一种含有延胡索乙素和欧前胡素的药物组合物

摘要

本发明公开了一种延胡索乙素和欧前胡素的药物组合物和应用。所述的药物组合物由延胡索乙素和欧前胡素以重量比为(1～8)∶(1～5)制备而成药剂学可以接受的各种固体口服剂型，如颗粒剂、粉剂、片剂、丸剂、胶囊剂。药理实验表明，该组合物具有抑制疼痛和不适，包括头痛、偏头痛、胃痛、神经痛、腰痛、月经痛的作用；该组合物可用于上述疼痛的治疗。

说明书

技术领域

本发明涉及一种延胡索乙素和欧前胡素的药物组合物，用于疼痛，主要是各种轻中度疼 痛和不适，如头痛、偏头痛、胃痛、神经痛、腰痛、月经痛等的治疗，属于医药技术领域。

背景技术

疼痛，是一种复杂的生理心理活动，是临床上最常见的症状之一。它包括伤害性刺激作 用于机体所引起的痛感觉，以及机体对伤害性刺激的痛反应。按美国疼痛学会报告，慢性疼 痛在美影响到其总人口的35.5％，即1.05亿人。据统计，2009年，全球疼痛治疗市场总值超 过500亿美元，其中在美国、日本、法国、德国、英国、意大利和西班牙这7国市场上销售 的止痛药物合计达270亿美元。鉴于人口老龄化、慢性疼痛性疾病发病率上升和医患双方对 疼痛及其治疗药物认识提高等因素，未来疼痛治疗市场仍将持续增长并得到进一步的发展。

目前，疼痛的治疗方法可分为药物和非药物治疗两种，其中药物治疗是最为行之有效的 方法。疼痛治疗现仍主要依赖具有止痛性质的药物，特别是非甾体抗炎药(NSAIDs)这一类 非麻醉性止痛药物和阿片类麻醉性止痛药物。NSAIDs是使用最为广泛的镇痛药物，已成为 治疗各种轻中度疼痛的一线用药，但其副作用一直困扰着它的使用，最明显的临床表现为胃 肠道副反应，如恶心、胃溃疡、胃出血、胃穿孔、甚至导致某些病人死亡。在近20年中，已 有5个NSAIDs被撤出市场；2005年4月7日，FDA发布声明指出：所有NSAIDs均有潜在 的心血管风险。虽然目前止痛药物的类别及具体品种均为数不少，但估计仍有多达1/4的用 药患者不能获得适当的疼痛缓解效果。此外，现有止痛药物也常存在耐受性差和副反应大、 有长期安全性问题和滥用倾向及使用不便等缺陷。显然，临床需要有新的安全、有效的止痛 药物，镇痛新药的开发具有重要的临床和现实意义。

“元胡止痛片”为《中国药典》(2010年版一部525页)标准制剂；是临床常用镇痛药物， 由延胡索、白芷两味药组成，其功能为理气、活血、止痛，临床用于气滞血瘀的胃痛、胁痛、 头痛及痛经等。方中延胡索为君药，有活血、理气、止痛之功效，白芷散风除湿、通窍止痛、 消肿排脓。该方以其组方简单、疗效确切而首载于1985年《中国药典》，现已入选国家基本药 物目录理气止痛类药物。研究表明：延胡索止痛、镇静化学成分主要为延胡索乙素，有效部 分为其左旋体，即左旋四氢巴马亭，又称颅痛定。金国章等人(参见金国章，中药延胡索研 究中的新发现，上海科学技术出版社，2001：71-111；金国章，胡江元，颅痛定的镇痛作用 机制与多巴胺受体，药理学进展，科学出版社，1999：64)已于20世纪80年代通过神经药理， 动物行为，神经生化，电生理等实验确定其是多巴胺受体的新型阻滞剂，其镇痛作用的中枢 神经通路为：左旋四氢巴马亭作用于D1、D2受体分布最为丰富的纹状体和伏膈核后，通过弓 状核的脑啡肽和内啡肽神经元作用于中脑导水管周围灰质，加强脑干下行抗痛系统的功能， 再通过中脑导水管周围灰质-延髓外侧网状旁巨细胞核-脊髓背角神经通路，抑制痛觉从脊髓水 平的传入，发挥其镇痛作用。

白芷中的主要成分欧前胡素具有镇静、解痉、平喘、消炎作用。有学者发现(Choi SY等， Phytother Res，2005，19：839-845)欧前胡素可使γ-氨基丁酸转氨酶钝化，从而提高神经元突触 间隙的抑制性神经递质γ-氨基丁酸含量。在放射自显影实验中(Dekermendjian K，等，Neurosci Lett，1996，219：151-154；Bergendorff O等，Phytochemistry，1997，44：1121-1124)，欧前胡素可 以抑制3H标记的地西泮与γ-氨基丁酸A亚型-苯二氮卓受体复合物的结合，而呋喃香豆素类化 合物与此受体有一定的亲和力，为其部分激动剂。同时，欧前胡素能增强三种传统抗癫痫药 的抗癫痫活性。欧前胡素能够显著提高卡马西平、苯巴比妥和苯妥英抑制小鼠最大电休克癫 痫发作的作用，使其半数有效量分别从10.3mg/kg降低至6.0mg/kg，从19.6mg/kg降低至12.2 mg/kg，从12.8mg/kg降低至8.5mg/kg(Luszczki JJ等，Eur.J.Pharmacol，2007，574：133-139)。

由以上可见，两种成分在中药方剂中均作为主要成分，具有不同的镇痛作用机理，但至 今没有协同作用的报道。因此，我们从新药研发的角度对延胡索乙素和欧前胡素进行了系统 的研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种有效的治疗疼痛的药物组合物，该组合物成分明确、质量可 控，可用于疼痛包括头痛、偏头痛、胃痛、神经痛、炎性疼痛、腰痛、月经痛等的治疗。

发明人对延胡索乙素和欧前胡素进行了研究，取得了重要的结果。采用动物实验研究发 现：延胡索乙素与欧前胡素重量比为(1～8)∶(1～5)合用，可以明显提高延胡索乙素的镇 痛效果，产生协同增效作用；二者组合在一起对于疼痛和不适，包括头痛、偏头痛、胃痛、 神经痛、腰痛、月经痛等有很好的治疗作用，克服药物单用服药量大，作用单一的缺点；此 作用与延胡索乙素与欧前胡素作用于不同的靶点，发挥了药物的整体治疗增效作用有关。根 据实验结果：我们发现延胡索乙素与欧前胡素合用不仅作用于多巴胺受体，抑制痛觉从脊髓 水平的传入，产生镇痛作用；而且明显抑制中枢及外周水平的一氧化氮(NO)、5-羟色胺 (5-HT)、前列腺素等多种化学和细胞因子的产生，抑制伤害性感受器的激活，降低痛觉致 敏性，从而产生明显的中枢和外周镇痛作用。

经过多种急性和慢性疼痛模型的药理作用研究，优选的延胡索乙素和欧前胡素的重量比 为(1～6)∶(1～2)。

本发明的另一目的还在于提供该组合物制剂的制备方法。考虑到欧前胡素在水中溶解性 较差和便于药物制剂临床应用，可以选择固体口服剂型，如颗粒剂、粉剂、片剂、丸剂、胶 囊等作为临床应用剂型，延胡索乙素和欧前胡素含量占药物组合物总重量的10～80％。

进一步优选的延胡索乙素和欧前胡素含量占药物组合物总重量的20～60％。

颗粒剂的制备为：将粉末形式的延胡索乙素和欧前胡素与填充剂、载体、粘合剂、着色 剂及矫味剂混合，在滚筒压实机上压实并通过制粒机打碎。

粉剂的制备为：将粉末形式的延胡索乙素和欧前胡素与载体、粘合剂、助流剂、着色剂 及矫味剂在掺合机中混合。

胶囊剂的制备为：将粉末形式的延胡索乙素和欧前胡素与载体、粘合剂、助流剂在掺合 机中混合，于胶囊分装机上分装。

根据不同疼痛部位和疼痛强度的临床需要，片剂又包括口服普通片、分散片、咀嚼片、 缓释或控释片和含片。

分散片系指能在水中迅速崩解成均匀的粘性混悬液的片剂。相对于普通片剂、胶囊剂等 固体制剂，分散片崩解和溶出速度更快，同时又具有灵活多样的服用方法：既可如普通片剂 用水吞服，也可先将其分散在水或饮料中服用，尤其适合老人、儿童和吞服困难的患者。本 发明进一步制备了延胡索乙素和欧前胡素组方的分散片，可提高欧前胡素的溶出度和生物利 用度。

本发明的分散片中含有药用辅料，且该辅料为选自药用崩解剂、粘合剂、填充剂、表面 活性剂、助流剂、润滑剂和矫味剂中的一种或一种以上的混合物，以保证片剂在加工过程中 物料流动性好，制成的片剂外观、硬度、分散性、崩解时间合格。

崩解剂的种类对分散片的崩解、溶出效果至关重要，所用的崩解剂选自羧甲基淀粉钠、 交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠，且其含量占分散片总重 量的3～20％。

所用的粘合剂选自羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮K30，且其含量占 分散片总重量的2～20％。

所用的填充剂选自乳糖、微晶纤维素、预胶化淀粉和淀粉，且其含量占分散片总重量的 10～60％。

润滑剂选自硬脂酸镁、滑石粉中的一种或两种合用，且其含量占分散片总重量的0.2～ 5％。

此外，还可加入表面活性剂，如十二烷基磺酸钠、吐温-80、磺基丁二酸二辛酯钠、蔗糖 酯和泊洛沙姆；助流剂如微粉硅胶；矫味剂如甘露醇、阿斯巴甜、糖精钠和甜菊苷。

本发明的分散片可以采用湿法制粒工艺、干法制粒工艺和直接压片工艺中的任一种工艺 进行制备。

具体实施方式

以下通过试验例来进一步阐明本发明所述药物组合物对疼痛的治疗效果。

试验例1：热板法测定延胡索乙素和欧前胡素的镇痛作用

实验动物：BABL/c小鼠，单一雌性，体重(20±2)g，购于第四军医大学实验动物中心。

实验分组与给药：将小鼠置于(55±1)℃的恒温水浴中的热烧杯内，以舔后足时间作为 痛阈，筛选出正常痛阈值在5～30s的小鼠56只，随机分为7组：空白对照组给予0.2％ CMC-Na (10ml/kg)；延胡索乙素和欧前胡素重量配比1∶1组，3∶1组，6∶1组；阳性对照药止痛片组 (0.25g/kg)；欧前胡素组(30mg/kg)和延胡索乙素组(30mg/kg)。

镇痛作用测定：连续灌胃(i.g)给药8天，1次/天，于最后一天给药后40min测其痛阈值， 若痛阈值超过60s，则按60s计。计算出痛阈提高率，比较各组间差异。

统计学处理：所有数据用SPSS12.0统计软件进行统计学处理，数据以表示，组间比较 采用t检验，P＜0.05表示有统计学差异。

结果：从表1可见，延胡索乙素和欧前胡素配比为1∶1、3∶1和6∶1时小鼠痛阈值提高率均明 显高于延胡索乙素和欧前胡素单用组，相对空白对照组有显著性差异(P＜0.05)。

表1 热板法测定延胡索乙素和欧前胡素的镇痛作用(n＝8)

注：^*P＜0.05，与空白组对照。

试验例2：扭体法测定延胡索乙素和欧前胡素的镇痛作用

实验动物：BABL/c小鼠，单一雌性，体重(20±2)g，购于第四军医大学实验动物中心。

实验分组与给药：取雌性小鼠64只，随机分为8组：空白对照组给予0.2％ CMC-Na (10ml/kg)；延胡索乙素和欧前胡素重量配比1∶1组，2∶1组，3∶1组，5∶1组；止痛片组(0.25g/kg)； 欧前胡素组(30mg/kg)；延胡索乙素组(30mg/kg)。

镇痛作用测定：连续i.g给药8天，于末次给药后60min，各组小鼠腹腔注射0.7％醋酸溶液 (0.1ml/10g)，分别记录注射醋酸溶液后15min内各组小鼠扭体次数(扭体反应表现为腹部收 缩、躯体扭曲、后髋伸展及臂部抬高)。按以下公式计算扭体反应的抑制率：抑制率(％)＝ (空白对照组扭体次数-用药组扭体次数)/空白对照组扭体次数×100。

统计学处理：同试验例1。

结果：从表2可见，延胡索乙素和欧前胡素配比为1∶1、2∶1、3∶1、5∶1时小鼠扭体次数明显 少于空白组、延胡索乙素和欧前胡素单用组，表明对外周有明显的镇痛作用(P＜0.05)。

表2 扭体法测定延胡索乙素和欧前胡素的镇痛作用(n＝8)

注：^*P＜0.05，与空白组对照。

试验例3：延胡索乙素和欧前胡素对偏头痛作用的研究

实验动物：昆明种小鼠，单一雌性，体重(20±2)g，购于第四军医大学实验动物中心。

利血平致小鼠偏头痛模型的复制：偏头痛的发病机制很多，可能与脑血管舒张、收缩功 能异常、血小板聚集、脑内递质的变化等有关，临床上发现单胺类递质耗竭剂利血平能够诱 发偏头痛，用利血平皮下注射造模，造模后小鼠凝血时间明显缩短，脑内5-HT含量明显降 低可基本反映偏头痛的特点。本实验用热板法筛选合格的昆明种小鼠(痛阈值小于30s)72 只，分成9组，皮下注射0.4mg/kg的利血平，每日1次，共10天。随机取正常和造模小鼠 各10只，测其凝血时间和5-HT吸光度值，造模后小鼠凝血时间与正常组比较明显降低 (P＜0.05)，脑内5-HT含量与正常组比较也降低(P＜0.05)，说明小鼠偏头痛模型造模成功。

实验分组与给药：造模成功后正常组和模型组不给药，溶剂组给予0.2％ CMC-Na(10 ml/kg)，阳性组给予去痛片(500mg/kg)，治疗组分别给予总量10mg/kg、30mg/kg、60mg/kg 的延胡索乙素和欧前胡素(重量配比3∶1)，30mg/kg的延胡索乙素，30mg/kg的欧前胡素。 连续给药4天。

脑组织中5-HT含量的测定：冰浴上断头取出脑组织，称重后，按1∶30比例加入预冷的 酸性正丁醇匀浆，离心(10000r/min，15min)后取上清液各加1mol/l的盐酸1ml和正庚烷 2.5ml，振荡、离心(10000r/min，10min)后取水相，加邻苯二甲醛2.5mg和1mol/l的盐 酸1ml沸水浴后冷却，在荧光分光光度计上以365nm/480nm处测定5-HT的吸光度。与5-HT -吸光度标准曲线对比确定5-HT含量。

统计学处理：同试验例1。

结果：由表3可知，延胡索乙素和欧前胡素合用可促进脑内5-HT含量的增加，并呈剂量 依赖性；相同剂量药物组合物组的5-HT含量明显高于延胡索乙素和欧前胡素单用组；当给 予高剂量60mg/kg的药物组合物时，脑内5-HT含量与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)， 与正常组无明显差异，并且小鼠偏头痛的症状明显改善。

表3 延胡索乙素和欧前胡素对小鼠5-HT含量的影响(n＝8)

注：^*P＜0.05，与模型组对照。

试验例4：延胡索乙素和欧前胡素对痛经的作用

实验动物：Wistar大鼠，单一雌性，体重200-250g，购于第四军医大学实验动物中心。

实验分组与给药：取大鼠48只，随机分为6组：其中5组皮下注射苯甲酸雌二醇注射液 (0.01g/kg/天)，连续6天，每日1次，另1组，即正常组，注射生理盐水。注射苯甲酸雌二 醇注射液的第2天开始，造模的5组分别灌胃给药，给予总量100mg/kg的延胡索乙素和欧 前胡素(重量配比3∶1)，25mg/kg欧前胡素组，75mg/kg延胡索乙素组，300mg/kg的阳性对 照药阿司匹林；每日一次；正常组给予同体积的生理盐水。

镇痛作用测定：连续i.g给药6天，于末次给药40min后，腹腔注射缩宫素20U/kg致大 鼠扭体反应，观察并记录给缩宫素后5～30min大鼠扭体反应发生的次数。

统计学处理：同试验例1。

结果：从表4可看出，空白对照组不出现扭体反应，模型组出现明显扭体反应；与模型 组比，延胡索乙素和欧前胡素重量配比3∶1组的扭体次数显著减少，并明显少于延胡索乙素 组和欧前胡素组；表明延胡索乙素和欧前胡素合用对大鼠痛经模型有很好的改善作用，优于 延胡索乙素和欧前胡素单用。

表4 延胡索乙素和欧前胡素对痛经的作用(n＝8)

注：^*P＜0.05，与模型组对照。

具体实施例

下面列举典型实施例，对本发明进一步说明，但不以任何形式构成对本发明的限制。

实施例1

(1)处方

(2)制备方法

称取处方量的延胡索乙素、欧前胡素、交联聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素混合均匀，加 入2％羟丙甲纤维素的水溶液为粘合剂制软材，20目筛制粒，50℃干燥3h，20目筛整粒，加 入处方量的滑石粉、硬脂酸镁，混合均匀，压片。每片含主药共计100mg。

(3)崩解时间及分散均匀性的测定

取样品6片，分别置于崩解仪吊篮的玻璃管中，使吊篮浸人1000ml烧杯中，并调节吊 篮位置使其下降时筛网距烧杯底部25mm，烧杯内盛有温度为(37±1)℃的水，调节水位高度 使吊篮上升时筛网在水面下15mm处。启动崩解仪，记录崩解时间为18s。

另取分散片2片，置100ml水中振摇，在(20±1)℃水中，3min全部崩解并通过2号筛。

实施例2

(1)处方

(2)制备方法

1)称取处方量的延胡索乙素、欧前胡素过100目筛，羧甲基淀粉钠、阿斯巴甜、微晶纤 维素，过80目筛，将上述原辅料充分混合均匀，备用。

2)粘合剂的配制：取全量的聚乙烯吡咯烷酮K30，制成浓度为5％的水溶液，搅拌至完全 溶解，备用。

3)将1)中的粉末用2)中的粘合剂制软材，过20目筛制粒，60℃干燥，控制水分为2％ 左右。加入处方量的滑石粉、硬脂酸镁，混合均匀，压片。每片含主药共计100mg。

(3)崩解时间及分散均匀性的测定

取样品6片，按实施例1方法测定崩解时间为79s。

另取分散片2片，置100mL水中振摇，在(20±1)℃水中，3min全部崩解并通过2号 筛。

实施例3

(1)处方

(2)制备方法

1)分别将延胡索乙素、欧前胡素过100目筛，微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、阿斯巴甜粉 碎，过80目筛，将上述原辅料充分混合均匀，备用。

2)粘合剂的配制：取全量的聚乙烯吡咯烷酮K30，制成浓度为5％的水溶液，加入表面活 性剂十二烷基硫酸钠，备用。

3)将1)中的粉末用2)中的粘合剂制软材，过20目筛制粒，60℃干燥，控制水分为2％ 左右。过20目筛整粒，加入硬脂酸镁和微粉硅胶混合均匀，压片，即得。每片含主药共计150 mg。

(3)崩解时间及分散均匀性的测定

取样品6片，按实施例1方法测定崩解时间为98s。

另取分散片2片，置100mL水中振摇，在(20±1)℃水中，3min全部崩解并通过2号 筛。

实施例4

(1)配方

(2)制备方法

1)分别将延胡索乙素、欧前胡素过100目筛，微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、羧甲 基淀粉钠、甘露醇过80目筛，将上述原辅料充分混合均匀，备用。

2)粘合剂的配制：制备含吐温-80的6％聚乙烯吡咯烷酮K30水溶液，搅拌至完全溶解， 备用。

3)将1)中的粉末用2)中的粘合剂制软材，过18目筛制粒，60℃干燥，过20目筛整粒， 加入微粉硅胶和硬脂酸镁混合均匀，压片，即得。每片含主药共计120mg。

(3)崩解时间及分散均匀性的测定

取样品6片，按实施例1方法测定崩解时间为135s。

另取分散片2片，置100ml水中振摇，在(20±1)℃水中，3min全部崩解并通过2号筛。