2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨基)丁酯的二糖精盐、二富马酸盐、二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐和单苯甲酸盐

摘要

本发明提供了2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨基)丁酯(化合物(I))的盐，含有其的药物组合物及其在治疗中的用途。

说明书

本申请涉及嘧啶衍生物的盐、含有其的药物组合物及其在治疗中的用 途。

免疫系统由先天性免疫和获得性免疫构成，两者共同作用以保护宿主免 受细菌引起的感染。已经显示的是，先天性免疫可以通过在免疫细胞表面表 达的toll样受体(toll-like receptor，TLR)来识别保守的病原体相关分子模式。 对侵入的病原体进行识别，然后触发细胞因子的产生(包括干扰素α(IFNα)， 上调吞噬细胞上的共刺激分子，由此调节T细胞的功能。因此，先天性免疫 与获得性免疫紧密相关，且可以影响获得性反应的发展和调节。

TLR是I型跨膜受体家族，其特征在于NH2末端的富含亮氨酸的胞外重 复结构域(LRR)和COOH末端的胞内尾部，所述尾部含有称为Toll/IL-1受体 (TIR)同源性结构域的保守区域。该胞外结构域含有可变数目的LRR，其被认 为参与配体结合。迄今已经在人类和小鼠中描述了十一种TLR。它们在配体 特异性、表达方式和它们可以诱导的靶标基因方面彼此不同。

已经开发了通过TLR发挥作用的配体(也称为免疫应答调节剂(IRM)，例 如在美国专利4689338中所述的咪唑并喹啉衍生物，其包括治疗生殖器疣的 咪喹莫特(Imiquimod)，和在WO 98/01448和WO 99/28321中所述的腺嘌呤衍 生物。

WO2009/067081描述了一类具有免疫调节性质的通过TLR7发挥作用的 嘧啶衍生物，其可用于治疗病毒性疾病或者变应性疾病和肿瘤。

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯和其某些盐描述于2008年11月21日提交的国际专利申请号 PCT/SE2008/051334(公开号WO2009/067081)的实施例57中。

在药品的配制过程中，使药品(活性物质)为其能够被便利地操作和处理 的形式是重要的。不仅从获得用于制备药品本身的商业上可行的制备方法的 角度来看，而且从随后制备包括活性物质和适合辅料的药物制剂的角度来看， 这都是重要的。因此，活性物质的化学稳定性和物理稳定性是重要的因素。 活性物质，以及含有活性物质的制剂，应当能够有效地储存可观的时间期间， 而活性物质的物理化学特征(例如化学组成、密度、吸湿性和溶解度)没有显 示出任何显著的变化。

此外，如果将活性物质结合至用于肺部(例如通过干粉吸入器(诸如 装置))给药的制剂中，期望的是，能够容易地对活性物质进行微 粒化以产生具有良好的流动性质并包括高的细颗粒级分(即其中活性物质颗 粒具有小于或等于10μm(微米)的质量中位直径(MMD)的级分)的粉末。这样 的级分能够被运送至肺的深处，从而活性化合物的吸收更快和更多。

典型地，本领域的技术人员将会理解，如果药品能够容易地以稳定的形 式(诸如稳定的晶体形式)获得，可提供在操作的容易性、制备的容易性和合 适的药物制剂的储存期限延长和更可靠的溶解度特征方面的优点。

现在已经令人惊奇地发现可制备与游离碱化合物相比具有改善的物理 化学性质的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二 甲基氨基)丁酯的某些盐，所述盐能够配制在用于鼻腔/肺部给药的干粉制剂 中。

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯的结构(下文用“化合物(I)”)如下所示：

化合物(I)

因此，根据本发明，提供了化合物(I)(活性药物成分，API)的苯甲酸盐、 反式肉桂酸盐、甲磺酸盐、二糖精盐、1-羟基-萘-2-甲酸盐、2，5-二氯苯磺酸 盐，1，5-萘二磺酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、富马酸盐、L-酒石酸盐或琥珀酸盐。

在本发明的上下文中，术语“盐”定义API和酸被离子化的晶体材料，或 者可替换地，其中API和酸这两种组分都利用显著的分子间相互作用，诸如 氢键来结合并产生均匀的(uniform)晶体材料(共晶)。应当理解的是，本发明的 盐可以是部分离子化的和部分共晶的。

在另一方面，本发明提供了化合物(I)的苯甲酸盐、反式肉桂酸盐、甲磺 酸盐、二糖精盐、1-羟基-萘-2-甲酸盐、2，5-二氯苯磺酸盐、1，5-萘二磺酸盐、 柠檬酸盐、磷酸盐、富马酸盐、L-酒石酸盐或琥珀酸盐，其显示如下述实施 例20中的相应表I-XIX所示的X射线粉末衍射特征峰(用2θ°表示)。

除非另有说明，本申请所述的所有X射线粉末衍射数据是采用如实施例 中所述的CuKα射线获得的。

本发明还提供了本发明的盐的溶剂化物(包括水合物)。然而，本发明的 盐优选是无水的，并且优选是为非溶剂化的形式。

在本发明的一个实施方案中，本发明的盐或其溶剂化物具有晶体性质并 且优选具有至少50％结晶度，更优选至少60％结晶度，仍更优选至少70％结 晶度并最优选至少80％结晶度。结晶度或结晶性可通过常规X射线衍射技术 来评估。

在本发明的另一个实施方案中，所述盐或其水合物具有从50％、60％、 70％、80％或90％至95％、96％、97％、98％、99％或100％结晶度。

除非另有说明，在本发明的盐中，化合物(I)对酸的化学计量可以是变化 的，例如从2∶1至1∶2，或者其间的任何比例，诸如1∶1。优选的本发明的盐 的实例包括化合物(I)对酸为1∶1的盐(苯甲酸盐、反式肉桂酸盐、甲磺酸盐、 2，5-二氯苯磺酸盐、1，5-萘二磺酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、富马酸盐、L-酒石 酸盐和琥珀酸)，或化合物(I)对酸为1∶2的盐(糖精盐(即二糖精盐)、1-羟基- 萘-2-甲酸盐(即二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐)、2，5-二氯苯磺酸盐(即二-(2，5-二氯苯 磺酸)盐)、磷酸盐(即二磷酸盐)或琥珀酸盐(即二琥珀酸盐)。另一种合适的盐 为化合物(I)对富马酸的1∶2的盐(即二富马酸盐)。

我们已经令人惊奇地发现化合物(I)的二糖精盐、二富马酸盐、二-(1-羟 基-萘-2-甲酸)盐和苯甲酸盐当在高温和高湿条件下储存时(例如40℃和75％ 相对湿度)显示出良好的固态化学稳定性。另外，对二糖精盐与乳糖一水合物 的混合物和二富马酸盐与乳糖一水合物的混合物的稳定性研究显示这些盐在 乳糖一水合物(用于配制用于吸入给药的药物的普通载体)的存在下也特别稳 定。本申请的实施例示例了这些盐的稳定性。因此，这些盐是有益的，因为 它们显示出了例如改善的储存稳定性。

因此，在本发明的一个实施方案中提供了化合物(I)的二糖精盐、二富马 酸盐、二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐或苯甲酸盐。

在本发明的另一个实施方案中提供了化合物(I)的二糖精盐、二-(1-羟基- 萘-2-甲酸)盐或苯甲酸盐。

在本发明的另一个实施方案中提供了化合物(I)的二糖精盐、二富马酸盐 或苯甲酸盐。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的二糖精盐或二富马酸盐。

化合物(I)的二糖精盐

在本发明的另一个实施方案中提供了化合物(I)的二糖精盐。

我们已经发现化合物(I)的二糖精盐以多种晶型存在。一种二糖精盐晶 型，即下文的“化合物(I)的二糖精盐晶型A”提供了基本上如图4中所示的X 射线粉末衍射图。晶型A的最显著的峰示于实施例中的表IV中。化合物(I) 的二糖精盐晶型A被认为是该盐热力学上最稳定的晶型。

因此，本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型A。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型A，其特征在 于所述晶型A的X射线粉末衍射图具有2θ在约9.2°、14.9°或15.2°的至少一 个特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型A，其特征在 于所述晶型A的X射线粉末衍射图具有2θ在约9.2°、10.3°、11.4°、12.8°、 14.9°、15.2°、22.9°或23.4°的至少一个特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型A，其特征在 于所述晶型A的X射线粉末衍射图具有2θ在约9.2°、14.9°和15.2°的特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型A，其特征在 于所述晶型A的X射线粉末衍射图具有2θ在约9.2°、10.3°、11.4°、12.8°、 14.9°、15.2°、22.9°和23.4°的特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型A，其特征在 于所述晶型A的X射线粉末衍射图具有基本上如图4中所示的X射线粉末 衍射图。

当在差示扫描热计(DSC)(条件如实施例部分所述)中加热时，化合物(I) 的二糖精盐晶型A显示出了熔融吸热，起始温度(onset temperature)为约 124℃，以及峰温度为约127℃，如图20所示。

根据本发明的另一个方面提供了用于制备化合物(I)的二糖精盐晶型A 的方法，包括(i)使化合物(I)与大约2摩尔当量的糖精在乙酸乙酯中反应，以 及(ii)使所述晶型A结晶。

步骤(i)中的反应适当地在环境温度进行。

步骤(ii)中的晶型A的结晶可在盐形成后自发进行。在这种情况下，可 能需要搅拌所得的盐的混悬液，从而允许发生完全结晶。对盐的浆液的搅拌 方便地在环境温度进行。通常在乙酸乙酯中搅拌盐的浆液数天，例如1-10天， 诸如约6天，由此得到了晶型A。

本发明的另一个方面提供了另一种用于制备化合物(I)的二糖精盐晶型A 的方法，包括(i)使化合物(I)与大约2摩尔当量的糖精在乙腈中反应；(ii)浓 缩反应混合物；和(iii)使所述晶型A从乙酸乙酯中结晶。

步骤(i)中的反应适当地在环境温度进行。

步骤(ii)中的对混合物的浓缩可以通过例如蒸发掉一些或所有的乙腈来 实现。

步骤(iii)中的晶型A的结晶可以通过例如在乙酸乙酯中搅拌所述盐的浆 液或溶液来进行。对盐的浆液/溶液的搅拌方便地在环境温度进行。通常在乙 酸乙酯中搅拌数天，适当地1-10天，例如2-7天，由此得到了晶型A。

实施例中示例了形成化合物(I)的二糖精盐晶型A的具体反应条件。

上述方法中晶型A的结晶可以借助于用晶型A的晶体进行种晶(seeding) 来进行。晶种可以使用实施例中所述的方法中的一种来获得。种晶的使用在 大规模的制备盐中是特别有益的。种晶也可允许使用可替换的溶剂和方法条 件来得到化合物(I)的二糖精盐晶型A。

因此，在一个实施方案中化合物(I)的二糖精盐晶型A是通过下述方法制 备的，所述方法包括：

(i)使化合物(I)溶解于乙腈中并与大约2摩尔当量的糖精反应；

(ii)加入乙酸乙酯，同时将混合物的温度保持在约40℃；

(iii)用化合物(I)的二糖精盐晶型A的晶体对混合物进行种晶；

(iv)冷却混合物；和

(v)分离化合物(I)的二糖精盐晶型A。

在步骤(ii)种晶之后，将混合物适当地搅拌一段时间，例如约5小时以允 许结晶。在步骤(iv)中将混合物冷却以促进进一步的结晶。在一个实施方案中， 将混合物冷却至约10-20℃。在一个实施方案中，将混合物冷却至约20℃。 在一个实施方案中，将混合物冷却至约20℃。在另一个实施方案中，将混合 物分阶段冷却，首先冷却至约35℃，然后接着冷却至约15℃。在第一阶段中， 在冷却至约35℃之后，将混合物搅拌约4小时，然后冷却至约15℃。然后 将混合物适当地搅拌大约2个多小时，接着分离晶型A。任选地，该盐的重 结晶可如下进行：通过将盐溶解于乙腈中并通过重复上述步骤(ii)至(v)重结 晶。

二糖精盐的另一种晶型，即下文的“化合物(I)的二糖精盐晶型B”提供了 基本上如图5中所示的X射线粉末衍射图。晶型B的最显著的峰示于实施例 中的表V中。

因此，本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型B。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型B，其特征在 于所述晶型B的X射线粉末衍射图具有2θ在约12.0°、12.5°、16.4°或19.8° 的至少一个特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型B，其特征在 于所述晶型B的X射线粉末衍射图具有2θ在约7.0°、10.8°、12.0°、12.5°、 13.9°、16.4°、17.3°或19.8°的至少一个特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型B，其特征在 于所述晶型B的X射线粉末衍射图具有2θ在约12.0°、12.5°、16.4°和19.8° 的特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型B，其特征在 于所述晶型B的X射线粉末衍射图具有2θ在约7.0°、10.8°、12.0°、12.5°、 13.9°、16.4°、17.3°和19.8°的特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二糖精盐晶型B，其特征在 于所述晶型B具有基本上如图5中所示的X射线粉末衍射图。

当在差示扫描热计(DSC)(条件如实施例部分所述)中加热时，化合物(I) 的二糖精盐晶型B显示出了熔融吸热，起始温度为约106℃，以及峰温度为 约110℃，如图21所示。

化合物(I)的二糖精盐晶型B可以通过下述方法来制备，所述方法包括： 使化合物(I)与大约2摩尔当量的糖精在乙酸乙酯或乙腈中反应。然后，晶型 B可以使用实施例中所述的具体条件从乙酸乙酯中结晶。晶型B的结晶可以 借助于用晶型B的晶体对所述盐的浆液进行种晶来进行。晶种可以使用实施 例中所述的方法中的一种来获得。

化合物(I)的二富马酸盐

在本发明的另一个实施方案中提供了化合物(I)的二富马酸盐。

化合物(I)的二富马酸盐为晶体并提供了基本上如图19中所示的X射线 粉末衍射图。二富马酸盐的最显著的峰示于实施例中的表XIX中。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二富马酸盐，其特征在于所 述盐具有2θ在约9.1°、14.2°、15.8°或20.4°的至少一个特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二富马酸盐，其特征在于所 述盐具有2θ在约7.8°、9.1°、14.2°、15.8°、18.7°、19.0°、20.4°或24.7°的至 少一个特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二富马酸盐，其特征在于所 述盐的X射线粉末衍射图具有2θ在约9.1°、14.2°、15.8°和20.4°的特征峰。

根据本发明的另一个方面提供了化合物(I)的二富马酸盐，其特征在于所 述盐具有的X射线粉末衍射图2θ在约7.8°、9.1°、14.2°、15.8°、18.7°、19.0°、 20.4°和24.7°的特征峰。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的二富马酸盐，其特征在于所述盐 具有基本上如图19中所示的X射线粉末衍射图。

使用重力分析蒸汽吸附(gravimetrical vapour sorption)(DVS，如实施例部 分中所述)的吸湿性测量显示，化合物(I)的二富马酸盐具有轻微的吸湿性(在 80％相对湿度有0.2-2％w/w的湿气吸收，参见图22)。

根据本发明的另一个方面提供了用于制备化合物(I)的二富马酸盐的方 法，包括(i)使化合物(I)与大约2摩尔当量的富马酸在乙腈，或乙腈和四氢呋 喃(THF)的混合物中反应，形成二富马酸盐；和(ii)从乙醚中结晶二富马酸盐。

步骤(i)中的反应适当地在环境温度进行。方便地，富马酸可溶解于THF 中。然后，将该溶液加至化合物(I)于乙腈中的溶液中。可替换地，可以将富 马酸以固体的形式加至化合物(I)的溶液中。反应之后，二富马酸盐可以通过 例如蒸发掉溶剂而分离。

步骤(ii)中的结晶方便地通过将所述盐在乙醚中进行浆化来进行。当在环 境温度搅拌浆液数天(例如约5-7天)之后，观察到了晶体二富马酸盐。

根据本发明的另一个方面提供了用于制备化合物(I)的二富马酸盐的方 法，包括(i)使化合物(I)与大约2摩尔当量的富马酸在乙醇中反应；和(ii)使 二富马酸盐结晶，例如通过加入合适的反溶剂诸如乙酸异丙酯来结晶。

二富马酸盐的结晶可以借助于用二富马酸盐的晶体对混合物进行种晶 来进行。晶种可以使用实施例中所述的方法中的一种来制备。当使用种晶开 始二富马酸盐的结晶时，可以使用用于结晶的宽范围的溶剂和反溶剂。例如， 二富马酸盐可以从醇诸如甲醇或乙醇中结晶。方便地，当使用种晶时，二富 马酸盐的结晶可以如下进行：使用合适的反溶剂从甲醇或乙醇中结晶由此进 行结晶。合适的反溶剂包括，例如酯(诸如乙酸异丙酯)。溶剂/反溶剂系统诸 如甲醇/乙酸异丙酯与种晶的使用被认为提供了用于大规模制备二富马酸盐 的方便方法。因此，在一个实施方案中二富马酸盐通过下述方法制备，所述 方法包括：

(i)将化合物(I)溶解于乙醇中并与大约2摩尔当量的富马酸反应；

(ii)加入乙酸异丙酯，同时将混合物的温度保持在约30℃；

(iii)用化合物(I)的二富马酸盐的晶体对混合物进行种晶；

(iv)加入额外的乙酸异丙酯并将混合物冷却至约20℃；和

(v)分离化合物(I)的二富马酸盐。

适当地在步骤(i)中，将化合物(I)溶解于约6体积比的乙醇中。在步骤(ii) 中，适当地将约2.8体积比的乙酸异丙酯加至混合物中。在步骤(iii)中，在种 晶之后将混合物适当地搅拌约2.5小时以允许结晶的发生。在步骤(iv)中，适 当地将约3.2体积比的乙酸异丙酯加至混合物中。然后，将混合物适当地搅 拌约1小时。

化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐

在本发明的另一个实施方案中提供了化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸) 盐。

化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐为晶体并提供了基本上如图6中所 示的X射线粉末衍射图。二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐的最显著的峰示于实施例中 的表VI中。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐，其特征 在于所述盐的X射线粉末衍射图具有2θ在约8.3°、16.6°、19.4°或23.4°的至 少一个特征峰。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐，其特征 在于所述盐的X射线粉末衍射图具有2θ在约8.3°、9.5°、11.5°、11.8°、12.8°、 13.6°、16.6°、16.9°、19.4°或23.4°的至少一个特征峰。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐，其特征 在于所述盐的X射线粉末衍射图具有2θ在约8.3°、16.6°、19.4°和23.4°的特 征峰。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐，其特征 在于所述盐的X射线粉末衍射图具有2θ在约8.3°、9.5°、11.5°、11.8°、12.8°、 13.6°、16.6°、16.9°、19.4°和23.4°的特征峰。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐，其特征 在于所述盐具有基本上如图6中所示的X射线粉末衍射图。

根据本发明的另一个方面提供了用于制备化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2- 甲酸)盐的方法，包括(i)使化合物(I)与大约2摩尔当量的1-羟基-萘-2-甲酸在 乙腈中反应；(ii)浓缩步骤(i)中的混合物；和(iii)使化合物(I)的1-羟基-萘-2-甲 酸盐结晶。

步骤(ii)中对混合物的浓缩可以通过除去一些或所有溶剂通过例如蒸发 或蒸馏来实现。适当地，如实施例中所描述，在步骤(iii)中盐是通过例如使盐 在少量的乙酸乙酯中浆化数天(例如1-7天)来结晶的。所述盐的结晶可以借助 于用盐的晶体对混合物进行种晶来进行。可以使用实施例中所述的方法中的 一种来制备晶种。

化合物(I)的苯甲酸盐

在本发明的另一个实施方案中提供了化合物(I)的苯甲酸盐。在该实施方 案中，苯甲酸盐为化合物(I)与苯甲酸的1∶1的盐，即化合物(I)的单苯甲酸盐。 化合物(I)的单苯甲酸盐为晶体并提供了基本上如图1中所示的X射线粉末衍 射图。单苯甲酸盐的最显著的峰示于实施例中的表I中。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的单苯甲酸盐，其特征在于所述盐 的X射线粉末衍射图具有2θ在约6.3°、9.3°、17.8°或23.8°的至少一个特征 峰。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的单苯甲酸盐，其特征在于所述苯 甲酸盐的X射线粉末衍射图具有2θ在约6.3°、7.2°、9.3°、12.6°、15.6°、17.8°、 19.8°、22.2°、23.8°或24.5°的至少一个特征峰。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的单苯甲酸盐，其特征在于所述盐 的X射线粉末衍射图具有2θ在约6.3°、9.3°、17.8°和23.8°的特征峰。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的单苯甲酸盐，其特征在于所述盐 的X射线粉末衍射图具有2θ在约6.3°、7.2°、9.3°、12.6°、15.6°、17.8°、19.8°、 22.2°、23.8°和24.5°的特征峰。

在另一个实施方案中提供了化合物(I)的单苯甲酸盐，其特征在于所述盐 具有基本上如图1中所示的X射线粉末衍射图。

根据本发明的另一个方面提供了用于制备化合物(I)的单苯甲酸盐的方 法，包括(i)使化合物(I)与大约1摩尔当量的苯甲酸在乙腈中反应；(ii)浓缩步 骤(ii)中的混合物；和(iii)使化合物(I)的单苯甲酸盐结晶。

步骤(ii)中，对混合物的浓缩可以通过例如通过蒸发或蒸馏除去一些或所 有溶剂来实现。适当地，如实施例中所述，在步骤(iii)中，盐可以通过例如使 盐在少量的乙腈中浆化来结晶。所述盐的结晶可以借助于用所述盐的晶体对 混合物进行种晶来进行。晶种可以使用实施例中所述的方法中的一种来制备。

在本发明的具体实施方案中，化合物(I)的盐的单独晶型基本上不含该化 合物(I)的盐的其它晶型。例如所述的化合物(I)的二糖精盐晶型A晶体包括小 于30％、20％、15％、10％、5％、3％或特别地，小于1％重量的化合物(I)的 二糖精盐的其它晶型，诸如晶型B。因此，在一个实施方案中化合物(I)的二 糖精盐晶型A基本上不含化合物(I)的二糖精盐晶型B。

在本发明的具体实施方案中，当具体描述了盐的化学计量时，例如1∶1 的化合物(I)对酸的盐(即单酸的盐)或1∶2的化合物(I)对酸的盐(即二酸盐)， 该盐适当地基本上不含具有其它化学计量的盐。例如，化合物(I)的二富马酸 盐基本上没有单富马酸盐。适当地，化合物(I)的具体的盐包括小于30％、 20％、15％、10％、5％、3％或特别地，小于1％重量的不同化学计量的盐。

当将本申请的盐描述为具有“......的X射线粉末衍射图具有2θ在约...... 的至少一个特征峰”时，该盐的XRPD可以含有一个或更多的所列的2θ值。 例如所列的一个或更多的2θ值，2个或更多的2θ值或3个或更多的2θ值。

在前述定义化合物(I)的盐的晶型的X射线粉末衍射峰的段落中，在表述 “......在2θ在约......”中所使用的术语“约”是表示峰的精确位置(即所列举的 2-θ角的值)不应当被解释为绝对值，这是因为如本领域的技术人员将会理解 的那样，峰的精确位置可以在一台和另一台测量仪器之间，从一个样品到另 一个样品之间发生些许变化，或是由于所使用的测量条件的些许变化而发生 些许变化。在前述段落中也说明了晶体化合物(I)的盐提供了“基本上”与示 于图1、4、5、6和19中的X射线粉末衍射图相同的X射线粉末衍射图，并 且具有示于表I、IV、V、VI和XIX中的基本上最显著的峰(°2θ值)。应当理 解在本文中术语“基本上”的使用也意图表示X射线粉末衍射图的°2θ值可 以在一台和另一台测量仪器之间，从一个样品到另一个样品之间发生变化， 或是由于所使用的测量条件的些许变化而发生些许变化，因此示于图中或在 表中引用的峰的位置也不应被解释为绝对值。

X射线粉末衍射领域的技术人员将会认识到峰的相对强度可以受到例 如，尺寸上大于约30微米的晶粒和不一致的长宽比(non-unitary aspect ratios) 影响，这些可能影响样品分析。此外，应当理解，强度可能随实验条件和样 品制备诸如颗粒在样品中的优选的取向而波动。自动或固定的发散狭缝的使 用也将会影响相对强度的计算。当比较衍射图时，本领域的技术人员能够处 理这些影响。

X射线粉末衍射领域的技术人员将会认识到由于样品高度的不同和在检 测器位置的校准中的错误的影响，2θ的位置可发生小的偏移。通常，给定的 值的±0.1°的差别被认为是恰当的。

本领域的技术人员将会理解，由于样品纯度、样品制备以及测量条件(例 如加热速率)的变化，由DSC测量的熔点可能会发生小的变化。应当理解， 通过其它种类的仪器或通过使用不同于那些在下文中描述的条件，可能会给 出可替换的熔点的读数。因此，本申请所引用的熔点和吸热图并不作为绝对 值，且当解释DSC数据时将考虑这样的测量误差。典型地，熔点可以发生±5℃ 或更少的变化。

也可使用其它合适的分析技术，例如NIR光谱法或固态核磁共振光谱， 表征本申请所述的化合物(I)的盐和/或将本申请所述的化合物(I)的盐与其它 物理形式进行区别。

本申请所述的化合物(I)的盐的化学结构可以通过常规方法例如质子核 磁共振(NMR)分析来确认。

化合物(I)的制备

用于制备本申请所述的盐的游离碱(即化合物(I))可以如WO2009/067081 的实施例57中的描述来制备。化合物(I)也可以如本申请实施例中所述来制 备。一种制备化合物(I)的具体方法图示于反应方案1中，其也显示了最终的 化合物(I)二糖精盐晶型A的制备。

反应方案1

反应方案1中的具体反应条件更详细地描述于实施例中。应当理解，具 体的反应条件和溶剂等并不限于图示于反应方案1中的合成方法。因此，其 它反应条件可适合于使用反应方案1所图示的方法的化合物(I)的制备。

例如在反应方案1的一个独立方面中，在步骤(i)中，3-羟基-2-亚甲基丁 酸甲酯和2-(4-溴苯基)乙腈的偶联反应在合适的钯催化剂和碱的存在下进行。 适当地，钯催化剂为例如，PdCl₂[P(o-tol)₃]₂(如反应方案1所图示)， Pd[P(t-Bu)₃]₂、Pd(OAc)₂和三苯基膦，或Pd(OAc)₂和四正丁基溴化铵(TBAB)。 碱可以为，例如，有机胺碱或无机碱。有机胺碱的实例包括三乙基胺和N，N- 二环己基甲基胺。无机碱的实例包括合适的碳酸盐碱诸如碳酸氢钠。反应方 便地在合适的溶剂的存在下进行，例如极性疏质子溶剂，诸如四氢呋喃(THF)、 乙腈、丙腈或N，N-二甲基甲酰胺(DMF)。反应温度可以为70-80℃在THF的 情况下为溶剂的回流温度。

例如在反应方案1的另一个独立方面中，在步骤(iii)中，步骤(ii)的产物 (2-(4-((2-氨基-4-羟基-6-甲基嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙腈)的反应可以与芳基磺 酰卤在碱的存在下进行。适当地，芳基磺酰卤为例如取代的苯磺酰卤诸如 2，4，6-三异丙基苯磺酰氯(IPBsCl-如反应方案1所图示的)、2，4-二甲氧基苯 磺酰氯、4-甲氧基苯磺酰氯或2-均三甲基苯磺酰氯(2，4，6-三甲基苯磺酰氯)。 碱可以为，例如，有机胺碱或无机碱。有机胺碱的实例包括1，4-二氮杂二环 [2.2.2]辛烷(DABCO)、N-甲基吡咯烷、N-甲基吗啉、N，N，N’，N’-四甲基-1，3- 丙二胺(TMPDA)、TMPDA与催化量的N-甲基咪唑(NMI)1，8-二氮杂二环 [5.4.0]十一-7-烯(DBU)与催化量的NMI或三甲基胺盐酸盐与两到三倍摩尔比 的三乙基胺。无机碱的实例包括合适的碳酸盐碱诸如碳酸钾。溶剂可以为极 性疏质子溶剂或芳香烃。反应方便地在合适的溶剂的存在下进行，例如极性 疏质子溶剂诸如乙腈、四氢呋喃(THF)或2-甲基四氢呋喃；或芳香烃诸如甲 苯。

疾病和医学病症

根据本发明的盐(包括溶剂化形式)可用作TLR7活性的调节剂并因此可 以给药于哺乳动物，包括人，用于治疗下述病症或疾病：

1.呼吸道：气道阻塞性疾病，包括哮喘，包括支气管哮喘、变应性哮喘、 内源性哮喘、外源性哮喘、运动诱发性哮喘、药物诱发性(包括阿司匹林和 NSAID诱发的)哮喘和粉尘诱发性哮喘，间歇性哮喘和持续性哮喘及各种严 重度的哮喘，和引起气道高反应性的其它原因；慢性阻塞性肺病(COPD)；支 气管炎，包括传染性支气管炎和嗜酸性支气管炎；肺气肿；支气管扩张；囊 性纤维化；结节病；农民肺及相关疾病；超敏感性肺炎；肺纤维化，包括隐 原性纤维化肺泡炎、特发性间质性肺炎、抗肿瘤治疗和慢性感染(包括结核病 和曲霉病及其它真菌感染)并发的纤维化；肺移植的并发症；肺血管的血管炎 和血栓形成疾病及肺动脉高压；镇咳活性，包括治疗与气道炎症和分泌情况 相关的慢性咳嗽及医源性咳嗽；急性鼻炎和慢性鼻炎，包括药物性鼻炎和血 管运动性鼻炎；常年性(perennial)变应性鼻炎和季节性变应性鼻炎，包括神经 性鼻炎(花粉症)；鼻息肉病；急性病毒感染，包括普通感冒和由呼吸道合胞 病毒、流行性感冒、冠状病毒(包括SARS)和腺病毒引起的感染；

2.皮肤：牛皮癣、特应性皮炎、接触性皮炎或其它湿疹性皮肤病及迟发 型超敏反应；植物性和光照性皮炎；脂溢性皮炎、疱疹样皮炎、光化性角化 病、扁平苔癣、萎缩性硬化性苔癣、坏疽性脓皮症、皮肤结节病、盘状红斑 狼疮、天疱疮、类天疱疮、大疱性表皮松解、荨麻疹、血管性水肿、血管炎、 中毒性红斑、皮肤嗜酸粒细胞增多、斑秃、男性型脱发、斯威特综合征(Sweet’s  syndrome)、韦-克综合征(Weber-Christian syndrome)、多形性红斑；蜂窝组织 炎，包括传染性和非传染性蜂窝组织炎；脂膜炎；皮肤淋巴瘤、非黑素瘤皮 肤癌和其它发育不良性损伤；药物诱发的疾病，包括固定性药疹；

3.眼：睑炎；结膜炎，包括常年性变应性结膜炎或春季变应性结膜炎； 虹膜炎；前色素层炎和后色素层炎；脉络膜炎；影响视网膜的自身免疫性疾 病、变性疾病或炎性疾病；眼炎，包括交感性眼炎；结节病；感染，包括病 毒、真菌和细菌感染；

4.生殖泌尿系统：肾炎，包括间质性肾炎和肾小球性肾炎；肾病综合征； 膀胱炎，包括急性和慢性(间质性)膀胱炎和杭纳溃疡(Hunner’s ulcer)；急性和 慢性尿道炎、前列腺炎、附睾炎、卵巢炎和输卵管炎；女阴阴道炎；佩伦涅 病(Peyronie’s疾病)；勃起机能障碍(男性和女性)；

5.同种异体移植物排斥：在例如肾脏、心脏、肝脏、肺脏、骨髓、皮肤 或角膜移植后或在输血后出现的急性和慢性同种异体移植物排斥；或慢性移 植物抗宿主病；

6.其它自身免疫性和变态反应性疾病，包括类风湿性关节炎、肠易激综 合征、系统性红斑狼疮、多发性硬化症、桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、 格雷夫斯病(Graves’疾病)、阿狄森病(Addison’s疾病)、糖尿病、特发性血小 板减少性紫癜、嗜酸性筋膜炎、高IgE综合征、抗磷脂综合征和塞扎里综合 征(Sazary syndrome)；

7.肿瘤：对常见癌症的治疗，所述癌症包括前列腺、乳腺、肺、卵巢、 胰腺、肠和结肠、胃、皮肤和脑肿瘤及影响骨髓(包括白血病)和淋巴增生系 统(例如何杰金(Hodgkin’s)和非何杰金淋巴瘤)的恶性肿瘤；包括对转移性疾病 和肿瘤复发及瘤外综合征的预防和治疗；和

8.感染性疾病：病毒性疾病，如生殖器疣、寻常疣、脚底疣、乙型肝炎、 丙型肝炎、单纯疱疹病毒、传染性软疣、天花、人免疫缺陷症病毒(HIV)、人 乳头状瘤病毒(HPV)、细胞巨化病毒(CMV)、水痘-带状疱疹病毒(VZV)、鼻 病毒、腺病毒、冠形病毒、流行性感冒、副流感；细菌性疾病，例如结核病、 鸟分枝杆菌和麻风病；其他感染性疾病，例如真菌性疾病、衣原体、念珠菌、 曲霉、隐球菌性脑膜炎、卡氏肺囊虫、隐孢子虫病、组织胞浆菌病、弓形体 病、锥虫感染和利什曼病。

因此，本发明提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化物，其用 于治疗。

在另一个方面，本发明提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物在制备用于治疗的药物中的用途。

在本说明书的上下文中，除非有相反的特殊说明，术语“治疗(therapy)” 也包括“预防(prophylaxis)”。术语“治疗的(therapeutic)”和“治疗地 (therapeutically)”应当相应地解释。

预防被认为与对以下患者的治疗特别有关，所述患者患有所讨论的疾病 或病症的先前发作或面临所讨论的疾病或病症的增加危险。面临形成具体疾 病或病症危险的患者通常包括具有该疾病或病症的家族史的那些患者或已通 过遗传学试验或筛选而确定为特别易于形成该疾病或病症的那些患者。

具体地，根据本发明的盐(包括溶剂化形式)可用于治疗哮喘、慢性阻塞 性肺病(COPD)、变应性鼻炎、变应性结膜炎、特应性皮炎、癌症、乙肝、丙 肝、HIV、HPV、细菌感染和皮肤病。另外盐也可以用作疫苗佐剂。

因此，本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶 剂化物，其用于治疗哮喘、慢性阻塞性肺病或变应性鼻炎。

本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物，其用于治疗哮喘。

本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物，其用于治疗慢性阻塞性肺病。

本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物，其用于治疗变应性鼻炎。

本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物，其用作疫苗佐剂。

本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物在制备用于治疗哮喘、慢性阻塞性肺病或变应性鼻炎的药物中的用途。

本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物在制备用于治疗哮喘的药物中的用途。

本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物在制备用于治疗慢性阻塞性肺病的药物中的用途。

本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物在制备用于治疗变应性鼻炎的药物中的用途。

本发明的另一个方面提供了本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化 物作为疫苗佐剂在制备用于治疗疾病或病症的疫苗中的用途。

本发明因此提供了在患有或面临所述疾病的风险的患者中治疗炎性疾 病的方法，其包括给药患者治疗有效量的本申请定义的化合物(I)的盐或盐的 溶剂化物。

本发明还提供了在患有或面临所述疾病的风险的患者中治疗气道疾病 例如可逆的阻塞性气道疾病诸如哮喘的方法，其包括给药患者治疗有效量的 本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化物。

本发明还进一步提供了治疗疾病或病症或者减少疾病或病症风险的方 法包括异常细胞生长(例如癌症)或由其所引起，其中该方法包括给药需要其 的患者治疗有效量的本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化物。

本发明进一步提供了治疗疾病或病症或者减少疾病或病症风险的方法， 其中该方法包括给药需要其的患者治疗有效量的疫苗和本申请定义的化合物 (I)的盐或盐的溶剂化物。

本发明进一步提供了在患者中增加对疫苗的响应的方法，其中该方法包 括给药需要其的患者治疗有效量的疫苗和本申请定义的化合物(I)的盐或盐的 溶剂化物。

在上面提到的治疗用途中，给药剂量当然应当根据所使用的盐、给药的 方式、所期望的治疗和所适应的紊乱来改变。例如，(溶剂化的)盐的每日剂 量，如果是吸入给药，可在每千克体重0.05微克(μg/kg)至每千克体重100微 克(μg/kg)的范围内。例如约0.1-100μg/kg的剂量诸如约0.1、0.5、1、2、5、 10、20、50或100μg/kg的剂量。可替换地，如果(溶剂化的)盐是口服给药， 则每日剂量可在每千克体重0.01毫克(mg/kg)至每千克体重100毫克(mg/kg) 的范围内。

本申请所提及的剂量是指游离碱形式的化合物(I)的剂量。因此，具体的 盐的等效剂量将会更高，这是因为盐与游离碱相比分子量增加了。

根据本发明的盐可单独使用，但通常以药物组合物的形式来给药，其中 盐或其溶剂化物(活性成份)与药用辅料、稀释剂或者载体混合。有关选择和 制备适当的药物制剂的常规程序描述在例如″Pharmaceuticals-The Science of  Dosage Form Designs″，M.E.Aulton，Churchill Livingstone，1988中。

根据给药方式，该药物组合物可包括0.05至99％w(重量百分比)，更优 选为0.05至80％w，仍更优选为0.10至70％w，甚至更优选为0.10至50％w 的活性成分，所有的重量百分比都是基于总组合物。

本发明还提供了药物组合物，包括本申请定义的化合物(I)的盐或盐的溶 剂化物以及可药用辅剂、稀释剂或载体。

本发明还提供了用于制备本发明的药物组合物的方法，其包括将本申请 定义的化合物(I)的盐或盐的溶剂化物与可药用辅料、稀释剂或载体混合。

该药物组合物可以通过以下形式来局部给药(例如给药至皮肤或给药至 肺和/或气道(通过口腔或鼻腔吸入))：例如乳膏剂、溶液剂、混悬液、七氟代 烷烃(HFA)气雾剂和干粉制剂(例如在吸入器装置(已知为)中的制 剂)；或通过以下形式来全身给药：例如通过口服给药的片剂、胶囊剂、糖浆 剂、粉剂或者颗粒剂；或通过以下形式来胃肠外给药：溶液剂或混悬剂；或 通过皮下给药；或通过栓剂的形式来直肠给药；或经皮给药。

用于吸入给药的药物组合物

在本发明的一个实施方案中，药物组合物通过吸入(口腔或鼻腔)给药。

化合物(I)的盐可以使用合适的递送装置，例如从干粉吸入器、定量吸入 器、雾化器或鼻腔递送装置给药。这样的装置是公知的。

在另一个实施方案中，药物组合物通过干粉吸入器(DPI)给药。

DPI可以是“被动的”或呼吸启动的，或是“主动的”，其中粉末是通过一 些机构(例如，内部供应压缩空气)而不是患者的吸入来分散。目前，可利用 三种类型的被动干粉吸入器：单剂量、多单位剂量或多剂量(贮库)吸入器。 在单剂量装置中，通常是在明胶胶囊中提供了单个剂量，且使用之前需要将 其装载至吸入器中，其实例包括(Aventis)、(Glaxo SmithKline)、AeroliserTM(Novartis)、(Boehringer)和Eclipse (Aventis)装置。多单位计量吸入器含有多个单独包装的剂量，为多个明胶胶 囊或位于泡罩(blisters)中，其实例包括(Glaxo SmithKline)、(GlaxoSmithKline)和(Boehringer)装置。在多剂量装置中，药物储 存在整装粉末贮库中，其中单个剂量被计量，其实例包括(AstraZeneca)、(Orion)、(ASTA Medica)、(Innovata Biomed)和(Chiesi)装置。

用于DPI的可吸入药物组合物或干粉制剂可以通过混合微细分散的活性 成份(具有通常等于或小于10μm，优选等于或小于5μm的质量中位直径) 与载体物质，例如单-、二-或多糖、糖醇或其它多元醇来制备。适当的载体 为糖或糖醇，例如乳糖、葡萄糖、棉子糖、松三糖、乳糖醇、麦芽糖醇、海 藻糖、蔗糖、甘露醇和淀粉。载体颗粒可具有从20-1000μm，更通常从50-500 μm的质量中位直径。粉末混合物可以然后，如所需的那样，分散至硬明胶 胶囊中，每个硬明胶胶囊含有所需剂量的活性成份。

可替换地，可吸入药物组合物可以通过将微细分散的粉末(例如由微细分 散的活性成分和微细分散的载体颗粒组成)加工成微球(spheres)来制成，所述 微球在吸入过程中破裂。将该球化的粉末填至多剂量吸入器的药物贮库中， 例如称为的那种吸入器，其中剂量单位计量所需的剂量，然后由 患者吸入所述剂量。

因此，本发明还提供了干粉吸入器，具体为多单位剂量干粉吸入器，其 含有本发明的可吸入药物组合物。

在另一个实施方案中，化合物(I)的盐通过定量吸入器(metered dose  inhaler，MDI)，特别是压力定量吸入器(pressurized metered dose inhaler，pMDI) 给药。pMDI在压力容器中含有以合适的溶液或混悬液形式的活性物质。活 性物质是通过启动pMDI装置上的阀来递送的。启动可以为手动或呼吸启动 的。在手动启动的pMDI中，该装置通过使用者吸入启动，例如通过按压pMDI 装置上的合适的释放机构。呼吸启动的pMDI在患者通过pMD的接嘴吸入 时启动。这可能是有益的，因为装置的启动与患者的吸入是同步的并可以导 致更一致的活性物质的计量。pMDI装置的实例包括(AstraZeneca)。

用于pMDI中的可吸入药物组合物可以通过将化合物(I)的盐(与或不与 附加的辅料诸如溶剂(例如乙醇)、表面活性剂、润滑剂、防腐剂或稳定剂)溶 解或分散于合适的推进剂中来制备。合适的推进剂包括烃、氯氟烃和氢氟烷 烃(例如七氟烷烃)推进剂，或任何这样的推进剂的混合物。优选的推进剂为 P134a和P227，其中每种可以单独使用或与其它推进剂和/或表面活性剂和/ 或其它辅料组合使用。当化合物(I)的盐以混悬液的形式使用时，所述盐适当 地以细分的形式存在(具有通常等于或小于10μm，优选等于或小于5μm的 质量中位直径)。

在另一个实施方案中，化合物(I)的盐通过压力定量气雾剂与隔室给药。 合适的隔室是公知的并包括(AstraZeneca)或(GSK)。

在另一个实施方案中，化合物(I)的盐通过雾化器给药。合适的雾化器是 公知的。

在雾化器中使用的可吸入药物组合物可以通过将化合物(I)的盐分散或 优选溶解于合适的水性介质中来制备。组合物也可包括例如合适的pH和/ 或张力调节剂、表面活性剂和防腐剂。合适的组合物的实例包括包括化合物 (I)的盐、柠檬酸盐缓冲液和盐水的组合物。

在另一个实施方案中，化合物(I)的盐以从合适的鼻腔递送装置(例如喷雾 器泵或适应于鼻腔递送的MDI)以喷雾器形式经鼻给药。可替换地，所述盐 可以使用合适的DPI装置(例如(AstraZeneca))以粉末 的形式经鼻给药。

用于在喷雾器泵或MDI鼻腔递送装置中使用的药物组合物可以通过将 化合物(I)的盐分散或优选溶解于合适的类似于上述通过MDI装置吸入的那 些水性介质中来制备。用于鼻腔递送的合适的干粉组合物为如上文所述的与 DPI递送有关的组合物。然而，若限制化合物向肺中的渗透以及将化合物保 持在鼻腔中是合乎需要的，可能必需要使用更大的粒径的化合物，例如平均 粒径大于约10μm，例如从10μm到50μm。

因此，本发明还提供了含有可吸入的本发明的药物组合物的适合于经鼻 给药的吸入器装置(例如干粉吸入器，特别是多剂量单位干粉吸入器，或pMDI 吸入器)。

根据本发明的盐也可与其它用于治疗上述病症的化合物一同给药。这样 的额外化合物的实例包括描述于WO2009/067081中的那些。

应当理解与用途、治疗方法、药物组合物和给药有关的“化合物(I)的盐” 的参考意图覆盖本申请描述的任何一种盐，例如2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基 氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨基)丁酯的苯甲酸盐、反式肉桂酸 盐、甲磺酸盐、二糖精盐、1-羟基-萘-2-甲酸盐、二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐、 2，5-二氯苯磺酸盐、二-(2，5-二氯苯磺酸)盐、1，5-萘二磺酸盐、柠檬酸盐、磷 酸盐、二磷酸盐、富马酸盐、二富马酸盐、L-酒石酸盐、琥珀酸盐、二琥珀 酸盐。

本发明因此进一步涉及组合治疗，其中本发明的盐，或本发明的药物组 合物与其它一种或多种治疗剂同时地或相继地给药，或与其它一种或多种治 疗剂一起作为组合制剂给药，用于治疗一种或多种所列的病症。

附图说明

图1显示化合物(I)的单苯甲酸盐的X射线粉末衍射图。

图2显示化合物(I)的单反式肉桂酸盐的X射线粉末衍射图。

图3显示化合物(I)的单甲磺酸盐的X射线粉末衍射图。

图4显示化合物(I)的二糖精盐(晶型A)的X射线粉末衍射图。

图5显示化合物(I)的二糖精盐(晶型B)的X射线粉末衍射图。

图6显示化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐的X射线粉末衍射图。

图7显示化合物(I)的单(2，5-二氯苯磺酸)盐的X射线粉末衍射图。

图8显示化合物(I)的二-(2，5-二氯苯磺酸)盐的X射线粉末衍射图。

图9显示化合物(I)的单-1，5-萘二磺酸盐(晶型A)的X射线粉末衍射图。

图10显示化合物(I)的单-1，5-萘二磺酸盐(晶型B)的X射线粉末衍射图。

图11显示化合物(I)的单柠檬酸盐(晶型A)的X射线粉末衍射图。

图12显示化合物(I)的单柠檬酸盐(晶型B)的X射线粉末衍射图。

图13显示化合物(I)的单磷酸盐的X射线粉末衍射图。

图14显示化合物(I)的二磷酸盐的X射线粉末衍射图。

图15显示化合物(I)的单富马酸盐的X射线粉末衍射图。

图16显示化合物(I)的单L-酒石酸盐的X射线粉末衍射图。

图17显示化合物(I)的单琥珀酸盐的X射线粉末衍射图。

图18显示化合物(I)的二琥珀酸盐的X射线粉末衍射图。

图19显示化合物(I)的二富马酸盐的X射线粉末衍射图。

图20显示化合物(I)的二糖精盐晶型A的差示扫描热量法(DSC)扫描图。 X-轴显示温度(℃)，y-轴为热流(watts/g)。

图21显示化合物(I)的二糖精盐晶型B的差示扫描热量法(DSC)扫描图。 X-轴显示温度(℃)，y-轴为热流(watts/g)。

图22显示化合物(I)的二富马酸盐的动态蒸气吸附(DVS)等温线图。X- 轴显示相对湿度(RH％)，y-轴显示样品质量的变化。

图23显示化合物(I)的单富马酸盐的动态蒸气吸附(DVS)等温线图。X- 轴显示相对湿度(RH％)，y-轴显示样品质量的变化。

图24显示当储存在40℃和75％相对湿度时化合物(I)的单糖精(2个不同 的批次，实心三角形)、单反式肉桂酸盐(实心圆)、单琥珀酸盐(实心菱形)、 单苯甲酸盐(空心菱形)、二富马酸盐(空心圆)、二昔萘酸盐(空心三角形)和二 糖精盐(十字形)的储存稳定性。X-轴显示时间(周数)，y-轴显示式(A)的酸降 解产物的％(w/w)(描述于实施例22中)。

图25显示当储存在40℃和75％相对湿度时乳糖一水合物和化合物(I) 的单糖精盐(实心三角形)、单苯甲酸盐(空心菱形)、二富马酸盐(空心圆)和二 糖精盐(十字形)的混合物的储存稳定性。X-轴显示时间(周数)，y-轴显示式(A) 的酸降解产物的％(w/w)(描述于实施例22中)。

实施例

现在本发明将会通过参考下述说明性的实施例作进一步地说明，其中， 除非另有说明：

(i)温度以摄氏度(℃)的形式给出；操作是在室温或环境温度进行，即 在18-25℃范围内的温度。

(ii)通常，反应过程之后是HPLC，反应时间仅为示例。

(iii)产率仅示例并不必须是通过勤勉工艺开发获得的那些；如果需要 更多的物质，则重复进行制备。

(iv)化学符号具有其通常含义；使用SI单位和符号。

(v)溶剂比以体积∶体积(v/v)术语的形式给出。

(vi)除非另有说明，起始材料是可商购的。

一般方法

NMR

¹H NMR谱用Varian Unity Inova 400MHz(软件：VNMR 6.1C和VNMRJ  1.1D；探针：Nalorac 5mm DG400-5AT)或Varian Mercury-VX 300MHz(软件： VNMR 6.1C；探针：Varian 5mm AutoSW PFG)仪器在298K记录。丙酮-d₆或 二甲亚砜(DMSO)-d₆的中心峰用作内部参考。

差示扫描热量法(DSC)

使用标准方法(例如描述于G.W.H.et al(1996)，Differential  Scanning Calorimetry，Springer，Berlin中的那些)，使用TA Instruments Q2000 差示扫描热计(DSC)研究测试样品对增加的温度的测热响应。在0和250℃ 之间进行测量，升温速率(ramp rate)为10℃/分钟。将大约0.5至5mg的测试 样品放置在氮气流(50mL/min)中的有盖铝盘(无折缝)中。

如上文所述，DSC的起始温度和峰温度可以随样品的纯度和仪器参数， 尤其是温度的扫描速率而发生变化是公知的。本领域的技术人员能够使用常 规的优化/校准以建立差示扫描热计的仪器参数从而可以收集与此处提供的 数据具有可比性的数据。

缩写

使用下述缩写。

Aq：         含水的或水溶液

DABCO：      1，4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷

EDCI：       1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺

EtOAc：      乙酸乙酯

HOBT：       羟基苯并三唑

MeCN：       乙腈

ⁱPrOAc：乙酸异丙酯

RPHPLC：     反相高效液相色谱法

THF：        四氢呋喃

加合物(盐)的制备

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯加合物(盐)的形成

除非另有说明，描述于下述实施例中的加合物(盐)采用如下方法制备：

向2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲 基氨基)丁酯(20mg)于乙腈中(2mL)中的溶液的等份中加入1或2摩尔当量的 相应的酸(或为固体或溶解在乙腈中(2mL)(苯甲酸(固体)、反式肉桂酸(固体)、 甲磺酸、2，5-二氯苯磺酸、柠檬酸、1，5-萘二磺酸、85％磷酸水溶液、琥珀酸(固 体)、富马酸(固体)、L-酒石酸、糖精(固体)或2-羟基-1-萘甲酸(固体)))。通过 露天蒸发，从所得的混合物中除去溶剂。然后，将溶剂(乙腈、四氢呋喃、乙 酸乙酯、二甲氧基乙醚，甲基叔丁基醚，1，4-二噁烷或乙醚；各2mL)加至 这些残余物中并对混合物进行浆化7天，形成相应的加合物。使用离心过滤 并真空干燥固体。

实施例1

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯苯甲酸盐

制备包括用乙腈进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为 1∶1。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.96-7.91(2H，m)，7.59-7.54(1H，m)，7.49-7.43 (2H，m)，7.14(2H，d)，7.05(2H，d)，6.36(1H，t)，6.10(2H，s)，4.01(2H，t)， 3.72(2H，s)，3.58(2H，s)，3.29-3.22(2H，m)，2.19(2H，t)，2.09(6H，s)，2.04 (3H，s)，1.59-1.49(2H，m)，1.48-1.34(4H，m)，1.28-1.09(4H，m)，0.82(3H， t)

实施例2

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯反式肉桂酸盐

制备包括用乙醚进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为 1∶1。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.67-7.61(m，2H)，7.48(d，1H)，7.44-7.35(m， 3H)，7.18-7.09(m，2H)，7.07-6.98(m，2H)，6.50(d，1H)，6.20-6.11(m，1H)， 5.69(s，2H)，4.01(t，2H)，3.71(s，2H)，3.58(s，2H)，3.27-3.18(m，2H)，2.15 (t，2H)，2.07(s，6H)，2.00(s，3H)，1.61-1.32(m，6H)，1.30-1.10(m，4H)， 0.82(t，3H)

实施例3

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯甲磺酸盐

制备包括用乙醚进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为 1∶1。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.16(2H，d)，7.07(2H，d)，6.52(2H，s)，4.02(2H，t)， 3.76(2H，s)，3.61(2H，s)，3.34-3.27(2H，m)，2.69-2.60(2H，m)，2.45(3H，s)， 2.30(6H，s)，2.09(3H，s)，1.61-1.40(6H，m)，1.27-1.06(4H，m)，0.81(3H，t)

实施例4

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯二糖精盐(晶型A)

在室温在氮气气氛下将HATU(0.333g)加至搅拌的2-(4-((2-氨基-4-甲基 -6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸(0.3g)、4-(二甲基氨基)丁-1-醇(0.308 g)和许尼希碱(0.45mL)于DMF(6mL)中的溶液中。将混合物在室温搅拌3小 时并然后通过RPHPLC用XBridge C8(30x100mm)柱纯化(用0.2％aq NH₃和乙 腈洗脱)。将所得的胶状物(225mg)溶解于MeCN(5mL)中，然后加入糖精(186 mg)并减压蒸发溶剂以留下泡沫(411mg)。(16mg)在乙酸乙酯(0.5mL)中进行 浆化并搅拌7天，得到标题化合物(化合物(I)的二糖精盐晶型A)，其通过过 滤分离。

通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为1∶2。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.92(t，1H)，7.69-7.52(m，8H)，7.40(s，2H)，7.18 (d，2H)，7.10(d，2H)，4.03(t，2H)，3.82(s，2H)，3.63(s，2H)，3.41-3.29(m，2H)， 3.10-3.02(m，2H)，2.76(s，6H)，2.20(s，3H)，1.71-1.54(m，4H)，1.47(五重 峰，2H)，1.28-1.05(m，4H)，0.81(t，3H)。

实施例4a

可替换的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸 4-(二甲基氨基)丁酯二糖精盐(晶型A)的制备

加热2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二 甲基氨基)丁酯(1.0g)于EtOAc(10mL)中的混悬液，变成溶液，然后冷却至 20℃。将糖精(0.9g)加至溶液中并将混合物在该温度搅拌3小时。搅拌6天 后，过滤收集所得的沉淀物并干燥，得到了化合物(I)的二糖精盐晶型A，1.78 g。

实施例4b

可替换的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸 4-(二甲基氨基)丁酯二糖精盐(晶型A)的制备

合并2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二 甲基氨基)丁酯(0.50g，1.13mmol)和糖精(0.41g，2.26mmol)并加入MeCN(25 mL)。超声处理该混悬液直至获得澄清的溶液。蒸发溶剂，得到二糖精盐， 为油状物。将EtOAc(17mL)加至油状物中。油状的残余物在室温未完全溶解。 超声处理该混合物并形成白色混悬液，并且在烧瓶壁上观察到一些胶状物质。 将混合物搅拌2天并过滤收集所得的晶体并减压干燥，得到化合物(I)的二糖 精盐晶型A(757mg，收率83％)。

实施例4c

可替换的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸 4-(二甲基氨基)丁酯二糖精盐(晶型A)的制备

(i)2-(4-(氰基甲基)苄基)-3-氧代丁酸甲酯

将搅拌的3-羟基-2-亚甲基丁酸甲酯(70.0g)、2-(4-溴苯基)乙腈(126.5g)、 PdCl₂[P(o-tol)₃]₂(4.2g)和三乙基胺(108.9g)于乙腈(280mL)中的混合物在氮气 下在70℃加热6小时。将混合物冷却至室温，用甲苯(840mL)和水(840mL) 稀释并搅拌10分钟。分离有机层，用水(840mL)洗涤并减压浓缩，得到副标 题化合物，为红色油状物，158.7g。该产物在下一步骤中使用未经进一步纯 化。

LC-MS m/z  244APCI-

(ii)2-(4-((2-氨基-4-羟基-6-甲基嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙腈

将搅拌的来自步骤(i)的粗产物和碳酸胍(128.1g)于甲醇(915mL)中的混 合物回流加热5小时。将混合物冷却至室温，用水(923mL)稀释并用乙酸中 和。然后将混合物冷却至10℃并过滤收集所得的沉淀物，用甲醇洗涤(501mL) 并减压干燥，得到副标题化合物，为固体，82.4g；¹H NMR DMSO-d6：δ10.91 (brs，1H)，7.20-7.17(m，4H)，6.38(s，2H)，3.95(s，2H)，3.63(s，2H)，2.00(s， 3H)。

LC-MS m/z  255APCI+

(iii)2-(4-((2-氨基-4-((2，4，6-三甲基苯磺酰基)氧基)-6-甲基嘧啶-5-基)甲基) 苯基)乙腈

将N，N，N′，N′-四甲基-1，3-丙二胺(56.7g)滴加至来自(ii)步骤的产物(85.0g) 和2，4，6-三甲基苯磺酰氯(87.8g)于THF(452.9g)中的混悬液中，并将混合物 在45℃加热7小时。将2.5％HCl于水中的溶液(1291g)加至混合物中，并将 混合物在5℃搅拌30分钟。过滤收集所得的沉淀物，用乙腈(2×68.0g)洗涤， 并干燥，得到粗制的副标题化合物，为固体。将搅拌过所述固体在乙腈(654.5 g)中的混悬液在70℃加热30分钟，冷却至5℃并在5℃搅拌30分钟。过滤 收集所得的沉淀物，用乙腈(2×68.0g)洗涤并干燥，得到副标题化合物，为 固体，113.1g；

¹H NMR CDCl3：δ7.24(d，2H)，7.11(d，2H)，6.96(s，2H)，4.71(s，2H)， 3.90(s，2H)，3.71(s，2H)，2.59(s，6H)，2.32(s，3H)，2.27(s，3H)。

LC-MS m/z 373多种模式+

(iv)2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)-乙腈

将三氟乙酸(27.4g)缓慢加至来自步骤的产物(iii)(105.0g)和正戊基胺 (62.9g)于乙酸丁酯(877.8g)中的混悬液中并将混合物在120℃加热2小时。 将混合物冷却至20℃并将4％aq.NaOH(997.5g)加至混合物中。分离有机 层，分别用水(997.5g)和10％aq.NH₄Cl(997.5g)洗涤并减压蒸发溶剂，得到 固体。将该固体在50℃溶解于乙腈(221.1g)中并将溶液冷却至42℃，种晶并 在该温度搅拌1小时。在混合物冷却至5℃并在5℃搅拌1小时之后，过滤 收集所得的沉淀物，用乙腈(2×31.5g)洗涤并减压干燥，得到副标题化合物， 为固体，52.0g；¹H NMR DMSO-d6：δ7.23(d，2H)，7.11(d，2H)，6.17(t，1H)， 5.68(s，2H)，3.96(s，2H)，3.73(s，2H)，3.27-3.22(m，2H)，2.00(s，3H)， 1.47-1.40(m，2H)，1.28-1.19(m，2H)，1.17-1.09(m，2H)，0.82(t，3H)。

LC-MS m/z 324多种模式+

(v)2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸

将来自步骤的产物(iv)(51.7g)和5M KOH(517g)于乙醇中(204g)的混 合物在80℃加热4小时。在减压蒸发溶剂之后，在25℃用水稀释(259mL) 并用叔丁基甲基醚洗涤(390g)残余物。将溶液冷却至5℃并将溶液的pH值 用浓HCl调节至pH 5。过滤收集所得的沉淀物，用水(200mL)和MeCN(200 g)的溶液洗涤并干燥，得到副标题化合物，为固体，57.0g；含有4.5％重量 的水；¹H NMR DMSO-d₆：7.12(d，2H)，7.02(d，2H)，6.32(t，1H)，5.94(brs，2H)， 3.71(s，2H)，3.46(s，2H)，3.27-3.23(m，2H)，2.00(s，3H)，1.48-1.41(m，2H)， 1.27-1.21(m，2H)，1.18-1.13(m，2H)，0.82(t，3H)。

LC-MS m/z 343多种模式+

(vi)2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲 基氨基)丁酯

在氮气下在25℃将4，4′-二甲基氨基丁醇(66.7g)、HOBt(30.8g)和 EDCI.HCl(43.8g)加至步骤(vii)的产物(65.0g)于DMF(619g)中的混悬液中。 将混合物在45℃搅拌4小时并用2M HCl(650g)酸化。用CHCl₃(966g)洗涤， 随后用28％aq.NH₃(176g)洗涤混合物。用EtOAc(2×586g)萃取混合物并用 水(3×975g)洗涤有机层。减压浓缩溶液，得到副标题化合物为棕色油状物， 68.2g；¹H NMR CDCl₃：7.19(d，2H)，7.08(d，2H)，4.61(brs，2H)，4.29(t，1H)， 4.10(t，2H)，3.73(s，2H)，3.58(s，2H)，3.29-3.25(m，2H)，2.26-2.23(m，2H)， 2.25(s，3H)，2.19(s，6H)，1.69-1.61(m，2H)，1.52-1.46(m，2H)，1.42-1.35(m， 2H)，1.27-1.18(m，2H)，1.12-1.03(m，2H)，0.82(t，3H)。

LC-MS m/z 442多种模式+

(vii)2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲 基氨基)丁酯二糖精盐(晶型A)

将糖精(41.5g)加至搅拌的来自步骤(vi)的产物(50.0g)于乙腈(150mL)中 的溶液中。将混合物加热至40℃并在该温度搅拌10分钟。用EtOAc(500mL) 稀释混合物，用晶型A的晶体种晶并在40℃搅拌5小时。然后将混合物冷 却至20℃并在该温度搅拌2小时。过滤收集所得的固体，用EtOAc洗涤(200 mL)并减压干燥，得到副标题化合物的粗样品，为白色固体，81.5g。

将上面获得的粗产物(1.0g)溶解于乙腈中(2mL)，加热至40℃，并在该 温度搅拌20分钟。将加热过的溶液滤过纸过滤器(0.1μm目)。用EtOAc(7mL) 稀释滤液，用晶型A的晶体种晶并在40℃搅拌30分钟。然后将混合物冷却 至35℃并搅拌4小时。在混合物冷却至15℃并在该温度搅拌2小时之后， 过滤收集所得的沉淀物，用EtOAc(2mL)洗涤并干燥，得到标题化合物，为 白色固体，0.9g；¹H NMR DMSO-d6：δ7.95(brt，1H)，7.68-7.63(m，2H)， 7.62-7.56(m，6H)，7.19(d，2H)，7.15(d，2H)，4.03(t，2H)，3.82(s，2H)，3.63 (s，2H)，3.38-3.33(m，2H)，3.07-3.02(m，2H)，2.76(s，6H)，2.20(s，3H)， 1.69-1.55(m，4H)，1.51-1.43(m，2H)，1.27-1.17(m，2H)，1.16-1.07(m，2H)， 0.80(t，3H)。

LC-MS m/z 442多种模式+

实施例4D

可替换的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸 4-(二甲基氨基)丁酯二糖精盐晶型A的制备

(i)2-(4-(氰基甲基)苄基)-3-氧代丁酸甲酯

在N₂气氛下将搅拌的3-羟基-2-亚甲基丁酸甲酯(30.0g，0.23mol)、2-(4- 溴苯基)乙腈(54.2g，0.28mol)、PdCl₂[P(o-tol)₃]₂(1.8g，2mmol)和三乙基胺 (46.7g，0.46mol)于乙腈(90g)中的混合物在70℃加热6小时。将混合物冷 却至25℃，用甲苯(300g)和10％aq.乙酸(360g)稀释，并搅拌10分钟。分离 有机层，用水(360g)洗涤，并减压浓缩，得到副标题化合物，为红色油状物， 67.3g。该产物在下一步骤中使用未经进一步纯化。

LC-MS m/z  244APCI-

(ii)2-(4-((2-氨基-4-羟基-6-甲基嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙腈

将搅拌的来自步骤(i)的粗产物和碳酸胍(36.7g，0.20mol)于甲醇(389g) 中的混合物回流加热7小时。将混合物冷却至30℃，用水稀释(222g)，并用 乙酸将溶液的pH调节至pH 6.5。在混合物冷却至5℃之后，过滤收集所得 的沉淀物，用甲醇洗涤两次(167g，333g)，并减压干燥，得到副标题化合物， 为固体，32.6g。

¹H NMR DMSO-d6：δ10.91(brs，1H)，7.20-7.17(m，4H)，6.38(s，2H)， 3.95(s，2H)，3.63(s，2H)，2.00(s，3H)。

LC-MS m/z  255APCI+

(iii)2-(4-((2-氨基-4-((2，4，6-三异丙基苯磺酰基)氧基)-6-甲基嘧啶-5-基)甲 基)苯基)乙腈

将来自步骤(ii)的产物(6.0g，23.6mmol)、2，4，6-三异丙基苯磺酰氯(9.28g， 30.6mmol)和DABCO(4.76g，42.5mmol)于THF(48.0g)中的混悬液在30℃ 搅拌7小时。将水(9.6g)加至混合物中，分离有机层并减压浓缩，得到固体。 将该固体溶解于乙腈(57.0g)中并加热至60℃。将水(36.0g)加至溶液中并将 混合物在60℃搅拌1小时。将水(36.0g)加至混合物中并将混合物冷却至5℃ 并在5℃搅拌1小时。过滤收集所得的沉淀物，用合并的水(9.0g)和乙腈(3.6 g)的溶液重复洗涤两次，并干燥，得到副标题化合物，为固体，11.6g。

¹H NMR DMSO：δ7.32(s，2H)，7.23(d，2H，J＝8.1Hz)，7.06(d，2H，J＝8.1 Hz)，6.54(s，2H)，4.01(m，2H)，3.98(s，2H)，3.78(s，2H)，2.97(s，1H)，2.21 (s，3H)，1.23(d，6H，J＝6.9Hz)，1.16(d，12H，J＝6.8Hz)。

LC-MS m/z 521多种模式+

(iv)2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙腈

将三氟乙酸(2.19g，19.2mmol)加至来自步骤(iii)的产物(10.0g，19.2 mmol)和正戊基胺(5.0g，57.6mmol)于乙酸丁酯(65.0g)中的混悬液中，并将 混合物在120℃加热6小时。冷却混合物并减压浓缩，得到固体。将固体于 甲苯(30.0g)中的混悬液再次减压浓缩，得到固体。将5％aq.LiOH(60.0g)加 至固体于甲苯(55.0g)和THF(14.0g)中的溶液中，并将混合物在40℃搅拌。 用水(60.0g)在40℃洗涤分离的有机层并减压浓缩，得到固体。将得到的固 体于甲苯(42.0g)中的混悬液在54℃搅拌1小时，冷却至5℃并在5℃搅拌 10小时。过滤收集所得的沉淀物并分别用乙腈(5.0g)和水(12.0g)洗涤，得到 副标题化合物，为湿的晶体。5.90g。该产物在下一步骤中使用而未经干燥。

LC-MS m/z 324多种模式+

(v)2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸

将来自步骤(iv)的湿的产物(5.90g)于10％aq.NaOH(34.2g)和乙醇(24.9g) 中的混悬液在85℃加热5小时。将混合物冷却至25℃，并用18％aq.乙酸 (31.1g)将溶液的pH值调节至pH 6.5。过滤收集所得的沉淀物，分别用水(18.6 g)和乙腈(15.5g)洗涤，并干燥，得到副标题化合物，为白色固体，4.43g。

¹H NMR DMSO-d₆：δ7.12(d，2H，J＝8Hz)，7.02(d，2H，J＝8Hz)，6.32 (t，1H，J＝6Hz)，5.94(brs，2H)，3.71(s，2H)，3.46(s，2H)，3.27-3.23(m，2H)， 2.00(s，3H)，1.48-1.41(m，2H)，1.27-1.21(m，2H)，1.18-1.13(m，2H)，0.82(t， 3H，J＝7Hz)。

LC-MS m/z 343多种模式+

(vi)2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸盐酸盐

将来自步骤(v)的产物(8.00g，23.4mmol)于乙腈中(48.0g)的混悬液加热 至40℃，并将35％aq.HCl(2.68g，25.7mmol)缓慢加至混悬液中。在将混合 物在40℃搅拌1小时之后，将乙酸异丙酯(160g)缓慢加至混合物中。将混合 物冷却至15℃并搅拌1小时。过滤收集所得的沉淀物，用乙腈(5.14g)和乙 酸异丙酯(13.9g)的合并的溶液洗涤并干燥，得到副标题化合物，为白色固体， 8.27g。

¹H NMR DMSO-d₆：δ12.31(s，1H)，7.98(t，1H，J＝5Hz)，7.17(d，2H， J＝8Hz)，7.08(d，2H，J＝8Hz)，3.81(s，2H)，3.51(s，2H)，3.38-3.34(m，2H)， 2.19(s，3H)，1.51-1.44(m，2H)，1.25-1.16(m，2H)，1.15-1.07(m，2H)，0.81(t， 3H，J＝7Hz)。

LC-MS m/z 343多种模式+

(vii)2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲 基氨基)丁酯(化合物(I))

将来自步骤(vi)的产物(2.00g，5.28mmol)和甲磺酸(1.52g，15.8mmol) 于乙腈(16.0g)中的溶液冷却至20℃并将亚硫酰氯(0.94g，7.92mmol)缓慢加 至该溶液中。在将混合物在20℃搅拌30分钟之后，将4-二甲基氨基-1-丁醇 (1.11g，9.50mmol)缓慢加至混合物中。将混合物加热至40℃并在该温度搅 拌5小时。在反应混合物冷却至20℃之后，将乙酸乙酯(18.0g)和25％aq. 三甲基胺(18.0g)缓慢加至混合物中。分离有机层并分别用5％aq.NH₄Cl(20.0 g)、1％aq.NaCl(20.0g)和水(20.0g)洗涤。副标题化合物的溶液在下一步骤 中使用而未经浓缩。

LC-MS m/z 442多种模式+

(viii)2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二 甲基氨基)丁酯二糖精盐(晶型A)(化合物(I)的二糖精盐(晶型A))

用乙腈(9.3g)稀释来自步骤(vii)的产物的溶液并加入活性炭(0.2g)。将混 合物在25℃搅拌30分钟，滤过纸过滤器(1μm目)，并用乙腈(7.0g)洗涤。将 糖精(1.32g，7.21mmol)加至滤液中，然后通过HPLC分析来确定来自步骤(vii) 的产物在溶液中的量。将用于来自步骤(vii)的产物的糖精的当量用另行加入 的糖精(0.34g，1.86mmol)调节至2.00摩尔比并将溶液减压浓缩。用乙腈(4.1 g)和乙酸乙酯(9.6g)稀释相应的残余物，将其加热至40℃并用标题化合物的 晶型A的晶体来种晶。在将混合物在40℃搅拌1小时之后，加入乙酸乙酯 (10.6g)。将混合物在40℃搅拌1小时，冷却至10℃并搅拌2小时。过滤收 集所得的固体，用乙腈(0.8g)和乙酸乙酯(3.0g)的合并的溶液洗涤，并减压干 燥，得到副标题化合物的粗样品，为白色固体，3.11g。

将上面获得的粗产物(3.00g)悬浮于乙腈(4.5g)中并将混悬液加热至 40℃。将所得的溶液滤过纸过滤器(1μm目)并用乙酸乙酯(12.0g)稀释滤液。 用二糖精盐的晶型A的晶体种晶该混合物，并搅拌1.5小时。将混悬液用乙 酸乙酯(18.0g)稀释，搅拌1小时，然后冷却至10℃并搅拌3小时。过滤收 集所得的固体，用乙腈(0.8g)和乙酸乙酯(3.9g)的合并的溶液洗涤并减压干 燥，得到标题化合物，为白色固体，2.54g。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.95(brt，1H，J＝6Hz)，7.68-7.63(m，2H)， 7.62-7.56(m，6H)，7.19(d，2H，J＝8Hz)，7.15(d，2H，J＝8Hz)，4.03(t，2H， J＝6Hz)，3.82(s，2H)，3.63(s，2H)，3.38-3.33(m，2H)，3.07-3.02(m，2H)， 2.76(s，6H)，2.20(s，3H)，1.69-1.55(m，4H)，1.51-1.43(m，2H)，1.27-1.17(m， 2H)，1.16-1.07(m，2H)，0.80(t，3H，J＝7Hz)。

LC-MS m/z 442多种模式+

实施例5

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯二糖精盐(晶型B)

将2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲 基氨基)丁酯(300mg，0.68mmol)和糖精(249mg，1.36mmol)合并并加入乙腈 (15mL)。超声处理混悬液直至获得澄清的溶液。蒸发溶剂，将残余物重新溶 解于乙酸乙酯(10mL)中并在室温搅拌3天，得到化合物(I)的二糖精盐晶型B； ¹H NMR DMSO-d6：δ7.91(1H，s)，7.69-7.54(8H，m)，7.39(2H，s)，7.18(2H， d)，7.10(2H，d)，4.04(2H，t)，3.82(2H，s)，3.63(2H，s)，3.39-3.33(2H，m)， 3.04(2H，t)，2.75(6H，s)，2.20(3H，s)，1.71-1.54(4H，m)，1.53-1.42(2H，m)， 1.28-1.17(2H，m)，1.16-1.06(2H，m)，0.81(3H，t)。

实施例5a

可替换的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸 4-(二甲基氨基)丁酯二糖精盐(晶型B)的制备

将溶解于乙酸乙酯(10mL)中的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶 -5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨基)丁酯(400mg，0.91mmol)和溶解于乙酸 乙酯(40mL)中并在其中超声处理的糖精(332mg，1.81mmol)合并。蒸发溶剂， 将残余物在乙酸乙酯(10mL)中进行浆化并在室温搅拌3天，得到化合物(I) 的二糖精盐晶型B。

实施例5b

可替换的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸 4-(二甲基氨基)丁酯二糖精盐(晶型B)的制备

将2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲 基氨基)丁酯(523mg，1.18mmol)溶解于8mL乙腈中。在一个单独的烧瓶中， 将糖精(434mg，2.37mmol)与10mL乙腈合并(其导致形进行浆化液)，其被 加至化合物(I)-乙腈混合物中。在室温搅拌该混合物直至获得澄清的溶液 (10分钟)。蒸发溶剂。向该树胶状的残余物中加入EtOAc(25mL)并用0.1mg 化合物(I)的二糖精盐晶型B对混合物进行种晶。将混合物在室温搅拌3天， 过滤并干燥(643mg)，得到化合物(I)的二糖精盐晶型B。

通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为1∶2。

¹H NMR(400MHz，DMSO)d 7.93(t，1H)，7.68-7.54(m，10H)，7.3-7.5 (m，2H)，7.18(d，2H)，7.10(d，2H)，4.03(q，2H)，3.82(s，2H)，3.63(s，2H)， 3.10-3.01(m，2H)，2.76(s，6H)，2.19(s，3H)，1.71-1.54(m，4H)，1.52-1.42 (m，2H)，1.31-1.06(m，5H)，0.81(t，3H)。

实施例6

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐

制备包括用乙酸乙酯进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计 量为1∶2。

¹H NMR DMSO-d6：δ8.20(d，2H)，7.98(s，2H)，7.80-7.71(m，5H)，7.51 -7.45(m，2H)，7.43-7.37(m，2H)，7.16(d，2H)，7.12-7.05(m，4H)，4.03(t， 2H)，3.82(s，2H)，3.60(s，2H)，3.40-3.32(m，2H)，2.99(t，2H)，2.71(s，6H)， 2.24(s，3H)，1.72-1.55(m，4H)，1.48(quintet，2H)，1.28-1.05(m，4H)，0.81 (t，3H)

实施例7

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯单(2，5-二氯苯磺酸)盐

制备包括用甲基叔丁基醚进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化 学计量为1∶1。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.83(2H，d)，7.44-7.37(4H，m)，7.18(2H，d)，7.09 (2H，d)，4.03(2H，t)，3.81(2H，s)，3.63(2H，s)，3.38-3.33(2H，m)，2.99-2.92 (2H，m)，2.69(6H，s)，2.16(3H，s)，1.67-1.55(4H，m)，1.51-1.42(2H，m)， 1.27-1.18(2H，m)，1.15-1.07(2H，m)，0.81(3H，t)

实施例8

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯二-(2，5-二氯苯磺酸)盐

制备包括用乙酸乙酯进行浆化。

实施例9

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯1，5-萘二磺酸盐(晶型A)

制备包括用二甲氧基乙烷进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化 学计量为1∶1。

¹H NMR DMSO-d6：δ8.86(2H，d)，7.92(2H，dd)，7.40(2H，dd)，7.18(2H， d)，7.09(2H，d)，4.03(2H，t)，3.81(2H，s)，3.63(2H，s)，3.40-3.33(2H，m)， 3.07-3.01(2H，m)，2.75(6H，s)，2.18(3H，s)，1.69-1.53(4H，m)，1.52-1.41 (2H，m)，1.28-1.17(2H，m)，1.15-1.05(2H，m)，0.81(3H，t)

实施例10

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯1，5-萘二磺酸盐(晶型B)

制备包括用四氢呋喃进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计 量为1∶1。

¹H NMR DMSO-d6：δ11.87(2H，s)，9.18(1H，s)，8.87(2H，d)，7.94(2H， d)，7.41(2H，dd)，7.18(2H，d)，7.09(2H，d)，4.03(2H，t)，3.81(2H，s)，3.60 (2H，s)，3.39-3.33(2H，m)，3.03(2H，t)，2.74(6H，s)，2.17(3H，s)，1.79-1.73 (2H，m)，1.67-1.53(2H，m)，1.50-1.42(2H，m)，1.27-1.17(2H，m)，1.15-1.05 (2H，m)，0.80(3H，t)

实施例11

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯柠檬酸盐(晶型A)

制备包括用乙腈进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为 1∶1。

¹H NMR MeOD：δ7.13(2H，d)，7.01(2H，d)，4.01(2H，t)，3.74(2H，s)， 3.51(2H，s)，3.35(2H，t)，2.87(2H，t)，2.68(2H，d)，2.61(6H，s)，2.58(2H，d)， 2.14(3H，s)，1.64-1.51(4H，m)，1.47-1.38(2H，m)，1.24-1.13(2H，m)，1.11 -0.99(2H，m)，0.76(3H，t)

实施例12

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯柠檬酸盐(晶型B)

制备包括用四氢呋喃进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计 量为1∶1。

¹H NMR MeOD：δ7.22(2H，d)，7.10(2H，d)，4.10(2H，t)，3.82(2H，s)， 3.60(2H，s)，3.43(2H，t)，2.98(2H，t)，2.77(2H，d)，2.72(6H，s)，2.67(2H，d)， 2.24(3H，s)，1.75-1.61(4H，m)，1.55-1.46(2H，m)，1.31-1.22(2H，m)，1.19 -1.09(2H，m)，0.84(3H，t)

实施例13

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯磷酸盐

制备包括用二氯甲烷进行浆化。

实施例14

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯二磷酸盐

制备包括用乙腈进行浆化。通过加入磷酸三甲酯证实磷酸盐抗衡离子为 (二-)化学计量。在测定条件下获得质子谱和磷谱，且精确地比较了化合物和 磷酸三甲酯的积分，确定了化学计量。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.16(2H，d)，7.06(2H，d)，6.92(2H，s)，4.01(2H，t)， 3.75(2H，s)，3.67(18H，s)，3.60(2H，s)，3.31-3.28(2H，m)，2.42-2.39(2H， t)，2.26(6H，s)，2.08(3H，s)，1.58-1.52(2H，m)，1.49-1.41(4H，m)，1.27- 1.20(2H，m)，1.17-1.11(2H，m)，0.82(3H，t)

³¹P NMR DMSO-d6：δ1.90((CH₃O)₃PO)，-0.29(OP(OH)₂O^-)

实施例15

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯富马酸盐

制备包括用乙腈进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为 1∶1。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.15(d，2H)，7.06(d，2H)，6.81(s，2H)，6.51(s，2H)， 4.01(t，2H)，3.75(s，2H)，3.59(s，2H)，3.31-3.26(m，2H)，2.33(t，2H)，2.20 (s，6H)，2.08(s，3H)，1.59-1.38(m，6H)，1.29-1.07(m，4H)，0.82(t，3H)

实施例16

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯L-酒石酸盐

制备包括用乙腈进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为 1∶1。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.15(2H，d)，7.06(2H，d)，6.78(1H，s)，6.43(2H，s)， 4.02(2H，t)，3.94(2H，s)，3.75(2H，s)，3.60(2H，s)，3.32-3.25(2H，m)，2.57 -2.45(2H，m)，2.30(6H，s)，2.07(3H，s)，1.61-1.40(6H，m)，1.31-1.09(4H， m)，0.82(3H，t)

实施例17

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯琥珀酸盐

制备包括用乙醚进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为 1∶1。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.14(2H，d)，7.05(2H，d)，6.55-6.46(1H，m)，6.12 (2H，s)，4.01(2H，t)，3.73(2H，s)，3.59(2H，s)，3.31-3.23(2H，m)，2.35(4H， s)，2.29(2H，t)，2.18(6H，s)，2.03(3H，s)，1.63-1.50(2H，m)，1.50-1.37(4H， m)，1.31-1.07(4H，m)，0.82(3H，t)

实施例18

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯二琥珀酸盐

制备包括用甲基叔丁基醚进行浆化。通过NMR证实化合物(I)对酸的化 学计量为1∶2。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.15(2H，d)，7.06(2H，d)，6.56-6.51(1H，m)，6.12 (2H，s)，4.01(2H，t)，3.73(2H，s)，3.59(2H，s)，3.31-3.24(2H，m)，2.40-2.31 (10H，m)，2.22(6H，s)，2.04(3H，s)，1.59-1.51(2H，m)，1.49-1.39(4H，m)， 1.28-1.10(4H，m)，0.82(3H，t)

实施例19

2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨 基)丁酯二富马酸盐

向溶解于乙腈(4mL)中的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲 基)苯基)乙酸4-(二甲基氨基)丁酯(200mg，0.45mmol)中加入预先溶解于THF 中的富马酸(105mg，2摩尔当量)。将所得的混合物真空浓缩至固体，加入乙 醚(2mL)并搅拌7天，得到化合物(I)的二富马酸盐。

实施例19a

可替换的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸 4-(二甲基氨基)丁酯二富马酸盐的制备

向溶解于乙腈(4mL)中的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲 基)苯基)乙酸4-(二甲基氨基)丁酯(100mg，0.23mmol)中加入固体富马酸(105 mg，2摩尔当量)。将所得的混合物真空浓缩至固体，加入乙醚(2mL)并搅拌 7天，得到化合物(I)的二富马酸盐。

通过NMR证实化合物(I)对酸的化学计量为1∶2。

¹H NMR(299.947MHz，DMSO)δ7.64(s，2H)，7.31-7.12(m，3H)，7.08 (d，2H)，6.54(s，4H)，4.02(t，2H)，3.77(s，2H)，3.61(s，2H)，3.38-3.26(m，2H)， 2.39-2.22(m，8H)，2.13(s，3H)，1.61-1.37(m，6H)，1.30-1.07(m，4H)，0.82 (t，3H)。

实施例19b

可替换的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸 4-(二甲基氨基)丁酯二富马酸盐的制备

将富马酸(52.6mg)加至搅拌的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5- 基)甲基)苯基)乙酸4-(二甲基氨基)丁酯(100.0mg)于乙醇(0.6ml)中的溶液中。 用ⁱPrOAc(0.6ml)稀释该溶液并在25℃搅拌5h。过滤收集所得的沉淀物， 用ⁱPrOAc(0.6ml)和乙醇(0.6ml)洗涤的合并的溶液，并减压干燥，得到标题 化合物，为白色固体，125.6mg。

¹H NMR DMSO-d6：δ7.17(d，2H，J＝8Hz)，7.07(d，2H，J＝8Hz)，6.52 (s，4H)，4.01(t，2H，J＝6Hz)，3.77(s，2H)，3.60(s，2H)，3.34-3.29(m，2H)， 2.56-2.45(m)，2.34(s，6H)，2.13(s，3H)，1.59-1.52(m，2H)，1.49-1.42(m， 4H)，1.28-1.18(m，2H)，1.16-1.09(m，2H)，0.81(t，3H，J＝7Hz)。

LC-MS m/z 442多种模式+

实施例19c

可替换的2-(4-((2-氨基-4-甲基-6-(戊基氨基)嘧啶-5-基)甲基)苯基)乙酸 4-(二甲基氨基)丁酯二富马酸盐的制备

将富马酸(31.6g)加至搅拌的来自实施例4c中步骤(vi)的产物(60.0g)于 乙醇(360mL)中的溶液中。将混合物加热至30℃并在该温度搅拌30分钟。 用ⁱPrOAc(180mL)稀释该溶液，用二富马酸盐晶体种晶并在30℃搅拌2.5 小时。另用ⁱPrOAc(180mL)稀释混合物，冷却至20℃，并在该温度搅拌1 小时。过滤收集所得的沉淀物，用ⁱPrOAc(120mL)和乙醇(90mL)的溶液洗涤， 用ⁱPrOAc(120mL)洗涤并减压干燥，得到标题化合物，为白色固体，81.9g； ¹H NMR DMSO-d6：δ7.16(d，2H)，7.07(d，2H)，6.53(s，4H)，4.01(t，2H)， 3.76(s，2H)，3.60(s，2H)，3.33-3.28(m，2H)，2.43(t，2H)，2.28(s，6H)，2.11 (s，3H)，1.59-1.52(m，2H)，1.49-1.42(m，4H)，1.28-1.18(m，2H)，1.17-1.12 (m，2H)，0.81(t，3H)。LC-MS m/z 442多种模式+

实施例20

X射线粉末衍射分析

一般操作

可以对根据标准方法(参见例如Giacovazzo et al.，eds.，Fundamentals of  Crystallography，Oxford University Press(1992)；Jenkins & Snyder，eds.， Introduction to X-Ray Powder Diffractometry，John Wiley & Sons，New York (1996)；Bunn，ed.，Chemical Crystallography，Clarendon Press，London(1948)； 和Klug&Alexander eds.，X-ray Diffraction Procedures，John Wiley & Sons， New York(1974))制备的样品进行X射线粉末衍射(XRPD)分析。

描述于上述实施例1-19中的盐(为无水形式)的X射线粉末衍射图是根据 下面的描述而获得的：

将使用单色CuKα射线(45kV和40mA)的Bragg-Brentano促聚焦粉末 X射线衍射仪用于所述分析。第一光源(primary optics)包括梭拉狭缝(soller  slits)和自动发散狭缝(automatic divergence slit)。扁平状的样品(Flat samples) 是在测量期间旋转的零背景盘(zero background plates)上制备的。第二光源 (secondary optics)包括梭拉狭缝、自动抗散射狭缝(automatic anti scatter slit)、 接受狭缝(receiving slit)和单色仪。衍射信号采用成比例的充有氙气的检测器 来检测。在连续扫描方式(100-秒暴露/每0.02°)中，在2°≤2θ(theta)≤40°之 间收集衍射图。原始数据采用电子方式储存。用原始的或经过平滑处理的 (smoothed)衍射图进行评估。

将处于反射模式的Panalytical X′pert MPD θ-θ衍射仪用于上述测量。本 领域的技术人员能够设置粉末X-射线衍射仪的仪器参数以至于能够收集与 所提供的数据具有可比性的衍射数据。所获得的结果示于图1-19中。下述表 I-XIX各自列出了分别示于图1-19中的X-射线衍射图的2θ(2theta)值(准确 度：)、d-间距和峰的相对强度。

实施例21

动态蒸气吸附(DVS)

使用SMS动态蒸气吸附DVS-Advantage仪器进行DVS分析。将固体样 品(大约1-5mg)放置于铂制样品容器中并在双循环步骤方法(40至90至0至 90至0％相对湿度(RH)，在10％RH步骤中)期间记录样品的重量。

使用DVS研究了单富马酸盐和二富马酸盐(实施例15和19)对湿度变化 的应答。吸湿性是按在第二循环起始时的0％RH和在第二循环中湿度增加的 期间的80％RH之间的样品重量的相对变化来计算的。

样品的吸湿性依赖于对结果将会有一些影响的除纯净固体形式其自身 的固有性质之外的因素，例如样品的纯度和结晶度。

发现化合物(I)的二富马酸盐(实施例19)具有轻微的吸湿性(在80％相对 湿度有0.2-2％w/w的湿气吸收)，如图22所示。

发现单富马酸化合物(I)的盐(实施例15)具有吸湿性(在80％相对湿度有 超过2％w/w的湿气吸收)，如图所示23。

实施例22

盐的稳定性

化合物(I)的单糖精(2个不同的批次)、单反式肉桂酸、单琥珀酸、单苯 甲酸、二富马酸、二昔萘酸(二-(1-羟基-萘-2-甲酸))和二糖精盐在40℃和75％ 相对湿度储存时的稳定性按如下进行测量。

将大约30mg的各种盐称量至4mL带螺旋帽的管形瓶中，将管形瓶盖 紧并在40℃/75％相对湿度储存以及将环境条件控制为不变。对于每个时间 点，将样品从储存设备中移走并通过HPLC分析式(A)的酸降解产物的存在：

式(A)

使用下述方法进行HPLC分析：

样品溶液以大约0.1-0.2mg/mL的浓度于样品稀释剂(0.03％三氟乙酸于 50/50v/v乙腈/水中的溶液)中来配制，根据需要使用超声处理。应用下述色 谱条件：

稳定性研究的结果示于图24中。化合物(I)的单糖精盐描述于 WO2009/067081的实施例57中。正如所理解的那样，图24中的二昔萘酸盐 为化合物(I)的二-(1-羟基-萘-2-甲酸)盐。

实施例23

盐/乳糖一水合物的稳定性

乳糖一水合物与化合物(I)的单糖精、单苯甲酸、二富马酸和二糖精盐的 混合物在40℃和75％相对湿度储存时的储存稳定性按如下进行测量。

将大约5克的各种盐用以氮气作为流动气体的1”气流动力磨(MC One， Jetpharma，Balerna，Switzerland)来微粒化。

10g大量的各种盐的乳糖混合物通过下述方法来制备：

将微粒化的乳糖一水合物(9800mg)加至60ml透明玻璃瓶中。向其中加 入所述微粒化的化合物(I)的盐(200mg)以及用于关闭该瓶的橡皮塞和铝螺旋 帽。

将含有该盐和乳糖一水合物的瓶置于震动混合器(trembling  blender)(Turbula T2C，W.Bachofen，Basel，Switzerland)的混合容器中并将混 合物在速度1(30rpm)混合10分钟。移走乳糖/盐混合物的样品(2g)。将剩余 的乳糖/盐混合物(8g)置于40℃/75％相对湿度的稳定性套件(控制环境条件) 中。将样品暂时性地从储存设备中移走从而用于分析。对于每次分析，将50mg 的乳糖/盐混合物溶解于样品稀释剂中并通过HPLC分析式(A)的化合物(如上 面实施例23中所描述的)。

对乳糖一水合物/盐混合物进行的稳定性研究的结果示于图25中。

生物活性

化合物(I)和其可药用具有安药(antedrug)性质。安药定义为活性的合成衍 生物，其被设计为在进入体循环后经历生物转化而转变成容易排泄的活性更 弱的形式，从而使系统性副作用最小化。因此，口服给药后，本发明的化合 物被快速酶降解以产生具有实质上减弱的医学作用的降解产物。如本申请定 义的医学作用表示本发明的化合物的药理学活性，尤其是包括干扰素诱导活 性和/或抑制IL4/IL5产生的活性。降解产物的医学作用优选10倍，更优选 100倍的小于本发明的化合物(即母体化合物)的医学作用。药理学活性可以使 用本领域已知的方法，适当地使用体外评估方法诸如可商购的ELISA试剂盒 或下述的人TLR7测定来测量。

人TLR7测定

将重组人TLR7稳定表达在已稳定表达pNiFty2-SEAP报道子质粒的 HEK293细胞系中；报道基因的整合通过用抗生素Zeocin进行选择来维持。 将人TLR7的最常见变异序列(称为EMBL序列AF240467)克隆到哺乳动物细 胞表达载体pUNO中并转染到上述报道子细胞系中。使用抗生素杀稻瘟菌素 (blasticidin)来选择具有稳定表达的转染子。在上述报道子细胞系中，分泌型 碱性磷酸酶(SEAP)的表达通过NFkB/ELAM-1复合启动子来控制，所述复合 启动子包含五个NFkB位点及相邻的ELAM-1启动子。TLR的信号传导引起 NFkB的易位且启动子的活化导致SEAP基因的表达。TLR7的特异性活化如 下评价：在0.1％(v/v)二甲基亚砜(DMSO)存在下将细胞与标准化合物在37℃ 一起孵育过夜后，确定所产生的SEAP的水平。将化合物对SEAP生成的浓 度依赖性诱导表示成对该化合物而言产生SEAP诱导的最大水平一半时的浓 度(pEC₅₀)。用化合物(I)的二糖精盐进行测试(在溶解于DMSO之前为无定形 的形式)，得到的平均pEC50值为6.9(n＝8)。