一种血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型及其制备方法

摘要

本发明涉及医疗评价、检测技术领域，公开了一种血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型及其制备方法，该方法为：以高脂饮食持续喂养SHR大鼠6～16周，并且前4～6周每日还要以附子汤喂食SHR大鼠，制备得到同时体现血瘀、阳亢、痰浊三种中医症候特征的高血压动物模型。本发明制备方法工序简化、控制方便，能够制备得到具有有用性能的血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型，使中医药防治高血压病的研究更有针对性。

说明书

技术领域

本发明涉及医疗评价、检测技术领域，具体涉及一种血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型及 其制备方法。

背景技术

高血压是最常见的慢性病，也是心脑血管病最主要的危险因素，其脑卒中、心肌梗死、 心力衰竭及慢性肾脏病等主要并发症，不仅致残、致死率高，而且严重消耗医疗和社会资 源，给家庭和国家造成沉重负担。过去50年，我国曾进行过四次大规模高血压患病率的人 群抽样调查。根据2002年调查数据，我国18岁以上成人高血压患病率为18.8％按2010年 我国人口的数量与结构，估计目前我国约有2亿高血压患者，每10个成年人中就有2人患 有高血压，约占全球高血压总人数的1/5。

通过建立合适的动物模型模仿高血压症，有助于人们了解高血压症的病理发生和发展 进程，帮助理解与高血压有关的病因学因素，建立临床上的诊断指标，为高血压的治疗提 供实验依据，对治疗高血压药物的筛选具有重大意义。

阳亢、血瘀、痰浊常相兼为患，是大多高血压患者的共同表现，是高血压胰岛素抵抗 和左室重构共有的重要因素。现有技术中已报道过阳亢高血压动物模型以及痰浊-血瘀动物 模型，用于探讨高血压发病机理、设计开发抗高血压药物。

现有技术的不足在于高血压病中“血瘀、阳亢、痰浊”为大多数患者的共同表现和共 同发病环节，因此虽然“阳亢”、“痰浊、血瘀”的动物模型分别已有报道，但尚缺乏将“血 瘀、阳亢、痰浊”等症候整合的高血压动物模型，给高血压病中医治疗的进一步研究带来 困难。因此，目前急需建立一种有效、稳定、制备方法简单的血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模 型，以便开展高血压病中医治疗的进一步研究。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型及其 制备方法。

本发明一方面公开了一种制备血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型的方法，该方法为：以高 脂饮食持续喂养SHR大鼠(自发性高血压大鼠)6～16周，并且前4～6周每日还要以附子 汤喂食SHR大鼠。

较优的，制备血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型的方法为以高脂饮食持续喂养SHR大鼠 12周，并且前4周每日还要以附子汤喂食SHR大鼠。

本发明所述的附子汤喂食SHR大鼠可采用对SHR大鼠附子汤灌胃的方法。

较优的，所述高脂饮食配方如下(质量百分比)：

更优的，所述高脂饮食配方为(质量百分比)：普通鼠饲料72.9％、胆固醇2％、猪油 10％、牛胆酸钠0.1％、蛋黄粉10％及蔗糖5％。

较优的，所述附子汤的制备方法为：取附子浸泡后，煎煮两次，将两次药液混合后浓 缩，制得附子汤。

更优的，所述附子汤的制备方法为：取附子20g，浸泡30min后，煎煮两次，将两次 药液混合后浓缩，制得附子汤的生药浓度为0.05～0.15g/ml。

最优的，制得附子汤的生药浓度为0.1g/ml。

较优的，每日喂食的附子汤的用量为20～30ml/kg。

更优的，每日喂食的附子汤的用量为20ml/kg。

较优的，每日附子汤喂食SHR大鼠的每日生药量为1～4.5g/kg。最优的，每日附子汤 喂食SHR大鼠的每日生药量为2g/kg(2g/kg是指每kg重量的SHR大鼠所喂食的附子汤 的生药量为2g)。

较优的，所述SHR大鼠为5周龄雄性SHR大鼠。

本发明第二方面公开了一种血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型，采用前述方法制备获得。

较优的，所述血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型的SHR大鼠为17周龄的SHR大鼠。通 过对5周龄的SHR大鼠以高脂饮食持续喂养12周，并且前4周每日以附子汤对SHR大鼠 灌胃一次获得。

更优的，所述以高脂饮食持续喂养的SHR大鼠为5周龄的SHR大鼠。

本发明通过对血瘀、阳亢、痰浊等相关指标的试验，检验本发明制备方法制备的血瘀- 阳亢-痰浊高血压动物模型与未进行处理的空白对照相比是否具有有用性，可用于高血压病 中医治疗的研究。所述血瘀的相关指标为血粘度，所述阳亢相关指标包括血管紧张素II含 量和易激惹程度，所述痰浊相关指标为血脂和糖代谢。

由于“阳亢”可表现为代谢亢进，高血压也多伴随有代谢亢进及糖代谢紊乱，两者共 同作用可能导致“痰浊、血瘀”模型效果的抵消或削弱；因此本发明的创新点在于得到了 “阳亢、痰浊、血瘀”三种综合症状的高血压大鼠模型。

本发明的有益效果为：本发明动物模型的制备方法工序简化、控制方便，能够制备得 到具有有用性能的血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型。该动物模型表现出较明显的“血瘀、阳 亢、痰浊”中医症候特征，使高血压病中医治疗的研究更有针对性，体现出中医“辨证施 治”的特点。

具体实施方式

下面结合实施例进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明，而非限 制本发明的范围。

实施例1血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型的制备

方法1：

(1)制备高脂饮食，其配方为：普通鼠饲料82％、胆固醇1.5％、猪油5％、牛胆酸 钠0.5％、蛋黄粉6％及蔗糖5％。

(2)制备附子汤：取附子20g，浸泡30min后，煎煮两次，将两次药液混合后浓缩， 制得附子汤的药液含生药0.15g/ml。

(3)取5周龄雄性SHR大鼠，以高脂饮食持续喂养SHR大鼠16周，并且，前5周 每日还要以附子汤喂食SHR大鼠，每日附子汤用量为30ml/kg，相当于每日生药4.5g/kg， 培养结束后，获得21周龄的血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型。

方法2：

(1)制备高脂饮食，其配方为：普通鼠饲料50％、胆固醇2.5％、猪油14％、牛胆酸 钠0.3％、蛋黄粉25％及蔗糖8.2％。

(2)制备附子汤：取附子20g，浸泡30min后，煎煮两次，将两次药液混合后浓缩， 制得附子汤的药液含生药0.05g/ml。

(3)取5周龄雄性SHR大鼠，以高脂饮食持续喂养SHR大鼠7周，并且，前4周 每日还要以附子汤对SHR大鼠灌胃一次，每日附子汤灌胃量为20ml/kg，相当于每日生药 1g/kg，培养结束后，获得12周龄的血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型。

方法3：

(1)制备高脂饮食，其配方为：普通鼠饲料72.9％、胆固醇2％、猪油10％、牛胆酸 钠0.1％、蛋黄粉10％及蔗糖5％。

(2)制备附子汤：取附子20g，浸泡30min后，煎煮两次，将两次药液混合后浓缩， 制得附子汤的药液含生药0.1g/ml。

(3)取5周龄雄性SHR大鼠，以高脂饮食持续喂养SHR大鼠12周，并且，前4周 每日还要以附子汤对SHR大鼠灌胃一次，每日附子汤灌胃量为20ml/kg，相当于每日生药 2g/kg，培养结束后，获得17周龄的血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型。

方法4：

(1)制备高脂饮食，其配方为：普通鼠饲料60％、胆固醇1％、猪油13.9％、牛胆酸 钠0.1％、蛋黄粉5％及蔗糖20％。

(2)制备附子汤：取附子20g，浸泡30min后，煎煮两次，将两次药液混合后浓缩， 制得附子汤的药液含生药0.1g/ml。

(3)取5周龄雄性SHR大鼠，以高脂饮食持续喂养SHR大鼠6周，并且6周内每 日还要以附子汤喂食SHR大鼠，每日附子汤用量为20ml/kg，相当于每日生药2g/kg，培养 结束后，获得11周龄的血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型。

实施例2血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型效果的验证

1.实验方法

选取11只5周龄雄性SHR大鼠按照实施例1的方法3制作“血瘀-阳亢-痰浊”高血压 动物模型，另选取11只5周龄雄性SHR大鼠进行空白对照，于17周龄时观察动物激惹程 度并行腹主动脉取血测定相关指标。

其中，以血粘度评价“血瘀”表现；以血脂、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价“痰 浊”表现；以血管紧张素II、易激惹程度评价“阳亢”表现。

各组数据以表示，采用SPSS 19.0版软件进行统计分析，两组间比较用独立样本 T检验，激惹程度比较采用Ridit分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.实验数据

2.1“血瘀”相关指标-血粘度

表1血粘度实验结果

*与对照组比较P＜0.01；△与对照组比较P＜0.05

实验结果显示(见表1)，与对照组比较，模型组的血粘度显著增高。血液流变学改变 是血瘀证发生的重要病理基础，是血瘀证微观辨证的依据，因此结果表明模型组出现了血 瘀的症候特点。

2.2“痰浊”相关指标

2.2.1血脂

表2血脂实验结果

*与对照组比较P＜0.01；△与对照组比较P＜0.05

2.2.2糖代谢

表3糖代谢实验结果

*与对照组比较P＜0.01

实验结果显示(见表2-3)，与对照组比较，模型组出现血脂显著增高及胰岛素抵抗， 符合中医对“痰浊为病”的认识，表明模型组出现了痰浊的症候特点。

2.3“阳亢”相关指标

2.3.1血管紧张素II

表4血管紧张素II实验结果

*与对照组比较P＜0.01

2.3.2易激惹程度

表5易激惹程度实验结果

*与对照组比较P＜0.01

实验结果显示(见表4-5)，模型组的血管紧张素II含量显著增高，易激惹程度也显著 提高，多集中在II及III，表明模型组出现了阳亢及烦躁易怒的特点。

3.实验结论

由实验数据可知，模型组的血管紧张素II、血粘度、血脂、胰岛素抵抗指数及易激惹 程度均明显高于对照组，说明本发明的模型组出现了血瘀、阳亢、痰浊的综合症状，证实 血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型的有用性，提示模型制作成功。

同样，按照实施例1其他方法制作“血瘀-阳亢-痰浊”高血压动物模型，另选取11只 5周龄雄性SHR大鼠进行空白对照，动物模型制备好后观察动物激惹程度并行腹主动脉取 血测定血管紧张素II、血粘度、血脂及胰岛素抵抗指数等相关指标，实验结果与实施例2 的结果类似，说明本发明的血瘀-阳亢-痰浊高血压动物模型及其制备方法的可用性。