法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2014-10-22
授权
授权
2012-03-28
实质审查的生效 IPC(主分类):A61K9/28 申请日:20100128
实质审查的生效
2012-02-15
公开
公开
相关申请的交叉引用
本申请与美国专利申请12/338,899，12/338,903和12/338,908相关，其全 部于2008年12月18日提交，在此通过引用以其整体并入。本申请要求美 国临时申请61/148,621的优先权，其于2009年1月30日提交，在此通过引 用以其整体并入。
技术领域
本发明涉及包衣的口服固体剂型以及检测所述固体剂上的包衣的有效 性的方法。
背景技术
艾斯佐匹克隆(eszopiclone)，也称为(S)-佐匹克隆((S)-zopiclone)或者 (S)-(6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡 咯并[3，4-b]吡嗪)((S)-(6-(5-chloro-2-pyridyl)-5-[(4-methyl-1-piperazinyl) carbonyloxy]-7-oxo-6，7-dihydro-5H-pyrrolo[3，4-b]pyrazine))，以游离碱的形式 合成并作为鲁尼斯塔进行销售。它被用来治疗不同类型的睡眠 问题，诸如难以入睡，在夜间难以保持睡眠，以及早晨起床太早。大多数失 眠的人有不止一种这样的问题。参见，例如WO 93/10787；Brun，J.P.，Pharm. Biochem.Behav.29：831-832(1988)。至少在以下美国专利中公开了化合物艾 斯佐匹克隆以及不同的治疗方法：7,125,874；6,864,257；6,444,673；6,319,926； 以及5,786,357。
外消旋的佐匹克隆，rac-(6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰氧 基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡嗪)，同样是以游离碱的形式合成的， 已经在欧洲销售了很多年用以治疗不同类型的睡眠问题。
游离碱形式的活性成分艾斯佐匹克隆具有非常强烈的苦味。人类味觉的 研究表明，即使是浓度非常低的溶液，例如，0.01mg/ml，人类的舌头也可 以察觉到苦味。因此，当患者吞下片与水时，由于极端的苦味， 片剂表面上痕量的活性成分，或任何包衣缺陷导致活性成分直接暴露在片剂 的表面，或者片剂在人口腔中瞬时溶解，都会被察觉到。
已经提出了许多形式的分析方法和仪器来测量或鉴别片剂表面的活性 成分。例如，拉曼成像光谱用于检测六种阿普唑仑(alprazolam)片剂的平表面 上阿普唑仑的活性成分(Sasic，Slobodan.Analytical R&D，Pfizer Global Research and Development，Sandwich，UK.Pharmaceutical Research(2007)， 24(1)，58-65)。此外，已经提出了许多分析方法来评价片剂的薄膜包衣性能。 例如，结合光谱-图像数据集的主成分分析的新的X-射线光电子光谱(XPS) 技术用来研究在包衣过程中，所用雾化空气的压力对薄膜-片剂界面厚度的 影响(Barbash，Dmytro；Fulghum，Julia E.；Yang，Jing；Felton，Linda.Physical Electronics USA，Inc.，Chanhassen，MN，USA，Drug Development and Industrial Pharmacy(2009)，35(4)，480-486.)。但这些技术都不能在很短的时间范围内精 确的检测极少量的物质。
人类味觉小组的研究，例如“舔和滚”的测试方法(一种涉及直接从服 用了片剂的患者中收集人类唾液的方法)不仅费时，而且需要 庞大而昂贵的临床研究。此外，传统的溶解法不能在溶解的初始阶段获取片 剂的溶出曲线，这是因为采样需要五分钟或更长的时间间隔。另一方面，传 统的如UV纤维光学和/或LC-UV方法，快速但灵敏性不足以在ng/mL水平 上精确地定量痕量的活性药物成分。因此，亟需开发一种可以克服现有技术 中已知方法或技术的弊端的新方法。
发明内容
一方面，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物以固体剂用于口 服，并含有包有水溶性聚合物包衣的治疗有效量的6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4- 甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡嗪或(S)-6-(5-氯 -2-吡啶基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡 嗪，或它们的盐，所述聚合物包衣为所述组合物重量的约2％到约10％。
另一方面，本发明提供了一种组合物，该组合物能够掩盖(6-(5-氯-2-吡 啶基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡嗪) 或(S)-(6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡 咯并[3，4-b]吡嗪)，或它们的盐的味道。
另一方面，本发明提供了一种制备药物组合物的方法，该方法包括：以 片剂的形式提供0.5到5mg的(6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰氧 基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡嗪)或(S)-(6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4- 甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡嗪)，或它们的 盐；以及使用含有纤维素衍生物的水分散液对该片剂进行喷雾包衣，以提供 为该组合物重量的约2％到约10％的包衣。
另一方面，本发明提供了一种检测包衣的固体口服剂型中外露核芯物质 的存在的方法，该剂型包括核芯以及包衣。该方法包括如下步骤：(a)提供体 外溶出介质；(b)将该包衣的固体口服剂型与该溶出介质接触；以及(c)使用液 相色谱和串联质谱(LC-MS/MS)，检测在将该包衣的固体口服剂型与该溶出 介质接触60秒之内，溶解在该溶出介质中的该核芯物质的量。使用该方法 可以用于检测在包衣的固体口服剂型表面的痕量的核芯物质，用以判断薄膜 包衣的缺陷，或预测薄膜包衣片让人不悦的味道。
本发明的目的还在于提供一种治疗、预防或改良患者的睡眠紊乱的方 法，该方法包括将上文所述的组合物给予有需要的患者。本发明进一步包括 一种治疗、预防或减轻患者的焦虑的方法，该方法包括将上文所述的组合物 给予有需要的患者。
另一方面，本发明提供了上文所述的组合物在制备治疗、预防或减轻睡 眠紊乱的药物中的应用。
另一方面，本发明提供了上文所述的组合物在制备治疗、预防或减轻焦 虑的药物中的应用。
附图说明
图1、图1显示了在不同溶出介质中3mg(艾斯佐匹克隆游离 碱)片剂的常规溶出曲线。
图2、图2显示了在不同溶出介质中3mg艾斯佐匹克隆马来酸盐片剂的 常规溶出曲线。
图3、图3显示了3mg商购的具有标准包衣(Opadry II，增重～4.5％)的 片剂的瞬时溶解曲线。
图4、图4显示了3mg具有Opadry TM包衣(增重～3.3％)的艾斯佐匹克 隆片剂的瞬时溶解曲线。
图5、图5显示了3mg具有Opadry TM包衣(增重～8％)的艾斯佐匹克隆 片剂的瞬时溶解曲线。
图6、图6显示了3mg具有标准包衣(Opadry II)和Opadry TM包衣(增 重约3.3％、6％和8％)的艾斯佐匹克隆片剂的瞬时溶解曲线的平均结果，n 为9-10个片剂。
具体实施方式
一方面，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物以固体剂用于口 服，并含有包有水溶性聚合物包衣的治疗有效量的(6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4- 甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡嗪)或(S)-(6-(5-氯 -2-吡啶基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡 嗪)，或它们的盐，所述聚合物包衣为组合物重量的约2％到约10％。在一些 实施方式中，该包衣的含有量介于该组合物重量的约3％到约8％之间，或者 优选的，含有量介于该组合物重量的约4％到约7％之间，或者更加优选的， 含有量介于该组合物重量的约4％到约6％之间。
在一些实施方式中，本发明提供了上文所述的药物组合物，其中，该包 衣含有至少一种纤维素衍生物。该纤维素衍生物可以选自由纤维素醚和纤维 素酯组成的组。在一些实施方式中，该包衣含有羟丙基甲基纤维素、羟丙基 纤维素、甲基纤维素、羟乙基纤维素或它们的混合物中的至少一种。
在本发明的一些实施方式中，该包衣含有tm(Colorcon，West Point，Pa.)。在其它实施方式中，本发明提供的是，该包衣含有至少一种味道 改造剂(taste modifying agent)。其它的包衣实例包括II与Clear(Colorcon，West Point，PA)的联用。
在一种优选的实施方式中，所述固体剂是片剂。
在一些实施方式中，该组合物能够掩盖(6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4-甲基-1- 哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡嗪)或(S)-(6-(5-氯-2-吡啶 基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡嗪)，或 它们的盐的味道至少约10秒，优选至少约20秒，更加优选至少约30秒。 在一些实施方式中，本发明的组合物能够掩盖艾斯佐匹克隆的味道约20秒， 或约30秒或约45秒。
在本发明的某些方面，该包衣含有至少一种纤维素醚、乳化剂和增塑剂。 增塑剂可添加到包衣配方中以调节物理性能。例如增塑剂可用于调节聚合物 的玻璃化转变温度(Tg)使其更加便于使用。Tg是指无定形聚合物(或部 分结晶聚合物的无定形区域)从硬以及比较脆的状态向粘性或弹性状态转变 的温度。增塑剂的功能是降低聚合物的Tg，使得在环境温度条件下的膜更 加柔软，更加可弯曲以及往往更强，从而能够更好地抵抗机械应力。增塑剂 的非限定性实例包括：分子量为200至8000的聚乙二醇，甘油，丙二醇， 三乙酸甘油酯，乙酰化单甘酯，柠檬酸三乙酯，柠檬酸三丁酯，乙酰柠檬酸 三乙酯，乙酰柠檬酸三丁酯，邻苯二甲酸二乙酯以及矿物油。在包衣的制作 中，乳化剂或乳化试剂可以用于促进实际的乳化，并且确保乳液在产品的保 质期内的稳定性。例如，天然存在的物质及其半合成的衍生物，如多糖，以 及甘油酯，纤维素醚，山梨醇酯和聚山梨酯，可用作乳化剂。可用于本发明 的乳化剂的非限定性实例包括聚山梨酯，聚乙烯(20)山梨醇酐单油酸酯， 吐温80以及十二烷基硫酸钠。包衣组合物中可以存在最多约2％重量的一种 或多种乳化剂，优选的是占包衣组合物重量的约0.1％到约0.5％。在包衣中， 可以含有已有的用于生产用于包衣片剂的包衣分散液的任何色素。例如FD &C和D&C lakes，钛白粉，碳酸镁，滑石粉，热解硅石(pyrogenic silica)， 氧化铁，槽法炭黑(channel black)和不溶性染料。还有如核黄素，胭脂红40， 姜黄素和胭脂树的天然色素。在一些实施方式中，本发明提供的是，该包衣 含有分别为重量比重量的约5-25％的二氧化钛，约25-70％的羟基丙基甲基 纤维素，约0-10％的聚乙二醇以及约0-2％的聚山梨酯。在其它实施方式中， 本发明提供的是，该包衣含有分别为重量比重量的约10-20％的二氧化钛， 约50-70％的羟基丙基甲基纤维素，约0-5％的聚乙二醇以及约0-1％的聚山梨 酯。
在一个优选的实施方式中，该包衣为即时释放包衣。在其它实施方式中， 可以使用肠溶包衣以及改变释放速率的包衣。例如，这样的包衣包括羟丙基 甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，醋酸纤维素，邻苯二甲酸醋酸纤维素，乙基 纤维素，明胶，制药釉，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯， 甲基丙烯酸共聚物，甲基纤维素，聚乙二醇，聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯 (polyvinyl acetate phthalate)，虫胶，蔗糖，二氧化钛，蜡，或玉米醇溶蛋白。 该包衣材料可进一步包括抗粘合剂，例如滑石粉；增塑剂(取决于包衣材料 的类型)，例如聚乙二醇，蓖麻油，二乙酰单甘酯，癸二酸二丁酯，邻苯二 甲酸二乙酯，甘油，丙二醇，三乙酸甘油酯，柠檬酸三乙酯；遮光剂，例如 二氧化钛；和/或着色剂和/或色素。
该包衣可以包括一种或多种适合调节释放或保护制剂的材料。在一种实 施方式中，所提供的包衣，例如当暴露于肠胃液中时，释放可以是pH-依赖 性或pH-非依赖性的。在一些实施方式中，多种活性剂可以制成单一制剂形 式。例如，pH-依赖性的包衣使得在胃肠(GI)道(例如胃或小肠)的期望区域 释放第一活性剂、第二活性剂或二者都释放，由此提供了能够为病人提供至 少约十二个小时，优选是二十四小时的治疗效益的吸收曲线。当期望包衣为 pH-非依赖性时，包衣旨在达到最优的释放，而无关于环境液体，例如胃肠 道的pH值变化。制剂组合物也有可能在胃肠道的某一期望的区域，例如在 胃中先释放部分剂量，然后在胃肠道的另外一个期望的区域，例如小肠中释 放剩下的剂量。在某些实施方式中，第一治疗剂在胃肠道的某一区域释放， 而第二治疗剂在胃肠道的另一区域释放。在某些实施例中，第一和第二治疗 剂在胃肠道的相同位置以几乎相等的量释放。
除了上述成分之外，包衣还可以含有适量的其它材料，例如制剂领域常 用的稀释剂，润滑剂，粘合剂，造粒助剂，着色剂，味道改造剂和助流剂。
在本发明的另一方面，包衣含有至少一种味道改造剂。此处所用的术语 “味道改造剂”是指能够遮蔽和/或改变活性成分味道的试剂。例如，味道改 造剂包括一种或多种甜味剂，调味剂和/或清凉剂。甜味剂可以是糖、糖的替 代品或它们的混合物。有用的甜味剂包括但不限于，糖，如蔗糖，葡萄糖(玉 米糖浆)，葡萄糖，转化糖，果糖，以及它们的混合物；糖精及其各种盐， 例如钠盐或钙盐；环己基氨基磺酸(cyclamic acid)及其各种盐，例如钠盐；二 肽甜味剂，例如阿斯巴甜，阿力甜，纽甜；三氯蔗糖，天然甜味剂，例如二 氢查尔酮化合物；甘草甜素(glycyrrhizin)；甜菊(甜菊糖)；糖醇，例如山梨 糖醇，山梨醇糖浆，甘露醇，木糖醇等等；合成甜味剂，例如安赛蜜-K及 其钠盐和钙盐等等，氢化淀粉水解物(莱卡生(lycasin))；基于蛋白质的甜味 剂，例如塔林(thaumaoccous danielli)和/或任何其他本领域已知的药学上可 接受的甜味剂，以及它们的混合物。
可以使用的调味剂包括本领域技术人员已知的，例如天然和人工调味 剂。这些调味料可以选自合成的调味油和调味芳烃，和/或油，油性树脂和植 物，树叶，花卉，水果等的提取物，以及它们的组合。代表性的调味油包括： 留兰香油，肉桂油，薄荷油，冬青，桉树丁香油，月桂油，百里香油，雪松 叶油，肉豆蔻油，鼠尾草油以及苦杏仁油。也可以用人造的，天然或合成的 调味料，例如香草，巧克力，咖啡，可可和包括柠檬，橘子，葡萄，酸橙， 葡萄柚的柑橘类植物油，和包括苹果，梨，桃，草莓，覆盆子，樱桃，李子， 菠萝，杏等水果的香精，例如麝香草酚，桉油精，樟脑，水杨酸甲酯，甲醛， 生姜之类的调味剂，例如柠檬酸，苹果酸之类的酸味剂。也可使用，例如醛 和酯调味料，包括乙酸肉桂酯，肉桂醛，柠檬醛，二乙缩醛，乙酸二氢葛缕 酯(dihydrocarvyl acetate)，甲酸丁香酚酯，对甲基茴香醚等。也可以使用可 以提供受热感觉的试剂。它包括但不限于甜椒(capsicum)，辣椒素，胡椒碱， 姜辣素，异硫氰酸酯，以及例如红辣椒(chili pepper)，辣根，生姜，黑胡椒 等等材料。通常，可以使用在Chemicals Used in Food Processing，publication 1274 by the National Academy of Sciences，第63-258页中所记载的任何调味 料或食品添加剂。这些调味料可以单独也可混合使用。
已知的清凉剂包括但不限于薄荷醇，取代的对-薄荷烷，例如，其羟甲 基和羟乙基衍生物，琥珀酸薄荷酯(PHYSCOOL)，乳酸薄荷酯(例如 FRESCOLAT)，N，N-二甲基薄荷基琥珀酰胺；取代的对-薄荷烷-3-氨甲酰， 例如N-乙基-对-薄荷烷-3-氨甲酰(WS-3)，N，2，3-三甲基-2-异丙基-丁唑酰胺 (WS-23)；无环氨甲酰，取代的环己酰胺，取代的环己烷氨甲酰，取代的 脲和磺胺，取代薄荷烷醇(substituted menthanols)；3-1-薄荷氧基丙烷-1，2-二 醇(3-1-menthoxy propan-1，2-diol)，薄荷氧基丙烷二醇(menthoxypropane diol)， 薄荷酮甘油缩酮(menthone glycerol ketals)，对-薄荷烷-3，8-二醇 (p-menthane-3，8-diols)，2-巯基环癸酮，2-异丙基-5-甲基环己醇 (ISOPREGOL)；异蒲勒醇(isopulegol)，荜澄茄醇(cubebol)，英西林(incilin)， 木糖醇、已知的具有清凉效果的其他化合物，以及它们的混合物。
此处所使用的术语佐匹克隆，6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰 氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡嗪和[8-(5-氯吡啶-2-基)-7-氧代 -2，5，8-三氮杂二环[4.3.0]壬基-1，3，5-三烯-9-基]4-甲基哌嗪基-1-羧酸酯 ([8-(5-chloropyridin-2-yl)-7-oxo-2，5，8-triazabicyclo[4.3.0]nona-1，3，5-trien-9-yl] 4-methyl piperazine-1-carboxylate)是指下面结构式所代表的化合物： 此处所使用的术语艾斯佐匹克隆，(S)-6-(5-氯-2-吡啶基)-5-[(4-甲基-1-哌嗪基)羰氧基]-7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯 并[3，4-b]吡嗪和[(9S)-[8-(5-氯吡啶-2-基)-7-氧代-2，5，8-三氮杂二环[4.3.0]壬基 -1，3，5-三烯-9-基]4-甲基哌嗪基-1-羧酸酯是指下面结构式所代表的化合物：
本发明的药物组合物既考虑外消旋混合物(也被称为佐匹克隆)，并在 某些实施方式中，又考虑单一对映体，例如，S-对映体(艾斯佐匹克隆)。 术语“佐匹克隆”，在没有其它修饰或限制时既包括立体异构体的混合物， 也包括基本不含其它立体异构体的单独立体异构体。例如，佐匹克隆可以含 有同一化合物立体异构体的非消旋混合物(例如，约90，80，70或60重量％ 的一种对映体以及约10，20，30或40重量％的相反对映体)；以及不同外消 旋或立体异构纯的化合物的混合物(例如，约90，80，70或60重量％的一种 化合物以及约10，20，30或40重量％的另外一种化合物)。艾斯佐匹克隆是 化合物佐匹克隆的S-(+)光学异构体，其记载在美国专利6,319,926、 6,444,673、Goa和Heel(Drugs，32：48-65(1986))以及美国专利3,862,149和 4,220,646中。接下来将使用USAN认证过的通用名称艾斯佐匹克隆表示这 个异构体，其包括光学纯以及基本上光学纯(例如90％，95％或99％光学纯) 的S-(+)-佐匹克隆异构体。
本发明的组合物可以通过本领域已知的技术来制备。在这方面，读者可 参考Remington′s Pharmaceutical Sciences，第19版，Mack Publishing，Easton Pa.(1995)，92和93章，其公开内容整体通过引用并入本发明。
在合成本发明的化合物时，所用的起始物以及某些中间体可以商购或可 以使用本领域已知的试剂和技术，包括本发明所描述的合成路线来合成。外 消旋的佐匹克隆可商购且可使用例如美国专利3,862,149和4,220,646所公 开的不同方法来制备。艾斯佐匹克隆可根据美国专利6,319,926公开的内容 来制备。
此处所记载的分析方法可以用来测定在包衣的固体口服剂型中外露核 心材料的存在。这种制剂包括至少核芯和包衣，并可以包括其它成分。被检 测的核芯材料可能是活性成分或者恰好是感兴趣的任何其它的核芯组分。通 常最感兴趣的组分是活性成分，但该方法也可以用于其它组分，例如粘合剂， 润滑剂，崩解剂等。在许多实施方式中，核芯是通过挤压获得的片芯。包衣 通常是膜的形式，其可以通过本领域公知的方法来实现，例如通过喷雾包衣。 这种技术记载于正规教科书中，例如Remington：The Science and Practice of Pharmacy第19版.(1995)第II卷，第1615-1659页，其通过引用并入本发 明。基于包衣的功能和性质，通常这种包衣的厚度从20微米到200微米， 并且重量为包衣剂型总重量的1-10％。由于片剂(特别是有浮雕图案的)上 的厚度是变化的，包衣通常使用增加的重量而不是厚度来进行测量。无论是 在薄膜包衣时(例如通过粉尘沉积)还是在包衣之后(例如通过薄膜的缺陷)， 核芯物质都可以到达包衣片剂的表面。当制剂给药时，既可以是设计的原因 也可以是成膜失效的原因，薄膜会有缺口，核芯物质同样会突破薄膜包衣。 在任意的这种情况下，都期望监控瞬间释放的微量(例口，小于999nM的或 小于99nM的溶液)核芯物质的存在。此处使用的“瞬时释放”是指包衣制剂 暴露到溶出介质之后60秒内。
在本发明的一个实施方式中，该方法包括如下步骤：(a)提供体外溶出介 质；(b)将该包衣的固体口服剂型与该溶出介质接触；以及(c)检测在将该包衣 的固体口服剂型与该溶出介质接触的60秒内，溶解在该溶出介质中的该核 芯物质的量。重复步骤(a)-(c)，据此绘制浓度/时间图。可以重复这些步骤， 以便以60秒时间循环多次测量核芯物质的浓度。还可以重复这些步骤，使 得即使在60秒内一次或多次测定浓度，浓度/时间图扩展到60秒时间循环之 外。测定时间和核芯物质浓度之间的关系可以通过：(a)在单一药水瓶中将一 个包衣固体口服剂型与溶出介质以一定的时间间隔重复接触；(b)在一系列药 水瓶中将一个包衣固体口服剂型与溶出介质以一定的时间间隔重复接触；或 者(c)以一定的时间间隔将一系列包衣固体口服剂型在一系列药水瓶中与溶 出介质接触。在接下来将会进一步详细描述这些过程。
在一些实施方式中，溶出介质是哺乳动物唾液或是化学上类似的含有淀 粉酶的溶液。唾液可以是人类唾液。唾液的浓度可以介于3％v/v到10％v/v 之间，溶出介质的其它组分是水或水溶液。在某些实施方式中，唾液或溶液 的浓度在5％左右。
在一些方面，本发明提供了使用上述的组合物治疗、预防或减轻多种紊 乱的方法。在一个实施方式中，本发明提供了治疗和/或预防睡眠紊乱的方法。
失眠以难以入睡或扰乱的睡眠模式为特征。失眠可以是与身体或心理事 件没有直接关系的原发状态，或者继发于某些继发性疼痛/焦虑或压力。
一方面，本发明提供了治疗或预防患者的睡眠紊乱，包括原发性失眠和 睡眠清醒节律紊乱(例如工作变动综合症，时区综合症(时差))的方法， 该方法包括将上述组合物给予有需要的患者，以使该组合物的给予治疗睡眠 紊乱。
另一方面，本发明提供了治疗或预防患者的焦虑的方法，该方法包括将 上述组合物给予有需要的患者，以使该组合物的给予治疗焦虑。
此处所用的术语“焦虑”是指焦虑症。通过在此公开的组合物和方法， 可治疗的焦虑症的实例包括但不限于：惊恐发作(panic attack)，广场恐怖症 (agoraphobia)，急性应激紊乱，特定恐惧症，恐慌症，精神活性物质焦虑症 (psychoactive substance anxiety disorder)，器质性焦虑症，强迫神经性焦虑症 (obsessive-compulsive anxiety disorder)，创伤后应激紊乱(posttraumatic stress disorder)和广泛性焦虑症(generalized anxiety disorder)。本文提及的焦虑，还 包括情境焦虑(situational anxiety)(例如，演员在演出之前所经历的)。
在一些方面，外消旋的佐匹克隆可以在此像所述的S型异构体艾斯佐匹 克隆一样以同样的方式使用。但是，公认的是使用艾斯佐匹克隆比使用外消 旋的佐匹克隆更有优势，因而在随后的许多应用中优选使用艾斯佐匹克隆。
术语“治疗”是指以治愈、愈合、缓和、缓解、改变、补救、减轻、提 高或影响疾病、疾病的症状或患病的倾向为目的，将在此所述的化合物给予 患者。
“治疗有效量”是指赋予所治疗患者治疗效果的化合物的用量。治疗效 果可以是客观的(即通过一些测试或标记来衡量)或主观的(即由患者给出 效果的暗示或感觉)。有效剂量也取决于不同的给药途径。
除非特别说明，在此所使用的术语“预防”和“预防性”是指预防在此 所述疾病的发病，复发或加剧。术语“预防”和“预防性”包括减轻和/或减 少在此所述疾病症状的发生。在此所使用的术语“预防”是指事先施用药物 以预防或延迟发作。医药领域普通的技术人员(本方法的要求所指向的)认 识到术语“预防”并不是一个绝对化的术语。在医药领域，它被解释为是指 预防性的给药以大幅减少发病的可能性或严重性，这也是申请人所要求的含 义。读者应该注意到本领域的正规工具书Physician’s Desk Reference，其中 术语“预防”出现了数百次。医药领域的技术人员没人以绝对的语言来解释 该术语。
在接下来的实施例中证明，上述包衣组合物相比于未包衣的化合物表现 出改善口味的特性。
在此所述的药学上的组合物或剂型含有一种或多种活性成分。典型的药 物组合物和剂型还包括一种或多种药学上可接受的赋型剂或稀释剂。
在此所使用的术语“药学上可接受的”是指在合理的医疗判断范围之内， 组分适合用于与人或其它哺乳动物的组织接触，而没有不必要的毒性，刺激 性，过敏性反应等，并且具有合理的收益/风险比。“药学上可接受的盐”是 指任何可以通过本发明的化合物或其前药直接或间接提供的，对给药受试者 无毒的盐。优选的药学上可接受的盐包括马来酸盐，苯磺酸，L-苹果酸盐， 甲磺酸盐，(R)-扁桃酸盐(mandelate)，琥珀酸盐，柠檬酸盐，富马酸盐，D- 苹果酸盐，D-酒石酸盐，硫酸盐，L-酒石酸盐和糖精的盐。
本发明也涉及含有有效量的佐匹克隆、艾斯佐匹克隆或它们的盐以及可 接受的载体的组合物。载体必须是“可接受的”，含义是指能够与制剂中的 其它成分兼容，而在药学上可接受的载体的情况下，其药学上的常规用量对 受试者是无害的。
本发明的药物组合物可以使用的药学上可接受的载体、辅料以及介质包 括但不限于离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白，诸如人血 白蛋白，缓冲物质，诸如磷酸盐，甘氨酸，山梨酸，山梨酸钾，饱和植物油 脂肪酸的偏甘油酯混合物，水，盐或电解质，诸如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二 钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐，胶体二氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮， 纤维素基物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸，蜡，聚乙烯-聚环 氧丙烷嵌段聚合物，聚乙二醇和羊毛脂。
制备方法包括将施用的组分与由一种或多种辅助组分组成的载体进行 组合的步骤。通常，可通过将活性成分与液体载体、脂质体或极细的固体载 体或其组合均匀和充分地混合，然后根据需要将产品成型来制备组合物。
单一剂型适合口服给予患者。剂型的实例包括但不限于：片剂，囊片剂 (caplets)，胶囊剂，诸如弹性明胶软胶囊和扁囊剂。
剂型的组成、形状和类型通常取决于其用途。本发明中一种特定剂型具 有与其它剂型不同的途径，这对本领域的技术人员来说是显而易见的。参见， 例如，Remington′s Pharmaceutical Sciences，op.cit。
典型的药物组合物和制剂含有一种或多种赋形剂。合适的赋形剂是药剂 学领域的技术人员所公知的，并且在此记载了合适的赋形剂的非限定性实 例。特定赋形剂的适用性还取决于剂型中特定的活性成分。例如，一些辅料 会加速一些活性成分的分解，例如乳糖，或者暴露于水中。本发明所包括的 药物组合物和剂型，如果有的话，几乎不含有乳糖或其它单糖或双糖。本发 明所使用的术语“不含乳糖”的含义是，如果有的话，乳糖存在的量不足以 实质上加快活性成分的降解速度。
不含乳糖的佐匹克隆组合物可以含有本领域公知的赋形剂。通常，不含 乳糖的组合物包括活性成分，和药学上兼容的以及药学上可接受量的粘合剂 /填料以及润滑剂。优选的不含乳糖的制剂包括活性成分，微晶纤维素，预胶 化淀粉和硬脂酸镁。
由于水可以促进某些化合物的降解，本发明还包括含有活性成分的无水 药物组合物和剂型。例如，加水(如5％)来模拟长期储存以确定制剂的保 质期或配方的长期稳定性等是一种在制药领域被广泛接受的方式。参见，例 如Jens T.Carstensen，Drug Stability：Principles & Practice，2d.Ed，Marcel Dekker，NY，N.Y.，1995，第379-380页。水和加热具有加速某些化合物的降解 的作用。由于在生产，搬运，包装，储存，装运和使用配方时通常会遇到的 水分和/或湿度，因此，配方中水的作用具有十分重要的意义。
无水的药物组合物和剂型可以使用无水或低水分的成分以及低水分或 低湿度的条件来制备。如果预期在生产，包装和/或储存过程中会与水分和/ 或湿度有实质性接触，含有乳糖和至少一种含有伯胺或仲胺的活性成分的药 物组合物和剂型优选是无水的。
无水药物组合物在制备和储存时都必须保持其无水的特性。因此，无水 组合物优选使用已知的能够防止与水接触的材料进行包装，例如，可以装入 到合适的配方试剂盒中。合适的包装的实例包括但不限于密封的箔，塑料， 单位剂量容器(例如药水瓶)，泡罩包装和带型包装。
本发明进一步包括含有能够降低活性成分降解速率的一种或多种化合 物的药物组合物和制剂。这类化合物，在此称为“稳定剂”，包括但不限于 抗氧化剂如抗坏血酸，pH缓冲液，或盐缓冲液。
适合口服给药的药物组合物可以以分离的剂型呈现，例如，但不限于片 剂(例如咀嚼片)，囊片剂和胶囊剂。这些制剂包括预设量的活性成分，并 通过本领域熟知的制药方法来制备。一般参见Remington′s Pharmaceutical Sciences，第19版，Mack Publishing，Easton Pa.(1995)。
口服制剂可以通过常规的药物配制技术将活性成分与至少一种辅料紧 密的掺和在一起来制备。取决于给药所期望的制剂的剂型，辅料可以采取多 种多样的类型。适用于固体口服剂型(例如粉剂，片剂，胶囊剂和囊片剂) 的辅料的实例包括但不限于淀粉，糖，微结晶纤维素，稀释剂，造粒剂，润 滑剂，粘合剂和崩解剂。
例如，片剂可以通过压缩或注塑来制备。压缩片剂可以通过将自由流动 (例如粉末或颗粒)形式的活性成分，任选与一种辅料混合，在合适的机器 中挤压来制备。塑型片剂可通过将惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混 合物在合适的机器中成型来制备。
可以用于口服制剂的辅料的实例包括但不限于粘合剂，填充剂，崩解剂 以及润滑剂。适用于药物组合物和制剂的粘合剂包括但不限于玉米淀粉，马 铃薯淀粉或其它淀粉，明胶，天然和合成的胶，诸如阿拉伯树胶(acacia)，褐 藻酸钠，褐藻酸，其它褐藻酸盐，粉状黄蓍胶，瓜尔豆胶，纤维素及其衍生 物(如乙基纤维素，醋酸纤维素，羧甲基纤维素钙，羧甲基纤维素钠)，聚 乙烯吡咯烷酮，甲基纤维素，预胶化淀粉，羟丙基甲基纤维素(例如2208 号，2906号，2910号)，微晶纤维素，以及它们的混合物。
适用于药物组合物和制剂的填充剂包括但不限于滑石粉，碳酸钙(例如 颗粒或粉末)，微晶纤维素，粉状纤维素，葡萄糖结合剂(dextrates)，高岭 土，甘露醇，硅酸，山梨糖醇，淀粉，预胶化淀粉，以及它们的混合物。本 发明药物组合物中粘合剂或填充剂的典型用量为药物组合物或制剂重量的 约50％到约99％。
崩解剂可用于使片剂与有水的环境接触时崩解。崩解剂太多会使片剂在 储存时就崩解，而如果太少，则崩解的速率达不到期望值或者在期望的条件 下不崩解。因此，本发明的固体口服制剂中应该有足够量的崩解剂，太多或 太少都不利于活性成分的释放。崩解剂的用量取决于配方的类型，这对本领 域的普通技术人员来说是可知的。典型的药物组合物含有约0.5到约15重量 ％的崩解剂，优选含有约1到5重量％的崩解剂。可以用于本发明的药物组 合物和制剂的崩解剂包括但不限于琼脂，褐藻酸，碳酸钙，微晶纤维素，交 联羧甲纤维素钠，交聚维酮，波拉克林钾(polacrilin potassium)，乙醇酸淀粉 钠，马铃薯或木薯淀粉，其他淀粉，预糊化淀粉，其他淀粉，粘土，其它海 藻酸，其他纤维素，树胶及其混合物。
可用于本发明药物组合物和制剂的润滑剂包括但不限于硬脂酸钙，硬脂 酸镁，矿物油，轻矿物油，甘油，山梨醇，甘露醇，聚乙二醇，其它二醇， 硬脂酸，十二烷基硫酸钠，滑石粉，氢化植物油(例如花生油，棉籽油，葵 花籽油，芝麻油，橄榄油，玉米油和大豆油)，硬脂酸锌，油酸乙酯，乙基 月桂酸，琼脂，以及它们的混合物。其它润滑剂包括，例如，消光硅胶 (AEROSIL 200，由W.R.Grace Co.ofBaltimore，Md.生产)，合成硅胶的凝聚 型气溶胶(由Degussa Co.of Plano，Tex.销售)，CAB-O-SIL(由Cabot Co.of Boston，Mass销售的焦化而成的二氧化硅产品)，以及它们的混合物。如果使 用，润滑剂的典型用量不超过所要加入的药物组合物或制剂的约1重量％。
艾斯佐匹克隆，佐匹克隆，及其马来酸盐，苯磺酸盐，L-苹果酸盐，甲 磺酸盐，(R)-扁桃酸盐，琥珀酸盐，柠檬酸盐，富马酸盐，D-苹果酸盐，D -酒石酸盐，硫酸盐或L-酒石酸盐的给药剂量，例如介于约0.001到约 0.2mg/kg体重范围，或者剂量介于0.1mg到15mg/剂，或者依据特定治疗的 需求而定。此处的方法包括给予有效量的化合物或化合物的组合物以实现所 需的或所述的效果。典型的，本发明的药物组合物每天给药约1到约6次或 者持续输药。这样的给药可以用于慢性或急性治疗。可与载体材料组合并以 形成单一剂量形式的活性成分的量可根据待治疗的受体、特定的施用模式而 变化。在一些实施方式中，这类制剂中含有约20％到约80％(w/w)的活性化 合物。在一些实施方式中，这类制剂中含有约0.5％到约20％(w/w)的活性化 合物。典型的制剂中含有约0.5％到约5％(w/w)的活性化合物。
相比于上文提到的那些剂量，可以使用更低或更高的剂量。用于特殊患 者的特定剂量和治疗方案取决于多种因素，包括所使用的特定化合物的活 性，年龄，体重，一般健康状况，性别，饮食，用药时间，排泄率，药物的 组合，疾病的严重性和进程，条件或症状，患者疾病的处置，条件或症状， 以及医师的判断。
就像辅料的用量和类型一样，剂型中活性成分的用量和特定种类因多个 因素而有所不同，例如但不限于患者的给药途径。在治疗人时，剂量取决于 所谋求的效果以及治疗的时长；成人通常每天口服0.5到15mg。在很多应用 中，合适的单位剂量含有0.5mg，1mg，2mg或3mg艾斯佐匹克隆或它们的 盐。在一些实施方式中，可以调节艾斯佐匹克隆盐的单位剂量使其含有相当 于0.5mg，1mg，2mg或3mg艾斯佐匹克隆游离碱的摩尔量。
另一方面，本发明涉及新的瞬时溶解法，其在测定片剂表面的活性成分 以及评价薄膜包衣效率上具有精确性、重复性和实用性。通过使用含有水性 人唾液溶液的早期溶出溶液，这个方法允许快速和精确的测定痕量级存在的 活性成分或者其它包衣口服剂型中核芯的其它组分的浓度。此外，通过瞬时 溶解法所获得的结果与人类味觉小组的研究结果的相关性很好，从而有助于 预测这类研究的结果。
包衣片剂的瞬时溶解溶液的典型制备步骤如下：随机选择含有核芯和薄 膜包衣的片剂(此处是艾斯佐匹克隆包衣片剂)，然后使用长柄(由不锈钢 管制成)将其放置到沉没筐(basket sinker)(例如，Hanson Research Part # ENMISC，BSK008-JP 8mesh，0.76”L x 0.41”W)中。随后沉没筐浸入到 药水瓶1的溶出稀释液(例如，5％人类唾液溶液)中2-5秒，然后将相同的 片剂转移到药水瓶2中浸渍2-5秒，依此类推。溶出稀释液(例如，5％人类 唾液的水溶液)可以通过在合适的容器中将约50mL普通人类唾液与约 950mL水直接混合来制备。将约5mL 5％人类唾液溶液移液到几个闪烁瓶 (scintillation vial)(体积为20mL左右)中。这个过程所用的包衣片剂含有约 2-4％重量的包衣。
另外，上文所述的浸渍实验通过将筐中的片剂沉浸到药水瓶1的溶出稀 释液(例如，约5％人类唾液的水溶液)中进行，以每两秒浸泡一次的速度 上下移动框约2-5秒钟；将筐移出稀释液；提取稀释液的样品；重新将片剂 沉浸到相同的药水瓶中。继续实验，同样的收集样品，直到片剂崩解或者到 预选的时间，以先到者为准。在一个实施方式中，每个药水瓶中使用新的片 剂。使用另外9个或10个片剂(总共10个片剂)重复所述的实验。然后使 用LC/MS/MS(ESI模式，正离子MRM扫描类型)来测定样品中活性成分， 例如艾斯佐匹克隆的浓度。通过几秒钟内艾斯佐匹克隆的对数浓度随时间变 化的点值来创建片剂的瞬时溶解曲线。
包衣片剂的瞬时溶出溶液的另外一个典型制备步骤如下：将一定数量的 含有核芯和薄膜包衣的片剂(此处是艾斯佐匹克隆包衣片剂)转移到沉没筐 中，并放置到一系列的含有溶出稀释液的药水瓶中。随后将筐沉浸到溶出稀 释液(例如，5％人类唾液水溶液)中，在药水瓶1中5秒，在药水瓶2中 10秒，在药水瓶3中15秒，系列的片剂依此类推。溶出稀释液(例如，5％ 人类唾液的水溶液)可以通过在合适的容器中将50mL普通人类唾液与 950mL水直接混合来制备。将约5mL 5％人类唾液溶液移液到几个闪烁瓶(体 积为20mL左右)中。这个过程所用的包衣片剂含有约3-8％重量的包衣。
在上述的每一个方案中，使用LC/MS/MS(ESI模式，正离子MRM扫 描类型)来测定样品中活性成分，例如艾斯佐匹克隆的浓度。通过艾斯佐匹 克隆的对数浓度随时间(以秒计)变化的点值来创建片剂的瞬时溶出曲线。
合适的溶出稀释液包括水，水溶液，水和有机溶剂的共溶剂，人类的唾 液溶液，模拟人类唾液的溶液(尤其是含有淀粉酶的生理盐水)，缓冲溶液， 0.01-0.1N的HCl溶液，以及任何能够瞬时溶解活性成分和崩解片剂的其它 溶液。
在此所述的瞬时溶解方法包括使用LC/MS/MS技术检测瞬时溶解溶液 中的活性成分的浓度的步骤。特别的，LC/MS/MS的过程包括：在6000xg 下离心上面的瞬时溶出溶液的样品5分钟(如果样品出现浑浊)以获得澄清 溶液；取上清液或澄清溶液，并加入到HPLC的自动取样器中。如果活性成 分的浓度超出了测定范围的上限(100ng/mL)，样品溶液将会进一步稀释， 例如，将100μL的离心样品溶液移液到4.9mL的样品稀释液中；如果稀释 的样品仍然超出测定范围的上限，可以使用含有内标的稀释溶液进行一连串 的稀释。最终的稀释样品的浓度应该落入测定范围之内。
合适的LC技术包括HPLC和UPLC。HPLC/MS/MS包括两部分：一部 分是HPLC，其用于从样品基质中分离活性成分；第二部分是质谱(MS)或 串联质谱(MS/MS)，用于检测活性成分。典型的HPLC色谱条件如下：
典型的质谱参数和条件如下：
HPLC和MS的参数都可以通过调节来优化分离和灵敏度。
典型的HPLC-MS/MS分析：在系统适应性进样完成之后，每个样品溶 液单独进样。记录活性成分，例如艾斯佐匹克隆，与内标(例如(RS)-佐匹克 隆-d8)的峰面积的比值。通过将样品/内标峰面积的比值(y)代入标准曲线， 然后使用1.4.1或更高版本的Analyst软件计算得到x轴上的浓度比值，从而 计算得出样品中活性成分，例如艾斯佐匹克隆的浓度。分别计算并记录每一 个时间点的浓度值和平均浓度值，绘制单个片剂的浓度(ng/mL)与时间(秒) 的函数，如图3、图4或图5所示。也可以绘制平均浓度(ng/mL)与时间 (秒)的函数，如图6所示。
HPLC-MS/MS方法的验证结果汇总于下表中：
为了与本发明所公开的方法进行对比，使用Hanson Research SR8-Plus Dissolution Apparatus and C-Technologies Fiber Optic UV Probes在305nm(减 去410nm处辅料的吸收)处测定在生理温度(37℃)时在不同pH值的溶出 介质中含有3mg艾斯佐匹克隆游离碱或3mg艾斯佐匹克隆马来酸盐的片剂 的常规溶出。典型的溶出介质包括0.1N的盐酸，pH4.5的醋酸缓冲液，pH5.5 的磷酸盐缓冲液和pH6.8的磷酸盐缓冲液。使用了标准的溶出方案。通过称 取已知重量(～20mg)的艾斯佐匹克隆游离碱然后加入到100mL容量瓶中来 制备标准的参比溶液(0.006mg/mL艾斯佐匹克隆游离碱)。在容量瓶中加入 10mL乙腈并超声直到固体完全溶解。将溶液冷却到室温，使用溶出介质补 充到100mL的标记处并充分混合。使用溶出介质将3mL这种原液稀释到 100mL。溶出设备的6个容器中每个都转入500mL体积的溶出介质并加热到 37℃。光纤探针浸没在每个溶出容器中，并为溶出介质中的所有探针的空白 值进行读数。每个单独容器的读数作为基准记录下来。然后使用介质清洗探 针并插回到各自的容器中。每个容器中转入一个片剂。溶出程序立即开始， 并记录60分钟内305nm处的读数(20分钟内每分钟记录一次，然后每10 分钟记录一次)。艾斯佐匹克隆片剂游离碱和艾斯佐匹克隆马来酸盐片剂的 常规曲线分别如图1和图2所示。
图1和图2显示了常规的溶出方法有助于检测超过45-60分钟范围的片 剂的溶出曲线并且其检测限为μg/mL到mg/mL级。
图3-6清楚的显示本发明所公开的瞬时溶出方法能够检测2-30秒、2-60 秒或2-120秒内包衣片剂的溶出曲线并且其检测限低于999ng/mL。
适用于通过上面所讨论的分析方法进行研究的活性成分包括任何可纳 入到片剂中的药用化合物。实施例中所示的药用化合物具有难闻的味道。其 包括艾斯佐匹克隆游离碱，艾斯佐匹克隆L-苹果酸盐，艾斯佐匹克隆马来酸 盐或其它酸添加盐；在某些情况下，活性成分是艾斯佐匹克隆游离碱。
在另一方面，本发明涉及瞬时溶出法在预测人类味觉临床研究的结果或 人类味觉临床研究数据的相关性上的应用。人类味觉临床研究也指“舔和滚 (Lick and Roll)”测试。典型的“舔和滚”测试过程包括：将训练为感官小 组成员的健康受试者中进行两部分研究。虽然研究是开放标记的，因此成员 知道所有的片剂都是有活性的，但是片剂包衣的6个可选项是不告知的并经 过检测的。味觉成员使用定性感官分析的味道图示法(the Flavor Profile method of descriptive sensory analysis)(Keane，1992)的强度等级来衡量片剂苦 味的不同。使用7个点表示0到3之间的类型量表，其中0表示无而3表示 强烈。在第1部分，成员通过几何体的表面的固定顺序，侧边以及两个面， 舔片剂的表面(“舔测试”)来评估片剂，每个几何体重复评估六次。在每个 评估中，成员记录达到中等强度2的苦味时舔的次数。在第2部分，成员通 过在口腔中轻轻的滚动片剂来评估片剂(“滚测试”)，评估重复三次。在每 次评估中，成员记录达到中等强度2的苦味时滚动的秒数。在实施例5中详 细描述了该应用的结果。
综上所述，通过经过味觉训练的成员的测定，不同包衣配方和包衣重量 的片剂在苦味的突破性有显著性的差异。应用透明包衣或改变包衣配方，例 如Opadry TM，通过增加包衣的重量可以延迟苦味的突破性。“舔和滚”方 法的数据与瞬时溶出方法的数据具有很好的一致性。因此，瞬时溶出方法可 以用于预测人类味觉临床研究的结果。
包衣的一般步骤
制备包衣悬浮液：纯水与水溶性聚合物包衣在室温(20℃-25℃)下搅拌混 合。包衣悬浮液中固体与水的比值(即固体含量)为约2％到约20％(wt/wt)， 优选为约3％到约15％(wt/wt)，以及更加优选为约7％到约13％(wt/wt)。混合 时的搅拌速度为500到1000rpm，时长在20到60分钟之间。分离包衣悬浮 液的样品并测量其粘度。随后混合物低速搅拌混合至少60分钟进行脱气。
包衣步骤：将固体制剂核芯(例如片剂)加入到适当的包衣设备中。基 于所选择的包衣装置，合适的包衣条件的范围会有差异；这些差异可能是所 制备的包衣悬浮液中固体与水的比值，目标入口温度，喷液速度，喷嘴压力， 盘速度(pan speed)和空气的流动，等等。在本发明中不同条件的设置范围取 决于批次和设备的大小。
接下来说明本发明的非限定性实施例。
实施例1——3mg艾斯佐匹克隆的包衣片剂(tm包衣)
使用Opadry包衣悬浮液对18千克艾斯佐匹克隆核芯(每片3.0mg)进 行包衣。在24℃下，使用14.58kg纯水与1.62kg Opadry tm(07F99077，Blue) 搅拌(750rpm)混合45分钟来制备本实施例中的Opadry悬浮液，固体含量 为10％。分离100g包衣悬浮液，其粘度为336.5cP(25℃)。随后混合物低速 搅拌混合一小时进行脱气。
将18kg核芯包衣(艾斯佐匹克隆3.0mg，除尘的单个核芯)加入到含 有4个混合挡板的24英寸的O’Hara Labcoat Model IIX盘中，使用蠕动泵、 96440-25 Masterflex管，2个系统喷射枪(SUV113A)，VF-3578-SS或 VF-3578-316SS喷嘴以及VA113293-60-316SS或CO-VF-3578-SS气帽进行 包衣。两个喷射枪设定为35g/min(总喷射速度为70g/min)。100分钟后， 实现了所期望的4.5％重量的包衣。喷射条件如下：
最终的包衣片剂通过记录100片片剂样品的重量来评估，在研钵中研磨 这100片片剂，研碎并使用Mettler水分平衡来测定干燥样品的失重(5g样 品大小，105℃，50秒内5mg自由关机模式)。使用激光诱导分解光谱仪来 评价包衣片剂中包衣的均匀性。
实施例2——在1kg规模上研究固体含量的范围。7％和10％固体含量的 样品具有类似的外表，而13％固体含量的表面比较粗糙。下表显示了粘度结 果和实现4％包衣重量增加所需要的运行时间
实施例3-味道评估
用开放标记的多剂量的艾斯佐匹克隆片剂的味道分析研究进行味道评 估。为了测试上述组合物，味道图示小组成员包括4个具有普通嗅觉和味觉 的人，并在基本的感官规则以及味道图示技术的所有方面进行了培训，是经 验相当丰富的小组成员。用于分析的样品是均匀的并且具有代表性。对样品 的制备和展示进行了规范和控制。
味道图示是公知用于测定产品和辅料的类型和强度的定性感官分析方 法。[参见Keane，P.The Flavor Profile Method.C.Hootman(Ed.)，Manual on Descriptive Analysis Testing for Sensory Evaluation ASTM Manual Series：MNL 13.Baltimore，MD.(1992).]。基于这样的概念，味道包括可识别的口感，气 味(香味)，和化学药品的感觉属性，再加上底层无法单独区分的复杂属性。 该方法包括描述和评估可重复生产的产品的味道的正式程序。
片剂包衣的每个表面，包括每个片剂的侧边和面，被每个感官成员测试 六次。在每次舔之后，成员等待几秒以感知可能的苦味。使用味道图示强度 等级(如下所示)来获得苦味强度的结果，并记录达到中等(2)苦味时舔 的次数。
测试六个不同类型的艾斯佐匹克隆片剂，其不同在于包衣类型，厚度以 及除尘的量：
采用重复测量方差分析(ANOVA)来分析数据，并且侧边和面上的数据分 别分析。用Bonferroni两两对比检验来确定样品类型之间的显著性差异。面 和侧边的数据是高度相关的(r＝0.94，数据未显示)，并且苦味突破片剂的面 比侧边需要更长的时间。
对于平均舔到苦味穿透的次数，发现包衣的类型具有显著性的差异，如 图1所示。在该图中，共用同一垂直线的包衣样品没有统计上的差异。
包衣类型分为三个不同的组：
组III：相比于其它组，Opadry tm(4.5％包衣，TM)，Opadry II(7.5％包衣， OC)以及Opadry II加Opadry Clear(4.5％和1-2％单独包衣；CC)需要更多次 的舔才能使得苦味穿透。
组II：双重除尘的Opadry II(4.5％包衣，DD)和未除尘的Opadry II(4.5％ 包衣，ND)。除尘对降低苦味的穿透没有效果。
组I：Opadry II(2.5％包衣，UC)产生最快速的苦味穿透。
可以通过改变活性成分与药学上可接受载体的比例、挤压重量或者使用 不同的冲压机来制备其它强度的片剂。
实施例4——商购的3mg Lunesta片剂的常规溶出
使用Hanson Research SR8-Plus Dissolution Apparatus and C-Technologies Fiber Optic UV Probes在305nm(减去410nm处辅料的吸收)处测定在生理 温度(37℃)时在不同pH值的溶出介质中含有3mg艾斯佐匹克隆游离碱片 剂的常规溶出。所使用的溶出介质为(a)通过混合50mL浓HCl与6L水来制 备pH值为1的0.1N HCl溶液；(b)通过在6L水中溶解5.88g三水合醋酸钠， 并使用醋酸调节pH值到4.5来制备pH值为4.5的醋酸缓冲溶液(20mM)； (c)通过在6L水中溶解16.3g磷酸二氢钾，并使用NaOH调节pH值到5.5来 制备pH值为5.5的磷酸缓冲溶液(20mM)；(d)通过在6L水中溶解16.3g磷 酸二氢钾，并使用NaOH调节pH值到6.8来制备pH值为6.8的磷酸缓冲溶 液(20mM)。使用标准的溶出方案。通过称取已知重量(～20mg)的游离艾 斯佐匹克隆然后加入到100mL容量瓶中来制备标准溶液(0.006mg/mL艾斯 佐匹克隆游离碱)。在容量瓶中加入10mL乙腈并超声直到固体完全溶解。将 溶液冷却到室温，使用介质补充到100mL体积的标记处并充分混合。使用 介质将3mL这种原液稀释到100mL。溶出设备的6个容器中每个都转入 500mL体积的溶出介质并加热到37℃。光纤探针浸没在每个溶出容器中， 并为溶出介质中的所有探针的空白值进行读数。每个单独容器的读数作为基 准记录下来。然后使用介质清洗探针并插回到各自的容器中。片剂转移到单 个容器中。溶出程序立即开始，并记录60分钟内305nm处的读数(20分钟 内每分钟记录一次，然后每10分钟记录一次)。商购的3mg Lunesta片剂在 不同介质中的溶出曲线如图1所示。
实施例5——商购的3mg艾斯佐匹克隆甲酸盐片剂的常规溶出
使用Hanson Research SR8-Plus Dissolution Apparatus and C-Technologies Fiber Optic UV Probes在305nm(减去410nm处辅料的吸收)处测定在生理 温度(37℃)时在不同pH值的溶出介质中含有3mg艾斯佐匹克隆甲酸盐片 剂随时间的溶出。所使用的溶出介质为(a)通过混合50mL浓HCl与6L水来 制备pH值为1的0.1N HCl溶液；(b)通过在6L水中溶解5.88g三水合醋酸 钠，并使用醋酸调节pH值到4.5来制备pH值为4.5的醋酸缓冲溶液(20mM)； (c)通过在6L水中溶解16.3g磷酸二氢钾，并使用NaOH调节pH值到5.5来 制备pH值为5.5的磷酸缓冲溶液(20mM)；(d)通过在6L水中溶解16.3g磷 酸二氢钾，并使用NaOH调节pH值到6.8来制备pH值为6.8的磷酸缓冲溶 液(20mM)。使用标准的溶出方案。通过称取已知重量(～20mg)的游离艾 斯佐匹克隆然后加入到100mL容量瓶中来制备标准溶液(0.006mg/mL游离 的艾斯佐匹克隆)。在容量瓶中加入约10mL乙腈并超声直到固体完全溶解。 将溶液冷却到室温，使用介质补充到100mL的标记处并充分混合。使用介 质将3mL这种原液稀释到100mL。溶出设备的6个容器中每个都转入500mL 体积的溶出介质并加热到37℃。光纤探针浸没在每个溶出容器中，并为溶出 介质中的所有探针的空白值进行读数。每个单独容器的读数作为基准记录下 来。然后使用介质清洗探针并插回到各自的容器中。片剂转移到单个容器中。 溶出程序立即开始，并记录60分钟内305nm处的读数(20分钟内每分钟记 录一次，然后每10分钟记录一次)。3mg艾斯佐匹克隆甲酸盐的片剂的溶出 曲线如图2所示。
实施例6——标准包衣(2-4.5％重量增加)的3mg艾斯佐匹克隆片剂的 瞬时溶出
这个过程适用于制备艾斯佐匹克隆片剂或任何重量增加较少(2-4.5％标 准包衣重量增加)的包衣片剂的瞬时溶出溶液。使用HPLC/MS/MS方法来 获得艾斯佐匹克隆片剂在5％人类唾液水溶液中的瞬时溶出曲线。通过50mL 普通人类唾液(收集的，特别是Biochemed提供的)和950mL水(Milli-Q) 在合适的容器中直接混合来制备5％人类唾液水溶液。在制备瞬时溶出样品 溶液时，5mL(使用5mL Eppendorf移液管)5％人类唾液水溶液被移液到多 个闪烁瓶(体积为20mL左右)中。使用长柄(由不锈钢管制成)将片剂放置到沉没筐(例如，Hanson Research Part # ENMISC，BSK008-JP 8 mesh，0.76”L x 0.41”W)中。随后将筐浸没到药水瓶1中2秒，然后移 到药水瓶2中浸渍2秒，依此类推。当片剂开始崩解时实验停止。使用另外 9个或10个片剂(总共10个片剂)重复所述的实验。使用LC/MS/MS(ESI 模式，正离子MRM扫描类型)来测定样品中艾斯佐匹克隆的浓度。通过几 秒钟内艾斯佐匹克隆的对数浓度随时间变化的点值来创建片剂的 瞬时溶解曲线，如图3和图4所示。
实施例7——TM包衣(3-8％增重)的3mg艾斯佐匹克隆片剂的瞬时溶 出
这个过程适用于制备Lunesta片剂或任何重量增加较多(3-8％TM包衣 增重)的包衣片剂的瞬时溶出溶液。使用HPLC/MS/MS方法来获得(艾斯佐匹克隆)片剂在5％人类唾液水溶液中的瞬时溶出曲线。通过50mL 普通人类唾液(收集的，特别是Biochemed提供的)和950mL水(Milli-Q) 在合适的容器中直接混合来制备5％人类唾液水溶液。在制备瞬时溶出样品 溶液时，5mL(使用5mL Eppendorf移液管)5％人类唾液水溶液被移液到多 个闪烁瓶(体积为20mL左右)中。使用长柄(由不锈钢管制成)将片剂放置到沉没筐(例如，Hanson Research Part # ENMISC，BSK008-JP 8 mesh，0.76L x 0.41W)中。片剂一直保持在液面以下，并且筐以每2秒钟浸 泡1次左右的速度上下移动10秒。使用单独的片剂和药水瓶重复这个过程 5-10次。闪烁瓶进行相应的标记(例如10-1，10-2等等直到10-6)。这个实 验在新的分别含有溶出稀释液(例如，5％人类唾液溶液)的药水瓶中类似 的进行，直到片剂崩解，或者直到片剂崩解，以先到者为准。然后使用 LC/MS/MS(ESI模式，正离子MRM扫描类型)来测定样品中活性成分， 例如艾斯佐匹克隆的浓度通过几秒钟内艾斯佐匹克隆的对数浓度随时间变 化的点值来获得片剂的瞬时溶解曲线，如图5或图6所示。
虽然上面的瞬时曲线的实施例涉及检测活性成分的存在，这个方法同样 能够用于检测其它核芯物质的浓度，这对技术人员来说是显而易见的。例如， 如果片剂核心包括其它具有刺激性气味的活性成分，也可以使用相同的方法 来检测该成分的穿透性。
实施例8——TM包衣的艾斯佐匹克隆片剂的人类味觉临床“舔和滚” 研究
方法：在训练为感官小组成员的健康受试者中进行两部分研究。尽管研 究是开放标记的，因此成员知道所有的片剂都是有活性的，但是片剂包衣的 6个可选项是不告知的并经过检测的。味觉成员使用定性感官分析的味道图 示法(Keane，1992)的强度等级来衡量片剂苦味的不同。使用7个点表示0到 3之间的类型量表，其中0表示无而3表示强烈。在第1部分，成员通过几 何体的表面的固定顺序、侧边以及两个面，舔片剂的表面(“舔测试”)来评 估片剂，每个几何体重复评估六次。在每个评估中，成员记录达到中等强度 2的苦味时舔的次数。在第2部分，成员通过在口腔中轻轻的滚动片剂来评 估片剂(“滚测试”)，评估重复三次。在每次评估中，成员记录达到中等强 度2的苦味时滚动的秒数。
结果与讨论：片剂上侧边的平均舔的次数在2.92次(UC配方)到8.38 次(OC配方)，95％的置信区间为1.63次。面上舔的次数的平均值与TM配 方需要舔最多次以达到苦味突破侧边的结果是相似的，其95％的置信区间小 于0.56次。滚的平均值在12.4到23.3秒之间，其中UC配方需要的时间最 少而OC配方的片剂需要的最多。滚测试的数据与舔测试的数据高度相关。
本领域的技术人员将认识到，或者仅通过使用常规实验能够确定，本发 明描述的特定的实施方式有许多等同替换。这些等同替换包括在附属的权利 要求中。
机译： 6-（5-氯-2-吡啶基）-5-[（4-甲基-1-哌嗪基）羰氧基] -7-氧代-6，7-二氢-5H-吡咯或[3,4-b吡嗪和测量涂层有效性的方法
机译： 涂有6-（5-氯-2-吡啶基）-5-[（4-甲基-1-哌嗪基）羰氧基] -7-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡嗪片剂和测量涂层效果的方法
机译： 具有治疗活性的（+）-6-（5-氯-2-吡啶基）-5-（4-甲基-1-哌嗪基）羰氧基-7-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯基的制备方法£3 ，4-b |吡嗪
