激，先后介绍其家乡类似病人数十人前来门诊求治。

实施例12

朱某，辽宁沈阳人，办公室职员，1974年5月出生，门诊病案号：100168。2006年单位体检发现轻度脂肪肝，没有引起重视。2007年体检发现甘油三酯升高，B超提示中度脂肪肝，肝功能异常，其后运动减肥。2008年体检时发现高血压，肝功能正常，血脂甘油三酯和低密度脂蛋白均高于正常值，超声提示：中度脂肪肝。于2008年10月就诊，就诊时身高173cm，体重75KG，腹部膨隆，诉平素嗜食肥甘，但不嗜烟酒，喜睡多寐，脾气容易急躁，胁痛，食后腹部胀满不适，遇寒后易腹泻，小便频多。舌淡偏暗，苔薄白，脉弦滑。予中药复方制剂15克，每日2次。连续服用半年后，2009年5月复诊时，自觉偶有食后胀满不适，余无不适，血压正常，B超提示：轻度脂肪肝；肝功能，血脂指标均在正常范围内。服用2年后自觉无明显不适，纳可，寐安，复查肝功能，血脂，血压未发现异常，超声报告肝胆脾胰未见明显异常。后停服药，定期复查。