高致病性传染性疾病的预防及治疗制剂

摘要

本发明涉及用于治疗和/或预防高致病性传染性疾病，诸如高致病性甲型流行性感冒，(特别是H5及H7亚型)，以及由基因型IV冠状病毒导致的严重急性呼吸系统综合征的制剂。这种制剂是以戊二酰组胺或其药学上可接受的盐的形式。本发明还涉及基于戊二酰组胺或其药学上可接受的盐的药物组合物，以及用于治疗和/或预防高致病性感染性疾病的方法。

说明书

发明领域

本发明涉及式(I)

所示的戊二酰组胺(glutaryl histamine(GH))，或其药学上 可接受的盐作为高致病性传染性疾病，诸如高致病性甲型流行性感冒， 特别是H5及H7亚型(下文中称作高致病性流行性感冒)，以及基因 型IV冠状病毒导致的严重急性呼吸道综合征(SARS)，的治疗和/或 预防的制剂，并且涉及用于这些疾病的治疗和/或预防的方法和药物组 合物。

发明背景

根据Terrestrial Animal Health Code 10.4的条款，高致病性 甲型流行性感冒病毒是那些其中静脉内致病性指数大于1.2的隔离群 (菌株)[Terrestrial Animal Health Code，2008 http://www.oie.int/eng/hormes/mcode/en_chapitre 1.10.4.html].

将甲型流行性感冒病毒菌株的隔离群(例如，H5N1)归类为高致 病性的另一种标准是这种病原的剂量可以杀死50％鼻内感染的白鼠。 在小鼠中，高致病性甲型流行性感冒病毒菌株是具有低于5.5lg EID₅₀的LD₅₀的菌株。[Maines，T.R.，Lu，X.H.，Erb，S.M.，et al.， ″Avian Influenza(H5N1)Viruses Isolated from Humans in Asia in  2004Exhibit Increased Virulence in Mammals，″I/I.Virol.，2005， Vol.79，No.18，pp.11788-11800]。

预防和控制流行性(大范围流行性)流行性感冒的主要工具是化 学疗法、化学预防以及疫苗。

考虑到不可能预测未来流行性(大范围流行性)甲型流行性感冒 病毒的抗原结构，有效的流行性感冒疫苗的早期设计是困难的，并且 因此在储备中具有用于高致病性病毒菌株所致疾病的预防及治疗的化 疗剂是重要的。

阿比朵尔是病毒感染，尤其是流行性感冒治疗及预防的最常用的 药物。然而，在体内实验口服给药(135mg/kg小白鼠体重)紧急预 防和治疗中，阿比朵尔抗高致病性甲型流行性感冒(H5N1)病毒菌株 的保护效力分别低到25和10％(见表2和3)。

这种保护水平不能满足抗病毒化学疗法效力(不应低于30％)的现 有国家标准(其应当不低于30％)， [Руководствопоэкспериментальному(доклиническому)изучению новыхфармакологическихвеществ.-M.，2005.-C.541].(The  Manual on Experimental(Preclinical)Study of Novel  Pharmacological Agents，Moscow，2005，p.541)].

金刚烷衍生物也是公知的化疗剂，其从20世纪60年代开始被用 于季节性流行性感冒的治疗。高致病性甲型流行性感冒(H5N1)病毒 最近分离的菌株高度对抗金刚烷衍生物，即金刚烷胺及金刚乙胺；因 此，这些药物失去了其治疗作用[Cheung，C.L.，Rayner，J.M.， Smith，G.J.，et al.，″Distribution of Amantadine-Resistant  H5N1Avian Influenza Variants in Asia，”J.Infect.Dis.，2006， Vol.193，pp.1626-1629]。

神经氨酸酶抑制剂奥司他韦是治疗流行性感冒最有效的制剂。由 于在神经氨酸酶中的一种氨基酸N1(His274Tyr和N294S)的置换， 许多甲型流行性感冒的H5N1亚型病毒菌株最近获得对奥司他韦的抗 药性。[HuiLing，Y.，Ilyshina，N.A.，Salomon，R.，et  al.′Neuraminidase Inhibitor-Resistant Recombinant  A/Vietnam/1203/04(H5N1)Influenza Viruses Retain Their  Replication Efficacy and Pathogenicity in vitro and vivo，′J. Virol.，2007，Vol.81，pp.12418-12426；Le，Q.M.，Kiso，M.，Someya， K.，et al.″Avian Flu：Isolation of Drug-Resistant H5N1 Virus， ″Nature，2005，Vol.437，p.1108]。

因此，通常用于对抗季节性流行性感冒菌株的药物被证明不足以 对抗高致病性菌株。

另一种更高致病性病毒性疾病是严重急性呼吸系统综合征 (SARS)，是由基因型IV病原体所致的、以高达10％死亡率为特征的 新急性冠状病毒疾病[Revised U.S.Surveillance Case Definition  for Severe Acute Respiratory Syndrome(SARS)and Update on  SARS Cases，United States and Worldwide，December 2003，MMWR WkIy Rep.，2003，Vol.52，No.49，pp.1202-1206]。

所以，有必要开发用于治疗和/或预防高致病性流行性感冒和SARS 的新制剂。本发明人出人意料地发现戊二酰组胺作为这样的制剂是有 效的，并且由此获得了本发明的发展。

发明概述

本发明涉及用于治疗和/或预防高致病性传染性疾病，诸如高致 病性甲型流行性感冒，特别是H5及H7亚型(下文中称作高致病性流 行性感冒)，以及由基因型IV冠状病毒导致的严重急性呼吸系统综合 征(SARS)的制剂，这种制剂代表戊二酰组胺或其药学上可接受的盐

此外，还提供了用于高致病性传染性疾病的治疗和/或预防的药 物组合物，包含有效量的戊二酰组胺或与一种或多种药学上可接受的 载体组合的其药学上可接受的盐。

另外，本发明涉及用于高致病性传染性疾病的治疗和/或预防的 方法，包括对有该需求的患者施用有效量的戊二酰组胺或其药学上可 接受的盐。

发明详述

下式的戊二酰组胺(GH)化合物

在WO 99/01103，January 14，1999中第一次被描述，其中披 露了其合成并且被发现具有广谱的生物特性，这些特性包括抗细菌性 以及抗病毒活性。研究了戊二酰组胺(GH)在对抗人脑心肌炎病毒、 甲型流行性感冒(季节性)病毒以及HIV-1病毒(见WO 99/01103， 实施例44)中的抗病毒活性。值得注意的是，HIV病毒和人脑心肌炎 病毒(微小核糖核酸病毒)均不与高致病性病毒相关。[Terrestrial  Animal Health Code，2008 http://www.oie.int/eng/hormes/mcode/en_chapitre_l. 10.4.html]。季节性流行性感冒病毒不被划分为高致病性病毒，因为 它们具有低的静脉内致病指数(低于1.2)。

本发明人出人意料地发现戊二酰组胺及其药学上可接受的盐可 有效地用于高致病性病毒疾病，诸如高致病性甲型流行性感冒(尤其 是H5和H7亚型)以及严重急性呼吸系统综合征(SARS)的预防和/ 或治疗。

因此，本发明涉及用于高致病性传染性疾病的治疗和/或预防的 制剂，其代表了下式的戊二酰组胺

或其药学上可接受的盐。

更特别地，本发明涉及用于高致病性甲型流行性感冒(尤其是H5 和H7亚型)的治疗和/或预防的制剂，这种制剂代表戊二酰组胺或其 药学上可接受的盐。

H5N1，H7N2，H7N7和H9N2是其中戊二酰组胺或其药学上可接受 的盐在治疗和/或预防中有用的、高致病性甲型流行性感冒的亚型的特 例。

在另一种实施方案中，本发明涉及用于由基因型I V冠状病毒导 致的严重急性呼吸系统综合征(SARS)的治疗和/或预防的制剂，这种 制剂代表下式的戊二酰组胺

或其药学上可接受的盐。

另外，本发明涉及用于高致病性感染性疾病的治疗和/或预防的 药物组合物，其包含有效量的、作为活性成分的戊二酰组胺或其药学 上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体。

在本发明的另一种实施方案中，药物组合物准备用于高致病性甲 型流行性感冒，尤其是H5和H7亚型，更特别地，H5N1，H7N2，H7N7 及H9N2亚型的治疗和/或预防。在本发明的另一种实施方案中，药物 组合物是为由基因型IV冠状病毒导致的严重急性呼吸系统综合征 (SARS)的治疗和/或预防而设计的。

此外，本发明涉及用于高致病性感染性疾病的治疗和/或预防的 方法，包括对有该需求的患者施用有效量的戊二酰组胺或其药学上可 接受的盐。患者可以是哺乳动物或鸟。戊二酰组胺或其药学上可接受 的盐可单独施用或在上述药物组合物中施用。

在另一种实施方案中，本发明涉及用于高致病性甲型流行性感 冒，尤其是H5和H7亚型，更特别地，H5N1、H7N2、H7N7及H9N2亚 型的治疗和/或预防的方法。在另一种实施方案中，本发明涉及用于由 基因型IV冠状病毒导致的严重急性呼吸系统综合征(SARS)的治疗和 /或预防的方法。

此外，本发明涉及戊二酰组胺或其药学上可接受的盐用于高致病 性感染性疾病，诸如高致病性甲型流行性感冒，尤其是H5和H7亚型， 更特别地，H5N1、H7N2、H7N7及H9N2亚型，以及由基因型IV冠状病 毒导致的严重急性呼吸系统综合征(SARS)的治疗和/或预防的用途。

根据本发明，戊二酰组胺的药学上可接受的盐可以是其碱或碱土 金属的盐，优选的为钠、钾和锂盐。

为提供所需治疗效果，以有效量施用戊二酰组胺或其盐。

戊二酰组胺或其盐可以每天从0.1到100mg/kg哺乳动物体重的 剂量，优选地以从0.3到30mg/kg的剂量施用于患者，一天一次或多 次。

必须注意，用于特定患者的特定药量依赖于很多因素，诸如患者 的年龄、体重、性别、综合健康状况以及饮食；施用该制剂的时间安 排和方式以及其排泄出机体的速度；以及治疗中个体疾病的严重性。

本发明的药物组合物包含提供所需结果的有效量的GH或其药学 上可接受的盐，并且可制备为包含GH及其盐作为活性成分，与载体或 适用于肌肉注射、静脉注射、口服、舌下、吸入、鼻内、直肠和经皮 给药的赋形剂相混合的单位制剂形式(例如，以固体、半固体或液体 形式)。活性成分可与适合生产溶液、片剂、丸剂、胶囊、糖衣丸剂、 栓剂、乳液、悬浮液、软膏剂、凝胶剂、贴剂以及任意其它剂型的常 用无毒药学上可接受的载体一同包含于本组合物中。

可以使用不同的赋形剂，诸如葡萄糖、乳糖、蔗糖；甘露醇或山 梨醇；纤维素衍生物；和/或磷酸钙，例如磷酸三钙或者磷酸氢钙。也 可以使用下列粘合剂：淀粉糊(例如，玉米、小麦、水稻或马铃薯淀 粉)、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维 素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮。如果需要，可以使用崩解剂，诸如前述淀 粉质和羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐，例 如海藻酸钠。

可以使用任选的添加剂，诸如流动性控制剂和润滑剂，诸如二氧 化硅、滑石，硬脂酸及其盐，例如硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或丙二醇。

也可使用稳定剂、增稠剂、着色剂和芳香添加剂。

软膏剂基质可以是碳氢化合物软膏剂基质，诸如白凡士林和黄凡 士林(Vaselinum album和Vaselinum flavum)、凡士林油(Oleum  Vaselini)，和白色软膏和液体软膏(分别为Unguentum album和 Unguentum flavum)。有用的增稠添加剂诸如固体石蜡和蜡状物；吸收 性软膏基质，诸如亲水性凡士林(Vaselinum hydrophylicum)，羊毛 脂(Lanolinum)，和冷霜(Unguentum leniens)；驱水软膏基质，诸 如亲水性软膏基质(Unguentum hydrophylum)；和水溶性软膏基质， 诸如聚乙二醇软膏(Unguentum Glycolis Polyaethyleni)；膨润土 基质及其他。

作为凝胶的基质，有用的是甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙 基、聚乙二醇或聚环氧乙烷及卡波姆。

作为栓剂的基质，有用的是水不溶性基质，诸如可可脂；水溶性 或水可混溶性基质，诸如明胶-甘油或聚环氧乙烷基质；和组合(皂- 甘油)基质。

在制备单位制剂形式时，用于与载体相结合的活性成分的量可以 根据治疗的接受者以及施用治疗剂的途径而改变。

例如，当GH或其盐被用于注射用溶液形式时，在该溶液中的活 性制剂量在0.1到5％之间。作为稀释液，可以使用注射用0.9％氯化钠 溶液、蒸馏水、奴佛卡因溶液、林格溶液、葡萄糖溶液和特定的增溶 佐剂。在以片剂或栓剂形式施用GH或其盐时，其量为每单位制剂形式 10到300mg。

本发明的制剂形式是按照常规方法，诸如混合、粒化、形成糖衣、 溶解和冻干制备的。

相关的，GH或其盐在其中是生物活性的情况下的用药量低于现有 技术类似物的用药量一个数量级，但实际上却具有等效或更高疗效， 而且没有发现GH的副作用。

以下，将通过举例的方式详细描述本发明，实施例是用于示例本 发明的优选实施方案的，并且绝不用于限制本发明的范围。

实施例1

戊二酰组胺的急性毒性研究

用体重在28到30克的雄性小白鼠做戊二酰组胺的急性毒性非线 性研究。进行胃内给药，LD₅₀大于10000mg/kg.

实施例2

戊二酰组胺抗H5N1流感病毒的预防及治疗功效

按照适当的手册要求进行所用药物的抗病毒活性研究 руководстве[Руководствопоэкспериментальному(доклиI новыхфармакологическихвеществ.-M.，2005.-C.532-545](The Manual  on Experimental(Preclinical)Study of Novel Pharmacological  Agents，Moscow，2005，pp.532-545)]。

抗A/鸡/库尔干/俄国/2/05(H5N1)流行性感冒病毒菌株的预防 及治疗效果在具有10到12g体重的小白鼠活体内是确定的。所使用的 传染源是经感染的、具有6.5lg CPD₅₀/ml，9.0lg ELD₅₀/ml，和5.0 lg LD₅₀/ml生物活性值的DCE(发展中的鸡胚)的尿囊液。

为紧急预防和治疗，给小白鼠口服戊二酰组胺。

表1示出了用所述制剂抗诱发的小白鼠高致病性流行性感冒的预 防性功效获得的结果，所述小白鼠已经用A/鸡/库尔干/俄国/2/05 (H5N1)流行性感冒病毒菌株经鼻内感染。

表1明示了因本发明制剂的使用而避免死亡的百分比平均为 45.0％，提供了戊二酰组胺的预防疗效的明显证据。

表2和3分别显示在对紧急状况预防和治疗情况使用GH的效力 的研究中得到的结果。

表1GH对鼻内感染A/鸡/库尔干/俄国/2/05(H5N1)流行性感冒病毒 菌株诱发的小白鼠流行性感冒的预防性效果

表2GH对鼻内感染A/鸡/库尔干/俄国/2/05(H5N1)流行性感冒病毒 菌株诱发的小白鼠流行性感冒的急性预防性效果

表3GH对鼻内感染A/鸡/库尔干/俄国/2/05(H5N1)流行性感冒病毒 菌株诱发的小白鼠流行性感冒的治疗效果

表2和3中的实验数据为戊二酰组胺的治疗和紧急预防效力均提 供了明显证据。

实施例3

对抗严重急性呼吸系统综合症的效力

为进行预防及治疗有效性评估，给叙利亚仓鼠经口感染1x10⁵PFU 剂量的严重急性呼吸系统综合症病毒。按照以下时间表以5.0和 15.0mg/kg剂量口服给药戊二酰组胺：为预防目的，每日一次7天， 接触病毒前和接触病毒前一小时；为治疗目的，接触病毒后24小时开 始并持续6天。

效力研究的结果显示在表4中

表4戊二酰组胺抗诱导的叙利亚仓鼠严重急性呼吸系统综合症的效 力

表中所示数据提供证据证明要求保护的化合物可有效对抗在叙 利亚仓鼠中诱导的SARS。对于疗效学目的，以15mg/kg剂量给药制 剂的治疗效力是40％；而对于预防和治疗目的，以5mg/kg剂量(给 药)，效力分别为30％和20％。

这些结果表明所要求保护的化合物可用于多种高致病性感染性疾 病的治疗。

实施例4

基于戊二酰组胺的单位制剂形式

A.明胶胶囊

戊二酰组胺或其盐：90mg；和

乳糖(乳糖)、马铃薯淀粉、胶体二氧化硅(Aerosil)以及硬 脂酸镁，以使胶囊内含重量达到220mg。

将前述成分混合并制成颗粒；将220mg量的颗粒置于硬明胶胶囊 中。

B.用于注射的溶液

制备注射用溶液有用的溶剂是0.9％氯化钠溶液、蒸馏水或奴佛 卡因溶液。可以以安瓿、小瓶、安瓿式半自动注射器以及插入物形式 生产单位制剂。

注射用溶液的配方如下：

戊二酰组胺或其盐：100mg；和

蒸馏水：5ml

可以以无菌溶液、无菌粉末和无菌片剂形式生产注射制剂。